4漢防己中生物堿的提取、分離和鑒定

1、實驗名稱實驗四 漢防己中生物堿的捉取、分離和鑒定實驗班級實驗課時間課時數(shù)10分組10實驗?zāi)康模?. 掌握一般叔胺生物總堿的捉取和純化方法。2. 熟悉柱色譜法分離生物堿的操作技術(shù)。3. 掌握生物堿的鑒定方法。實驗原理：根據(jù)大多數(shù)生物堿或生物堿鹽均能溶于乙醇的通性，利用乙醇捉取總生物 堿。利用季鍍型生物堿易溶于水，不溶于親脂性冇機溶劑的性質(zhì)，用溶劑萃取法 分離脂溶性生物堿和水溶性生物堿；根據(jù)漢防己叩素和乙素和酸結(jié)合成鹽而易溶 丁水，難溶于親脂性試劑，在堿性條件下易溶于親脂性試劑不溶于水的性質(zhì)反復(fù) 處理后，再利用兩者在冷苯中溶解度的不同，使它們相互分離?；蛘呃脙烧叩?極性不同，利用柱層析進行分離。

2、漢防己甲素 r=ch3漢防己乙素 r=h實驗試藥與器材：試藥：漢防己、85%乙醇、1%鹽酸、氯仿、氨水、1%氫氧化鈉、無水硫酸鈉、氧 化鋁、丙酮、環(huán)己烷、甲醇、改良碘化鈕鉀試劑、碘-碘化鉀試劑、碘化 汞鉀試劑、硅餌酸試劑等器材：回流裝置、圓底燒瓶、分液漏斗、層析柱、漏斗、薄層板、乳缽、量筒、 燒杯、試管等實驗內(nèi)容與方法：一、總生物堿的捉取取漢防己粉末100g,置于500ml圓底燒瓶屮，加85%乙醇300ml,水浴加熱 回流1小時，濾出乙醇捉取液；藥渣重新加入85%乙醇200ml同法捉取1次，合 并兩次捉取液，過濾，濃縮至無醇味，成糖漿狀，得到總生物堿。二、精制將上述糖漿狀提取液轉(zhuǎn)入燒杯屮，加1

3、%鹽酸調(diào)ph為2,邊加邊攪拌，靜置, 過濾，得澄明濾液。濾液加等體積氯仿，再加氨水調(diào)ph為10以上，于分液漏斗 屮振搖萃取，靜置分層后放岀氯仿層，堿液再用氯仿萃取兩次，合并氯仿液。氯 仿液置于分液漏斗屮，先以1%氫氧化鈉溶液洗2次，再用水洗2-3次后加入約 5g無水硫酸鈉脫水，放置過夜，過濾，回收氯仿至少量，得漢防己總堿。三、漢防己卬素和漢防己乙素的分離1. 裝柱 取層析柱垂直固定在鐵架臺上，在管的下端墊入少量棉花，稱取屮性 氧化鋁100 b 20g,緩緩加入層析柱中，邊加邊輕輕振動色譜柱，使氧化鋁在柱 屮填實均勻。2. 上樣 取loomg漢防己總堿置于小蒸發(fā)皿中，用少量丙酮溶解，另加0.5g

4、 色譜用氧化鋁（作吸附劑），攪拌均勻，并于水浴上緩緩蒸去溶劑。然后將含冇 樣品的氧化鋁裝入色譜柱的上端，并蓋一圓形濾紙。3洗脫 將色譜柱活塞打開，以正己烷-丙酮（4 : 1）洗脫，流速控制在5ml/min, 收集各流分（10ml15ml/份）。4. 檢查 將各流分回收溶劑，依次點于硅膠g-cmc-na薄層板上，用氯仿一 丙酮一甲醇（6： 1 ： 1）為展開劑，展開，噴以改良碘化鋌鉀試劑，比較各流分 的rf值，合并相同rf值的流分。5. 結(jié)品 將合并流分的溶液濃縮至適當(dāng)體積，放置，析品，滴加少量丙酮洗滌 結(jié)晶，可得漢防己甲素、漢防己乙素結(jié)品。四、檢識1. 化學(xué)檢識將捉取的氯仿液，用1%的鹽酸萃取

5、，得鹽酸溶液10毫升，分為四個小試管儲存，分別在四個小試管中加入改良碘化鈕鉀、碘碘化鉀、碘化汞鉀、硅餌酸 試劑，觀察各試管中的變化，記錄在如下表格中。改良碘化鈕鉀碘碘化鉀碘化汞鉀硅磚酸漢防c生物堿空白2. 色譜檢識色譜材料：硅膠g-cmc-na ®板點樣：漢防己總堿、漢防己甲素和漢防己乙素的0.1%醇溶液展開劑：氯仿一丙酮一甲醇（6 ： 1 ： 1）%1 氯仿一乙醇（10 : 1）%1 甲苯一丙酮一乙醇（4 ： 5 ： 1）顯色劑：改良碘化鈕鉀試劑觀察記錄：記錄圖譜及斑點顏色實驗注意事項：1、提取裝置的安裝要小心，不能打碎儀器。2、提取總生物堿時，冋收乙醇至稀浸膏狀即可，過干時，當(dāng)加入鹽酸后會結(jié)成 膠狀i才i塊，影響提取效果。3、用1%氫氧化鈉