設計性機械損傷對馬鈴薯生理性質的影響

1、設計性實驗-機械損傷對馬鈴薯生理性質的影響成員：2009236105郭銀炫 2009236107蘇彩婉 2009236108鐘麗桃 2009236116鐘玉嫻 2009236117陳毓文 2009236123丁丹麗（一）刀器割傷對馬鈴薯多酚氧化酶（PPO）活性測定一、實驗目的：掌握測定多酚氧化酶活性的方法；了解多酚氧化酶的特性二、實驗原理：多酚氧化酶是一種含銅的氧化酶，能使一元酚和二元酚氧化生成醌。醌有顏色，在525nm下有最大光吸收，通過分光光度法測定反應體系顏色變化可測定酶活性。三、器材與試劑1、儀器：低溫離心機、分光光度計2、試劑：0.1 mol·L兒茶酚、pH 7.2磷酸緩沖

2、液3、材料：馬鈴薯四、實驗步驟：1稱取馬鈴薯0.5克，加入2.5mL pH 7.2磷酸緩沖液，少許PVP，研磨勻漿，轉移到離心管，再用2.5mL pH 7.2磷酸緩沖液沖洗研缽，合并提取液。4 4000rpm離心15分鐘，上清液即為粗酶液。2在試管中，加入2.5mL pH 7.2磷酸緩沖液，1.5mL 兒茶酚（鄰苯二酚）以及1mL 粗酶液，空白調零以1mL磷酸緩沖液代替粗酶液。3A值測定：加入粗酶液后迅速混勻，立刻于525nm下測定反應體系的A值，每隔10秒記錄一次，共記錄5次。4計算酶活力。按下式計算PPO活性U/min gFW A值增加0.001定義為一個酶活力單位。5.刀割傷后每隔1個小

3、時，按上述步驟重復做三次五、實驗報告：時間（h）0123完好馬鈴薯A值0.3120.4150.5230.326損傷馬鈴薯A值0.1330.1230.1200.127六實驗結果：馬鈴薯機械損傷后，多酚氧化酶活性降低 隨著時間的增長，多酚氧化酶的活性越來越低七實驗分析及討論1.完好馬鈴薯在放置三個小時后的PPO活性顯著變大答：,PPO活力可能與馬鈴薯的大小有關，馬鈴薯體積越大，酶量較多，酶活力越大2,刀割放置四個小時后，馬鈴薯PPO活力微升答：取材部位較前三次深入表皮，而PPO活力與馬鈴薯的選材部位有關，靠近表皮的PPO易被氧化，所以活力比中間部位的馬鈴薯的PPO的活力小3，刀割后，促進馬鈴薯氧化

4、褐變，所以酶活力越來越低（二）失重率與呼吸強度的測定一、 機械損傷對馬鈴薯失重率的影響（1）各取一個完好和刮傷的馬鈴薯用電子天平稱重，每隔6小時稱量一次，記錄數(shù)據(jù)。（2）實驗數(shù)據(jù)：表一：相隔時間（質量（g）樣品0h6h12h24h完好的馬鈴薯89.0288.9688.7788.73損傷的馬鈴薯68.0367.6766.4464.22表二：相隔時間失重率樣品0h6h12h24h完好00.07%0.28%0.32%損傷00.53%2.33%5.6%圖一：機械損傷對馬鈴薯失重率的影響注：縱坐標是失重率(3)結論：機械損傷對增強馬鈴薯的蒸騰失水，導致馬鈴薯的質量減少，失重率比完好的大。二、機械損傷對馬

5、鈴薯呼吸強度的影響（1）本實驗以完好的馬鈴薯和刮傷的馬鈴薯做對比試驗，采用靜置法測定它們呼吸強度的變化，每隔6小時測定一次，記下數(shù)據(jù)，分析機械損傷對呼吸強度的影響。（2）實驗材料與試劑0.4mol/L氫氧化鈉、0.2mol/L草酸、飽和氯化鋇溶液、1%酚酞指示劑、凡士林。干燥器（直徑25cm）、滴定管架、25mL酸式滴定管、150ml三角瓶、10cm培養(yǎng)皿、10ml移液管、洗耳球、天平。（3）實驗數(shù)據(jù)與結果：表三：記錄數(shù)據(jù)相隔時間體積（ml）試樣0h6h12h18h24h完好的馬鈴薯8.248.278.288.318.30刮傷的馬鈴薯8.278.198.248.298.29空白試驗8.398.

6、408.398.418.40表四：馬鈴薯呼吸強度的變化相隔時間呼吸強度（mg/kg.h）樣品0h6h12h18h24h完好的馬鈴薯15.0512.8510.889.919.91刮傷的馬鈴薯15.0527.1619.5015.6114.31圖二：完好和刮傷的馬鈴薯呼吸強度的變化注：縱坐標是呼吸強度，單位是mg/(kg.h)（4）結論：馬鈴薯是非躍變型果蔬，其呼吸強度在成熟期間隨時間的增長而不斷下降，而受到機械損傷的馬鈴薯剛開始呼吸強度不正常的增加，到達一定的高峰之后，隨著時間的增長，其呼吸強度也逐漸降低，到達一定的程度后，變化幅度小，幾乎不變。所以在果蔬貯運期間要盡量避免機械損傷，果蔬受到機械損

7、傷，呼吸強度增強，體內有機物質消耗快，降低果蔬的貯藏壽命。（三）馬鈴薯總可溶性固形物含量的測定（折光儀法）一，實驗目的 測定完好的馬鈴薯與損傷后的馬鈴薯固形物含量變化情況。2、 藥品與器材馬鈴薯（一個完好的，一個有機械損傷的，蒸餾水； 手持式折光儀、燒杯、滴管、擦鏡紙（或棉花）。三、操作步驟1、儀器的校正 打開手持式折光儀蓋板，用擦鏡紙或棉花小心擦干棱鏡玻璃面。在棱鏡玻璃面上滴2滴蒸餾水，蓋上蓋板。朝向光源明亮處，于水平狀態(tài)，從接眼部處觀察，檢查視野中明暗交界線是否處在刻度的零線上。若與零線不重合，則旋動刻度調節(jié)螺旋，使分界線面剛好落在零線上。 2、打開蓋板，將水擦干，在棱鏡玻璃面上滴2滴馬鈴薯汁，朝向光源明亮處觀測，讀取視野中明暗交界線上的刻度，即為果蔬汁中可溶性固形物含量（%）。 3、每個樣品重復測定三次，取其平均值，以百分數(shù)計算。 4、連續(xù)使用儀器測定不同試樣時，在每次測完后，用清水沖洗潔凈再用干燥的鏡紙擦干凈，才可繼續(xù)進行測試。測試結束后，必須擦凈鏡身各部分。4 實驗數(shù)據(jù) 時間段馬鈴薯種類 0時 6小時 12小時 24小時 完好的馬鈴薯 7.88.18.28.4損傷的馬鈴薯7.78.18.