中藥分析章節(jié)大題復習過程

1、第三章3試述薄層色譜法在鑒別中藥中有何特點？鑒別時為何需要對照物？為什么鑒別要在同一 薄層板上進行？如何保存薄層色譜圖？答：特點：設備簡單、操作快捷、專屬性強、費用低廉。具有展開劑靈活多變，色譜圖 新鮮直觀、容易辨認等特點。原因：對照物在薄層色譜上通過展開會有相應的斑點， 作為中藥制劑如果含有對照物的 成分，那么在對照物斑點對應的位置上將會有相相應的斑點，可鑒別出中藥制劑中含有與對照物一致的成分。克服薄層板厚薄不均勻而帶來的影響以光學照片或電子圖像的形式保存，也可用薄層掃描儀記錄相應的色譜圖。4應用薄層掃描法進行中藥鑒別的步驟有哪些？答：薄層板制備一點樣一展開一顯色與檢視一記錄5在中藥制劑鑒別

2、中，陰性對照試驗的目的是什么？答：消除干擾（考察制劑中其他藥味對欲鑒別藥味的薄層色譜干擾情況）6試分析為什么紅外光譜法在中藥鑒別中的應用比合成藥物少得多？答：紅外光譜具有特征性強、取樣量小、簡便迅速、準確等特點。中藥是多組分的混合物， 紅外光譜是所含組分各基團吸收峰的疊加；很合物組成的變化一定導致紅外光譜譜峰的變化，因此也具有特征性。中藥的傅里葉變換近紅外漫反射光譜包含了樣品極為豐富的組成信息，圖譜具有較強的指紋性。7. DNA分子遺傳標記技術鑒別中藥有什么特點？答：具有微量、快速、特異性強、準確可靠、對樣本要求較低的特點中藥的檢查1. 中藥制劑中雜質分為哪兩類？它們主要來自哪些方面？答：常規(guī)

3、物質 和有害物質（1）藥材和飲片中引入的雜質（2）生產制備過程引入的雜質（3）貯藏過程引入的雜質2. 為什么中藥制劑的雜質只進行限量檢查，一般不測定其準確含量？在不影響療效和不發(fā)生毒副作用的原則下，對于中藥制劑中可能存在的雜質允許有一定限度，在此限度內，雜質的存在不致對人體有毒害，不會影響藥物的穩(wěn)定性和療效，因此，對中藥制劑中的雜質進行限度檢查即可。3. 簡述中藥檢查所包括的主要內容？答：有效性檢查、純度檢查（雜質檢查）、制劑通則檢查、安全性檢查4. 什么是重金屬？在重金屬檢查中，常以鉛作為代表，為什么？簡述其檢查原理？答：重金屬是指在規(guī)定實驗條件下，能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯色，生成不溶性

4、硫化物的金屬雜質。原因：由于在藥品生產中遇到鉛的機會較多，而且鉛易蓄積中毒， 故重金屬檢查時常以 鉛為代表。原理：在弱酸性（PH3-3.5）條件下，硫代乙酰胺發(fā)生水解，產生硫化氫，可與重金屬離子生成有色硫化物的均勻混懸液。（化學方程式P87）在堿性條件下，硫化鈉與重金屬離子作用生成不溶性硫化物。與標準前對照溶液在相同條件下產生的顏色進行比較，判定供試品中重金屬是否符合限量規(guī)定。5中藥中常用的水分測定方法有哪幾種？各自的適用范圍是什么？答：水分測定法有烘干法、甲苯法、減壓干燥法、氣相色譜法烘干法：適用于不含或少含揮發(fā)性成分的藥品甲苯法：含揮發(fā)性成分的藥品。減壓干燥法：含有揮發(fā)性成分的貴重藥品。氣

5、相：各種類型藥品中微量水分的準確測定。6簡述古蔡氏砷鹽檢查法的原理，并說明KI、酸性氯化亞錫、醋酸鉛棉花的作用。古蔡氏法原理:利用金屬鋅和酸作用，產生新生態(tài)的氫，與供試品中微量砷鹽反應，生成揮發(fā)性砷化氫，砷化氫再與溴化汞試紙作用生成黃色或棕黃色砷斑。與標準砷溶液在同一條件下所形成的砷斑進行比較，判定供試品中砷鹽是否符合限量規(guī)KI和酸性氯化亞錫：將五價砷還原為三價砷。溶液中的碘離子，與反應中產生的鋅離子能形成配合物，使生成砷化氫的反應不斷進行。抑制銻化氫生成。氯化亞錫可在 鋅粒表面形成鋅錫齊 （鋅錫的合金）起去極化作用，使鋅粒與鹽酸作用緩和，使氫氣均勻而 連續(xù)的發(fā)生，有利于砷斑的形成，增加反應的

6、靈敏度和準確度。醋酸鉛棉花：供試品和鋅粒中可能含有少量硫化物，在酸性溶液中產生的H2S氣體會干擾檢查，用 醋酸鉛棉花可吸收除去 H2S7簡述Ag-DDC砷鹽檢查法的原理，并說明該法的特點答：原理：金屬鋅與酸作用，產生新生態(tài)氫，與供試品中的微量亞砷酸鹽反應，生成揮發(fā)性的砷化氫，被二乙基二硫代氨基甲酸銀溶液吸收，使Ag-DDC中的銀還原生成紅色膠態(tài)銀。比較供試品與標準砷溶液在同一條件下生成紅色膠態(tài)銀顏色深淺，檢查供試品中砷鹽的限量。（P91）1 10ug特點：靈敏度為 0.5ug As/30ml。本法優(yōu)點可避免目視誤差，靈敏度較高，在As/40ml范圍內線性關系良好，顯色在2小時內穩(wěn)定，重現性好。

7、8中藥注射劑的有關物質檢查包括哪些？答：除另有規(guī)定外，一般應檢查“蛋白質”、“鞣質”、“樹脂”等，靜脈注射液還應檢查“草酸鹽”、“鉀離子”等。9中藥注射劑一般要求的檢查項目有哪些？中藥注射劑一般要求的質量檢查項目有： 澄明度檢查、無菌檢查、裝量差異、不溶性 微粒。10.中藥注射劑安全性檢查的項目有哪些？中藥注射劑安全性檢查的項目有： 熱原檢查、刺激性檢查、過敏反應、溶血試驗、異 常毒性。中藥的含量測定：1中藥制劑的含量測定中，進行樣品處理的主要作用是？答:A.使被測成分有效地從樣品中釋放出來，制成供分析測定的穩(wěn)定試樣B. 除去雜質，凈化樣品，以提高分析方法的重現性和準確度C. 進行富集或濃縮，

8、以利于低含量成分的測定D. 衍生化以提高方法的靈敏度和選擇性E. 使試樣的形式及所用溶劑符合分析測定的要求2什么是超臨界流體，它有哪些特征？既不是液體，又不是答：超臨界流體：高于臨界壓力和臨界溫度時所形成的單一相態(tài),氣體。特征：（1）密度與液體相近，具有與液體相似的溶劑作用，即對樣品組分溶解能力強。（2）粘度比液體低，擴散系數比液體高，具有良好的傳質性能，有利于樣品中化學成分擴散進入流體中。（3） 表面張力幾乎為零，較容易滲透進樣品基質空隙中，有利于流體與樣品充分接觸（4）在臨界點附近，壓力與溫度的微小變化將導致流體密度較大的變化，從而大幅度改變其對成分的溶解能力，有利于不同極性成分的分離及提

9、取物的解析。3. 什么是超臨界流體萃取法？該萃取方法有什么特點？答：SFE是以超臨界流體作為提取溶劑的一種樣品預處理新技術。特點：1 ）通過調節(jié)溫度和壓力可全部或選擇性地提取有效成分或脫除有害物質;2）選擇適宜的溶劑如 C02可在較低溫度和無氧環(huán)境下操作，分離、精制熱敏性物質和 易氧化物質；3）臨界流體具有良好的滲透性和溶解性，能從固體或粘稠的原料中快速提取有效成分；4）降低超臨界相的密度，很容易使溶齊U從產品中分離，無溶劑污染，且回收溶劑無相 變過程，能耗低；5）兼有蒸餾和萃取雙重功能，可用于有機物的分離、精制。4. 簡述回收率試驗的意義、方法與要求。答：含量測定方法的建立過程中，以回收率估

10、計分析方法的誤差和操作過程的損失，以評價方法的可靠性。實驗方法包括：加樣回收試驗和模擬配方回收試驗?；厥章试囼炛辽傩枰M行5 （n=5）次試驗或三組平行試驗（n=6）,在同一批樣品中加入相同或不同的純品量，后者可進一步 驗證測定方法中取樣量多少更為合適?；厥章室话阋笤?95%105%。RSD V 3%5. GC、HPLC法的系統適用性試驗有哪些項目？各項指標要求是什么？按中國藥典2000年版附錄要求，應用 GC HPLC法建立中藥制劑有效成分含量測定 方法時，需按各品種項下要求對儀器進行適用性試驗，具體規(guī)定包括在分析狀態(tài)下色譜柱的理論塔板數、分離度、重復性及拖尾因子。色譜柱的理論塔板數視各組

11、分情況而定，一般n2000;分離度按藥典標準R> 1.5 ;重復性要求對照品溶液連續(xù)進樣 5次，其峰面積RSDC 2.0% ;除另有規(guī)定外，拖尾因子T應 在0.951.05之間。6. 薄層掃描法（TLCS定量測定中藥制劑中有效成分含量時，為何常用隨行外標法？如何進行隨行標準？為了克服薄層板間差異，薄層掃描法定量時常采用隨行標準法。（內標法雖然克服了外標法必須準確點樣的缺點，其定量準確度與點樣量無關，但內標物難尋且操作繁瑣。而實際 工作中外標法采用同一根定量毛細管點樣，或直接用半自動點樣儀點樣，其誤差在允許范圍內，因而實際工作中常采用隨行外標法而不用內標法。）如何進行：對照品溶液與供試品溶

12、液交叉點在同一塊薄層板上。同時，為減少誤差，同一薄層板上供試品點樣不得少于4個，對照品每一濃度不得少于 2個；并調整標準溶液的濃度或供試品溶液與對照品溶液的點樣量，使其峰面積相接近，為了使點樣量準確，宜用定量毛細管點樣。7. 簡述HPLC法用于中藥成分分析時，常用的檢測器及其特點。答：（1）紫外檢測器（uvd :具有 靈敏度高、噪音低、線性范圍寬、對溫度和流速 變化不敏感、可用于梯度洗脫 等優(yōu)點。只能用于可見一紫外區(qū)有吸收的物質，且要求檢測波長大于流動相的截止波長。（2）蒸發(fā)光散射檢測器 （ELSD :通用型檢測器。要求流動相的揮發(fā)性大于組分的揮發(fā)性，且不能含有緩沖鹽類， 適用于沒有特征紫外吸

13、收或紫外吸收很弱的待測物，無需衍生化而直接測定，避免了衍生帶來的誤差。（3） 熒光檢測器（FD）：靈敏度比UVD高，選擇性好，檢出限可達10-10g/ml，但只適 用于能產生熒光或經衍生化后能產生熒光的物質的檢測。主要用于氨基酸、多環(huán)芳烴、維生 素、甾體化合物及酶等生物活性物質的分析，尤其適合于體內藥物分析。（4）電化學檢測器（ECD :適用于具有氧化還原活性化合物的檢測。主要用于離子色 譜，尤其適合于痕量組分的分析。（5）示差折光檢測器（RID）:通用型檢測器，只要組分與流動相的折光率有足夠的差 別，即可進行檢測，對大多數物質檢測的靈敏度較低，手流動相組成、溫度波動影響較大，不適合梯度洗脫。

14、對某些少數物質如糖類有較高的靈敏度。操作方便，穩(wěn)定性好8. 簡述GC法用于中藥成分分析時，常用的檢測器及其適用范圍。答：（1）氫焰離子化檢測器（FID）:含CH的有機物（2）熱導檢測器（TCD :通用型（3）電子捕獲檢測器（ECD）:電負性基團，如含氮農藥殘留（4） 熱離子檢測器（TID）,又稱氮磷檢測器（NPD :氮、磷等有機化合物，如含磷農 藥殘留。（5）火焰光度檢測器（FPD）:有機磷、硫化合物（6） 光離子化檢測器（PD :芳香化合物、 HS PH、N2H4中藥中各類化學成分的分析1.試舉例說明中藥中生物堿成分定性、定量分析方法有哪些？ 答：定性鑒別:（1）化學法：生物堿沉淀反應（2）

15、色譜法：薄層色譜法、紙色譜法、高效液相色譜法、氣相色譜法（如 麻黃堿、煙堿）定量分析:（1）化學法：A.酸堿滴定法：生物堿分子結構中所含氮原子的堿性不同，選 用水溶液酸堿滴定或非水溶液酸堿滴定；B.重量分析法：用于混合堿、未知結構或相對分子質量相差較大的生物堿含量測定；（eg:昆明山海棠片中總生物堿的含量測定。根含雷公藤堿，雷公藤次堿，雷公藤春堿，雷公藤甲素等多種生物堿）（2）分光光度法：A.紫外分光光度法：在紫外區(qū)有吸收的生物堿類成分，可在其最大吸收波長處測定，利用其吸光度與生物堿的量成正比的原理進行定量分析。Eg：雷公藤總生物堿的測定波長為 267nm,通過吸收系數法或對照品對照法進行定量

16、計算。雙波長等計算分光光 度法，eg馬錢子總生物堿的含量測定，測定波長為262nm和300nm。B.比色法：酸性染料比色法；苦味酸鹽比色法、雷氏鹽比色法eg:延胡索中的級季銨堿、益母草總生物堿的含量測定；異羥肟酸鐵比色法eg:川烏雙酯型生物堿的含量測定（3） 薄層掃描法：雙波長反射式鋸齒掃描；熒光掃描eg：鹽酸小檗堿（4） 高效液相色譜法：單體生物堿成分的含量測定eg：苦參中苦參堿和氧化苦參堿的含量 測定。（5）氣相色譜法：eg:麻黃堿、檳榔堿（6）毛細管電泳法2當采用硅膠薄層色譜法鑒別生物堿成分時，為什么常有斑點Rf值較小或斑點明顯拖尾的現象？可采用哪些方法克服？當使用硅膠作吸附劑時，由于硅

17、膠顯弱酸性，強堿性的生物堿在硅膠色譜板上能形成鹽，使Rf值很小或拖尾等?？朔姆椒ǎ涸趬A性系統（常加入二乙胺、氨水等）或 堿性環(huán)境下（用氨蒸氣飽和平 衡）展開，以及用 堿液鋪制薄層板 等方法。3. 用反相高效液相色譜法測定生物堿類成分時，如何克服硅醇基酸性的影響？答：（1）改變流動相：A.在流動相中加入 硅醇基抑制劑 二乙胺、三乙胺等B.加入表面活性劑；C. 加入季銨鹽試劑； D.加入一定濃度的 電解質緩沖鹽（2）改進固定相：封尾技術可使填料的鍵合更徹底；選擇適宜的柱型號。4. 試舉例說明中藥中黃酮類成分定性、定量分析方法有哪些？答：定性鑒別：（1）化學法：還原反應：A.鹽酸-鎂粉反應。多數黃

18、銅、黃酮醇、二 氫黃酮及二氫黃酮醇類化合物顯橙紅-紫紅色，但查爾酮、橙酮、兒茶素、異黃酮不顯色。B.四氫硼鈉還原反應：二氫黃酮、二氫異黃酮醇類化合物還原產生紅-紫紅色。（2） 與金屬鹽類試劑的絡合反應A.三氯化鋁反應；B.鋯鹽-枸櫞酸反應 C.氨性氯化鍶反應：含鄰二酚羥基的黃酮類D.醋酸鎂反應：二氫黃酮、二氫黃酮醇類化合物，紫外光下顯天藍色。（3） 色譜法薄層色譜法、紙色譜法、聚酰胺薄層色譜、纖維素薄層色譜含量測定：（1）分光光度法：一般用于總黃酮類成分和總蒽醌及其苷類的含量測定。Eg：槐花中總黃酮的含量測定（2）薄層掃描法：測定中藥中單體黃酮類成分（3）高效液相色譜法5. 簡述中藥中結合蒽醌

19、類成分含量測定時供試品制備的主要操作過程。答：生藥+酸（鹽酸或硫酸）水解 t氯仿（非極性溶劑）萃取t 少量水洗氯仿層至中性（因酸性較強對加堿液有干擾）t混合堿液顯色測定得總蒽醌的量，從中減去游離蒽醌含量，即為結合蒽醌的含量6. 采用HPLC法測定皂苷類成分的含量時常用那些檢測器？答：紫外檢測器、蒸發(fā)光散射檢測器。論述題2為什么說中藥指紋圖譜可以控制中藥制劑的內在質量？答：中藥制劑的功能主治不像化學藥品那樣明確地直接瞄準某個或某幾個“靶點”發(fā)揮作用，往往是通過修復、調整，調動人體的某些機能而達到防病治病的目的，所以選定某一 中藥的“有效成分”、“活性成分”或“指標成分”建立相應的定性、定量標準，

20、不能滿足 中藥質量控制的要求。中藥指紋圖譜是綜合的、宏觀的質量控制體系，它不是針對某一成分 所作的技術控制指標，而是可控制某一制劑中所含的成分種類和相對含量的高低的宏觀控制 體系，特別是色譜指紋圖譜， 是確認中藥制劑產品的真?zhèn)?、質量穩(wěn)定與否的綜合的可量化的質量評價模式，可起到控制中藥制劑內在質量的目的。5試述中藥制劑含量測定方法的效能評價指標。答：精確度（一般用回收率表示）、精密度（包括重復性、中間精密度和重現性）、專 屬性（陰性對照法）、線性、范圍（原料藥和制劑含量測定，范圍應為測試濃度的80% 120%，對于有毒的，具有特殊功效或藥理作用的成分，其范圍應大于被限定含量的區(qū)間， 溶出度或釋放

21、度中的溶出量測定，范圍應為限度的土20%）、檢測限和定量限（目視法、信噪比法）、耐用性等。補充：生物樣品分析方法驗證的內容與要求（老師上課講的，簡答或論述）答案：（1）特異性一一避免干擾（2）標準曲線與線性范圍一一覆蓋所有濃度范圍（3）準確度一一與實際狀況相符（4）精密度一一結果可重現（RSD不超過15%，在LLOQ附近RSD應不超過20%(5) 定量限一一達到峰濃度的 1/10 1/20(6)穩(wěn)定性一確保所有樣品準確測定(7) 提取回收率一一一般應大于 50%，結果要求重現性好6. 論述如何選定中藥制劑含量測定的測定成分。測定藥味選擇以后，還應選定某一成分為定量指標，一般應遵循以下幾項原則。

22、測定有效成分盡量與該藥味的功能主治、藥理作用相一致。測定毒性成分如烏頭中所含多種生物堿，其中酯型生物堿(包括單酯型、雙酯型及三酯型)具有毒性，可測定總酯型生物堿的含量，作為質控指標之一，保證中藥制劑服用安全有效。(3) 測定在制備、貯存過程中易損失的成分。如含冰片的中藥制劑(4) 測定總成分有效部位或指標性成分類別明確的，可進行總成分的測定，如 總黃酮、總皂苷、總生物堿、總有機酸、總揮發(fā)油等。(5) 對有效成分不明確的中藥制劑，測定專屬性強的 指標性成分，其含量高低可代 表藥材在制劑中的量?？?測定浸出物，也可以某一物理常數 為測定指標：如柴胡注射液(蒸餾液)其有效成分不太清楚，但實驗證明，在

23、276nm波長處有最大吸收，且吸收度的高低與其1:1蒸餾液濃度呈正比，所以可用 276nm的吸收度值(A)來控制其質量。此外， 在建立化學成分的含量測定有困難時，也可考慮建立生物測定等其它方法。(6) 被測成分應歸屬于某一藥味，若為兩味或兩味以上藥材所共有的成分，則不應 選為定量指標。如處方中同時含有黃連、黃柏，最好不選小檗堿作為定量指標。(7) 測定成分應盡量與中醫(yī)理論相一致，與藥理作用和主治功能一致。如山楂在制 劑中若以消食健胃為主，則應測定有機酸含量，若以治療心血管疾病為主則應測定黃酮類成分。又如制何首烏具有補肝腎、益精血、烏須發(fā)的功能，若以大黃素為定量指標，就不 太適宜。(8) 若處方

24、中含有化學藥成分應進行含量測定(9) 測定成分可以是單一成分也可以根據中藥具有多組份、多靶點，相互協同作用 的特點建立多組分含量測定的方法。7. 試述建立中藥指紋圖譜的意義。答：中藥材多為植物的干燥器官，由于復雜的自然環(huán)境、社會狀況以及我國歷史上科 技發(fā)展不平衡等多種原因，造成了中藥材在應用方面的復雜性。同一名稱的中藥材可能來自不同基源的植物。同一基源的中藥材由于產地不同、采收季節(jié)和生長年限不同而存在差 別。一些中藥材，特別是名貴藥材，?？梢姷絺纹放c正品相混淆。由于以上因素的存 在，使得不同來源的同種中藥材其化學組成有可能相同，也有可能不同，這就必然影響到中醫(yī)的臨床療效和中藥的實驗研究，并影響

25、以其為原料生產出的中成藥的化學組成，從而影響其質量和療效。此外，我國中成藥品種繁多，中成藥生產過程中各工藝環(huán) 節(jié)的穩(wěn)定性等多種因素對產品的化學組成也具有重要的影響。從現有的中藥內在質量控制 現狀來看，還存在很多問題需逐步解決。其中 ，最突出的問題之一就是中藥整體化學特 征的表征。因此建立中藥指紋圖譜對于更加客觀地從整體上評價中藥的內在質量具有重要 意義。8. 試述中藥制劑質量標準的特征。答：(1)具有中藥特色(2)科學性強(3)技術先進但不脫離生產實際，切實可行。9. 試述中藥注射劑檢查的目的和意義。答：中藥注射劑是一種新型的中藥制劑，由于其給藥途徑的特殊性，因而對其質量要求也特別嚴格，除應符合注射劑一般的質量要求外，為保證其安全性和有效性，還應進行安全性檢查和特殊性檢查。