微生物農(nóng)藥復(fù)習(xí)資料

1、-作者xxxx-日期xxxx微生物農(nóng)藥復(fù)習(xí)資料【精品文檔】一、名詞解釋(大概念、大類概念、構(gòu)成、特殊結(jié)構(gòu)、作用方式等)2. 農(nóng)用抗生素3. VIP蛋白4. 包涵體5. 重寄生作用二、單項(xiàng)選擇題 （最、第一等字眼；防治對(duì)象、專性、來(lái)源、毒素、機(jī)理、不同分類、可開(kāi)發(fā)為。，已應(yīng)用等字眼；有效活性成分，測(cè)定方法、指標(biāo)，特殊結(jié)構(gòu)、致病過(guò)程、實(shí)際生產(chǎn)方法、等）1. 以下哪一種微生物為專性寄生昆蟲(chóng)病原菌（ ）。A. 綠僵菌 B. 金龜子芽孢桿菌 C. 枯草芽孢桿菌 D. 蘇云金芽孢桿菌2. （ ）具有抗植物根結(jié)線蟲(chóng)作用，是一種很有應(yīng)用前景的生防因子。A. 穿刺巴斯德氏柄菌 B. 肉毒梭菌 C. 嗜酸乳桿菌

2、D. 熒光假單胞菌3. 綠僵菌的主要防治對(duì)象為（ ）。A. 蚜蟲(chóng) B. 蠟蚧 C. 鱗翅目幼蟲(chóng) D. 線蟲(chóng)4. 魯保一號(hào)是用于防治（ ）的微生物源藥劑。A. 害蟲(chóng) B. 病原菌 C. 雜草 D. 鼠害5. （ ）是諾爾斯鏈霉菌西昌變種產(chǎn)生的抗生素，對(duì)多種植物病毒病具有特效。A. 井岡霉素 B. 農(nóng)抗120 C. 中生霉素 D. 寧南霉素6. （ ）可以產(chǎn)生劇烈的細(xì)菌外毒素，此毒素是目前草原農(nóng)田廣泛應(yīng)用的生物殺鼠劑。A. 肉毒梭菌 B. 穿刺巴氏柄菌 C. 惡臭假單胞菌 D. 熒光假單胞菌7. 以下農(nóng)用抗生素可用于殺螨劑的是（ ）。A. 莫西菌素 B. 華光霉素 C. 武夷霉素 D. 波拉霉素8

3、. 除了（ ）以外，以下均為DNA殺蟲(chóng)病毒。A. 核型多角體病毒 B. 顆粒體病毒 C. 昆蟲(chóng)痘病毒 D. 質(zhì)型多角體病毒9. 可以開(kāi)發(fā)為殺蟲(chóng)劑的病毒主要集中在（ ）。A. 桿狀病毒科 B. 長(zhǎng)尾噬菌體科 C. 絲狀病毒科 D. 壬酸10. 雙丙氨膦屬于滅生性除草劑，其有效殺草成分為（ ）。A. L-草銨膦 B. 蘆竹堿 C. 纖精酮 D. 拮抗關(guān)系11. 病毒制劑毒力生物測(cè)定方法有活體生物測(cè)定、離體生物測(cè)定和空斑測(cè)定法，其中活體生物測(cè)定法檢測(cè)病毒毒力常用指標(biāo)為（ ）。A. LD50 B. TCID50 C. LC50 D. EC5012. 蘇云金素對(duì)昆蟲(chóng)的毒性是由于其對(duì)害蟲(chóng)（ ）具有抑制作用

4、。A. RNA合成 B. 蛋白質(zhì)合成 C. DNA合成 D. 幾丁質(zhì)合成13. 第一個(gè)登記注冊(cè)的病毒殺蟲(chóng)劑是（ ）。A. 棉鈴蟲(chóng)NPV殺蟲(chóng)劑 B. 茶小卷葉蛾NPV殺蟲(chóng)劑 14.（ ）為具有囊膜的昆蟲(chóng)病毒。A. 顆粒體病毒 B. 細(xì)小病毒 C. 虹彩病毒 D. 質(zhì)型多角體病毒15. （ ）對(duì)蚊蟲(chóng)具有毒殺作用，是一種很有應(yīng)用開(kāi)發(fā)前景的蚊蟲(chóng)病原菌。A. 球形芽孢桿菌 B. 梭狀芽孢桿菌 C. 惡臭假單胞菌 D. 多黏芽孢桿菌16. 在菌物中已用于開(kāi)發(fā)殺蟲(chóng)劑的除卵菌門(mén)的（ ）以外，其余都是無(wú)性型真菌。A. 大鏈壺菌 B. 暗孢耳霉 C. 粉棒束孢 D. 寡雄腐霉17. 在昆蟲(chóng)病原真菌侵染寄主過(guò)程中各

5、種水解酶起到重要作用，其中以（ ）最為重要，其活性高低是決定真菌致病力的及其重要因素。A. 蛋白酶 B. 幾丁質(zhì)酶 C. 脂酶 D. 糖苷酶18. （ ）在寄主體內(nèi)繁殖過(guò)程中一般不分泌毒素，直到菌絲占領(lǐng)整個(gè)蟲(chóng)體后才引起昆蟲(chóng)死亡。A. 布氏白僵菌 B. 球孢白僵菌 C. 綠僵菌 D. 蟲(chóng)霉菌19. 以分生孢子為產(chǎn)品的真菌殺蟲(chóng)劑，在實(shí)際生產(chǎn)中多采用（ ）。A. 液體發(fā)酵 B. 固體發(fā)酵 C. 雙相發(fā)酵 D. 高密度發(fā)酵20.（ ）會(huì)造成染病昆蟲(chóng)表現(xiàn)出行動(dòng)遲緩、體軀腫脹和皮膚易破、組織液化等病理特征。A. 小菜粉蝶GV B. 梭狀芽孢桿菌 C. 球孢白僵菌 D. 球形芽孢桿菌三、多項(xiàng)選擇題 1. 由

6、于阿維菌素毒性偏高，通過(guò)化學(xué)結(jié)構(gòu)修飾與改造獲得的系列新型殺蟲(chóng)抗生素有（ ）。A. 伊維菌素 B. 多拉菌素 C. 埃瑪菌素 D. 中生菌素2. 農(nóng)用抗生素具有（ ）等特點(diǎn)。A. 選擇性強(qiáng) B. 高效、低毒、易降解 C. 大多具有內(nèi)吸活性 D. 可通過(guò)發(fā)酵工程生產(chǎn)3. 按照用途微生態(tài)制劑可分為（ ）。A. 微生態(tài)促生長(zhǎng)劑 B. 微生態(tài)治療劑 C. 微生態(tài)多功能劑 D. 微生態(tài)單菌劑4. 真菌植物病害生防劑的作用方式包括（ ）。A. 重寄生 B. 抗生 C. 占領(lǐng) D. 誘導(dǎo)植物抗性5. 以下哪些昆蟲(chóng)病毒可形成包涵體形式（ ）。A. 甜菜尺蠖姬蜂病毒 B. 棉鈴蟲(chóng)核型多角體病毒C. 菜粉蝶球形病毒

7、 D. 印度棕櫚獨(dú)角仙病毒四、判斷題（每小題1分，共10分） （來(lái)源、對(duì)象、機(jī)制、致病過(guò)程、藥劑性質(zhì)（水溶。堿溶） 得分： 分1. 位點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)是熒光假單胞菌在植物根圍定殖和大量繁殖的重要機(jī)制。（ ）2. 春雷霉素能選擇性的抑制某些真菌和一些細(xì)菌的生長(zhǎng)，尤其對(duì)稻瘟病菌特別敏感，其作用機(jī)制是干擾菌體蛋白的合成。（ ）3. 緩死芽孢桿菌是對(duì)金龜子幼蟲(chóng)蠐螬具有高度致病力的專性致病菌。（ ）4. 地衣芽孢桿菌可通過(guò)產(chǎn)生抗菌物質(zhì)、位點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)及誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗性而起到抑菌作用。（ ）5. 昆蟲(chóng)痘病毒寄生在寄主的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，病毒粒子包埋于紡錘形包涵體內(nèi)。（ ）6. 滅瘟素是一種從灰色鏈霉菌的代謝產(chǎn)物中分離出來(lái)的芐氨基

8、苯磺酸鹽類抗生素。（ ）7. 綠色木霉可通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)、占領(lǐng)和重寄生等多重方式作用于植物病原菌。（ ）8. 塊狀耳霉菌劑型種類多樣，殺蟲(chóng)譜廣，可寄生于鱗翅目、同翅目和雙翅目等昆蟲(chóng)。（ ）9. Cry蛋白具有廣泛的溶細(xì)胞活性，被稱為溶細(xì)胞蛋白。（ ）10. 武夷菌素為水溶性抗生素，是具有我國(guó)自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的內(nèi)吸性核苷類抗生素殺菌劑。（ ）五、簡(jiǎn)答題 （對(duì)比作用方式。機(jī)制，區(qū)別概念，簡(jiǎn)單）1. 簡(jiǎn)述井岡霉素的作用機(jī)制和特點(diǎn)。2.什么是昆蟲(chóng)病原病毒，與蟲(chóng)媒病毒有何不同？ 3.簡(jiǎn)述食線蟲(chóng)真菌的作用方式，如何科學(xué)使用真菌殺線蟲(chóng)劑？ 4.昆蟲(chóng)病原真菌的作用方式與其他昆蟲(chóng)病原微生物有何不同？5.簡(jiǎn)述核型多角體病毒在

9、宿主細(xì)胞中的復(fù)制周期？ 6.簡(jiǎn)述枯草芽孢桿菌抗病機(jī)理？ 六、論述題（比較機(jī)理）比較阿維菌素與蘇云金芽孢桿菌殺蟲(chóng)機(jī)理有何異同。一、名詞解釋1. 昆蟲(chóng)病原病毒2. -外毒素3. 拮抗作用4. 伴孢晶體5. 食線蟲(chóng)真菌二、填空題 1. 真菌殺線蟲(chóng)劑是使用食線蟲(chóng)真菌經(jīng)發(fā)酵加工制成，其作用方式有和。2. 井岡霉素是由產(chǎn)生的多組分的類抗生素，其主要成分井岡霉素A分子中包含了結(jié)構(gòu)和一個(gè)。3. 雙丙氨膦是經(jīng)一種發(fā)酵而產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物，其有效殺草成分為。4. 微生態(tài)制劑按作用和用途可分為、和微生態(tài)多功能劑。三、判斷題1. 金龜子芽孢桿菌是對(duì)鞘翅目害蟲(chóng)金龜子幼蟲(chóng)具有高度致病力的專性致病菌。（ ）2. 核型多角體病毒

10、和顆粒體病毒都是專性寄生鱗翅目昆蟲(chóng)的病原病毒。（ ）3. 梭狀芽孢桿菌會(huì)造成染病昆蟲(chóng)表現(xiàn)出行動(dòng)遲緩、體軀腫脹和組織液化等病理特征。（ ）4. 木霉菌主要通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)、拮抗和誘導(dǎo)系統(tǒng)抗性達(dá)到對(duì)植物的保護(hù)作用。（ ）5. 井岡霉素對(duì)多種植物病原真菌以及革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌、革蘭氏陰性細(xì)菌均具有明顯抑菌作用。（ ）四、 選擇題1. 已被開(kāi)發(fā)用于防治根結(jié)線蟲(chóng)的真菌殺線蟲(chóng)劑是（ ）。A. 淡紫擬青霉 B. 盤(pán)長(zhǎng)刺盤(pán)孢C. 湯普生被毛孢 D. 尖孢鐮刀菌2. 肉毒毒素是肉毒梭菌產(chǎn)生的一種（ ）殺鼠劑，它具有很多化學(xué)殺鼠劑所不及的優(yōu)點(diǎn)，具有良好的推廣前景。A. 神經(jīng)毒劑 B. 呼吸抑制劑C. 抗凝血?jiǎng)?D. 以上都對(duì)

11、3.（ ）被應(yīng)用于防治森林的馬尾松毛蟲(chóng)，已經(jīng)開(kāi)發(fā)了多種生防制劑。A. 綠僵菌 B. 菜氏野村菌C. 玫煙色棒束孢 D. 大鏈壺菌4. 以下哪一種抗生素作用機(jī)理不屬于抑制菌體蛋白質(zhì)的生物合成（ ）。A. 春雷霉素 B. 鏈霉素C. 滅瘟素 D. 灰黃霉素5熒光假單胞菌能通過(guò)與植物根際病原菌競(jìng)爭(zhēng)（ ）而達(dá)到抑制病原物的效果。A.鐵元素 B. 游離氮 C. 氧份 D. 碳元素 6球形芽孢桿菌對(duì)不同蚊幼蟲(chóng)的毒殺作用主要是通過(guò)其產(chǎn)生的（ ）。A.毒素蛋白 B. 蛋白酶 C. 芽孢 D. 細(xì)菌素 7（ ）通過(guò)幼蟲(chóng)攝食而侵入，感病幼蟲(chóng)呈現(xiàn)食欲不振、停止進(jìn)食、下痢、吐液、體積縮小等癥狀。A. 核型多角體病毒

12、B. 質(zhì)型多角體病毒 C. 顆粒體病毒 D. 泡囊病毒8. 以下哪種昆蟲(chóng)病毒具有球形體和紡錘體兩種類型包涵體（ ）。A. 昆蟲(chóng)痘病毒 B. 顆粒體病毒 C. 細(xì)小病毒 D. 虹彩病毒9. 蘇云金芽孢桿菌用于害蟲(chóng)防治主要是其毒素發(fā)揮作用，其中營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)其分泌的殺蟲(chóng)蛋白是（ ）。A. VIP蛋白 B. Cry蛋白C. Cyt蛋白 D. 腸毒素 10（ ）是通過(guò)內(nèi)吸篩選模型獲得的一種內(nèi)吸性強(qiáng)、廣譜、高效、低毒的核苷類抗生素。A. 武夷菌素 B. 中生菌素C. 寧南霉素 D. 多抗霉素 五、簡(jiǎn)答題 1. 簡(jiǎn)述阿維菌素神經(jīng)毒作用機(jī)制。2. 依據(jù)抗生素農(nóng)藥的作用目標(biāo)和作用機(jī)理，抗生素農(nóng)藥可分為哪些種類？ 3

13、. 簡(jiǎn)述蘇云金芽孢桿菌的毒素殺蟲(chóng)機(jī)制。4. 簡(jiǎn)述核型多角體病毒致病機(jī)理。5. 細(xì)菌農(nóng)藥與化學(xué)農(nóng)藥相比有什么特點(diǎn)？ 6. 微生態(tài)制劑在微生物農(nóng)藥方面有什么應(yīng)用潛力？ 六、論述題 什么是真菌殺蟲(chóng)劑？使用真菌殺蟲(chóng)劑有哪些優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)？怎樣才能用好真菌殺蟲(chóng)劑？微生物農(nóng)藥復(fù)習(xí)資料考點(diǎn)：大類概念、具體品種、機(jī)理機(jī)制、特點(diǎn)、使用、生產(chǎn)、研發(fā)過(guò)程、重要意義（里程碑、首個(gè)）、分類及依據(jù)第一章緒論1.3R問(wèn)題：殘留、抗藥性、再猖獗2.微生物農(nóng)藥來(lái)源分類：（1）活體微生物農(nóng)藥：細(xì)菌農(nóng)藥：蘇云金桿菌、日本金龜子桿菌、球狀芽孢桿菌真菌農(nóng)藥：白僵菌、綠僵菌病毒農(nóng)藥：核型多角體病毒、質(zhì)型多角體病毒、顆粒體病毒農(nóng)用抗生素：井岡

14、霉素、春雷霉素、農(nóng)抗120、多抗霉素、阿維菌素寄生線蟲(chóng)：小桿線蟲(chóng)、斯氏線蟲(chóng)微孢子原蟲(chóng)類3.微生物農(nóng)藥概念：以活體微生物或微生物代謝產(chǎn)物來(lái)作為農(nóng)藥，包括殺蟲(chóng)、殺菌、除草和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)活性等。4.活體農(nóng)藥主要商品化產(chǎn)品有：蘇云金桿菌、枯草芽孢桿菌、蠟質(zhì)芽孢桿菌、棉鈴蟲(chóng)核型多角體病毒、粘蟲(chóng)核型多角體病毒、甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒、短穩(wěn)桿菌、木霉菌抗生素產(chǎn)品:寧南霉素、伊維菌素、阿維菌素、井岡霉素、多抗霉素、春雷霉素、中生霉素5.微生物農(nóng)藥特點(diǎn)：答:優(yōu)點(diǎn)：（1）環(huán)境相容性好對(duì)非靶標(biāo)生物毒性低，影響小，在大氣、土壤、水體、作物中易于分解，無(wú)殘留影響對(duì)病蟲(chóng)害特異性強(qiáng)，不殺傷植物病原體、害蟲(chóng)、雜草的天敵和有害

15、生物，能保護(hù)生態(tài)平衡（2）不易產(chǎn)生抗藥性 作用成分和作用機(jī)理復(fù)雜，害蟲(chóng)和病菌抗藥性發(fā)展緩慢，特別是活體微生物農(nóng)藥（3）資源豐富，開(kāi)發(fā)成本低資源豐富，可篩選分離；并可用現(xiàn)代生物技術(shù)手段對(duì)產(chǎn)生菌及其發(fā)酵工藝進(jìn)行改造，不斷改進(jìn)性能和提高品質(zhì)生產(chǎn)原料和有效成分屬于天然產(chǎn)物，能保證可持續(xù)性發(fā)展缺點(diǎn)：大多數(shù)微生物農(nóng)藥發(fā)揮作用緩慢穩(wěn)定性相對(duì)較差，特別是以活體微生物為有效成分的產(chǎn)品一些微生物農(nóng)藥如活體生物的應(yīng)用等技術(shù)要求高，對(duì)氣候條件要求較嚴(yán)格，不利于農(nóng)民掌握生產(chǎn)工藝比較復(fù)雜，工業(yè)化生產(chǎn)難度大等，使成本相對(duì)高存在一定程度的隱患天敵的安全性問(wèn)題主要是對(duì)生物多樣性的影響轉(zhuǎn)基因作物則存在“基因污染”和“基因漂移”等

16、隱患，對(duì)人類有無(wú)致病性、致畸性，尚不明確抗生素令靶標(biāo)生物產(chǎn)生抗性，對(duì)非靶標(biāo)生物也具有一定的毒性答：（1）利用生物工程技術(shù)改造微生物農(nóng)藥殺蟲(chóng)工程菌、殺蟲(chóng)工程植物、工程病毒(2)科學(xué)使用微生物農(nóng)藥，揚(yáng)長(zhǎng)避短活體生物農(nóng)藥，應(yīng)靈活運(yùn)用各種使用方法(3)以化學(xué)和生物相結(jié)合的方法開(kāi)發(fā)與創(chuàng)制新農(nóng)藥以天然物質(zhì)為先導(dǎo)化合物i，通過(guò)化學(xué)修飾改造，例如甲氨基阿維菌素，活性較阿維菌素提高了10倍第二章微生物農(nóng)藥研發(fā)的一般原理和方法從自然環(huán)境(土壤、水、動(dòng)植物、礦物、極端環(huán)境)篩選并培育改良從微生物或培養(yǎng)物保存單位收集菌株并篩選購(gòu)置專利菌種細(xì)菌種類：芽孢桿菌屬，假單胞菌屬產(chǎn)生的抗生素：桿菌肽、短桿菌肽、泰樂(lè)菌素、多粘菌

17、素、多肽類提取的優(yōu)缺點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn) 培養(yǎng)時(shí)間短，對(duì)生產(chǎn)有利 缺點(diǎn)：易受到噬菌體的侵襲；易產(chǎn)生粘性強(qiáng)的多糖類種類：木霉屬，黏帚霉屬產(chǎn)生的抗生素類：木霉素、膚霉素、抗菌肽、綠黏帚霉素放線菌，代謝產(chǎn)物為抗生素，如鏈霉素、阿維菌素、井岡霉素、寧南霉素、武夷霉素、春雷霉素和滅瘟素4.工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)水平的高低主要取決于生產(chǎn)菌種、發(fā)酵工藝和后提取工藝這三個(gè)因素。其中擁有良好菌種是前提。菌種主要來(lái)源于土壤。5.微生物農(nóng)藥研究開(kāi)發(fā)的一般原理即為：利用自然界現(xiàn)有的微生物資源，依據(jù)相生相克這種普遍現(xiàn)象來(lái)防治有害生物。6.微生物農(nóng)藥包括微生物體農(nóng)藥和微生物生物化學(xué)農(nóng)藥（即農(nóng)用抗生素）。微生物體農(nóng)藥的開(kāi)發(fā)核心在于發(fā)現(xiàn)和馴化，而

18、微生物化學(xué)類生物農(nóng)藥的開(kāi)發(fā)較為復(fù)雜。l發(fā)酵培養(yǎng)基價(jià)格低廉、來(lái)源充足、轉(zhuǎn)化為產(chǎn)品的效率高l對(duì)人、動(dòng)物、植物和環(huán)境安全l發(fā)酵后副產(chǎn)品少，產(chǎn)品相對(duì)容易分離l遺傳特性穩(wěn)定，易進(jìn)行基因操作答：定方案：查閱資料，了解菌種的生長(zhǎng)培養(yǎng)特性采樣：有針對(duì)性的采樣增殖：人為控制養(yǎng)分或培養(yǎng)條件，使所需菌種增殖培養(yǎng)后，在數(shù)量上占優(yōu)勢(shì)分離：利用分離技術(shù)得到純種發(fā)酵性能測(cè)定：進(jìn)行生產(chǎn)性能測(cè)定。包括形態(tài)、培養(yǎng)特征、營(yíng)養(yǎng)要求、生理生化特性、發(fā)酵周期、產(chǎn)品品種和產(chǎn)量、耐受最高溫度、生長(zhǎng)和發(fā)酵最適溫度、最適PH值、提取工藝等9.菌種分離：要從混雜的各類微生物中依照生產(chǎn)的要求，采用各種篩選方法，快速、準(zhǔn)確地把所要生物菌種挑選出來(lái)目的

19、：高效地獲取一株高產(chǎn)目的產(chǎn)物的微生物問(wèn)題：如何使樣品中所含微生物的可能性最大；如何在后續(xù)的操作中使這種可能性實(shí)現(xiàn)以生物測(cè)定（離體和活體）為依據(jù)，建立快捷簡(jiǎn)單、可重復(fù)，且較經(jīng)濟(jì)等要求的活性測(cè)試體系生測(cè)方法：殺蟲(chóng)殺螨活性篩選體系供試蟲(chóng)種：具有一定的經(jīng)濟(jì)意義，可大批供應(yīng)，不受季節(jié)限制如：粘蟲(chóng)、苜蓿蚜、二斑葉螨、家蠅或庫(kù)蚊子、小菜蛾雜擬谷盜生測(cè)方法：飼料混毒飼蟲(chóng)法，葉片浸藥飼蟲(chóng)法，點(diǎn)滴法，藥液浸蟲(chóng)法殺菌活性篩選系統(tǒng)供試菌種：分類上具有一定的代表性，最好是重要的農(nóng)業(yè)植物病害的病原菌；易培養(yǎng)，多代繁殖不易產(chǎn)生變異如：番茄灰霉病菌、蘋(píng)果炭疽病菌、水稻稻瘟病菌、玉米大斑病菌、枯草桿菌、黃瓜霜霉病菌、小麥條銹病

20、菌生測(cè)方法：生長(zhǎng)速率法、孢子萌發(fā)法、抑菌圈法、組織法、盆栽試驗(yàn)法除草活性篩選體系供試植物：反枝莧種子、油菜種子、狗尾草種子，小麥種子生測(cè)方法：小麥去胚乳法，水瓊脂培養(yǎng)法11.微生物源生物化學(xué)農(nóng)藥研究開(kāi)發(fā)的程序與方法（圖示）12.有效成分的分離與精制方法（圖示）常用檢測(cè)方法：質(zhì)譜、紅外（IR）、紫外(uv)、圓二色譜（CD）、原子力顯微技術(shù)（AFM）、X-單晶衍射、一維核磁共振譜、二維核磁共振譜15.試管培養(yǎng)、試管搖床培養(yǎng)目的：原種斜面培養(yǎng)后，為了提高初篩效率搖瓶培養(yǎng)，250ml-500ml錐形瓶，再200rpm搖床上培養(yǎng)目的：培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件的初篩玻璃自控發(fā)酵罐 容量5L-50L。是搖床向發(fā)酵

21、罐過(guò)渡的階段目的：工藝參數(shù)、工藝條件的選擇和考察試驗(yàn)罐培養(yǎng)、中間工業(yè)試驗(yàn)階段目的：放大和驗(yàn)證搖床試驗(yàn)結(jié)果，積累發(fā)酵工藝規(guī)律和發(fā)酵參數(shù)16.菌株選育、分子改造目的：防止菌種退化、解決生產(chǎn)實(shí)際問(wèn)題、提高生產(chǎn)能力、提高產(chǎn)品品質(zhì)、開(kāi)發(fā)新產(chǎn)品方法：基因突變：自然選育、誘變育種基因重組：雜交、原生質(zhì)體融合、基因工程技術(shù)基因的直接進(jìn)化：點(diǎn)突變、易錯(cuò)PCR、DNA shuffling（1）病毒活體農(nóng)藥開(kāi)發(fā)的一般程序（2）細(xì)菌真菌活體農(nóng)藥開(kāi)發(fā)的一般程序與方法 （3）病原線蟲(chóng)活體農(nóng)藥開(kāi)發(fā)的一般程序第三章 病毒農(nóng)藥1.病毒：非細(xì)胞形式的最小有機(jī)體，是一種最原始的生命形態(tài) 病毒由兩部分組成：內(nèi)部是核酸，外部是衣殼，成

22、分是蛋白質(zhì)只含有一種核酸，DNA或RNA，沒(méi)有細(xì)胞器和細(xì)胞構(gòu)造，不能獨(dú)立生活，只能在活的寄主細(xì)胞內(nèi)才能復(fù)制增殖答：病毒只含有一種核酸，DNA或RNA，其他生物一般含有DNA和RNA兩種核酸病毒依靠自身的核酸通過(guò)復(fù)雜的生物合成過(guò)程進(jìn)行復(fù)制，在特定的生活的宿主細(xì)胞中進(jìn)行，而不是通過(guò)二分裂或類似二分裂方式在特定的宿主活細(xì)胞中進(jìn)行繁殖病毒缺乏完整的酶系統(tǒng)，不含核糖體，必須利用宿主細(xì)胞的核糖體合成自身蛋白質(zhì)，脫離宿主不能進(jìn)行任何形式的代謝活動(dòng)在離體條件下能以無(wú)生命的生物大分子狀態(tài)存在，并可長(zhǎng)期保持其侵染活力病毒對(duì)抗菌素或其他對(duì)微生物代謝途徑作用的因子不敏感病毒對(duì)宿主DNA復(fù)制有一定指導(dǎo)性。例如病毒的核酸

23、整合到宿主的基因組中，并誘發(fā)潛伏性感染病毒在活細(xì)胞內(nèi)，以其基因?yàn)槟０?，在酶的作用下，分別合成病毒基因及蛋白質(zhì)，再組裝成完整的病毒顆粒，這種方式稱為復(fù)制。從病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞開(kāi)始，經(jīng)過(guò)基因組復(fù)制和病毒蛋白合成至釋放出子代病毒的全過(guò)程，稱為一個(gè)復(fù)制周期病毒復(fù)制周期：包括吸附、侵入、脫殼、大分子合成、裝配與釋放五個(gè)連續(xù)步驟4. 昆蟲(chóng)病毒分類與性狀病毒粒子特性（1） 病毒的形態(tài)特征（囊膜、粒子的大小、性狀及亞顯微結(jié)構(gòu)）（2） 生理生化和物理性質(zhì)（如分子量、沉降系數(shù)）（3） 病毒基因組（核酸的類型、單雙鏈、線狀或環(huán)狀）（4） 病毒蛋白（結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白的數(shù)量、大小、功能、活性）（5） 病毒脂類和碳水化

24、合物的含量和特性（6） 病毒基因組組成和復(fù)制特性病毒抗原性質(zhì)（病毒粒子及有關(guān)血清學(xué)性質(zhì)）、病毒生物學(xué)特性（天然寄主范圍、傳播特性、分布、致病機(jī)理、引發(fā)的病理和組織病理學(xué)特點(diǎn)）5. 根據(jù)病毒核酸類型分為（1）雙鏈DNA病毒（有囊膜）囊膜（envelope）是指病毒外殼包被的由蛋白質(zhì)、多糖和脂類構(gòu)成的類脂雙層膜，也稱為包膜。囊膜主要來(lái)源于宿主細(xì)胞膜（磷脂層和膜蛋白），但也包含有一些病毒自身的糖蛋白。病毒囊膜的主要功能是幫助病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞。桿狀病毒科多分DNA病毒科痘病毒科泡囊病毒（2）雙鏈DNA病毒（無(wú)囊膜）虹彩病毒科細(xì)尾病毒科（3）單鏈DNA病毒（無(wú)囊膜）細(xì)小病毒科（4）雙鏈RNA病毒呼腸孤病

25、毒科二分RNA病毒科（5） 單鏈RNA病毒微RNA病毒科 野田村病毒科T4病毒科（6） DNA和RNA反轉(zhuǎn)錄病毒，包括：前病毒科變位病毒科6. 根據(jù)包涵體在寄主細(xì)胞中的部位分類核型多角體病毒（NPV）棉鈴蟲(chóng)、粘蟲(chóng)和桑毛蟲(chóng)的核型多角體病毒質(zhì)型多角體病毒（CPV）家蠶、馬尾松松毛蟲(chóng)、茶毛蟲(chóng)、棉鈴蟲(chóng)、小地老虎顆粒體病毒（GV）菜青蟲(chóng)、小菜蛾、茶小卷葉螟、稻縱卷葉螟無(wú)包涵體病毒美麗姬蜂非包涵體病毒1型、橄欖實(shí)蠅非包涵體病毒4型昆蟲(chóng)痘病毒7. 昆蟲(chóng)病毒包括兩類昆蟲(chóng)病毒：泛指以昆蟲(chóng)為宿主的病毒，即只要在昆蟲(chóng)體內(nèi)增殖的病毒，就可以認(rèn)為是昆蟲(chóng)病毒蟲(chóng)媒病毒:能在昆蟲(chóng)體內(nèi)增殖，不表現(xiàn)病原性，它們以昆蟲(chóng)為中間介體傳

26、給其他動(dòng)物或植物昆蟲(chóng)病原病毒：可以在昆蟲(chóng)體內(nèi)增殖，對(duì)寄主昆蟲(chóng)表現(xiàn)致病性，在生物防治中用于防治害蟲(chóng)8. 我國(guó)絕大部分為桿狀病毒，國(guó)際60%也為桿狀病毒1971， 美國(guó)首個(gè)商品化制劑是棉鈴蟲(chóng)NPV9. 病毒殺蟲(chóng)劑優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：選擇性好：不損傷天敵，不易引起生態(tài)平衡的破壞傳播性強(qiáng)：很快擴(kuò)散蔓延，造成流行病持久性長(zhǎng)：包涵體可抵抗不良環(huán)境，具有非常好的穩(wěn)定性經(jīng)濟(jì)效益高：劑量低，使用方便安全無(wú)害：無(wú)殘留缺點(diǎn)：防治效果慢：10天，潛伏期較長(zhǎng)，往往降低其商業(yè)價(jià)值和實(shí)際效果防治譜窄：不能成功得用來(lái)防治種植地區(qū)生長(zhǎng)季節(jié)內(nèi)繁衍的多種害蟲(chóng)受到溫度、陽(yáng)光等環(huán)境條件影響大不易生產(chǎn)存在的安全隱患：昆蟲(chóng)病毒、其它的無(wú)脊椎動(dòng)物、

27、脊椎動(dòng)物和植物病毒之間并無(wú)明確的界限呼腸孤病毒環(huán)狀病毒屬、朋揚(yáng)病毒科、彈狀病毒科的全體成員既能使昆蟲(chóng)致死，又能寄生植物；野田村病毒既能使昆蟲(chóng)發(fā)病，又能使哺乳動(dòng)物發(fā)病致死 10. DNA病毒（1） NPV (2)GV (3)昆蟲(chóng)痘病毒（EPV）(4) DNV細(xì)小病毒（5）其它DNA病毒 多分DNA病毒科、虹彩病毒科、泡囊病毒科、細(xì)尾病毒科、棕櫚獨(dú)角仙病毒11. 桿狀病毒（樹(shù)頂病，宿主專一性）發(fā)現(xiàn)最早、數(shù)量最大、研究最多最實(shí)用的節(jié)肢動(dòng)物特異性的DNA病毒研發(fā)現(xiàn)狀：20種左右桿狀病毒殺蟲(chóng)劑試用或應(yīng)用A亞組核型多角體病毒，如家蠶NPV，棉鈴蟲(chóng)NPV,松毛蟲(chóng)NPV,春尺蠖NPV,舞毒蛾NPV,斜紋夜蛾N

28、PV,粘蟲(chóng)NPV,中國(guó)刺蛾NPVB亞組顆粒體病毒，如黃地老虎GV，菜粉蝶GV,茶小卷葉蛾GVC亞組非包涵體核型桿狀病毒，如印度棕櫚獨(dú)角仙病毒D亞組非包涵體多分體DNA基因組核型桿狀病毒，如甜菜尺蠖姬蜂病毒押題桿狀病毒致病癥狀：初期，行動(dòng)遲緩，缺乏食欲，體軀腫脹，變黃或乳白色，皮膚變脆，組織液化，一觸即破后期：趨向最高處。如植株頂端，頭朝下倒掛，“樹(shù)頂病”桿狀病毒殺蟲(chóng)劑特點(diǎn)l 感染病毒的幼蟲(chóng)形成大量包涵體，擴(kuò)散，傳播l 桿狀病毒有宿主專一性，宿主僅限于節(jié)肢動(dòng)物，對(duì)脊椎動(dòng)物、植物完全不感染應(yīng)用安全l 主要見(jiàn)于昆蟲(chóng)體內(nèi)，是已知昆蟲(chóng)病毒中類群最大、發(fā)現(xiàn)最早、研究最多，且實(shí)用意義最大的主要應(yīng)用：作為載體

29、，表達(dá)外源基因作為殺蟲(chóng)劑，有效地控制農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)的發(fā)生，并且對(duì)環(huán)境不造成污染殺蟲(chóng)活性：主要為鱗翅目，其次是膜翅目、雙翅目、鞘翅目、直翅目舉例：光譜的桿狀病毒，苜蓿銀紋夜蛾病毒，對(duì)10多種害蟲(chóng)有效，克服防治譜窄，但活性低1-2個(gè)數(shù)量級(jí)包涵體：在感染病毒的昆蟲(chóng)細(xì)胞內(nèi)形成特殊的蛋白質(zhì)晶體顆粒多角體polyhedra ：是指隨著某種昆蟲(chóng)病毒的感染，核內(nèi)或細(xì)胞質(zhì)中形成直徑0.510微米的多面體，由晶狀排列的堿溶性蛋白質(zhì)組成，中間包藏著數(shù)目不定的病毒粒子。它的功能是保護(hù)病毒顆粒免受外界各種不良環(huán)境的破壞，它對(duì)各種蛋白分解酶有抗性，而在堿中易溶解，釋出病毒粒子。（1） 核多角體病毒NPV專一性侵染節(jié)肢動(dòng)物的DN

30、A病毒，主要寄生鱗翅目，在雙翅目、膜翅目、鞘翅目等也有，僅脊椎動(dòng)物中發(fā)現(xiàn) 形態(tài)特征 病毒粒子呈桿狀、具囊膜，雙鏈環(huán)狀DNA分子，DNA分子以超螺旋形式壓縮包裝在桿狀衣殼內(nèi)，90-180kb病毒束：在NPV中，每個(gè)囊膜可以包封一個(gè)至多個(gè)核衣殼，一個(gè)囊膜內(nèi)有多個(gè)排列成束的核衣殼的，常稱為病毒束判斷：同一品系或分離株病毒的多角體的形狀是趨于穩(wěn)定的相同寄主而不同品系或分離株病毒的多角體形狀和平均大小可能差別很大舉例：盜毒蛾幼蟲(chóng)體分離的NPV的兩菌株，一個(gè)多角體是多角形狀的，另一個(gè)是立方體的。多角體的表面有膜，若多角體被溶解，則會(huì)留下囊狀空炮，再延長(zhǎng)時(shí)間，也會(huì)被溶解，與核膜相似。在NPV中，每個(gè)囊膜可以

31、包封一個(gè)至多個(gè)核衣殼，一個(gè)囊膜內(nèi)有多個(gè)排列成束的核衣殼的，常稱為病毒束獲得囊膜的病毒粒子被隨機(jī)的包埋在蛋白質(zhì)構(gòu)成的結(jié)晶狀多角體之內(nèi)，一個(gè)多角體可以包埋一個(gè)至多個(gè)病毒粒子。而未被包埋的病毒粒子則只有核衣殼。核型多角體病毒根據(jù)病毒粒子囊膜內(nèi)包含核衣殼的數(shù)目分為兩類MNPV :即多核衣殼核型多角體病毒，指一個(gè)囊膜包含多個(gè)核衣殼SNPV單核衣殼判斷：兩種不同包埋型的病毒，與不同的病毒品系或分離株有關(guān)，是由遺傳性決定的；棉鈴蟲(chóng)、斜紋夜蛾、盜毒蛾都是MNPV同一種昆蟲(chóng)的兩種不同包埋型的NPV，它們對(duì)寄主的感染力、專一性、對(duì)環(huán)境的抵抗力以及多角體蛋白的化學(xué)特性、血清學(xué)特征等方面都可能有較大差異NPV理化性質(zhì)

32、ü 對(duì)不同化學(xué)藥劑具有高度抵抗力ü 不溶于水和各種有機(jī)溶劑ü 不被細(xì)胞或細(xì)胞蛋白酶分解ü 在PH值2-2.9時(shí)，可被胰蛋白酶破壞ü 溶于強(qiáng)酸和強(qiáng)堿ü 比重大于水，稍耐低溫，不耐高溫ü 不溶于昆蟲(chóng)血淋巴，所以將其接種于昆蟲(chóng)的血腔，幼蟲(chóng)不會(huì)感染ü 必須通過(guò)幼蟲(chóng)食入，經(jīng)消化液消化后，才能釋放出有感染能力的病毒粒子ü 經(jīng)干燥后，可以保存多年性質(zhì)不變，如家蠶多角體在無(wú)水氯化鈣中保存37年后，在碳酸鈉中的溶解性不變ü 可以抵抗細(xì)菌的腐敗作用，在提純或死蟲(chóng)尸體為細(xì)菌污染的時(shí)候，多角體一般不受破壞ü

33、在昆蟲(chóng)幼蟲(chóng)消化液中的溶解性不受寄主范圍的限制，對(duì)非敏感昆蟲(chóng)也如此ü 有較強(qiáng)的折光性，成熟的多角體不易被一般染料著色，但經(jīng)酸堿處理后可為一些染料所強(qiáng)染NPV復(fù)制過(guò)程重要特點(diǎn)：具有兩種不同表現(xiàn)性，產(chǎn)生兩種不同形態(tài)、不同功能的病毒粒子出芽型病毒粒子（BV）包涵體來(lái)源型病毒粒子(ODV)兩種表現(xiàn)型的病毒粒子形成雙相復(fù)制周期第一階段：包涵體在宿主中腸內(nèi)被堿裂解釋放出ODV,并感染宿主中腸上皮細(xì)胞，病毒在中腸細(xì)胞內(nèi)復(fù)制與增殖產(chǎn)生子代BV,該過(guò)程也稱為初級(jí)感染。第二階段，增殖后的BV 再感染其他組織與細(xì)胞，引起宿主系統(tǒng)感染，即次級(jí)感染此階段感染早期產(chǎn)生BV,晚期產(chǎn)生了大量的ODV，ODV由多角體保

34、護(hù)著，最后宿主幼蟲(chóng)的細(xì)胞核充滿了多角體并液化NPV致病機(jī)理通過(guò)幼蟲(chóng)口服侵入，多角體在易感蟲(chóng)體中腸內(nèi)迅速溶解，侵入上皮細(xì)胞，并出現(xiàn)最初的復(fù)制在侵染昆蟲(chóng)細(xì)胞核內(nèi)充滿大量的多角體，引起昆蟲(chóng)腫脹，厭食，最終由于病毒蛋白酶的產(chǎn)生，細(xì)胞核和細(xì)胞裂解，導(dǎo)致昆蟲(chóng)死亡昆蟲(chóng)死亡后，病毒編碼的幾丁質(zhì)酶和組織蛋白酶的進(jìn)一步作用，導(dǎo)致昆蟲(chóng)表皮解體，蟲(chóng)體組織液化，大量多角體釋放進(jìn)入環(huán)境中中毒癥狀：2-5d內(nèi)不表現(xiàn)癥狀，初期無(wú)明顯變化，漸而行動(dòng)遲緩，食欲減退，體色變淡或油光色，血淋巴變?nèi)榘咨?-12天內(nèi)死亡，表現(xiàn)為表皮易破，體內(nèi)組織液化，內(nèi)部含有大量多角體，破后流出乳白色或褐色濃稠液體。NPV殺蟲(chóng)劑的生產(chǎn)適齡健康幼蟲(chóng)，感

35、染病毒后，感病幼蟲(chóng)擴(kuò)增病毒，收集蟲(chóng)尸，低溫貯存含病毒蟲(chóng)尸，高速勻漿過(guò)濾，得到粗制多角體，差速離心，提純多角體。加乳液添加劑得到乳劑，加固體添加劑并干燥得到粉劑。生測(cè)之后產(chǎn)品包裝。NPV生產(chǎn)中應(yīng)該注意的問(wèn)題：1. 生產(chǎn)環(huán)境的消毒和條件控制車(chē)間、使用器具必須嚴(yán)格消毒；溫度20-26、濕度<50%、光照2. 人工飼養(yǎng)宿主昆蟲(chóng)人工合成飼料3. 病毒感染液的制備和感染將病蟲(chóng)和蟲(chóng)尸低溫儲(chǔ)藏，進(jìn)行抽提：勻漿、過(guò)濾、離心濃縮、制成懸浮劑或粉劑4. 病毒制劑毒力生物測(cè)定 產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)化的核心是生物活性測(cè)定病毒活體生物測(cè)定，用敏感昆蟲(chóng)測(cè)試，指標(biāo)是LD50，根據(jù)幼蟲(chóng)死亡率計(jì)算病毒離體生物測(cè)定，以昆蟲(chóng)細(xì)胞為對(duì)象直接

36、測(cè)定病毒對(duì)昆蟲(chóng)細(xì)胞的感染效價(jià)?？瞻邷y(cè)定法 在用苜蓿銀紋夜蛾NPV感染夜蛾細(xì)胞的時(shí)候，在培養(yǎng)的單層細(xì)胞上覆蓋一層瓊脂糖，限制了新生病毒粒子的運(yùn)動(dòng)，這樣一個(gè)病毒粒子感染可使集團(tuán)病變的細(xì)胞形成一個(gè)空斑。產(chǎn)生一個(gè)空斑的病毒量為一個(gè)空斑形成單位PFU推廣最多，最成功得是棉鈴蟲(chóng)NPV(2) 顆粒體病毒GV殺蟲(chóng)劑(3) 最初從患病的大菜粉蝶中發(fā)現(xiàn)，主要存在于鱗翅目昆蟲(chóng)幼蟲(chóng)中，致病性較強(qiáng) 顆粒體病毒的理化性質(zhì)1. 比重大于水2. 不溶于水及多種有機(jī)溶劑3. 強(qiáng)酸強(qiáng)堿下迅速溶解，并使粒子變性失活4. 耐低溫，高溫和紫外線易使粒子失活5. 有包涵體的顆粒體病毒，在外界環(huán)境中較穩(wěn)定，在室內(nèi)和野外土壤中可存活數(shù)年6.

37、 沒(méi)有包涵體保護(hù)的顆粒體，穩(wěn)定性差顆粒體（蒴狀體）是包涵和保護(hù)病毒粒子的結(jié)晶狀蛋白質(zhì)，呈卵形、橢圓形、腎形顆粒體病毒的生物學(xué)特性GV屬于桿狀病毒，病毒粒子由一個(gè)桿狀的核衣殼包圍在囊膜內(nèi)而組成，粒子呈桿狀顆粒體（蒴狀體）是包涵和保護(hù)病毒粒子的結(jié)晶狀蛋白質(zhì)，呈卵形、橢圓形、腎形一個(gè)顆粒體僅包埋一個(gè)（偶爾2個(gè)）病毒粒子顆粒體的致病機(jī)理侵染途徑：與NPV相似，被敏感昆蟲(chóng)攝入體內(nèi)后，顆粒體在消化道中被堿性消化液溶解，病毒粒子通過(guò)中腸柱形細(xì)胞的微絨毛侵入細(xì)胞，通過(guò)核孔進(jìn)入細(xì)胞核增殖，形成新的病毒粒子和包埋入顆粒體中毒癥狀初期無(wú)明顯病癥，因顆粒體大量在脂肪體中積累，腹部出現(xiàn)蒼白或乳黃色感病幼蟲(chóng)幼蟲(chóng)期比正常幼

38、蟲(chóng)要長(zhǎng)一些，體積更大，隨著體色變化，幼蟲(chóng)活力通常變?nèi)?，行?dòng)遲鈍，身體變軟，皮膚易破顆粒體病毒殺蟲(chóng)劑的生產(chǎn)和應(yīng)用生產(chǎn)原理和方法與NPV相同，但GV表現(xiàn)更高的宿主專一性，主要是人工飼養(yǎng)昆蟲(chóng)，然后感染GV，等病蟲(chóng)瀕死時(shí)收集蟲(chóng)尸，再配成殺蟲(chóng)劑。GV也是具有包涵體的病毒，病毒粒子能抵抗外界不良環(huán)境。GV殺蟲(chóng)劑通常比NPV具有更高的殺蟲(chóng)專一性（2） 痘病毒（EPV）殺蟲(chóng)劑 形態(tài)特征 EPV屬于痘病毒科，雙鏈DNA,具囊膜。EPV通常呈磚形或橢圓形，病毒形態(tài)相似，大小隨寄主不同而不同。包涵體有兩類：球形體，包埋病毒粒子 紡錘體，不含病毒粒子球形體：是一種結(jié)晶蛋白結(jié)構(gòu)，基質(zhì)蛋白叫球形蛋白，類似于多角體蛋白和顆

39、粒體病毒蛋白，蛋相對(duì)分子量要打，不同宿主甚至同一宿主不同細(xì)胞中球形體包含的病毒粒子數(shù)不等紡錘體：出現(xiàn)在細(xì)胞質(zhì)中的核周邊區(qū)，功能和意義尚不明確。EPV致病機(jī)理宿主范圍小，不同科之間無(wú)交叉感染。有些EPV感染脂肪體細(xì)胞，也有些能感染較多組織。鱗翅目昆蟲(chóng)感染EPV后，表現(xiàn)為蟲(chóng)體發(fā)白發(fā)軟，蛹期延長(zhǎng)，幼蟲(chóng)比正常的大。鞘翅目昆蟲(chóng)感染EPV后，脂肪體和真皮中包涵體的增殖使體色逐漸發(fā)白。EPV殺蟲(chóng)劑生產(chǎn)我國(guó)首次發(fā)現(xiàn)的蝗蟲(chóng)痘病毒是西伯利亞蝗蟲(chóng)痘病毒，接著發(fā)現(xiàn)亞洲小車(chē)蝗蟲(chóng)痘病毒。意大利蝗蟲(chóng)痘病毒等五種。（3） DNV細(xì)小病毒科殺蟲(chóng)劑細(xì)小病毒是最小的DNA動(dòng)物病毒，為單鏈DNA，無(wú)囊膜。大多數(shù)細(xì)小病毒DNV病毒對(duì)環(huán)

40、境抗性較強(qiáng)，能夠水解蛋白酶及核酸水解酶 感染DNV的幼蟲(chóng)，病變發(fā)生在細(xì)胞核內(nèi)，核明顯膨大殺蟲(chóng)活性國(guó)外：蠟螟濃縮核癥病毒和鹿眼蝶濃縮核癥病毒國(guó)內(nèi)：菜粉蝶濃縮核癥病毒可感染：鱗翅目，鞘翅目、膜翅目（4） 虹彩病毒形態(tài)：病毒粒子為二十面體。直徑為120-200毫微米，核酸為雙鏈DNA,無(wú)膜，無(wú)包涵體。代表種為：二化螟虹彩病毒，是鱗翅目幼蟲(chóng)感染虹彩病毒的首例，昆蟲(chóng)癥狀與致病機(jī)理食入病毒感染，粒子大量復(fù)制，在組織內(nèi)形成大量結(jié)晶體，活體昆蟲(chóng)出現(xiàn)虹彩顏色。感染部位主要在脂肪細(xì)胞， 其次為皮膚上皮細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞和肌肉細(xì)胞殺蟲(chóng)活性：雙翅目，鱗翅目，也可感染鞘翅目、半翅目和膜翅目昆蟲(chóng)主要寄主：棉鈴象甲，葉跳蟲(chóng)，深

41、山葉蟬，黑尾葉蟬、小褐飛虱、蚊蟲(chóng)12. RNA病毒殺蟲(chóng)劑質(zhì)型多角體病毒CPV,其他RNA殺蟲(chóng)病毒（雙RNA病毒科，野田村病毒科，四對(duì)稱病毒科）（1） 質(zhì)型多角體病毒CPV屬于呼腸孤病毒科。侵襲昆蟲(chóng)消化管，在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)寄生，細(xì)胞核中無(wú)多角體。已在鱗翅目、雙翅目、膜翅目、鞘翅目、脈翅目中發(fā)現(xiàn)。cpv致病機(jī)理CPV是通過(guò)幼蟲(chóng)攝食CPV多角體侵入，主要感染幼蟲(chóng)的中腸部位，約4天后表現(xiàn)癥狀癥狀：初期：食欲不振，體型縮小，比例失調(diào)成大頭，長(zhǎng)刺毛。幼蟲(chóng)消化道出現(xiàn)不透明和淡黃色或乳白色，失去半透明和淡綠色。后期：表皮出現(xiàn)白色斑塊。中腸細(xì)胞液化后，多角體可被嘔吐出來(lái)或由糞便排出。影響病毒防治效果的因素：（1） 病

42、毒本身 選擇毒力高的病毒株系，適宜濃度、次數(shù)、時(shí)間（2） 防治對(duì)象（3） 環(huán)境因素（4） 溫度、光照、pH值CPV大量生產(chǎn)與應(yīng)用天然飼料人工飼料飼養(yǎng)昆蟲(chóng)。原理簡(jiǎn)單：活蟲(chóng)體、活細(xì)胞、活組織采集或引進(jìn)昆蟲(chóng)病毒的原種：不同單株毒力不同，且差異很大，所以一定要選用最好的病毒株必須經(jīng)濟(jì)方便：選用最易感染的昆蟲(chóng)找出一個(gè)最適宜的接種量，蟲(chóng)期、環(huán)境條件。舉例：我國(guó)CPV，馬尾松毛蟲(chóng)CPV,茶毛蟲(chóng)CPV/棉鈴蟲(chóng)CPV和文山松毛蟲(chóng)馬尾松毛蟲(chóng)不能人工飼料飼養(yǎng)。 在生產(chǎn)馬尾松松毛蟲(chóng)CPV時(shí)采用直接感染宿主昆蟲(chóng)增殖病毒，最簡(jiǎn)便的方法是在害蟲(chóng)大發(fā)生時(shí)，將病毒噴灑于植物上，然后手收集病死蟲(chóng)。*林建圍欄增殖法是我國(guó)生產(chǎn)松毛蟲(chóng)

43、最常用的方法。CPV大量生產(chǎn)的方法：直接在害蟲(chóng)自然種群中繁殖：蟲(chóng)口密度大，適當(dāng)蟲(chóng)期噴，把死蟲(chóng)收回，最簡(jiǎn)便，適于一些害蟲(chóng)在室內(nèi)不易人工培養(yǎng)，如葉蜂，森林上的害蟲(chóng)野外采集，采回（小區(qū)、室內(nèi)）接種完全在室內(nèi)條件下用自然或人工合成的飼料來(lái)繁殖：斜紋夜蛾，地老虎重組昆蟲(chóng)桿狀病毒用人工半合成飼料大量增殖NPV天然飼料養(yǎng)、添食，使感染，大量增殖NPV直接從野外大量收集NPV蟲(chóng)尸感病蟲(chóng)體的收集、破碎、勻漿過(guò)濾NPV的采集、分離、鑒定NPV毒株的引進(jìn)NPV殺蟲(chóng)劑生產(chǎn)工藝?yán)ハx(chóng)病毒的傳播與誘發(fā)水平傳遞：經(jīng)污染的環(huán)境和食物傳給健康昆蟲(chóng)垂直傳遞：經(jīng)雌蟲(chóng)所產(chǎn)的卵傳遞給后代1. 由患病幼蟲(chóng)傳播：患病毒而死亡的幼蟲(chóng)，從其尸體

44、釋放出大量的病毒，這些病毒留在植物或其食物上，甚至嚴(yán)重污染周?chē)h(huán)境，從而感染其他健康昆蟲(chóng)，或從口或糞便中排出病毒。2.患病成蟲(chóng)傳播，飛行，交尾傳播鳥(niǎo)類取食，糞便。寄生昆蟲(chóng)。應(yīng)用短期防治長(zhǎng)期防治選擇防治：利用?；詮?qiáng)、蟲(chóng)口密度低時(shí)殺死一部分，協(xié)調(diào)防治。注意事項(xiàng)經(jīng)驗(yàn)和秸稈單獨(dú)使用混用 增效作用。迫發(fā)劑。原理：亞致死劑量的化學(xué)農(nóng)藥提高了寄主昆蟲(chóng)對(duì)病毒的感受性混用生物農(nóng)藥 8010等 長(zhǎng)效+短效病毒+病毒干擾作用：研究有益昆蟲(chóng)病毒?。ㄐQ、蜂）增效作用：移栽法：苗浸泡再移栽，目的：把病毒引入生態(tài)學(xué)病蟲(chóng)釋放法：土壤思考題：1.病毒農(nóng)藥防治害蟲(chóng)的優(yōu)缺點(diǎn)？2.生產(chǎn)病毒殺蟲(chóng)劑需要解決哪些關(guān)鍵問(wèn)題？3.怎樣才能使

45、用好病毒農(nóng)藥？6.比較NPV CPV的致病機(jī)理分類總結(jié)：DNA病毒（1） NPV （呈桿狀、具囊膜，雙鏈環(huán)狀DNA分子 ）家蠶NPV，棉鈴蟲(chóng)NPV,松毛蟲(chóng)NPV,春尺蠖NPV,舞毒蛾NPV,NPV復(fù)制過(guò)程重要特點(diǎn)：具有兩種不同表現(xiàn)性，產(chǎn)生兩種不同形態(tài)、不同功能的病毒粒子出芽型病毒粒子（BV）包涵體來(lái)源型病毒粒子(ODV)此階段感染早期產(chǎn)生BV,晚期產(chǎn)生了大量的ODV，ODV由多角體保護(hù)著，最后宿主幼蟲(chóng)的細(xì)胞核充滿了多角體并液化(2)GV 如黃地老虎GV，菜粉蝶GV,茶小卷葉蛾GVD NA雙鏈、超螺旋、共價(jià)閉合環(huán)狀(3)昆蟲(chóng)痘病毒（EPV）雙鏈DNA,具囊膜包涵體有兩類：球形體，包埋病毒粒子 紡

46、錘體，不含病毒粒子(5) DNV細(xì)小病毒（單鏈DNA，無(wú)囊膜(6) 其它DNA病毒 多分DNA病毒科 多個(gè)不同的，封閉的、環(huán)狀超螺旋的DNA組成，僅寄生蜂內(nèi)虹彩病毒科 雙鏈DNA，無(wú)囊膜、泡囊病毒科 線性雙鏈DNA，有囊膜 細(xì)尾病毒科 雙股DNA，具囊膜棕櫚獨(dú)角仙病毒 桿狀病毒（樹(shù)頂病，宿主專一性）發(fā)現(xiàn)最早、數(shù)量最大、研究最多最實(shí)用的節(jié)肢動(dòng)物特異性的DNA病毒研發(fā)現(xiàn)狀：20種左右桿狀病毒殺蟲(chóng)劑試用或應(yīng)用A亞組核型多角體病毒，如家蠶NPV，棉鈴蟲(chóng)NPV,松毛蟲(chóng)NPV,春尺蠖NPV,舞毒蛾NPV,斜紋夜蛾NPV,粘蟲(chóng)NPV,中國(guó)刺蛾NPVB亞組顆粒體病毒，如黃地老虎GV，菜粉蝶GV,茶小卷葉蛾GV

47、C亞組非包涵體核型桿狀病毒，如印度棕櫚獨(dú)角仙病毒D亞組非包涵體多分體DNA基因組核型桿狀病毒，如甜菜尺蠖姬蜂病毒RNA病毒質(zhì)型多角體病毒CPV,雙鏈RNA,無(wú)囊膜，具衣殼，病毒粒子二十面體其他RNA殺蟲(chóng)病毒（雙RNA病毒科，二十面體，雙股RNA，無(wú)囊膜野田村病毒科，兩個(gè)單鏈RNA分子，基因組分離四對(duì)稱病毒科 單股正鏈RNA，有衣殼，二十面體病毒）第4章 細(xì)菌農(nóng)藥細(xì)菌殺蟲(chóng)劑：蘇云金芽孢桿菌、球形芽孢桿菌、金龜子芽孢桿菌、嗜蟲(chóng)黏質(zhì)賽氏桿菌細(xì)菌殺菌劑：假單胞菌、枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌細(xì)菌殺線蟲(chóng)殺鼠劑：穿刺巴斯德氏柄菌、肉毒梭菌1.細(xì)菌：狹義的細(xì)菌是指一類細(xì)胞細(xì)短，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，胞壁堅(jiān)韌，多以二分裂方

48、式繁殖和水生性較強(qiáng)的原核生物2.細(xì)菌基本形狀：球狀、桿狀、螺旋狀3.細(xì)菌基本構(gòu)造：細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、DNA細(xì)菌特殊構(gòu)造：糖被、鞭毛、菌毛、性毛、芽孢、伴胞晶體革蘭氏陽(yáng)性 初染結(jié)晶紫，酒精不脫色的為陽(yáng)性。若脫色，復(fù)染后呈紅色的即為陰性。有芽孢的桿菌和絕大多數(shù)的球菌、所有放線菌和真菌都呈革蘭氏陽(yáng)性?；【?、螺旋體和大多數(shù)致病的無(wú)芽孢桿菌都是革蘭氏陰性。4.細(xì)菌農(nóng)藥：由細(xì)菌或其代謝產(chǎn)物組成的殺蟲(chóng)或殺菌劑。細(xì)菌農(nóng)藥是我國(guó)開(kāi)發(fā)較早，生產(chǎn)量最大，應(yīng)用最廣的微生物農(nóng)藥。研究較多的有熒光假單胞桿菌和芽孢桿菌。5.細(xì)菌殺蟲(chóng)劑：細(xì)菌殺蟲(chóng)劑是利用某些對(duì)昆蟲(chóng)有致病或致死作用的昆蟲(chóng)病原細(xì)菌，經(jīng)發(fā)酵制成含有殺蟲(chóng)活性成

49、分或菌體本身，用于防治和殺死目標(biāo)昆蟲(chóng)的生物殺蟲(chóng)制劑。具有殺蟲(chóng)作用的昆蟲(chóng)病原細(xì)菌大多屬于3個(gè)科：芽孢桿菌科，腸桿菌科，假單胞菌。能稱為殺蟲(chóng)劑的屬于芽孢桿菌科的芽孢桿菌屬和梭狀芽孢桿菌屬6.細(xì)菌殺蟲(chóng)劑致病機(jī)理 大多數(shù)昆蟲(chóng)病原細(xì)菌通過(guò)口和消化道感染昆蟲(chóng)，只要少數(shù)通過(guò)卵、體壁和氣管感染；也可以通過(guò)寄生蟲(chóng)和捕食昆蟲(chóng)攜帶感染。細(xì)菌侵染后，引起敗血癥，導(dǎo)致昆蟲(chóng)死亡。死亡的蟲(chóng)體顏色加深，蟲(chóng)體軟化腐爛，體壁易破，流出帶有臭味的粘稠液體。6.細(xì)菌殺蟲(chóng)劑特點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：具有獨(dú)特的作用方式和殺蟲(chóng)機(jī)理主要是利用自身代謝產(chǎn)生的生物活性毒素對(duì)目標(biāo)昆蟲(chóng)進(jìn)行毒殺或通過(guò)營(yíng)養(yǎng)體、芽孢在蟲(chóng)體內(nèi)的繁殖等途徑致死目標(biāo)昆蟲(chóng)。具有一定特異性和選擇性的殺蟲(chóng)作用，不殺傷天敵和非目標(biāo)昆蟲(chóng)。有專性和兼性的病原細(xì)菌，兼性是主要農(nóng)藥來(lái)源。應(yīng)用較廣的專性病原細(xì)菌有日本金龜子芽孢桿菌和緩病芽孢桿菌，