廣西單招生物模擬試題：多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段

1、2016年廣西單招生物模擬試題:多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段【試題內(nèi)容來(lái)自于相關(guān)網(wǎng)站和學(xué)校提供】1：使用末端終止法測(cè)定DNA序列需要的成分有：A、DNA聚合酶B、dNTPC、ddNTPD、RNA引物2：如圖為DNA變性和復(fù)性示意圖，下列相關(guān)說(shuō)法正確的是(    )A、向右的過(guò)程為加熱(80100)變性的過(guò)程B、向左的過(guò)程是DNA雙鏈迅速致冷復(fù)性C、變性與在生物體內(nèi)解旋過(guò)程的條件、實(shí)質(zhì)都相同D、圖中DNA片段共有4個(gè)游離的磷酸基、4個(gè)3端3：在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)模擬生物體內(nèi)的DNA復(fù)制，需要哪些條件酶游離的脫氧核苷酸ATPDNA分子引物tRNA適宜的溫度適宜的酸堿度A、B、C

2、、D、4：下列有關(guān)DNA聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的說(shuō)法正確的是        A、需要引物B、始終在高于70的條件下進(jìn)行C、需要加解旋酶D、需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶5：下列有關(guān)核酸的變性與復(fù)性的正確敘述是(   )。A、不同長(zhǎng)度的DNA分子變性后，在合適溫度下復(fù)性所用的時(shí)間基本相同B、熱變性后的DN A經(jīng)緩慢冷卻后可復(fù)性C、熱變性的DNA迅速降溫過(guò)程也稱作退火D、復(fù)性的最佳溫度為700C-850C6：PCR技術(shù)是把DNA片段在體外酶的作用下，合成許許多多相同片段的一種方法，利用它能快速而特異地?cái)U(kuò)增任何要求的

3、目的基因或DNA分子片段，它的基本過(guò)程如下圖所示：注：圖中短線表示每次擴(kuò)增過(guò)程中需要的引物。每個(gè)引物約含20個(gè)脫氧核苷酸，并分別與兩條單鏈DNA結(jié)合，其作用是引導(dǎo)合成DNA子鏈。(1) PCR技術(shù)的原理是模擬生物體內(nèi)_的過(guò)程。(2) PCR擴(kuò)增過(guò)程中需要對(duì)DNA片段進(jìn)行高溫處理，其目的是_，此過(guò)程在生物體內(nèi)為_(kāi)，需_酶的參與。(3)假如引物都用3H標(biāo)記，從理論上計(jì)算，所得DNA分子中含有3H標(biāo)記的占_。(4)假定DNA片段含200對(duì)脫氧核苷酸，經(jīng)3次擴(kuò)增，從理論上計(jì)算需要_個(gè)游離脫氧核苷酸。7：（2014河北石家莊月考）PCR是一種體外快速擴(kuò)增DNA的方法，用于擴(kuò)增特定的DNA片段，數(shù)小時(shí)內(nèi)可

4、使目的基因片段擴(kuò)增到數(shù)百萬(wàn)個(gè)拷貝。請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題：(1) DNA分子的兩條鏈在堿基關(guān)系上表現(xiàn)為_(kāi)，DNA的兩條鏈在方向上表現(xiàn)為_(kāi)；通常將_的末端稱為5端；當(dāng)引物與DNA母鏈通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合后，DNA聚合酶就能從引物的_開(kāi)始延伸DNA鏈，故DNA子鏈復(fù)制的方向是_。(2) PCR與體內(nèi)DNA復(fù)制的不同之處主要表現(xiàn)在溫度上，在PCR中先用95高溫處理的目的是_；而這一過(guò)程在細(xì)胞內(nèi)是通過(guò)_實(shí)現(xiàn)的。(3) PCR需要模板DNA、引物、_和_等條件，其中的引物實(shí)質(zhì)上是一種_8：（2015湖北襄陽(yáng)第一次調(diào)研）生活飲用水已經(jīng)過(guò)沉淀、過(guò)濾、加氯消毒等處理，含微生物很少，但當(dāng)其水源水不潔或處理達(dá)不到要求時(shí)，

5、仍然會(huì)含相當(dāng)量的微生物甚至含致病性微生物。供水管道破損及二次供水等環(huán)節(jié)也可能導(dǎo)致生活飲用水的污染。因此生活飲用水的微生物安全性日常檢測(cè)是很重要的。我國(guó)生活飲用水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)( CB5749 - 85)中規(guī)定生活飲用水中細(xì)菌總數(shù)不得大于100個(gè)/mL，總大腸菌群不得大于3個(gè)/L。(1)檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí)，通常將水樣進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量，這種方法稱力_。(2)用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)是否需要設(shè)置對(duì)照組？為什么？_  _。(3)如分別取0.1 mL已稀釋102倍的水樣分別涂布到四個(gè)瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)

6、，培養(yǎng)基記錄到大腸桿菌的菌落數(shù)分別為161、155、158、170，則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為_(kāi)。(4)純化大腸桿菌時(shí)使用的培養(yǎng)基一般用法滅菌， _（可不可）用加入抗生素的方法防止雜菌感染。(5)如果要測(cè)定水中的病毒種類，可以用_技術(shù)使其遺傳物質(zhì)擴(kuò)增，然后用_技術(shù)進(jìn)行鑒定。9：請(qǐng)根據(jù)以下圖表回答問(wèn)題。(1)在采用常規(guī)PCR方法擴(kuò)增目的基因的過(guò)程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物體內(nèi)的DNA聚合酶，其最主要的特點(diǎn)是 _。(2) PCR過(guò)程中復(fù)性溫度必須根據(jù)引物的堿基數(shù)量和種類來(lái)設(shè)定。如表為根據(jù)模板設(shè)計(jì)的兩對(duì)引物序列，如圖為引物對(duì)與模板結(jié)合示意圖。請(qǐng)判斷哪一對(duì)引物可忍耐較高的復(fù)性溫度 _。10：

7、在進(jìn)行DNA親子鑒定時(shí)，需大量的DNA。PCR技術(shù)（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）可以使樣品DNA擴(kuò)增，獲得大量DNA克隆分子。該技術(shù)的原理是利用DNA的半保留復(fù)制，在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制（如圖，圖中黑色長(zhǎng)方形是引物）。在很短的時(shí)間內(nèi)將DNA擴(kuò)增幾百萬(wàn)倍甚至幾十億倍，使實(shí)驗(yàn)室所需的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。(1)圖中的變性、延伸分別是指_、_、_。(2)某樣品DNA分子中共含3 000個(gè)堿基對(duì)，堿基數(shù)量滿足：(A+T)(G+C)=12，若經(jīng)5次循環(huán)，至少需要向試管中加入_個(gè)腺嘌呤脫氧核苷酸。（不考慮引物所對(duì)應(yīng)的片段）(3)若下圖為第一輪循環(huán)產(chǎn)生的產(chǎn)物。請(qǐng)繪出以a鏈和b鏈為模板經(jīng)PCR擴(kuò)增的產(chǎn)物。1

8、1：（8分） PCR技術(shù)（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù)，下圖表示合成過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖分析回答：（1） C過(guò)程要用到的酶是。PCR反應(yīng)除提供酶外，還需要滿足的基本條件有：，。（2） 人類利用PCR技術(shù)合成的DNA進(jìn)行新子鑒定，其原理是：首先獲取被測(cè)試者的DNA，并進(jìn)行PCR擴(kuò)增，放進(jìn)凝膠內(nèi)，用電泳推動(dòng)DNA小片段分離，再使用特別的“探針”去尋找基因。相同的基因會(huì)凝聚在一起，然后利用特別的染料在X光下，便會(huì)顯示由DNA探針凝聚于一起的黑色條碼。每個(gè)人的條碼一半與其母親的條碼吻合，另一半與其父親條碼吻合。下圖為某小孩和其母親以及待測(cè)定的四位男性的DNA指紋圖譜示意圖

9、，請(qǐng)推測(cè)該小孩真正生物學(xué)上的父親是，為什么？。如果四位男性中有該小孩的同母異父的兄弟，請(qǐng)推測(cè)該小孩的同母異父的兄弟有 。12：（12分）糖尿病是一種常見(jiàn)病，且發(fā)病率有逐年增加的趨勢(shì)，以致西方發(fā)達(dá)國(guó)家把它列為威脅人類健康的第三號(hào)“殺手”。目前對(duì)糖尿病的治療，大多采用激素療法，該激素過(guò)去主要從動(dòng)物（豬、牛）中得到。自從70年代基因工程發(fā)展起來(lái)后，人們開(kāi)始采用這種新技術(shù)生產(chǎn)，其操作的基本過(guò)程如圖所示。（17代表某生理過(guò)程，ag代表細(xì)胞或結(jié)構(gòu)）（1）2過(guò)程需要用工具是           &#

10、160;   ，4過(guò)程需要用工具是               。（2）已知g代表的胰島素分子是由51個(gè)氨基酸分子構(gòu)成的蛋白質(zhì)，具有兩條肽鏈，控制合成g的基因至少有        個(gè)含氮堿基（不考慮終止密碼子）。（3）b細(xì)胞是         ，d基

11、因與人體內(nèi)胰島素基因的區(qū)別是                    。        （4）在功能上與g物質(zhì)有拮抗作用的是                

12、60;                      。13：（6分）請(qǐng)回答PCR方面的有關(guān)問(wèn)題：(1)引物是擴(kuò)增過(guò)程中必須加入的物質(zhì)，從化學(xué)本質(zhì)上說(shuō)，引物是一小段_。(2)引物是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)，如下圖。從理論上推測(cè)。第四輪循環(huán)產(chǎn)物中兩條脫氧核苷酸鏈等長(zhǎng)的DNA片段所占DNA總數(shù)的比例為       

13、0;。(3)設(shè)計(jì)引物是PCR技術(shù)關(guān)鍵步驟之一。某同學(xué)設(shè)計(jì)的一組引物(只標(biāo)注了部分堿基序列)不合理(如下圖)，請(qǐng)說(shuō)明理由                                。（4）在DNA聚合酶的作用下，兩條子鏈的延伸方向都是   

14、0;                    。（5）假如引物都用3H標(biāo)記，從理論上計(jì)算，所得DNA分子中含有3H標(biāo)記的占         。（6）與體內(nèi)DNA復(fù)制相比，PCR反應(yīng)體系除引物外，還需加入哪種特別的物質(zhì)？       。14：（

15、改編）番茄營(yíng)養(yǎng)豐富，是人們喜愛(ài)的一類果蔬。但普通番茄細(xì)胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制細(xì)胞產(chǎn)生多聚半乳糖醛酸酶，該酶能破壞細(xì)胞壁，使番茄軟化，不耐貯藏。為滿足人們的生產(chǎn)生活需要，科學(xué)家們通過(guò)基因工程技術(shù)，培育出了抗軟化、保鮮時(shí)間長(zhǎng)的番茄新品種。操作流程如圖，請(qǐng)回答：(1)過(guò)程需要的工具酶有            和_。后者的作用是恢復(fù)前者切開(kāi)的           

16、          鍵。(2)在番茄新品種的培育過(guò)程中，將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法叫做           。(3)從圖中可見(jiàn)，mRNAl和mRNA2的結(jié)合直接導(dǎo)致了_無(wú)法合成，最終使番茄獲得了抗軟化的性狀。多聚半乳糖醛酸酶基因與抗多聚半乳糖醛酸酶基因是否為等位基因        。(4)普通番茄細(xì)胞導(dǎo)入目

17、的基因后，經(jīng)            過(guò)程和            過(guò)程，然后誘導(dǎo)出試管苗，進(jìn)一步培養(yǎng)成正常植株。（5）如圖是該目的基因表達(dá)過(guò)程中的一個(gè)階段，圖中3和4的核苷酸是否相同               

18、;   理由                                              

19、60;                   （6）請(qǐng)?jiān)谙驴蛑挟?huà)出某DNA片段被切割形成黏性末端的過(guò)程示意圖。15：在進(jìn)行DNA親子鑒定時(shí)，需大量的DNA。PCR技術(shù) （聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）可以使樣品DNA擴(kuò)增，獲得大量DNA克隆分子。該技術(shù)的原理是利用DNA的半保留復(fù)制，在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制（如下圖，圖中黑色長(zhǎng)方形是引物）。在很短的時(shí)間內(nèi)將DNA擴(kuò)增幾百倍甚至幾十億倍，使實(shí)驗(yàn)室所需的遺傳物質(zhì)不再受限于活

20、的生物體。（1）圖中的變性、延伸分別是指                                             、 

21、60;                                                 

22、60;                      。（2）假設(shè)PCR反應(yīng)中的DNA模板為P，第一輪循環(huán)的產(chǎn)物2個(gè)子代DNA為N1，第二輪的產(chǎn)物4個(gè)子代DNA為N2，N1、N2中分別含有模板DNA單鏈的DNA分別有      、       個(gè)。若繼續(xù)

23、循環(huán)，該DNA片段共經(jīng)過(guò)30次循環(huán)后能形成      個(gè)這樣的片段。（3）某樣品DNA分子中共含3000個(gè)堿基對(duì)，堿基數(shù)量滿足：（A+T）/（G+C）1/2，若經(jīng)5次循環(huán)，至少需要向試管中加入               個(gè)腺嘌呤脫氧核苷酸。（不考慮引物所對(duì)應(yīng)的片段）（4）若下圖為第1輪循環(huán)產(chǎn)生的產(chǎn)物。請(qǐng)?jiān)谙旅嬖嚲砜瞻滋幚L出以a鏈和b鏈為模板經(jīng)PCR擴(kuò)增的產(chǎn)物。答案部分1、A,B,C略2

24、、A使DNA變性因素很多，例如強(qiáng)酸強(qiáng)堿等，加熱只是使DNA變性的因素之一。3、DDNA復(fù)制條件：模板，酶，能量，原料，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)還需要適宜的溫度和PH。即D。4、A,DDNA聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，需要引物，需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶，需原料等。5、B 熱變性的DNA驟然冷卻時(shí)，DNA不會(huì)復(fù)性，在緩慢冷卻時(shí)可以復(fù)性;DNA的片段越大，復(fù)性越慢，DNA的濃度越大，復(fù)性越快，當(dāng)將雙股鏈呈分散狀態(tài)的DNA溶液緩慢冷卻時(shí)，它們可以發(fā)生不同程度的重新結(jié)合而形成雙鏈螺旋結(jié)構(gòu)，這現(xiàn)象稱為“退火”。DNA復(fù)性溫度受G+C含量影響而各不相同。    6、(1)DNA復(fù)制(2)

25、使DNA兩條鏈彼此分開(kāi)  解旋  解旋( 3)100%(4)2 800由圖可知，高溫變性的過(guò)程就是DNA在高溫條件下解旋的過(guò)程，在生物體內(nèi)則需要解旋酶的催化才能進(jìn)行。低溫復(fù)性時(shí)兩個(gè)DNA分子都需要引物。每次低溫復(fù)性時(shí)，引物都與兩條單鏈DNA結(jié)合，進(jìn)而形成雙鏈DNA，所以所得DNA中均含3H。擴(kuò)增3次一共形成了8個(gè)子代DNA片段，需游離的脫氧核苷酸數(shù)為(8-1)×400=2 800個(gè)。 7、(1)互補(bǔ)配對(duì)  反向平行  磷酸基團(tuán)  3端  5 端到3端(2)使兩條鏈之間的氫鍵斷裂  解旋酶(3)四種脫氧核苷

26、酸  耐熱的DNA聚合酶  單鏈DNA分子或RNA分子DNA的兩條鏈在堿基關(guān)系上表現(xiàn)為互補(bǔ)配對(duì)，在方向上表現(xiàn)為反向平行。通常將DNA含有磷酸基團(tuán)的一端稱為5端，DNA聚合酶只能從引物的3端連接脫氧核苷酸，故子鏈復(fù)制的方向是5端到3 端。在PCR技術(shù)中，95高溫處理的目的是使兩條鏈之間的氫鍵斷裂，這一過(guò)程在細(xì)胞內(nèi)通過(guò)解旋酶來(lái)實(shí)現(xiàn)。PCR技術(shù)中除需要模板DNA、引物、四種脫氧核苷酸外，還需要耐熱的DNA聚合酶等條件，其中的引物是一種單鏈DNA分子或RNA分子。 8、(1)稀釋涂布平板法(2)需要，因?yàn)樾枰袛嗯囵B(yǎng)基是否被污染(3) 1.61x(4)高壓蒸汽滅菌不可(5

27、)PCR DNA分子雜交(1)檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí)，通常將水樣進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量，這種方法稱為稀釋涂布平板法。(2)用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)需要設(shè)置對(duì)照組，通過(guò)設(shè)置對(duì)照組來(lái)判斷培養(yǎng)基是否被污染。(3)如分別取0.1 mL已稀釋倍的水樣分別涂布到四個(gè)瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)基記錄到大腸桿菌的菌落數(shù)分別為161、155、158、170，由題意可知，每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為( 161+155+158+170)×÷( 4x0.1x10-3)=l.61x。(4)培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽

28、滅菌法滅菌，不可用加入抗生素的方法防止雜菌感染，因?yàn)榇竽c桿菌對(duì)抗生素敏感。(5)遺傳物質(zhì)擴(kuò)增常用PCR技術(shù)，可用DNA分子雜交技術(shù)鑒定水中病毒的種類。 9、(1)耐高溫(2)引物對(duì)B本題考查運(yùn)用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的有關(guān)知識(shí)以及對(duì)圖表的識(shí)別能力。(1) PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的過(guò)程中，使用的DNA聚合酶具有耐高溫的特性。(2)引物對(duì)B中含c-c堿基對(duì)較多，可忍耐較高的復(fù)性溫度。 10、(1)模板DNA雙鏈解旋形成單鏈在DNA聚合酶的作用下，原料脫氧核苷酸聚合形成新的DNA鏈(2) 31 000(3)如圖    (1)變性的實(shí)質(zhì)是DNA雙鏈解旋

29、；延伸是以DNA單鏈為模板，按堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成子鏈的過(guò)程。(2)由(A+T)( G+C)= 1/2可知A:T:G:C=1:1:2:2，所以A的比例為1/6，在一個(gè)DNA分子中的數(shù)量為3 000x2x(l/6)=1 000(個(gè))，5次循環(huán)形成的DNA數(shù)為32個(gè)，所以需要利用原料合成的DNA數(shù)相當(dāng)于32-1= 31（個(gè)），至少需腺嘌呤脫氧核苷酸為31x1000= 31000（個(gè)）。(3)畫(huà)圖的關(guān)鍵是注意引物A、B的位置和所對(duì)應(yīng)的模板鏈。11、（8分）（1）TaqDNA聚合酶， DNA模板 ，分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物，四種脫氧核苷酸。（2） B ，其子代的遺傳物質(zhì)一半來(lái)自父親，一半來(lái)自母

30、親（2分）,C、D。略12、（12分）（1）同種的限制性內(nèi)切酶    DNA連接酶 （2）306（3）胰島B細(xì)胞   人工合成的基因中不含非編碼區(qū)和內(nèi)含子（4）胰高血糖素（或腎上腺素）略13、（6分）(1)DNA或RNA （2）50%(3)引物自身折疊后會(huì)出現(xiàn)局部堿基互補(bǔ)配對(duì)而失效（4）從子鏈的5端向3端延伸（5）100（6）Taq 酶基因擴(kuò)增中引物通常是一小段DNA或RNA片段，第二輪中含引物II（或考題中的引物A）比例為3/4，第三輪中占7/8，即所有DNA片段中，只有一個(gè)片段不含引物II，故推測(cè)在第四輪中，含引物II（或引物A）的比例為15/16。與兩條脫氧核苷