中藥天年飲對(duì)衰老大鼠學(xué)習(xí)記憶及腦單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量的影響

1、         08-06-07 10:08:00     編輯：studa20          作者：陳志宏， 高福祿， 龐曉靜    【關(guān)鍵詞】  中藥摘要：目的觀察中藥天年飲（Tiannianyin，TNY）對(duì)D半乳糖衰老大鼠學(xué)習(xí)記憶及腦單胺類神經(jīng)遞質(zhì)去甲腎上腺素（NE）、多巴胺（DA）、5羥色胺（5HT）含量的影響。方法選用成年雄性SD

2、大鼠40只，隨機(jī)分為4組，每組10只：正常組、衰老模型組、TNY用藥組、陰性對(duì)照組。D半乳糖連續(xù)腹腔注射制作亞急性衰老的大鼠模型，采用Morris水迷宮檢測(cè)各組大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力及采用高效液相色譜電化學(xué)法檢測(cè)各組大鼠下丘腦、海馬NE，DA，5HT的含量。結(jié)果D半乳糖衰老大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力明顯下降并且衰老大鼠下丘腦，海馬NE，DA，5HT的含量明顯降低（與正常大鼠相比P<0.01）；TNY可明顯改善衰老大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力及提高腦單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的含量（P<0.01或P<0.05）。結(jié)論TNY可有效調(diào)整中樞神經(jīng)遞質(zhì)的合成及提高學(xué)習(xí)記憶能力，具有良好的延緩衰老的作用。關(guān)鍵詞

3、：天年飲；衰老；學(xué)習(xí)記憶；單胺類神經(jīng)遞質(zhì)Influence of Chinese Decoction TNY on Learning and Memory and Monoamine Neurotransmitter in Aging Rats BrainAbstract:ObjectiveTo observe the influence of Chinese decoction Tiannianyin (TNY) on learning and memory and monoamine neurotransmitter contents in Dgal aging rats brain. M

4、ethods40 adult male SD rats were used in this study and divided into 4 groups at random: normal group, aging model group, TNY treatment group, and negative control group, each group had 10 rats. The subacutely aging rats were made by injecting Dgal into the rats' abdominal cavity continuosly. Th

5、e learning and memory ability of rats in each group were detected with Morris water maze. The monoamine transmitter contents in hypothalamus and hippocampus were detected with HPLCECD.ResultsThe learning and memory ability of aging rats dropped significantly compared with normal rats(P<0.01). The

6、 NE, DA, 5HT contents in hippocampus and hypothalamus of aging rats decreased significantly compared with normal rats (P<0.01). In TNY treatment group, the learning and memory ability and  NE, DA, 5HT contents increased significantly compared with aging rats (P<0.01，P<0.05).Conclusion

7、TNY can regulate the disorderly metabolized monoamine transmitter effectively and improve the learning and memory ability. Consequently, TNY has fairly antiaging effects.Key words:TNY;Aging;Learning and memory; Monoamine neurotransmitter腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)是一類調(diào)節(jié)機(jī)體生理活動(dòng)的重要物質(zhì)，這些物質(zhì)在組織中的含量是反映神經(jīng)遞質(zhì)生物合成、釋放、攝取、失活等過(guò)程的生化

8、指標(biāo)；在研究神經(jīng)元功能狀態(tài)或研究藥物對(duì)神經(jīng)組織作用的影響時(shí)，亦常用這些生化指標(biāo)1。本研究主要觀察中藥天年飲（Tiannianyin， TNY）對(duì)D半乳糖衰老大鼠學(xué)習(xí)記憶及下丘腦、海馬單胺類神經(jīng)遞質(zhì)去甲腎上腺素（NE）、多巴胺（DA）、5羥色胺（5HT）含量的影響，探討天年飲延緩衰老的作用機(jī)理。1  材料和方法1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇及分組實(shí)驗(yàn)選用成年雄性SD大鼠40只，體重180250 g，由河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)部提供。將40只大鼠隨機(jī)分為4組：正常組、衰老模型組、TNY用藥組、陰性對(duì)照組，每組均為10只。其中模型組、用藥組、對(duì)照組均采用D半乳糖連續(xù)腹腔注射制作亞急性衰老的大鼠模型：

9、模型組大鼠于造模成功后不再作任何處理；用藥組大鼠于造模成功后每天用TNY灌胃，共30 d；對(duì)照組大鼠于造模成功后每天灌胃同等劑量的生理鹽水，時(shí)間同用藥組大鼠。1.2 實(shí)驗(yàn)試劑D半乳糖購(gòu)自北京化學(xué)試劑公司（批號(hào)：020402）。TNY（由我院中醫(yī)系主任賈春華教授提供）由何首烏、懷牛膝、肉蓯蓉、淫羊藿、丹參、茯苓等中藥組成，每副含生藥90 g，按傳統(tǒng)方法加水煎成溶液，按8.1 g/kg灌胃1次/d。NE、DA、5HT標(biāo)準(zhǔn)品購(gòu)自美國(guó)Sigma公司。1.3 衰老動(dòng)物模型的建立 D半乳糖用生理鹽水配制成25%的溶液，按200 mg/kg腹腔注射1次/d，連續(xù)40 d。1.4  行為學(xué)測(cè)試采用M

10、orris水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力，包括定位航行實(shí)驗(yàn)（Place navigation test）和空間探索實(shí)驗(yàn)（Spatial probe test）。每天訓(xùn)練完畢后于當(dāng)天下午進(jìn)行空間探索實(shí)驗(yàn)：撤除安全平臺(tái)后，記錄大鼠90 s穿過(guò)安全平臺(tái)位置的次數(shù)（time）和在原安全平臺(tái)所在象限探索時(shí)間占總時(shí)間（90 s）的百分比（percentage）。1.5 單胺類遞質(zhì)含量的測(cè)定1.5.1 樣品的制備實(shí)驗(yàn)動(dòng)物斷頭處死，迅速取出全腦后置于冰盤上，分離出左側(cè)海馬，將分離出的海馬及其余腦組織迅速投入液氮中冷凍，然后移入80冰箱保存待測(cè)。待檢測(cè)時(shí)取出海馬組織，稱重后置于500l甲醇中冰浴下用內(nèi)切式勻漿器以15 000 r/min勻漿30 s，然后在4條件下12 000 r/min離心40 min，取上清液20 l進(jìn)樣。待檢測(cè)時(shí)取出腦組織，用直徑2.5 mm的套管刀在冰凍大鼠腦腹側(cè)視交叉后方打孔取下丘腦，組織柱長(zhǎng)約5 mm，迅速稱重（約30 mg）后置于400 l甲醇中冰浴下勻漿，4離心，取上清液20 l進(jìn)樣。1.5.2 含量測(cè)定采用高效液相色譜電化學(xué)法檢測(cè)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的含量2：使用日本島津公司的SHIMADZU10A高效液相色譜儀和L-ECD-6A電化學(xué)檢測(cè)器，流動(dòng)相為乙酸鈉甲醇（964），流速為1.2 ml