第五章巴比妥類藥物的分析

1、第五章第五章 巴比妥類藥物的分析巴比妥類藥物的分析 巴比妥類藥物是一類臨床常用的催巴比妥類藥物是一類臨床常用的催眠鎮(zhèn)靜藥。由于這類藥物應(yīng)用廣泛，容眠鎮(zhèn)靜藥。由于這類藥物應(yīng)用廣泛，容易因不合理使用而引起中毒，因此，需易因不合理使用而引起中毒，因此，需要對本類藥物的原料、制劑進行分析，要對本類藥物的原料、制劑進行分析，有時也需要對生物樣品中微量巴比妥類有時也需要對生物樣品中微量巴比妥類藥物進行分析。藥物進行分析。一、巴比妥類藥物的結(jié)構(gòu)一、巴比妥類藥物的結(jié)構(gòu)CCCONONC OR1R2R3543216HH巴比妥類藥物母核為巴比妥類藥物母核為巴比妥酸巴比妥酸5,55,5二取代的巴比妥二取代的巴比妥類藥

2、物類藥物 1,5,5 1,5,5三取代的巴三取代的巴比妥類藥物比妥類藥物 C C2 2位硫取代的硫代巴位硫取代的硫代巴比妥類藥物比妥類藥物5,5-5,5-取代的巴比妥類藥物取代的巴比妥類藥物 CCCONONC OH5C2H5C2HH巴比妥5CCCONONC OH5C2HH苯巴比妥CCCONONC ONaCH2CHCH2CHCH3C3H7H司可巴比妥鈉CCCONONC ONaC2H5CHCH2CH2CH3CH3H異戊巴比妥鈉CCNCNHOOOH3CCH31,5,5-取代的巴比妥類藥物 己瑣巴比妥（藥典未收載）己瑣巴比妥（藥典未收載）51硫代巴比妥類藥物硫代巴比妥類藥物 硫噴妥鈉HCCCONONC

3、SNaC2H5CH3CH2CH2CHCH3 巴比妥類藥物的基本結(jié)構(gòu)分為兩部分：巴比妥類藥物的基本結(jié)構(gòu)分為兩部分：一部分為：一部分為：共性共性部分，為巴比妥酸環(huán)狀結(jié)構(gòu)部分，為巴比妥酸環(huán)狀結(jié)構(gòu)另一部分：另一部分：個性個性部分，即部分，即R R1 1、R R2 2取代基，取代基，區(qū)別區(qū)別各種巴比妥類藥物各種巴比妥類藥物 巴比妥類藥物的物性：巴比妥類藥物的物性： 性狀性狀：一般為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，具有：一般為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，具有一定的熔點一定的熔點 溶解性溶解性：游離巴比妥類藥物微溶或極微溶于：游離巴比妥類藥物微溶或極微溶于水，易溶于乙醇及有機溶劑水，易溶于乙醇及有機溶劑 相反，鈉鹽容易溶于

4、水，而不溶于有機溶劑相反，鈉鹽容易溶于水，而不溶于有機溶劑 與堿液共沸時水解開環(huán)與堿液共沸時水解開環(huán) 二、巴比妥類藥物的特性1.弱酸性1 1，3 3二酰亞胺基團二酰亞胺基團具有弱酸性（具有弱酸性（pKa為為7.38.4）,與與強堿的成鹽反應(yīng)：強堿的成鹽反應(yīng)：CO NHCNCOOHR1R2+ NaOHCO NHCNCOONaR1R2+ H2O加酸酸化后，加酸酸化后，析出游離的析出游離的巴比妥類藥巴比妥類藥物，可測定物，可測定熔點或進行熔點或進行化學(xué)反應(yīng)化學(xué)反應(yīng)2. 2. 水解反應(yīng)水解反應(yīng) 巴比妥類藥物 +NaOHNH3+ 2Na2CO3CHCOONaR1R2+2NH3 CONHCNCOOHR1R

5、2+ 5NaOH紅色紅色石蕊變石蕊變藍藍3 3、易與重金屬離子反應(yīng)、易與重金屬離子反應(yīng) 二銀鹽白色可溶性一銀鹽取代的巴比妥類藥物，3323AgNO CONa AgNO55硫噴妥鈉 +綠色銅吡啶試液吡啶合適的pH溶液中與鈷鹽的反應(yīng)：與鈷鹽的反應(yīng)： 紫紫堇堇色色配配位位化化合合物物巴巴比比妥妥類類藥藥物物鈷鈷鹽鹽堿堿性性醋酸鈷、硝酸醋酸鈷、硝酸鈷、氧化鈷鈷、氧化鈷有機堿：異丙胺有機堿：異丙胺4、與香草醛（、與香草醛（Vanillin）的反應(yīng)）的反應(yīng) CCCONONC OR1R2R3543216HH棕棕紅紅色色產(chǎn)產(chǎn)物物香香草草醛醛濃濃硫硫酸酸活潑活潑BP（2005）用于鑒別戊巴比妥）用于鑒別戊巴比妥

6、5. 5. 具有紫外特征吸收具有紫外特征吸收 A A、H H2 2SOSO4 4溶液溶液(0.05(0.05mol/L)mol/L)B B、pH9.9pH9.9緩沖溶液緩沖溶液 ，發(fā)生，發(fā)生一級電離，最大吸收一級電離，最大吸收240nm240nmC C、pH13 NaOHpH13 NaOH溶液，溶液，5,55,5二取代巴比妥類藥物有二二取代巴比妥類藥物有二級電離，最大吸收級電離，最大吸收255 255 nm nm ，1,5,5三取代三取代巴比妥類藥巴比妥類藥物不發(fā)生二級電離，最大物不發(fā)生二級電離，最大吸收仍為吸收仍為240240nmnm特例特例： 硫噴妥硫噴妥酸性溶液酸性溶液堿性溶液堿性溶液2

7、55nm，隨堿，隨堿性增強，消失性增強，消失三、鑒別試驗三、鑒別試驗（一）丙二酰脲類反應(yīng)（一）丙二酰脲類反應(yīng) 主要用于苯巴比妥、異戊巴比妥及其鹽、主要用于苯巴比妥、異戊巴比妥及其鹽、司可巴比妥鈉的鑒別。司可巴比妥鈉的鑒別。1.1.與銀鹽的反應(yīng)與銀鹽的反應(yīng)CONCNCOCR1R2ONaAg+NaHCO3NaNO3+CONHCNCOCR1R2ONa+ AgNO3+ Na2CO3NaNO3+CONCNCOCR1R2OAgAgAgNO3+CONCNCOCR1R2ONaAg2.2.與銅鹽的反應(yīng)與銅鹽的反應(yīng)巴比妥類藥物 +紫色或紫色 銅吡啶試液吡啶特例特例：含硫巴比妥類藥物顯綠色，硫噴妥鈉與銅鹽反應(yīng)含硫巴

8、比妥類藥物顯綠色，硫噴妥鈉與銅鹽反應(yīng)顯顯綠色綠色。與銅鹽的反應(yīng)可以用于鑒別、區(qū)別巴比妥類和與銅鹽的反應(yīng)可以用于鑒別、區(qū)別巴比妥類和硫代巴比妥類藥物硫代巴比妥類藥物銅吡啶試液要現(xiàn)用現(xiàn)配銅吡啶試液要現(xiàn)用現(xiàn)配硫噴妥鈉 +綠色銅吡啶試液吡啶（二）熔點的測定二）熔點的測定原理：原理： 巴比妥類藥物可直接用藥典方法測定熔點巴比妥類藥物可直接用藥典方法測定熔點 鈉鹽，鈉鹽，利用游離巴比妥類藥物與其鈉鹽溶解性利用游離巴比妥類藥物與其鈉鹽溶解性質(zhì)差異，質(zhì)差異， 測定析出的游離巴比妥藥物的熔點。測定析出的游離巴比妥藥物的熔點。 巴比妥類的鈉鹽酸巴比妥類的鈉鹽酸 游離巴比妥類藥物游離巴比妥類藥物 過濾過濾 洗滌洗滌

9、 干燥干燥 測熔點測熔點 （三）利用特殊取代基或元素的鑒別反應(yīng)（三）利用特殊取代基或元素的鑒別反應(yīng)1.1.利用不飽和取代基的鑒別試驗利用不飽和取代基的鑒別試驗 司可巴比妥鈉司可巴比妥鈉 與碘、溴試液發(fā)生加成反應(yīng)，使溴試液褪色與碘、溴試液發(fā)生加成反應(yīng)，使溴試液褪色 與高錳酸鉀發(fā)生氧化反應(yīng)與高錳酸鉀發(fā)生氧化反應(yīng) 把紫色高把紫色高錳酸鉀還原為棕色的二氧化錳錳酸鉀還原為棕色的二氧化錳 丙烯基丙烯基或溴液或溴液2.2.利用芳環(huán)取代基的鑒別試驗苯巴比妥及其鈉鹽利用芳環(huán)取代基的鑒別試驗苯巴比妥及其鈉鹽 硝化反應(yīng)硝化反應(yīng)與亞硝酸鈉與亞硝酸鈉- -硫酸的反應(yīng)硫酸的反應(yīng) 含有苯環(huán)取代基，可與亞硝酸鈉含有苯環(huán)取代基

10、，可與亞硝酸鈉- -硫酸反應(yīng)，硫酸反應(yīng)，生成生成橙黃橙黃色產(chǎn)物，并隨即轉(zhuǎn)成色產(chǎn)物，并隨即轉(zhuǎn)成橙紅色橙紅色。 特點：特點：用于區(qū)分苯巴比妥與其它不含芳環(huán)取用于區(qū)分苯巴比妥與其它不含芳環(huán)取代的巴比妥類藥物分離代的巴比妥類藥物分離與甲醛與甲醛- -硫酸的反應(yīng)硫酸的反應(yīng) 苯巴比妥與甲醛苯巴比妥與甲醛- -硫酸反應(yīng)，生成硫酸反應(yīng)，生成玫瑰紅色玫瑰紅色環(huán)。反應(yīng)產(chǎn)物結(jié)構(gòu)不明。環(huán)。反應(yīng)產(chǎn)物結(jié)構(gòu)不明。 方法為方法為: :取本品約取本品約50mg50mg，置試管中，加甲醛，置試管中，加甲醛試液試液l m1l m1，加熱煮沸，冷卻，沿，加熱煮沸，冷卻，沿管壁緩緩管壁緩緩加硫加硫酸酸0.5m10.5m1，使成兩液層，

11、置水浴中加熱，使成兩液層，置水浴中加熱，接界接界面顯玫瑰紅色面顯玫瑰紅色。特點：特點：用于區(qū)分苯巴比妥與其它不含芳環(huán)取代的用于區(qū)分苯巴比妥與其它不含芳環(huán)取代的巴比妥類藥物分離巴比妥類藥物分離3. 3. 硫元素的鑒別試驗硫元素的鑒別試驗 硫噴妥鈉硫噴妥鈉例：例：硫硫噴妥鈉噴妥鈉特點：特點：用于區(qū)別硫代巴比妥與其它的巴比妥類藥物用于區(qū)別硫代巴比妥與其它的巴比妥類藥物（四）紅外分光光度法四）紅外分光光度法 采用標準圖譜對照法采用標準圖譜對照法四、四、 特殊雜質(zhì)檢查特殊雜質(zhì)檢查（一）苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查（一）苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查1.1.酸度酸度 目的：中間體目的：中間體的乙基化反應(yīng)不完全時，的乙基

12、化反應(yīng)不完全時，會與尿素縮合產(chǎn)生會與尿素縮合產(chǎn)生苯基丙二酰脲苯基丙二酰脲，酸性，酸性較苯巴比妥強，能使甲基橙指示劑顯紅較苯巴比妥強，能使甲基橙指示劑顯紅色，色， 檢查方法：在一定量苯巴比妥供試品水檢查方法：在一定量苯巴比妥供試品水溶液中，加甲基橙指示劑，不顯紅色即溶液中，加甲基橙指示劑，不顯紅色即酸性物質(zhì)合格。酸性物質(zhì)合格。 2.2.乙醇溶液的澄清度乙醇溶液的澄清度目的：控制雜質(zhì)目的：控制雜質(zhì)苯巴比妥酸苯巴比妥酸 原理：利用藥物與雜質(zhì)溶解性質(zhì)的差異進原理：利用藥物與雜質(zhì)溶解性質(zhì)的差異進行檢查行檢查（雜質(zhì)（雜質(zhì)苯巴比妥酸苯巴比妥酸在乙醇溶液中溶解度?。┰谝掖既芤褐腥芙舛刃。┓椒ǚ椒? :取本品取

13、本品1.0g1.0g，加乙醇，加乙醇5m15m1，加熱回流，加熱回流3min3min，溶液應(yīng)澄清，則為合格。，溶液應(yīng)澄清，則為合格。3. 3. 中性或堿性物質(zhì)中性或堿性物質(zhì)目的目的：檢查中間體：檢查中間體的副產(chǎn)物的副產(chǎn)物2-2-苯基丁二酰胺、苯基丁二酰胺、2-2-苯基丁二酰脲或分解產(chǎn)物。苯基丁二酰脲或分解產(chǎn)物。原理原理；利用雜質(zhì)和主成分在氫氧化鈉試液中的；利用雜質(zhì)和主成分在氫氧化鈉試液中的溶解性質(zhì)差異，用提取重量法測定雜質(zhì)含量溶解性質(zhì)差異，用提取重量法測定雜質(zhì)含量在氫氧化鈉試液：雜質(zhì)不溶，而主成分可溶在氫氧化鈉試液：雜質(zhì)不溶，而主成分可溶在乙醚中：雜質(zhì)可溶在乙醚中：雜質(zhì)可溶 用醚提取雜質(zhì)后稱重

14、，測定其限量。用醚提取雜質(zhì)后稱重，測定其限量。 方法方法: :取本品取本品1.0 g1.0 g，置分液漏斗中，加氫氧，置分液漏斗中，加氫氧化鈉試液化鈉試液lOmllOml溶解后，加水溶解后，加水5ml5ml與乙醚與乙醚25ml25ml，振搖振搖lminlmin，分取醚層，用水振搖洗滌，分取醚層，用水振搖洗滌3 3次，每次，每次次5m15m1，取醚液經(jīng)干燥濾紙濾過，濾液置，取醚液經(jīng)干燥濾紙濾過，濾液置1O51O5恒重的蒸發(fā)皿中，蒸干，在恒重的蒸發(fā)皿中，蒸干，在105105干燥干燥1 1小時，小時，遺留殘渣不得超過遺留殘渣不得超過3 3。（二）司可巴比妥鈉的特殊雜質(zhì)檢查（二）司可巴比妥鈉的特殊雜質(zhì)

15、檢查 1.1.溶液的澄清度溶液的澄清度 司可巴比妥鈉在水中極易溶解，司可巴比妥鈉在水中極易溶解，水溶液應(yīng)澄清，否則表明含有水不溶水溶液應(yīng)澄清，否則表明含有水不溶性雜質(zhì)。性雜質(zhì)。 特點：特點：新沸過的冷水溶解樣品，目新沸過的冷水溶解樣品，目的是為了除去水中二氧化碳的是為了除去水中二氧化碳。和和司可巴比妥鈉司可巴比妥鈉作用，析出司可作用，析出司可巴比妥巴比妥2.2.中性或堿性物質(zhì)中性或堿性物質(zhì) 原理原理：利用雜質(zhì)和主成分在氫氧化鈉試液：利用雜質(zhì)和主成分在氫氧化鈉試液中的溶解性質(zhì)差異（雜質(zhì)不溶，而主成分可中的溶解性質(zhì)差異（雜質(zhì)不溶，而主成分可溶于氫氧化鈉試液），用乙醚提取雜質(zhì)后稱溶于氫氧化鈉試液），

16、用乙醚提取雜質(zhì)后稱重，測定其限量。重，測定其限量。 要求要求：1g 1g 供試品中乙醚提取物干燥后遺留供試品中乙醚提取物干燥后遺留殘渣不超過殘渣不超過3 3。五五. .含量的測定方法含量的測定方法 （一）銀量法（一）銀量法原理原理：此類藥物在適當?shù)膲A性溶液中，可與重：此類藥物在適當?shù)膲A性溶液中，可與重金屬離子反應(yīng)，定量地形成鹽。金屬離子反應(yīng)，定量地形成鹽。 終點指示：終點指示：電位法指示（電位法指示（AgAg電極為指示電極，電極為指示電極，飽和甘汞電極為參比電極）自身指示飽和甘汞電極為參比電極）自身指示 反應(yīng)摩爾比反應(yīng)摩爾比：1111溶劑系統(tǒng)溶劑系統(tǒng)：甲醇：甲醇+3%+3%無水碳酸鈉（無水碳酸

17、鈉（8585年版改進）年版改進）適用范圍適用范圍：20052005年版藥典采用銀量法測定年版藥典采用銀量法測定苯巴苯巴比妥及其鈉鹽、異戊巴比妥及其鈉鹽以及它們的比妥及其鈉鹽、異戊巴比妥及其鈉鹽以及它們的制劑制劑。特點特點：操作簡便，專屬性強，此類藥物的降解：操作簡便，專屬性強，此類藥物的降解產(chǎn)物和其他可能存在的雜質(zhì)不和硝酸銀反應(yīng)產(chǎn)物和其他可能存在的雜質(zhì)不和硝酸銀反應(yīng)缺點缺點：受溫度影響較大，滴定終點不易觀察：受溫度影響較大，滴定終點不易觀察方法的改進方法的改進： 中國藥典中國藥典(1963,1977(1963,1977年版年版) )采用在碳酸鈉采用在碳酸鈉溶液中硝酸銀直接滴定法，以所生成的沉淀

18、溶液中硝酸銀直接滴定法，以所生成的沉淀3030秒內(nèi)不消失為終點。秒內(nèi)不消失為終點。 中國藥典（中國藥典（19851985，19951995，20002000年版）改進年版）改進了這種直接滴定目視判斷的方法，沿用甲醇及了這種直接滴定目視判斷的方法，沿用甲醇及3%3%無水碳酸鈉作為溶劑，并采用銀無水碳酸鈉作為溶劑，并采用銀- -玻璃電極玻璃電極系統(tǒng)電位法指示終點系統(tǒng)電位法指示終點注意事項注意事項：測定時無水碳酸鈉溶液要測定時無水碳酸鈉溶液要臨用新配臨用新配。銀電極在臨用前要用硝酸浸泡銀電極在臨用前要用硝酸浸泡1 12 2分鐘，再用分鐘，再用水淋洗干凈后使用。水淋洗干凈后使用。AgNO3AgNO3滴

19、定液應(yīng)新鮮配制滴定液應(yīng)新鮮配制終點指示：電位法指示（終點指示：電位法指示（AgAg電極為指示電極，電極為指示電極，飽和甘汞電極為參比電極自身指示）飽和甘汞電極為參比電極自身指示）（二）溴量法（二）溴量法 原理：原理：對對5 5位取代基中含有位取代基中含有雙鍵雙鍵的巴比妥的巴比妥類藥物，利用結(jié)構(gòu)中所含的雙鍵能和溴定類藥物，利用結(jié)構(gòu)中所含的雙鍵能和溴定量地發(fā)生加成反應(yīng)的特點，采用溴量法測量地發(fā)生加成反應(yīng)的特點，采用溴量法測定定 方法方法 司可巴比妥鈉原料及其膠囊的測定司可巴比妥鈉原料及其膠囊的測定 I22Na2S2O32NaINa2S4O6+Br2（定量過量）CO NHCNCOCHCH2CH2CH

20、3(CH2)2CHCH3ONaCO NHCNCOCHCH2CH2CH3(CH2)2CHCH3ONaBrBrBr22KI2KBrI2 注意事項：注意事項： 配制硫代硫酸鈉滴定液時，要用新沸冷配制硫代硫酸鈉滴定液時，要用新沸冷水配制水配制硫代硫酸鈉滴定液要放置硫代硫酸鈉滴定液要放置1 1個月后，過濾個月后，過濾標定后用。否則，要現(xiàn)用現(xiàn)標定標定后用。否則，要現(xiàn)用現(xiàn)標定用基準重鉻酸鉀標定硫代硫酸鈉滴定液用基準重鉻酸鉀標定硫代硫酸鈉滴定液溴滴定液（溴滴定液（0.1 mol/L0.1 mol/L）的配制：）的配制： 取溴酸鉀取溴酸鉀3.0 g3.0 g與溴化鉀與溴化鉀15 g15 g，加水，加水適量使溶解

21、成適量使溶解成1000 ml1000 ml，搖勻，搖勻KBrO35KBr6HCl3Br26KCl3H2O 操作中要防止溴和碘的逸失操作中要防止溴和碘的逸失空白試驗可減少溴和碘逸失帶來的誤差空白試驗可減少溴和碘逸失帶來的誤差含量測定方法為：容量法中的回滴定法含量測定方法為：容量法中的回滴定法%100%0 WFTVVB）（含含量量%10010001 .130%3220WMVVOSNaB）（含量（三）紫外分光光度法（三）紫外分光光度法 原理：原理： 1 1、直接測定的紫外分光光度法、直接測定的紫外分光光度法 將供試品溶解后，根據(jù)溶液的將供試品溶解后，根據(jù)溶液的pHpH，在相應(yīng)的，在相應(yīng)的最大吸收波長

22、處，直接測定對照品和供試品的最大吸收波長處，直接測定對照品和供試品的吸收值，計算含量。吸收值，計算含量。 吸收系數(shù)法吸收系數(shù)法lEAC1%1cm)g/100ml(ClEA%1cm1100)g/ml(1%1cmlEAC對照法對照法 lCElCEAA對%1cm1供%1cm1對供對供對供AACC對供對供CCAA例：注射用例：注射用硫噴妥鈉硫噴妥鈉的含量測定（的含量測定（20052005年版藥典收錄）年版藥典收錄） 具體方法如下具體方法如下: :取裝量差異項下的內(nèi)容物，混合均勻，取裝量差異項下的內(nèi)容物，混合均勻，精密稱取適量精密稱取適量( (約相當于約相當于硫噴妥鈉硫噴妥鈉0.25 0.25 g g)

23、 )，置，置5 5OOmlOOml量量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，量取此溶液用瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，量取此溶液用0.4%0.4%氫氧氫氧化鈉液定量稀釋制成每化鈉液定量稀釋制成每lmllml中約含中約含5g5g的溶液的溶液; ;另取另取硫噴硫噴妥妥對照品，精密稱定，加對照品，精密稱定，加0.4%0.4%氫氧化鈉溶液溶解并定量氫氧化鈉溶液溶解并定量稀釋制成中約含稀釋制成中約含5g5g的溶液。用的溶液。用lcmlcm吸收池，于吸收池，于304 nm304 nm波長處分別測定吸收度，以波長處分別測定吸收度，以0.4%0.4%氫氧化鈉溶液作空白，氫氧化鈉溶液作空白，根據(jù)每支的平均裝量計算，即得。根

24、據(jù)每支的平均裝量計算，即得。每每lmglmg的硫噴妥相當于的硫噴妥相當于1.091.09lmglmg的的C CllllH H1717N N2 2NaSNaS測定結(jié)果用下式計算測定結(jié)果用下式計算: :091.1)( DCAAmgSSu硫硫噴噴妥妥鈉鈉的的測測定定量量式中式中: :A Au,u,A AS S分別為供試品和對照品的吸收值分別為供試品和對照品的吸收值 C CS S為硫噴妥對照品的濃度為硫噴妥對照品的濃度, ,mg/mlmg/ml D D為稀釋體積（為稀釋體積（mlml），），500500100=5000100=5000 1.091 1.091為硫噴妥鈉和硫噴妥的分子量比值為硫噴妥鈉和硫噴妥的分子量比值%100091.1(%) 平平均均裝裝量量供供試試品品量量硫硫噴噴妥妥鈉鈉的的標標示示量量DCAASSu注射用硫噴妥鈉的含量為注射用硫噴妥鈉的含量為2 2、提取分離后的紫外分光光度法、提取分離后的紫外分光光度法 當供試品中存在干擾物質(zhì)時，可用提取分當供試品中存在干擾物質(zhì)