色譜法薄層色譜和紙色譜

1、色譜法又稱“色譜分析”、“色譜分析法”、“層析法”，是一種分離和分析方法，在分析化學(xué)、有機(jī)化學(xué)、生物化學(xué)等領(lǐng)域有著非常廣泛的應(yīng)用。色譜法利用不同物質(zhì)在不同相態(tài)的選擇性分配，以流動相對固定相中的混合物進(jìn)行洗脫，混合物中不同的物質(zhì)會以不同的速度沿固定相移動，最終達(dá)到分離的效果。 色譜法分類分類按兩相狀態(tài)按兩相狀態(tài)氣相色譜法氣固色譜法氣液色譜法 液相色譜法液固色譜法液液色譜法 按固定相的幾何形式柱色譜法柱色譜法是將固定相裝在一金屬或玻璃柱中或是將固定相附著在毛細(xì)管內(nèi)壁上做成色譜柱，試樣從柱頭到柱尾沿一個方向移動而進(jìn)行分離的色譜法。 紙色譜法紙色譜法是利用濾紙作固定液的載體，把試樣點(diǎn)在濾紙上，然后用溶

2、劑展開，各組分在濾紙的不同位置以斑點(diǎn)形式顯現(xiàn)，根據(jù)濾紙上斑點(diǎn)位置及大小進(jìn)行定性和定量分析。薄層色譜法薄層色譜法是將適當(dāng)粒度的吸附劑作為固定相涂布在平板上形成薄層，然后用與紙色譜法類似的方法操作以達(dá)到分離目的。 按分離原理按色譜法分離所依據(jù)的物理或物理化學(xué)性質(zhì)的不同，又可將其分為：吸附色譜法( adsorption chromatography )利用吸附劑表面對不同組分物理吸附性能的差別而使之分離的色譜法稱為吸附色譜法。分配色譜法( partition chromatography )利用固定液對不同組分分配性能的差別而使之分離的色譜法稱為分配色譜法。離子交換色譜法尺寸排阻色譜法親和色譜法 原

3、理原理 色譜過程的本質(zhì)是待分離物質(zhì)分子在固定相和流動相之間分配平衡的過程，不同的物質(zhì)在兩相之間的分配會不同， 這使其隨流動相運(yùn)動速度各不相同，隨著流動相的運(yùn)動，混合物中的不同組分在固定相上相互分離。根據(jù)物質(zhì)的分離機(jī)制，又可以分為吸附色譜、分配色譜、離子交 換色譜、凝膠色譜、親和色譜等類別。 色譜法常見的方法有：柱色譜法、薄層色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法等。 柱色譜柱色譜柱色譜法是最原始的色譜方法，這種方法將固定相注入下端塞有棉花或?yàn)V紙的玻璃管中，將被樣品飽 和的固定相粉末攤鋪在玻璃管頂端，以流動相洗脫。常見的洗脫方式有兩種，一種是自上而下依靠溶劑本身的重力洗脫，一種是自下而上依靠毛細(xì)作用洗脫。收集分 離后的純凈組分也有兩種不同的方法，一種方法是在柱尾直接接受流出的溶液，另一種方法是烘干固定相后用機(jī)械方法分開各個色帶，以合適的溶劑浸泡固定相提取 組分分子。柱色譜法被廣泛應(yīng)用于混合物的分離，包括對有機(jī)合成產(chǎn)物、天然提取物以及生物大分子的分離。 薄層色譜薄層色譜薄層色譜法是應(yīng)用非常廣泛的色譜方法，這種色譜方法將固定相圖布在金屬或玻璃薄板上形成薄層，用毛細(xì)管、鋼筆或者 其他工具將樣品點(diǎn)染于薄板一端，之后將點(diǎn)樣端浸入流動相中，依靠毛細(xì)