實(shí)驗(yàn)糞便隱血試驗(yàn)

1、實(shí)驗(yàn)三 糞便隱血試驗(yàn) 【目的】 掌握糞便隱血試驗(yàn)（obt）鄰聯(lián)甲苯胺法的方法及其評(píng)價(jià)。 【原理】 血紅蛋白中的亞鐵血紅素有類似過氧化物酶的活性，能催化過氧化氫分解釋放新生態(tài)氧，將受體鄰聯(lián)甲苯胺氧化成鄰甲偶氮苯而顯藍(lán)色。一、鄰聯(lián)甲苯胺法【操作】1制備涂片 2滴加試劑 3結(jié)果判斷 4報(bào)告方式 二、單克隆抗體膠體金法 【目的】 熟悉隱血試驗(yàn)的單克隆抗體膠體金檢測(cè)法。 【原理】 膠體金是由氯化金和枸櫞酸合成的膠體物質(zhì)，具有膠體化的性質(zhì)，呈紫紅色。特制的乙酸纖維膜上含均勻分布的膠體金標(biāo)記的羊抗人hb單克隆抗體和無(wú)關(guān)膠體金標(biāo)記鼠igg，膜的上端由上至下依次包被羊抗鼠igg抗體和羊抗人hb多抗。檢測(cè)時(shí)，試紙

2、條浸入被檢的稀釋糞便液中，糞便懸液通過層析的作用，沿著試紙條上行，如糞便 中含有hb，在上行過程中與膠體金標(biāo)記羊抗人hb單克隆抗體結(jié)合，待行至羊抗人hb多抗體線時(shí)，形成金標(biāo)記的抗人hb單抗-糞hb-羊抗人hb多抗復(fù)合物，在紙條上顯現(xiàn)一條紫紅色線，即為隱血試驗(yàn)陽(yáng)性；試帶上無(wú)關(guān)的金標(biāo)記鼠igg隨糞便懸液上行至羊抗鼠igg處時(shí)，與之結(jié)合形成又一條紫紅色線，為陰性對(duì)照線（試劑質(zhì)控線），即隱血試驗(yàn)陽(yáng)性時(shí)試帶出現(xiàn)2條紫紅色線，如果只顯現(xiàn)1條紫紅色線為隱血試驗(yàn)陰性，試帶無(wú)紫紅色線出現(xiàn)即說明已失效?！静僮鳌?1制備糞便懸液 2浸試帶 3結(jié)果判斷 4報(bào)告方式 【注意事項(xiàng)】 1實(shí)驗(yàn)所用的器材用具要清潔、干凈無(wú)酸堿殘留，無(wú)鐵劑、血跡等污染。 2試劑 （1）化學(xué)法試劑：h202最好新鮮配制，做 標(biāo)本檢測(cè)時(shí)應(yīng)做陰、陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn)。 （2）金標(biāo)試紙質(zhì)量：如試紙滲透性差，糞液滲透不良，可造成假陰性。 3結(jié)果分析 （1）化學(xué)法： 反應(yīng)時(shí)間不足，尤其溫度低時(shí)； 糞便中存在抑制過氧化物酶的物質(zhì)； 糞便留取時(shí)間較長(zhǎng)，血紅蛋白被細(xì)胞分解。 （2）膠體金法： 上消化道出血患者有時(shí)可因?yàn)檠t蛋白經(jīng)過腸 道消化酶降解變性而不具有原來的免疫原性，單克隆抗體與血紅蛋白抗原不