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文檔簡介

1、設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)-機(jī)械損傷對(duì)馬鈴薯生理性質(zhì)的影響成員:2009236105郭銀炫 2009236107蘇彩婉 2009236108鐘麗桃 2009236116鐘玉嫻 2009236117陳毓文 2009236123丁丹麗(一)刀器割傷對(duì)馬鈴薯多酚氧化酶(PPO)活性測定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模赫莆諟y定多酚氧化酶活性的方法;了解多酚氧化酶的特性二、實(shí)驗(yàn)原理:多酚氧化酶是一種含銅的氧化酶,能使一元酚和二元酚氧化生成醌。醌有顏色,在525nm下有最大光吸收,通過分光光度法測定反應(yīng)體系顏色變化可測定酶活性。三、器材與試劑1、儀器:低溫離心機(jī)、分光光度計(jì)2、試劑:0.1 mol·L兒茶酚、pH 7.2磷酸緩沖

2、液3、材料:馬鈴薯四、實(shí)驗(yàn)步驟:1稱取馬鈴薯0.5克,加入2.5mL pH 7.2磷酸緩沖液,少許PVP,研磨勻漿,轉(zhuǎn)移到離心管,再用2.5mL pH 7.2磷酸緩沖液沖洗研缽,合并提取液。4 4000rpm離心15分鐘,上清液即為粗酶液。2在試管中,加入2.5mL pH 7.2磷酸緩沖液,1.5mL 兒茶酚(鄰苯二酚)以及1mL 粗酶液,空白調(diào)零以1mL磷酸緩沖液代替粗酶液。3A值測定:加入粗酶液后迅速混勻,立刻于525nm下測定反應(yīng)體系的A值,每隔10秒記錄一次,共記錄5次。4計(jì)算酶活力。按下式計(jì)算PPO活性U/min gFW A值增加0.001定義為一個(gè)酶活力單位。5.刀割傷后每隔1個(gè)小

3、時(shí),按上述步驟重復(fù)做三次五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告:時(shí)間(h)0123完好馬鈴薯A值0.3120.4150.5230.326損傷馬鈴薯A值0.1330.1230.1200.127六實(shí)驗(yàn)結(jié)果:馬鈴薯機(jī)械損傷后,多酚氧化酶活性降低 隨著時(shí)間的增長,多酚氧化酶的活性越來越低七實(shí)驗(yàn)分析及討論1.完好馬鈴薯在放置三個(gè)小時(shí)后的PPO活性顯著變大答:,PPO活力可能與馬鈴薯的大小有關(guān),馬鈴薯體積越大,酶量較多,酶活力越大2,刀割放置四個(gè)小時(shí)后,馬鈴薯PPO活力微升答:取材部位較前三次深入表皮,而PPO活力與馬鈴薯的選材部位有關(guān),靠近表皮的PPO易被氧化,所以活力比中間部位的馬鈴薯的PPO的活力小3,刀割后,促進(jìn)馬鈴薯氧化

4、褐變,所以酶活力越來越低(二)失重率與呼吸強(qiáng)度的測定一、 機(jī)械損傷對(duì)馬鈴薯失重率的影響(1)各取一個(gè)完好和刮傷的馬鈴薯用電子天平稱重,每隔6小時(shí)稱量一次,記錄數(shù)據(jù)。(2)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù):表一:相隔時(shí)間(質(zhì)量(g)樣品0h6h12h24h完好的馬鈴薯89.0288.9688.7788.73損傷的馬鈴薯68.0367.6766.4464.22表二:相隔時(shí)間失重率樣品0h6h12h24h完好00.07%0.28%0.32%損傷00.53%2.33%5.6%圖一:機(jī)械損傷對(duì)馬鈴薯失重率的影響注:縱坐標(biāo)是失重率(3)結(jié)論:機(jī)械損傷對(duì)增強(qiáng)馬鈴薯的蒸騰失水,導(dǎo)致馬鈴薯的質(zhì)量減少,失重率比完好的大。二、機(jī)械損傷對(duì)馬

5、鈴薯呼吸強(qiáng)度的影響(1)本實(shí)驗(yàn)以完好的馬鈴薯和刮傷的馬鈴薯做對(duì)比試驗(yàn),采用靜置法測定它們呼吸強(qiáng)度的變化,每隔6小時(shí)測定一次,記下數(shù)據(jù),分析機(jī)械損傷對(duì)呼吸強(qiáng)度的影響。(2)實(shí)驗(yàn)材料與試劑0.4mol/L氫氧化鈉、0.2mol/L草酸、飽和氯化鋇溶液、1%酚酞指示劑、凡士林。干燥器(直徑25cm)、滴定管架、25mL酸式滴定管、150ml三角瓶、10cm培養(yǎng)皿、10ml移液管、洗耳球、天平。(3)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)與結(jié)果:表三:記錄數(shù)據(jù)相隔時(shí)間體積(ml)試樣0h6h12h18h24h完好的馬鈴薯8.248.278.288.318.30刮傷的馬鈴薯8.278.198.248.298.29空白試驗(yàn)8.398.

6、408.398.418.40表四:馬鈴薯呼吸強(qiáng)度的變化相隔時(shí)間呼吸強(qiáng)度(mg/kg.h)樣品0h6h12h18h24h完好的馬鈴薯15.0512.8510.889.919.91刮傷的馬鈴薯15.0527.1619.5015.6114.31圖二:完好和刮傷的馬鈴薯呼吸強(qiáng)度的變化注:縱坐標(biāo)是呼吸強(qiáng)度,單位是mg/(kg.h)(4)結(jié)論:馬鈴薯是非躍變型果蔬,其呼吸強(qiáng)度在成熟期間隨時(shí)間的增長而不斷下降,而受到機(jī)械損傷的馬鈴薯剛開始呼吸強(qiáng)度不正常的增加,到達(dá)一定的高峰之后,隨著時(shí)間的增長,其呼吸強(qiáng)度也逐漸降低,到達(dá)一定的程度后,變化幅度小,幾乎不變。所以在果蔬貯運(yùn)期間要盡量避免機(jī)械損傷,果蔬受到機(jī)械損

7、傷,呼吸強(qiáng)度增強(qiáng),體內(nèi)有機(jī)物質(zhì)消耗快,降低果蔬的貯藏壽命。(三)馬鈴薯總可溶性固形物含量的測定(折光儀法)一,實(shí)驗(yàn)?zāi)康?測定完好的馬鈴薯與損傷后的馬鈴薯固形物含量變化情況。2、 藥品與器材馬鈴薯(一個(gè)完好的,一個(gè)有機(jī)械損傷的,蒸餾水; 手持式折光儀、燒杯、滴管、擦鏡紙(或棉花)。三、操作步驟1、儀器的校正 打開手持式折光儀蓋板,用擦鏡紙或棉花小心擦干棱鏡玻璃面。在棱鏡玻璃面上滴2滴蒸餾水,蓋上蓋板。朝向光源明亮處,于水平狀態(tài),從接眼部處觀察,檢查視野中明暗交界線是否處在刻度的零線上。若與零線不重合,則旋動(dòng)刻度調(diào)節(jié)螺旋,使分界線面剛好落在零線上。 2、打開蓋板,將水擦干,在棱鏡玻璃面上滴2滴馬鈴薯汁,朝向光源明亮處觀測,讀取視野中明暗交界線上的刻度,即為果蔬汁中可溶性固形物含量(%)。 3、每個(gè)樣品重復(fù)測定三次,取其平均值,以百分?jǐn)?shù)計(jì)算。 4、連續(xù)使用儀器測定不同試樣時(shí),在每次測完后,用清水沖洗潔凈再用干燥的鏡紙擦干凈,才可繼續(xù)進(jìn)行測試。測試結(jié)束后,必須擦凈鏡身各部分。4 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù) 時(shí)間段馬鈴薯種類 0時(shí) 6小時(shí) 12小時(shí) 24小時(shí) 完好的馬鈴薯 7.88.18.28.4損傷的馬鈴薯7.78.18.

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