毒理學(xué)復(fù)習(xí)綱要?dú)w納

1、第一章 緒論1經(jīng)典毒理學(xué)和現(xiàn)代毒理學(xué)的研究對(duì)象經(jīng)典毒理學(xué)（傳統(tǒng)毒理學(xué)）的研究對(duì)象：研究外源化學(xué)物對(duì)生物體損害作用?，F(xiàn)代毒理學(xué)：所有外源因素（物理、化學(xué)、生物因素）對(duì)生物系統(tǒng)的損害作用、生物學(xué)機(jī)制、安全性評(píng)價(jià)與危險(xiǎn)性評(píng)價(jià)的學(xué)科。2毒理學(xué)研究的三個(gè)領(lǐng)域：（但是考試的時(shí)候不會(huì)直接問(wèn)毒理學(xué)研究的是哪三個(gè)領(lǐng)域？問(wèn)法示例：?jiǎn)枺汗I(yè)和環(huán)境毒物除考慮對(duì)人的影響外，還要研究其對(duì)魚(yú)類、鳥(niǎo)類、陸棲動(dòng)物及植物等的影響這屬于哪類毒理學(xué)范疇？正選：描述毒理學(xué)。）（1）描述毒理學(xué)-用以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為受試對(duì)象的毒性實(shí)驗(yàn)，獲得與各種染毒途徑相聯(lián)系的受試物毒性大小、受損系統(tǒng)和器官以及癥狀發(fā)生順序和恢復(fù)過(guò)程等資料，可以為安全性評(píng)價(jià)提供

2、依據(jù)，并且為毒作用機(jī)制提供線索。（2）機(jī)制毒理學(xué)-研究外源因素對(duì)生物系統(tǒng)損害作用的細(xì)胞、生化及分子機(jī)制。（3）管理毒理學(xué)-根據(jù)描述毒理學(xué)和機(jī)制毒理學(xué)的研究資料進(jìn)行科學(xué)決策，以確?；瘜W(xué)物、藥品及食品進(jìn)入市場(chǎng)足夠安全。3 理論、建設(shè)、推測(cè)、觀點(diǎn)，猜測(cè)的肯定性的大小4毒理學(xué)科未來(lái)的發(fā)展趨勢(shì)：(掌握大點(diǎn))從高度綜合到高度分化從整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)到替代試驗(yàn)-3R原則：優(yōu)化（refinement）實(shí)驗(yàn)方法和技術(shù), 減少（reduction）受試動(dòng)物的數(shù)量和痛苦, 代替（replacement）整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法從閾劑量到基準(zhǔn)劑量-閾劑量沒(méi)有準(zhǔn)確值，只可由LOAEL或NOAEL得到近似最大無(wú)作用劑量值；且這些測(cè)定值

3、受樣本含量和組距大小的影響很大。幾個(gè)參數(shù)：LOAEL（觀察到有害作用的最小劑量）；NOAEL（未觀察到有害作用劑量），BMD（基準(zhǔn)計(jì)量法）應(yīng)用于制定非致癌物的可接受水平時(shí)比傳統(tǒng)方法更準(zhǔn)確，推薦替代LOAEL和NOAEL?，F(xiàn)用于包括生殖與發(fā)育毒性在內(nèi)的各種危險(xiǎn)度評(píng)定。從構(gòu)效關(guān)系SAR到定量構(gòu)效關(guān)系（QSAR）：QSAR是根據(jù)藥效基因圖譜和3D搜索與分子設(shè)計(jì)，確立了QSAR。這種QSAR研究，包括多個(gè)毒性終點(diǎn)以及致突變、致畸和致癌的QSAR研究，為開(kāi)展環(huán)境中大量存在的混合化合物（復(fù)合暴露）的危險(xiǎn)評(píng)定創(chuàng)造條件。Quantitative structure-activity relationship

4、(QSAR) 從危險(xiǎn)度評(píng)定到危險(xiǎn)度管理：據(jù)描述和機(jī)制毒理學(xué)的研究資料（危險(xiǎn)度評(píng)定的依據(jù)）進(jìn)行科學(xué)決策，協(xié)助政府部門制定衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)、制訂相關(guān)法規(guī)條例和管理措施并付諸實(shí)施，以確保化學(xué)物、藥品、食品等進(jìn)入市場(chǎng)足夠安全，達(dá)到保護(hù)人民群眾身心健康的目的。管理毒理學(xué)是描述毒理學(xué)和機(jī)制毒理學(xué)的目的和延伸。5.3R法，QSAR法已在4中闡明。6.毒性、毒效應(yīng)將在第二章中解析。第二章 毒理學(xué)基本概念1毒性：毒性是化學(xué)物引起有害作用的固有能力。毒性是物質(zhì)一種內(nèi)在的、不變的性質(zhì)。指化學(xué)物質(zhì)能夠造成機(jī)體損害的能力，有大小強(qiáng)弱之分。劑量相同時(shí)，對(duì)機(jī)體損害能力越強(qiáng)的化學(xué)物質(zhì)，毒性越高。相對(duì)于同一損害指標(biāo)，需要?jiǎng)┝吭叫〉幕瘜W(xué)

5、物質(zhì)，其毒性越大。（必考）2毒效應(yīng)：化學(xué)物對(duì)機(jī)體健康引起的有害作用稱為毒效應(yīng)。通過(guò)毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)觀察毒物的毒效應(yīng)來(lái)了解認(rèn)識(shí)毒物的毒性。（必考）（要點(diǎn)：毒性是內(nèi)在屬性，毒效應(yīng)是外在表現(xiàn)，毒性是毒效應(yīng)的誘因，但毒性不一定都能引起毒效應(yīng)。）3外源化學(xué)物：是在人類生活和生產(chǎn)環(huán)境中存在、可能與機(jī)體接觸并進(jìn)入機(jī)體，并呈現(xiàn)一定的生物學(xué)作用的化學(xué)物質(zhì)，又稱為外源生物活性物質(zhì)，相對(duì)于內(nèi)源化學(xué)物（機(jī)體內(nèi)原已存在的和代謝過(guò)程中所形成的產(chǎn)物或中間產(chǎn)物）毒物：是一定條件下以較小劑量進(jìn)入機(jī)體就能干擾其正常生理生化功能，引起暫時(shí)或永久性病理變化、甚至危及生命的化學(xué)物質(zhì)。是外源化學(xué)物毒性的具體表現(xiàn)，是毒理學(xué)的主要研究對(duì)象。 4.

6、 損害作用：指影響機(jī)體行為的生化改變，功能紊亂或病理?yè)p害，或降低對(duì)外界環(huán)境應(yīng)激的反應(yīng)能力。非損害作用：機(jī)體發(fā)生的生物學(xué)變化在機(jī)體適應(yīng)代償能力范圍之內(nèi)，機(jī)體對(duì)其他不利因素的易感性也不增高。 便于理解的例子（fro PTT）：損害作用與非損害作用二者間無(wú)嚴(yán)格的界限。比如乙醇誘導(dǎo)肝臟CYP2e1，因后者是多種亞硝胺類致癌物的活化酶，當(dāng)同時(shí)接觸亞硝胺時(shí)，前者為損害作用（增加機(jī)體對(duì)亞硝胺致癌作用的易感性），否則為非損害作用。5.毒效應(yīng)譜（了解毒效應(yīng)譜的寬窄，毒效應(yīng)弱的地方毒效應(yīng)譜寬，受影響的人群多，毒效應(yīng)強(qiáng)的地方毒效應(yīng)譜窄，占少數(shù)人群）毒物接觸劑量/時(shí)間非損害作用損害作用機(jī)體的化學(xué)物負(fù)荷 亞臨床改變 基

7、因突變無(wú)病理意義的生理、生化改變 中毒 細(xì)胞增殖 死亡 致癌、致畸毒效應(yīng)譜：外源化學(xué)物可引起機(jī)體的多種性質(zhì)或強(qiáng)度方面的生物學(xué)變化，包括：A機(jī)體對(duì)外源化學(xué)物的負(fù)荷增加；B意義不明的生理和生化改變；C。亞臨床改變；D臨床中毒（三致作用）；E死亡。CDE屬于損害作用（毒效應(yīng)），毒效應(yīng)譜還包括致癌、致突變和致畸胎作用。適應(yīng)：機(jī)體對(duì)一種通常能引起有害作用的化學(xué)物顯示不易感性或易感性降低。抗性：用于一個(gè)群體對(duì)于應(yīng)激原化學(xué)物反應(yīng)的遺傳機(jī)構(gòu)改變，以致與未暴露的群體相比有更多的個(gè)體對(duì)該化學(xué)物不易感性。耐受：獲得對(duì)某種化學(xué)物毒作用的抗性，通常是早先暴露的結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致對(duì)該化學(xué)物毒作用反應(yīng)性降低的狀態(tài)。6毒作用的分類：

8、（一）速發(fā)性或遲發(fā)型作用：速發(fā)型（某些外源化學(xué)物在一次暴露后的短時(shí)間內(nèi)所引起的即刻毒作用）：KCN，H2S，等。遲發(fā)型（在一次或多次暴露某種外源化學(xué)物后，經(jīng)一定時(shí)間間隔才出現(xiàn)的毒作用）：典型者如致癌物：B(a)P,石棉，等；潛伏期可長(zhǎng)達(dá)10-20年。 與毒物吸收、分布及排泄速率不同及是否需要生物活化有關(guān)。也與所觀察的反應(yīng)有關(guān)，如矽塵引起呼吸道刺激癥狀為速發(fā)型作用，而肺纖維化則為遲發(fā)型作用。（二）局部作用和全身作用-局部作用：對(duì)暴露部位直接的損害作用 ;全身作用-吸收和分布至靶器官或全身所產(chǎn)生的毒作用。 （三）可逆或不可逆作用-例子ppt 脂肪肝（可逆）肝硬化（不可逆）作用是否可逆，主要取決于受

9、損組織的修復(fù)和再生能力(四) 超敏反應(yīng)-機(jī)體對(duì)外源化學(xué)物的病理性免疫反應(yīng)。外源性化學(xué)物可作為半抗原，與內(nèi)源性蛋白質(zhì)分子結(jié)合形成完全抗原，刺激免疫反應(yīng)，低劑量即可發(fā)生，難以觀察劑量反應(yīng)關(guān)系。（五）特異質(zhì)反應(yīng)（遺傳性異常的反應(yīng)性）-由于機(jī)體遺傳物質(zhì)異常（基因多態(tài)性，與免疫性超敏反應(yīng)無(wú)關(guān)）而發(fā)生的對(duì)外來(lái)化學(xué)物的反應(yīng)；如肌松藥琥珀酰膽堿的降解酶是血清膽堿酯酶（ChE），人群中有極少數(shù)人缺乏此酶活性。又如：亞硝酸鹽高鐵血紅蛋白NADH高鐵血紅蛋白還原酶（多態(tài)性）7選擇性毒性（某種化學(xué)物質(zhì)只對(duì)某種/類生物、某些/類群體、某種/些組織器官產(chǎn)生毒性）的原因： 物種及細(xì)胞學(xué)差異，細(xì)菌；對(duì)化學(xué)物質(zhì)生物轉(zhuǎn)化過(guò)程的差

10、異，葉酸；組織器官對(duì)化學(xué)物質(zhì)親和力的差異；組織器官修復(fù)能力的差異等。8生物學(xué)標(biāo)志及其分類 外源化學(xué)物通過(guò)生物學(xué)屏障進(jìn)入組織或體液后對(duì)其外源化學(xué)物及其生物學(xué)后果的測(cè)定指標(biāo)。分為：暴露標(biāo)志-體內(nèi)或排泄物中，原型/代謝物/反應(yīng)產(chǎn)物 (如CO：碳氧血紅蛋白；鉛中毒：Delta ALA）效應(yīng)標(biāo)志-生化，生理，行為等方面。易感性標(biāo)志-如暴露的化學(xué)物有關(guān)的代謝酶的多態(tài)性（亞硝胺類，CYP2E1;B(a)P, CYP1A1)。目的是發(fā)現(xiàn)和保護(hù)易感人群。暴露標(biāo)志：測(cè)定組織、體液或排泄物中吸收的外源化學(xué)物、其代謝物或與內(nèi)源性物質(zhì)的反應(yīng)產(chǎn)物，作為吸收劑量或靶劑量的指標(biāo)，提供關(guān)于暴露于外源化學(xué)物的信息。內(nèi)劑量標(biāo)志（血

11、鉛），生物效應(yīng)劑量標(biāo)志（苯并比的DNA加合物）效應(yīng)標(biāo)志：機(jī)體中可測(cè)出的生化、生理、行為或其他改變的指標(biāo)，提示與不同靶劑量的外源化學(xué)物或其代謝物有關(guān)聯(lián)的對(duì)健康有害效應(yīng)的信息。易感標(biāo)志：個(gè)體對(duì)外源化學(xué)物生物易感性的指標(biāo)，篩選易感人群，保護(hù)高危人群。9靶器官-是外源化學(xué)物發(fā)揮主要毒性效應(yīng)的器官。 如甲基汞腦，鎘腎，CCl4肝。毒效應(yīng)的強(qiáng)弱取決于毒物在靶器官的濃度，靶器官相同不代表毒性機(jī)制相同，但毒物蓄積的器官未必是靶器官。如鉛蓄積于骨，但骨并非靶器官；DDT蓄積于脂肪組織，但不對(duì)脂肪組織產(chǎn)生毒作用。 多種因素決定一個(gè)毒物的靶器官：該器官的血液供應(yīng)；存在特殊的酶或生化途徑；器官的功能和在體內(nèi)的解剖位置

12、；對(duì)特異性損傷的易感性；對(duì)損傷的修復(fù)能力；具有特殊的攝入系統(tǒng)；代謝毒物的能力和活化解毒系統(tǒng)平衡；毒物與特殊的生物大分子結(jié)合等。10 量反應(yīng)、質(zhì)反應(yīng)、毒物劑量效應(yīng)關(guān)系（詳見(jiàn)課件、課本22）（必考）知識(shí)點(diǎn)：質(zhì)反應(yīng)體現(xiàn)的是有或無(wú)的關(guān)系；劑量效應(yīng)關(guān)系反應(yīng)的是各個(gè)機(jī)體的差異性。如果曲線為水平走勢(shì)，說(shuō)明群體差異性很大，如果曲線波動(dòng)趨勢(shì)明顯，說(shuō)明群體差異性小。量反應(yīng)/效應(yīng)：暴露一定劑量外源化學(xué)物后所引起的一個(gè)生物個(gè)體、器官或組織的生物學(xué)改變。此改變的程度用計(jì)量單位來(lái)表示。質(zhì)反應(yīng)/反應(yīng)：指暴露某一化學(xué)物的群體中出現(xiàn)某種效應(yīng)的個(gè)體在群體中所占比率，一般用百分率或比值表示。如死亡率，腫瘤發(fā)生率等。其觀察結(jié)果以“有

13、”或“無(wú)”“異?！被颉罢！眮?lái)表示。一般用百分率或比值來(lái)表示。劑效反應(yīng)關(guān)系：反映化學(xué)物的毒效應(yīng)性質(zhì)；比較不同化學(xué)物毒性大??；反映各個(gè)體的機(jī)體易感性變異度；判斷因果關(guān)系；安全性評(píng)價(jià)或危險(xiǎn)性評(píng)價(jià)的依據(jù)。量反應(yīng)與劑量效應(yīng)關(guān)系、質(zhì)反應(yīng)與劑量效應(yīng)關(guān)系二者的量-效曲線都有可能呈S型半對(duì)數(shù)圖，但前者提示毒物的最大效能，后者反映群體對(duì)毒物反應(yīng)的差異。（必考） 量反應(yīng)和劑量效應(yīng)曲線：I.在游離器官/組織的量反應(yīng)，因?yàn)橛坞x器官缺乏多種整體干預(yù)機(jī)制；II在整體動(dòng)物的量反應(yīng)，受整體動(dòng)物的神經(jīng)和內(nèi)分泌調(diào)節(jié)及轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制的影響，一般呈現(xiàn)上升或下降的不同類型的曲線，呈雙曲線型、直線型或S型曲線等多種形狀。質(zhì)反應(yīng)和劑量反應(yīng)曲線：

14、非對(duì)稱S型曲線，反應(yīng)率在50%斜率最大，轉(zhuǎn)換后可呈對(duì)稱S性曲線及直線；直線轉(zhuǎn)化后可計(jì)算多種參數(shù)：ED50（半數(shù)的有效劑量）、TD50（半數(shù)中毒劑量）、LD50（半數(shù)致死量）.11毒理學(xué)研究方法:體外實(shí)驗(yàn)；體內(nèi)實(shí)驗(yàn)/整體動(dòng)物試驗(yàn)（目前的標(biāo)準(zhǔn)方法）；人體觀察；流行病學(xué)研究。12毒性參數(shù)：毒性上限參數(shù)：急性毒性試驗(yàn)中以死亡為終點(diǎn)的各項(xiàng)毒性參數(shù)毒性下限參數(shù)：觀察到有害作用最低水平及最大無(wú)有害作用劑量。LD100-絕對(duì)致死劑量/濃度，引起一組受試實(shí)驗(yàn)動(dòng)物全部死亡的最低劑量（mg/kg）/濃度，受個(gè)體間耐受性差異影響太大。LD50-半數(shù)致死劑量/濃度，一組受試實(shí)驗(yàn)動(dòng)物半數(shù)死亡的劑量或濃度（LC50，氣態(tài)或

15、液態(tài)毒物），與毒性呈反比，較為穩(wěn)定，較少受個(gè)體耐受程度差異的影響。LD01/MLD-最小致死劑量，一組受試實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中僅引起個(gè)別動(dòng)物死亡的最小劑量或濃度。 LD0最大非致死劑量/濃度，一組受試實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中，不引起動(dòng)物死亡的最大劑量或濃度LOAEL（lowest observed adverse effect level）觀察到有害作用的最低水平，指引起某種可觀察到的有害改變的最低劑量。NOAEL-未觀察到有害作用水平，指未觀察到有害作用（非損害作用）的最高劑量。NOAEL-LOAEL=一個(gè)劑量組LOEL，觀察到作用的最低水平，某種作用（非有害作用如治療作用）。NOEL，未觀察到作用水平，任何作用（

16、有害作用或非有害作用）閾值，外源化學(xué)物的一般毒性/器官毒性和致畸作用的劑量-反應(yīng)關(guān)系是有閾值的；而遺傳毒性致癌物和致突變物的劑量-反應(yīng)關(guān)系通常被認(rèn)為是無(wú)閾值的（零閾值）。有害效應(yīng)的閾值介于NOAEL和LOAEL之間；非有害效應(yīng)的閾值則介于NOEL和LOEL之間。ADI-每日容許攝入量。BMD-基準(zhǔn)劑量法（緒論4.（3）指ED1、ED5或ED10的95%可信限下限值。）（課本P8）13急性毒作用帶、慢性毒作用帶（P31）毒作用帶是化學(xué)毒作用特點(diǎn)的參數(shù)。急性毒作用帶：急性毒作用帶（Zac）-LD50/Limac，即半數(shù)致死劑量與急性閾劑量的比值。此值小，說(shuō)明化學(xué)物質(zhì)從產(chǎn)生輕微損傷到導(dǎo)致急性死亡的劑

17、量效應(yīng)窄；反之說(shuō)明引起的急性毒性死亡的危險(xiǎn)性小。慢性毒作用帶(Zch)- Limac/Limch，急性閾劑量與慢性閾劑量的比值。此值大，說(shuō)明從Lmac到Limch之間的劑量范圍大，由輕微的慢性毒性實(shí)驗(yàn)到較為明顯的急性毒性重度之間劑量范圍寬，故發(fā)生慢性毒性的危險(xiǎn)性大。反之，發(fā)生慢性毒性的危險(xiǎn)性小。第三章 外源化學(xué)物在體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)運(yùn)與生物轉(zhuǎn)化1.ADME-機(jī)體對(duì)于外源化學(xué)物的處置包括吸收（absorption）、分布（distribution）、代謝（metabolism）和排泄（excretion）四過(guò)程，代謝和排泄合稱消除。又稱（ADME過(guò)程）每個(gè)過(guò)程都會(huì)受到多種因素影響，進(jìn)而改變外源化學(xué)物在

18、作用部位的存在數(shù)量、時(shí)間和繼發(fā)的反應(yīng)。其中吸收、分布、排泄具有共性，均為外源化學(xué)物穿越生物膜的過(guò)程，其本身結(jié)構(gòu)性質(zhì)不發(fā)生改變，故稱生物轉(zhuǎn)運(yùn)。而代謝則是外源化學(xué)物轉(zhuǎn)化為新的化學(xué)物的過(guò)程，產(chǎn)物結(jié)構(gòu)形式發(fā)生改變，為生物轉(zhuǎn)化過(guò)程。2.外源化學(xué)物質(zhì)通過(guò)通過(guò)生物膜的方式及其特點(diǎn)，簡(jiǎn)單擴(kuò)散影響因素 I 被動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn) ：（1）簡(jiǎn)單擴(kuò)散（2）濾過(guò) 簡(jiǎn)單擴(kuò)散/脂溶擴(kuò)散：順濃度差，不耗能，不需要載體，無(wú)飽和性，無(wú)競(jìng)爭(zhēng)性大多數(shù)外源化學(xué)物的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)方式濾過(guò)：壓力差/滲透壓差，適合的分子量 II特殊轉(zhuǎn)運(yùn)：（1）主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)（2）易化擴(kuò)散3）膜動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)-(a)吞噬作用(b)胞飲作用(c)胞吐作用。主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)：逆濃度差，耗能，需要載體，

19、飽和性，競(jìng)爭(zhēng)性，特異性易化擴(kuò)散：順濃度差，不耗能，需要載體，飽和性，競(jìng)爭(zhēng)性膜動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)：特征表現(xiàn)為轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)生物膜的形態(tài)發(fā)生變化 簡(jiǎn)單擴(kuò)散的影響因素：1）經(jīng)簡(jiǎn)單擴(kuò)散的外源化學(xué)物必須有脂溶性。脂水分配系數(shù)越大，越易溶解于脂肪，經(jīng)簡(jiǎn)單擴(kuò)散的速度就越快。不過(guò)生物膜包含脂相和水相，因此脂溶性極高，全部溶于脂肪的物質(zhì)，也難以通過(guò)簡(jiǎn)單擴(kuò)散的方式進(jìn)行跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)。 （2）外源化學(xué)物質(zhì)的解離狀態(tài)對(duì)生物膜的轉(zhuǎn)運(yùn)的影響。解離程度越高，極性越大，越難通過(guò)生物膜脂相進(jìn)行擴(kuò)散。所以，非解離態(tài)的外源化學(xué)物易于轉(zhuǎn)運(yùn)。如弱有機(jī)酸、弱有機(jī)堿。（3）濃度梯度對(duì)擴(kuò)散速率的影響最為重要3經(jīng)胃腸道、呼吸道、皮膚吸收的主要部位，方式，影響因素（一）

20、胃腸道吸收主要部位及方式：以小腸為主，其次是胃。多數(shù)是簡(jiǎn)單擴(kuò)散，部分物質(zhì)是主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)（如左旋多巴、Pt、天冬酰苯丙氨酸甲酯），少數(shù)是胞飲、濾過(guò)（鉻、鎘、錳、鉛）、吞噬作用吸收。胃腸道吸收影響因素：弱有機(jī)酸和弱有機(jī)堿，只有分子態(tài)才可吸收。所以胃腸道pH起決定作用。胃和十二指腸腔內(nèi)為酸性環(huán)境，利于弱酸如苯甲酸吸收。小腸腔內(nèi)pH達(dá)6以上，利于弱堿性物質(zhì)（如苯胺）的吸收。胃腸蠕動(dòng)、排空速度和腸道菌從也對(duì)外來(lái)化合物的吸收有影響。（二）呼吸道吸收的主要部位（以肺泡為主）：(1)直徑 5 微米：沉積于鼻咽部(2)直徑在25微米：沉降于氣管、支氣管區(qū)域。被咳出或吞咽進(jìn)胃腸道(3)直徑在1微米以下：可達(dá)肺泡并被吸

21、收入血.呼吸道吸收的影響因素：氣體和蒸氣的吸收主要取決于（1）脂溶性和濃度（簡(jiǎn)單擴(kuò)散）。(2)血/氣分配系數(shù)(mg/L:mg/L) 乙烯：0.14，乙醇：1300，苯：6.85血/氣分配系數(shù)：當(dāng)某種化學(xué)物在呼吸膜兩側(cè)達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡時(shí)，在血液中的濃度與在肺泡中濃度的比值， (3)肺通氣量(4)氣溶膠：霧經(jīng)肺的吸收與氣體和蒸氣相似(5)煙和粉塵的顆粒直徑大小與其到達(dá)呼吸道的部位有密切關(guān)系。（三）皮膚吸收的方式：（1）穿透階段：角質(zhì)層-被動(dòng)擴(kuò)散（2）吸收階段：表皮深部和真皮層-經(jīng)靜脈和淋巴入體循環(huán)皮膚吸收的影響因素：脂溶性較好的物質(zhì)易吸收，而高脂溶性或高水溶性物質(zhì)，經(jīng)皮吸收困難。增加皮膚通透性的因素-

22、酸堿、二甲基亞砜，芥子氣等。潮濕皮膚使角質(zhì)層結(jié)合水的能力增加3-5倍，通透性增加2-3倍。皮膚炎性反應(yīng)也可增加外源化學(xué)物的吸收。4貯存庫(kù)有哪些？答：血漿蛋白（最主要的貯存庫(kù)，因?yàn)榍宓鞍自隗w內(nèi)比例最大，與慢性毒性蓄積作用有關(guān)，外源化學(xué)物與血漿單邊的結(jié)合是暫時(shí)而可逆的）、肝臟、腎臟、脂肪組織、骨髓。蓄積：外源化學(xué)物以相對(duì)較高的濃度富集于某些組織器官的現(xiàn)象。貯存庫(kù)：凡是毒物蓄積的部位。靶器官，對(duì)急性中毒有保護(hù)作用；是慢性毒性作用發(fā)生的物質(zhì)基礎(chǔ)。表觀分布容積Vd=D/C，可用于推測(cè)毒物在體內(nèi)的分布范圍，是體內(nèi)毒物劑量與血毒物濃度的比值。Vd=血漿容量（0.05L/kg），提示毒物只分布在血液中；Vd=

23、體液總量（0.6L/kg），提示毒物均勻分布在體液中；Vd>體液總量，提示毒物在體內(nèi)有貯存庫(kù)。5生物轉(zhuǎn)化主要反應(yīng)類型和六大結(jié)合反應(yīng)答：（1）一相反應(yīng):包括氧化，還原和水解反應(yīng)。重點(diǎn)：細(xì)胞色素P450酶系/微粒體混合功能氧化酶MFO/單加氧酶，在一相反應(yīng)中居于首位，分布廣泛，以肝細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)微粒體（粗>細(xì)）中含量最高。由3種成分構(gòu)成，即血紅蛋白類（細(xì)胞色素P450和細(xì)胞色素b5，傳遞電子，活性中心）和黃素蛋白（NADPH-細(xì)胞色素P450還原酶，為傳遞電子的轉(zhuǎn)運(yùn)體，增加底物的親和力）、磷脂（固定作用）。（注：P450為催化作用的活性中心）.胞液中的醇脫氫酶ADH和醛脫氫酶ALDH與甲醇

24、和乙醇的代謝有關(guān),乙醛脫氫酶具遺傳多態(tài)性。亞洲人中有大約一半的人因點(diǎn)突變而缺乏此酶ALDH活性（將乙醇氧化成乙酸）：紅暈綜合癥。 （2）二相反應(yīng)：結(jié)合作用，是外源化學(xué)物原有的或經(jīng)過(guò)一相反應(yīng)后引入或暴露出的羥基、氨基、羧基、巰基、羰基、和環(huán)氧基等與內(nèi)源性極性基團(tuán)之間發(fā)生的生物結(jié)合反應(yīng)，反應(yīng)速度較I相快。二相反應(yīng)主要在肝臟進(jìn)行，其次是腎臟，也可在肺、腸、脾腦中進(jìn)行。 六大結(jié)合反應(yīng)：1、葡萄糖醛酸結(jié)合(體內(nèi)最重要的結(jié)合反應(yīng))2、硫酸基結(jié)合3、谷胱甘肽結(jié)合4、甲基化反應(yīng)5、乙?；磻?yīng)6、氨基酸結(jié)合生物轉(zhuǎn)化前后毒物水溶性和毒性的變化：多數(shù)外源性化學(xué)物代謝后毒性降低，少數(shù)毒物如氯乙烯和B(a)P本身不直接

25、發(fā)生毒效應(yīng)，而是依賴代謝過(guò)程使其成為具有細(xì)胞毒性、遺傳毒性或致癌性的活性形式（自由基或親電子劑）。要點(diǎn)記憶：1.多數(shù)外源化學(xué)物代謝后毒性降低，但少數(shù)毒性反而增加，稱為代謝活化。如硫磷、氯乙烯、苯丙芘。2.溶解度變化：多數(shù)二相反應(yīng)使外源化學(xué)物的水溶性增加，排泄加快，除甲基化或乙酰化反應(yīng)使結(jié)合物水溶性降低。（必考） 6代謝活化和代謝滅活 此知識(shí)點(diǎn)須知:一相反應(yīng)一般為代謝活化，將外源化學(xué)物的毒性集團(tuán)暴露，以便二相反應(yīng)的進(jìn)行。在二相反應(yīng)中的六大結(jié)合反應(yīng)中：(1)硫酸基結(jié)合反應(yīng)-硫酸基轉(zhuǎn)移酶有時(shí)使外源性化學(xué)物毒性增強(qiáng)活化為細(xì)胞毒性和致突變物。（必考）（2）乙?；饔?多為代謝滅活，但有時(shí)為代謝活化。見(jiàn)課

26、本（P58）。第五章 毒作用影響因素該章節(jié)首先要大線條掌握，還需要理解一些典型例子：比如化學(xué)結(jié)構(gòu)、高溫高濕、水溶性、 年齡等對(duì)毒作用的影響影響毒作用的四大因素：1.化學(xué)因素 2.機(jī)體因素 3.環(huán)境因素 4.聯(lián)合作用1.化學(xué)物質(zhì)本身的因素對(duì)毒作用的影響:化學(xué)結(jié)構(gòu)，理化性質(zhì)，純度和穩(wěn)定性。化學(xué)結(jié)構(gòu)：a.取代基的影響 ，取代基不同毒性不同ü 苯: 麻醉作用和抑制造血功能。 甲基取代（甲苯、二甲苯)：麻醉作用,抑制造血功能; 氨基取代：形成高鐵血紅蛋白； 硝基（硝基苯）或鹵素（鹵代苯）取代：肝毒性; ü 烷烴：氫被鹵素取代，肝毒性增加，且取代愈多，毒性愈大。CH3CL<CH2

27、CL2<CHCL3<CCL4b. 異構(gòu)體和立體異構(gòu)的影響 (不會(huì)考)c. 同系物的碳原子數(shù)和結(jié)構(gòu)理化性質(zhì)：脂水分配系數(shù)，揮發(fā)性，氣態(tài)物質(zhì)的血/氣分配系數(shù)，比重，大小，電離性脂水分配系數(shù)：達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡時(shí)化學(xué)物在脂相和水相中的溶解分配率的平衡系數(shù)。 大，脂溶性強(qiáng)，易吸收、蓄積，如DDT。 小，水溶性強(qiáng)，不易透膜吸收，易排泄 同系化合物中，水溶性越大,毒性愈大 、 砒霜(As2O3，水溶解度較大)>雄黃(As2S3) 一氧化鉛>金屬鉛>硫酸鉛>碳酸鉛 氣態(tài)化學(xué)物：水溶性影響在呼吸道的吸收部位 NH3易溶于水，損害上呼吸道 NO2不易溶解，深入到肺泡，引起肺水腫。

28、血/氣分配系數(shù)：系數(shù)越大越易被吸收入血2.機(jī)體因素：a.遺傳因素：種間遺傳差異（解剖、生理差異；代謝差異；物種間遺傳差異）、個(gè)體間差異；b.非遺傳因素：健康狀況、營(yíng)養(yǎng)、年齡、性別（年齡：生物轉(zhuǎn)運(yùn)的差異；藥物代謝酶系統(tǒng)；神經(jīng)系統(tǒng)）（知道什么屬于機(jī)體因素就可以了）3.環(huán)境因素：氣象條件、季節(jié)及晝夜節(jié)律（器官代謝具有節(jié)律性）、動(dòng)物籠養(yǎng)形式、外源化合物的接觸特征和賦形劑氣象條件：ü 氣溫 高溫：血管擴(kuò)張，血液循環(huán)和呼吸加快，胃酸分泌減少，多汗，少尿。 ü 氣濕 增加機(jī)體體溫調(diào)節(jié)負(fù)荷 高溫高濕：皮膚吸收增加，黏附時(shí)間延長(zhǎng)外源化學(xué)物的接觸特征和賦形劑：接觸途徑（靜脈注射吸入>腹腔

29、注射肌肉注射>皮下注射>皮內(nèi)注射>口服>經(jīng)皮給藥）；接觸持續(xù)時(shí)間；接觸頻率；溶劑或助溶劑助溶劑：溶劑或助劑、生物體、化學(xué)物之間的相互作用，化學(xué)物在溶劑或助劑中的濃度影響毒效應(yīng)：濃>稀 ü 要求所選溶劑或助劑無(wú)毒、不與受試化學(xué)物發(fā)生反應(yīng)、不影響受試化學(xué)物的毒性、受試化學(xué)物在溶劑或助劑中穩(wěn)定。4.聯(lián)合作用：同時(shí)或先后接觸兩種或兩種以上外源化學(xué)物對(duì)機(jī)體產(chǎn)生的總毒性效應(yīng)。 (掌握五種是哪五種即可)（可能是多選）ü 非交互作用：a.相加作用：相同的方式，相同的機(jī)制，作用于相同的靶標(biāo)；總毒性作用等于各化學(xué)物單獨(dú)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生效應(yīng)的算術(shù)總和也稱為，簡(jiǎn)單相似作用/

30、簡(jiǎn)單聯(lián)合作用/劑量相加作用，原則上不存在閾值例如：PCB與二惡英，大多數(shù)刺激性氣體b.獨(dú)立作用 各化學(xué)物毒性效應(yīng)不同，但互不影響； 總效應(yīng)是每個(gè)化合物的反應(yīng)的總和決定簡(jiǎn)單不同作用（反應(yīng)相加）ü 交互作用（比預(yù)期的相加作用更強(qiáng)或更弱）：a.協(xié)同作用（總毒性效應(yīng)大于各個(gè)化學(xué)物的毒性效應(yīng)總和，毒性增強(qiáng)）：馬拉硫磷與苯硫磷聯(lián)合染毒，毒性明顯增加。 b.加強(qiáng)作用（一種無(wú)毒性，同時(shí)/先后暴露后效應(yīng)增強(qiáng)，助癌物；促癌物）：促癌物，本身不致癌，但能夠加強(qiáng)致癌物的致癌效應(yīng)。苯巴比妥，乙烯雌酚。 c. 拮抗作用：阿托品、氯磷定對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥；區(qū)別于抑制作用（一種無(wú)毒性，另一種先后/同時(shí)暴露后毒性降低）第六

31、章 外源化學(xué)物的一般毒性作用1. 一般毒性包括哪些，概念：一般毒性作用也稱基礎(chǔ)毒性，是全身各系統(tǒng)對(duì)外源化學(xué)物的毒作用反應(yīng)，與特殊毒性（致畸、致突變、致癌）相對(duì)而言。按照接觸毒物的時(shí)間長(zhǎng)短可分為：急性毒性、重復(fù)劑量毒性、亞慢性毒性、慢性毒性。急性毒性：機(jī)體（實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、人）一次或24小時(shí)內(nèi)接觸多次一定劑量外源化學(xué)物后在短期（最長(zhǎng)14天）內(nèi)所產(chǎn)生的毒作用及死亡。（國(guó)內(nèi)多規(guī)定24小時(shí)一般不超過(guò)3次）亞慢性毒性：機(jī)體（實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、人）連續(xù)較長(zhǎng)期（相當(dāng)于生命周期的1/10）接觸外源化學(xué)物所產(chǎn)生的中毒效應(yīng)。慢性毒性：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物長(zhǎng)期染毒外源化學(xué)物所引起的毒性效應(yīng)。2.各研究實(shí)驗(yàn)的染毒時(shí)間急性毒性實(shí)驗(yàn)：一次或24小

32、時(shí)內(nèi)多次短期重復(fù)劑量實(shí)驗(yàn)：28d（14-30d）亞慢性毒性實(shí)驗(yàn)： 90d ，相當(dāng)于生命周期的1/10，已成為較常用的長(zhǎng)期重復(fù)染毒毒性試驗(yàn)，基本可代替慢性毒性試驗(yàn)，由該實(shí)驗(yàn)可確定外源化學(xué)物的未觀察到有害作用劑量NOAEL慢性毒性：長(zhǎng)期（終生）3.各研究實(shí)驗(yàn)的研究目的急性：a.測(cè)定毒物的致死劑量以及其他急性毒性參數(shù)，以LD50為主，進(jìn)行毒性分級(jí)。 b.初步評(píng)價(jià)毒物對(duì)機(jī)體的毒效應(yīng)特征、靶器官、劑量-反應(yīng)（效應(yīng)）關(guān)系和對(duì)人體產(chǎn)生損害的危險(xiǎn)性 c.為試驗(yàn)研究以及其他毒理試驗(yàn)提供接觸劑量設(shè)計(jì)及觀察指標(biāo)選擇依據(jù)。 d.提供毒理學(xué)機(jī)制研究的初步線索。短期重復(fù)劑量、亞慢性、慢性：a.觀察長(zhǎng)期接觸受試物的毒性效應(yīng)

33、譜、毒作用特點(diǎn)和毒作用靶器官。了解其毒性機(jī)制。 b.觀察長(zhǎng)期接觸受試物毒性作用的可逆性。 c.研究重復(fù)接觸受試物毒性作用的劑量反應(yīng)（效應(yīng)）關(guān)系，確定NOAEL和LOAEL,為制定安全限量提供參考。 d.確定不同動(dòng)物物種對(duì)受試物的毒效應(yīng)的差異，為將研究結(jié)果外推到人提供依據(jù)。4.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中：動(dòng)物選擇的大原則及其各實(shí)驗(yàn)對(duì)動(dòng)物種屬、年齡、性別的要求²急性毒性試驗(yàn)動(dòng)物選擇的原則：a.急性毒性反應(yīng)與人近似 b.易于飼養(yǎng)、操作方便c.繁殖力較強(qiáng)，數(shù)量較大 d.價(jià)格較低，易于獲得（經(jīng)典的急性毒性試驗(yàn)中，大鼠為首選的嚙齒類動(dòng)物）² 各實(shí)驗(yàn)對(duì)動(dòng)物種屬、年齡、性別的要求急性毒性：大鼠；雌雄兼用,

34、青壯年，設(shè)置3個(gè)劑量組，組距適當(dāng)，各組同一性別動(dòng)物數(shù)相等亞慢性：一般選擇兩種試驗(yàn)動(dòng)物：嚙齒類、非嚙齒類 最好的選擇：大鼠和犬；經(jīng)皮：兔或豚鼠雌雄各半，大鼠6-8周齡,剛斷乳數(shù)量不要求掌握5.亞急性、亞慢性慢性實(shí)驗(yàn)中：劑量設(shè)計(jì)及其理想的劑量設(shè)計(jì)、觀察指標(biāo)原則：3個(gè)劑量組 和1個(gè)陰性（溶劑）對(duì)照組 ² 陰性對(duì)照組² 低劑量組：NOAEL（未觀察到有害劑量） ² 中劑量組： LOAEL（觀察到有害作用的最低劑量）² 高劑量組：明顯毒性或少量動(dòng)物死亡（少于10）組距：3-10倍，最少不小于2倍亞慢性和慢性毒性試驗(yàn)中劑量設(shè)計(jì)的考慮因素：1.以相同物種的短期毒性資料

35、為依據(jù)。亞慢性實(shí)驗(yàn)可依據(jù)急性毒性的閾劑量為最高劑量，或1/5-1/20的LD50的劑量；慢性試驗(yàn)儀亞慢性試驗(yàn)的最大耐受量MTD為最高劑量。劑量選擇的一般步驟可歸納為：急性毒性試驗(yàn)亞急性（28天）毒性試驗(yàn)90天毒性試驗(yàn)慢性毒性試驗(yàn)。2.對(duì)于人群主動(dòng)攝入的食品和藥品，可采用人體可能擬用的最高劑量作為劑量設(shè)計(jì)依據(jù)。觀察指標(biāo)：（1）一般觀察： （2）實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)項(xiàng)目： 血液學(xué)指標(biāo)： 血液生化學(xué)指標(biāo)： （3）系統(tǒng)尸解和病理組織學(xué)檢查： （4）可逆性觀察 （5）指標(biāo)觀察時(shí)間 （6）特異性指標(biāo)及其他6.LD50的毒理學(xué)意義和局限性(應(yīng)該是多選)毒理學(xué)意義 LD50標(biāo)準(zhǔn)化毒物毒作用強(qiáng)度，評(píng)價(jià)和比較毒物對(duì)機(jī)體毒性

36、的大小。 計(jì)算藥物的治療指數(shù)，藥效劑量和毒性劑量的距離。 為后續(xù)的重復(fù)給藥毒理學(xué)試驗(yàn)劑量的選擇提供參考。 通過(guò)比較不同途徑的LD50值，獲得生物利用度的信息。 試驗(yàn)結(jié)果可用來(lái)推測(cè)人類的致死劑量以及中毒后的體征，為臨床毒副反應(yīng)提供監(jiān)測(cè)參考。LD50的局限性 評(píng)價(jià)新藥或化學(xué)物時(shí)，LD50值給予有效的信息較少，實(shí)用性有限 LD50的波動(dòng)性很大，影響因素多 LD50受物種差異影響大 消耗動(dòng)物數(shù)量大7.皮膚刺激和眼刺激眼原發(fā)性刺激試驗(yàn)的觀察終點(diǎn)時(shí)眼刺激和眼腐蝕。多選用家兔為試驗(yàn)動(dòng)物。推薦方法為Draize試驗(yàn)。一般對(duì)皮膚產(chǎn)生刺激的強(qiáng)酸及強(qiáng)堿性物質(zhì)可免除眼刺激試驗(yàn)，產(chǎn)生皮膚刺激的物質(zhì)不一定由于眼刺激體征（

37、PH接近中性時(shí)）皮膚原發(fā)性刺激試驗(yàn)，終點(diǎn)為皮膚刺激和皮膚腐蝕。常用動(dòng)物為家兔或豚鼠。推薦方法為Draize試驗(yàn)。以下情況不適宜做皮膚刺激試驗(yàn)：I根據(jù)結(jié)構(gòu)域活性關(guān)系及理化特性推測(cè)可能由腐蝕性的物質(zhì)（PH2或>11.5）II在急性經(jīng)皮毒性試驗(yàn)顯示有很強(qiáng)系統(tǒng)毒性的物質(zhì)；III在急性經(jīng)皮毒性試驗(yàn)中染毒劑量大2000mg/kg時(shí)仍未產(chǎn)生皮膚刺激體征的物質(zhì)。8.重要概念：蓄積毒性、物質(zhì)蓄積、損傷蓄積、食物利用率、臟器系數(shù)蓄積作用：是發(fā)生慢性毒作用的前提，外源化學(xué)物連續(xù)的、反復(fù)的進(jìn)入機(jī)體，而且吸收速度或總量超過(guò)代謝轉(zhuǎn)化排出的速度或總量時(shí)，化學(xué)物質(zhì)就有可能在體內(nèi)組建增加并貯留的現(xiàn)象。物質(zhì)蓄積：當(dāng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

38、反復(fù)多次接觸化學(xué)毒物后可以用分析方法在體內(nèi)測(cè)出物質(zhì)的原形或其代謝產(chǎn)物時(shí)稱為物質(zhì)蓄積。損傷蓄積：如果在機(jī)體內(nèi)不能測(cè)出其原形或代謝產(chǎn)物，卻出現(xiàn)慢性毒性作用，稱為損傷蓄積。食物利用率：即動(dòng)物每食入100g飼料所增長(zhǎng)的體重克數(shù)（g體重 /100g飼料）?？梢澡b別動(dòng)物體重降低是由于進(jìn)食減少，還是受試物毒作用。臟器系數(shù)/臟器相對(duì)重量：指某個(gè)臟器的濕重與單位體重的比值，通常是每100g體重中某臟器所占的質(zhì)量，表示為臟器質(zhì)量（g）/體重（100g）。 適用于實(shí)質(zhì)性臟器，系數(shù)增大，提示臟器腫大，病變可能為增生、充血、水腫等；系數(shù)減小，可能發(fā)育不良或萎縮等變化。第七章 外源化學(xué)物致突變作用1.突變、自發(fā)突變、誘發(fā)

39、突變，致突變作用，基因庫(kù)，遺傳負(fù)荷的概念 突變:遺傳結(jié)構(gòu)本身的變化及其引起的變異稱為突變。突變實(shí)際上是遺傳物質(zhì)的一種可遺傳 的變異。 自發(fā)突變：在普遍存在的未知因素的作用下，自然條件下發(fā)生的改變；發(fā)生過(guò)程長(zhǎng)，頻率低，與物種進(jìn)化有關(guān)。 誘發(fā)突變：人為地造成地突變；發(fā)生過(guò)程短，頻率高，即可被人類利用，也可能對(duì)人類產(chǎn)生危害。致突變作用：外來(lái)因素，特別是化學(xué)因子引起細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)發(fā)生改變的能力，而且此種改變可隨同細(xì)胞分裂過(guò)程而傳遞?；驇?kù)：某物種在特定時(shí)期的處于生育年齡的群體所含有的基因總和。 遺傳負(fù)荷：一種物種中每一個(gè)攜帶的可遺傳給下一代的有害基因的平均水平。2.突變類型： ² 基因突

40、變（種類及其后果） a.堿基置換 后果：同義突變、錯(cuò)義突變、無(wú)義突變 b.移碼突變 后果：致死性突變² 染色體畸變（典型類型，與基因突變的區(qū)別，從受損程度和是否觀察到區(qū)分）類型：缺失，重復(fù)，倒位，易位 ² 染色體數(shù)目的變化（種類）：非整倍體和多倍體 3.突變的機(jī)制：以 DNA 為靶（大線條）， 以細(xì)胞分裂過(guò)程為靶（紡錘體損傷可能的機(jī)制）DNA：堿基損傷，DNA鏈?zhǔn)軗p細(xì)胞分裂：靶位：有絲分裂或減數(shù)分裂成分。如紡錘體、微管蛋白、極體、著絲粒等紡錘體損傷可能的機(jī)制：與微管蛋白二聚體結(jié)合 ;與微管上的巰基結(jié)合 ;已組裝好的微管的破壞 ;中心粒移動(dòng)受阻四突變的后果：生殖細(xì)胞突變的后果

41、，體細(xì)胞突變的后果 體細(xì)胞：癌變生殖細(xì)胞：突變可以傳給下一代：顯性突變-純合或雜合表型均異常；隱性突變-純合表型異常；雜合表型正常，為攜帶者五損傷修復(fù)：損傷耐受 修復(fù)（哪幾種） DNA損傷修復(fù)：損傷耐受機(jī)制和修復(fù)機(jī)制。損傷耐受機(jī)制-部分修復(fù)DNA損傷。修復(fù)機(jī)制-完全修復(fù)，可分為直接修復(fù)和切除修復(fù)。直接修復(fù)針對(duì)較小的DNA損傷。切除修復(fù)則針對(duì)較大范圍的損傷。DNA損傷的修復(fù)分為-直接修復(fù)切除修復(fù)-核苷酸切除修復(fù);堿基切除修復(fù)錯(cuò)配修復(fù) ；雙鏈斷裂修復(fù)； 交聯(lián)修復(fù)；呼救性修復(fù)（SOS repair）六評(píng)價(jià)：遺傳學(xué)終點(diǎn)（哪些） ，成組配套的原則，Ames試驗(yàn)原理，微核的形成及其微核實(shí)驗(yàn)的遺傳學(xué)終點(diǎn)1.

42、遺傳學(xué)終點(diǎn):（書(shū)本）將致突變?cè)囼?yàn)的觀察終點(diǎn)稱為遺傳學(xué)終點(diǎn)（課件）試驗(yàn)觀察到的項(xiàng)目反映的各種事件的統(tǒng)稱遺傳學(xué)終點(diǎn)有4點(diǎn)：1）DNA堿基序列改變；(基因突變）2）染色體完整性改變；（染色體畸變）3）染色體分離改變（染色體組的畸變）4）DNA的原始損傷2.成套項(xiàng)目選擇原則1）同時(shí)反映基因突變、染色體畸變、染色體分離異常及原發(fā)性DNA損傷等每一類型的遺傳學(xué)終點(diǎn)2）物種：動(dòng)物、細(xì)胞；原核生物、真核細(xì)胞；細(xì)菌、動(dòng)物細(xì)胞、人體細(xì)胞3）體內(nèi)、體外試驗(yàn)配合4）體細(xì)胞、生殖細(xì)胞3.細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)(Ames試驗(yàn))鼠傷寒沙門氏菌原養(yǎng)型 正向突變 組氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株 (his+) 回復(fù)突變 (his-) 受試物4

43、.微核實(shí)驗(yàn)微核試驗(yàn)(Micronucleus test，MNT)目的：是觀察受試物能否產(chǎn)生微核的試驗(yàn)。檢出DNA斷裂劑和非整倍體誘變劑。原理：染色體或染色單體的無(wú)著絲點(diǎn)斷片或紡錘絲受損傷而丟失的整個(gè)染色體，在細(xì)胞分裂后期遺留在細(xì)胞質(zhì)中，末期之后，單獨(dú)形成一個(gè)或幾個(gè)規(guī)則的次核，比主核小，故稱微核。光學(xué)顯微鏡下可見(jiàn)。微核來(lái)源有二：斷片或無(wú)著絲粒染色體在細(xì)胞分裂后期不能定向移動(dòng)，而遺留在細(xì)胞質(zhì)中；有絲分裂毒物的作用使個(gè)別染色體或帶著絲粒的染色體環(huán)和斷片在細(xì)胞分裂后期被留在細(xì)胞質(zhì)中。第八章 外源化學(xué)物致癌作用一.化學(xué)致癌中的“癌”，發(fā)生原因中環(huán)境因素和化學(xué)致癌中的“癌” ，發(fā)生原因中環(huán)境因素、化學(xué)因素

44、的重要性 化學(xué)致癌作用：指化學(xué)物質(zhì)引起或誘導(dǎo)正常細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化并發(fā)展成為腫瘤的過(guò)程“癌”包括良性和惡性腫瘤。在引起腫瘤發(fā)生的原因中有80來(lái)自環(huán)境因素，人類腫瘤90%與環(huán)境因素有關(guān)，環(huán)境因素包括化學(xué)因素、物理因素、生物因素（病毒）等，而其中最主要的是化學(xué)因素。二.化學(xué)致癌三階段，各個(gè)階段的特點(diǎn) 1.引發(fā)階段-啟動(dòng)階段，第一步驟，化學(xué)致癌物對(duì)靶細(xì)胞DNA產(chǎn)生損傷作用經(jīng)細(xì)胞分裂增固定下成為突變細(xì)胞特點(diǎn)：化學(xué)致癌物不可逆地將正常細(xì)胞腫瘤細(xì)胞起始步驟引發(fā)劑或啟動(dòng)劑 相對(duì)迅速的過(guò)程2. 促長(zhǎng)階段-第二階段，促進(jìn)引發(fā)形成腫瘤細(xì)胞分裂生長(zhǎng)特點(diǎn)：促癌物的作用長(zhǎng)期、慢性引發(fā)物和促癌物單獨(dú)作用均不能引起腫瘤引發(fā)必

45、須發(fā)生在促長(zhǎng)之前引發(fā)作用是不可逆改變，促長(zhǎng)在早期階段促長(zhǎng)劑：具有促長(zhǎng)作用的化學(xué)物質(zhì)，稱為促長(zhǎng)劑。最經(jīng)典的促癌劑是佛波酯，它通過(guò)激活蛋白激酶刺激細(xì)胞增生而起作用。3.進(jìn)展階段-在腫瘤形成過(guò)程中，在促進(jìn)之中或之后，細(xì)胞表現(xiàn)出不可逆的遺傳學(xué)改變。標(biāo)志：遺傳不穩(wěn)定性增加和惡性變化，在形態(tài)上或功能代謝和行為方面逐漸表現(xiàn)出腫瘤的特征之前這里是個(gè)課本里的一個(gè)大表格,老師說(shuō)不要求掌握，課上她并沒(méi)有展開(kāi)講到。我就刪掉了三. 化學(xué)致癌機(jī)制：突變學(xué)說(shuō)和非致癌機(jī)制（大線條）體細(xì)胞突變學(xué)說(shuō)的證據(jù) （可能為多選題）體細(xì)胞突變學(xué)說(shuō)研究證據(jù)（P163）1.DNA加合物誘導(dǎo)基因突變2.大多數(shù)致癌物在致突變實(shí)驗(yàn)中(+)3. DN

46、A修復(fù)缺陷4.染色體畸變/基因組不穩(wěn)定性5.腫瘤細(xì)胞來(lái)源于單細(xì)胞克隆6.癌基因突變,抑癌基因突變或缺失非突變致癌機(jī)制（P164）1.表觀遺傳調(diào)控失常2.細(xì)胞增生異常3.免疫抑制4.內(nèi)分泌激素失衡5.過(guò)氧化酶增殖劑激活受體四.化學(xué)致癌的分子事件（大線條） 基因突變端粒調(diào)控與細(xì)胞永生化 -“端粒假說(shuō)”細(xì)胞周期調(diào)控紊亂-重要因子功能障礙細(xì)胞凋亡-干擾正常調(diào)亡過(guò)程五.化學(xué)致癌物的分類：依據(jù)動(dòng)物和人群的資料 大線條 依據(jù)致癌機(jī)制：大線條 （不要掌握什么物質(zhì)是何組致癌物，只要知道每組的定義）依據(jù)對(duì)人類和動(dòng)物致癌作用：IARC（International Agency for Research on Can

47、cer 國(guó)際癌癥研究所）組1：對(duì)人類是致癌物 對(duì)人類致癌性證據(jù)充分組2：對(duì)人類是很可能或可能致癌物2A，對(duì)人類很可能是致癌物，對(duì)人類致癌性證據(jù)有限，對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物致癌性證據(jù)充分2B，對(duì)人類是可能致癌物，指對(duì)人類致癌性證據(jù)有限，對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物致癌性證據(jù)并不充分或指對(duì)人類致癌性證據(jù)不足，對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物致癌性證據(jù)充分組3：現(xiàn)有的證據(jù)不能對(duì)人類致癌性進(jìn)行分類組4：對(duì)人類可能是非致癌物美國(guó)EPA的分類方法：A, B1, B2, C, D, E依據(jù)致癌機(jī)制：1.遺傳毒性致癌物：進(jìn)入細(xì)胞后與DNA共價(jià)結(jié)合，引起機(jī)體遺傳物質(zhì)改變，導(dǎo)致癌變的化學(xué)物質(zhì)。遺傳毒理學(xué)試驗(yàn)可檢測(cè)該類致癌物。1）直接致癌物：本身具有直接致癌作用，在

48、體內(nèi)不需要代謝活化即可致癌：各種烷化劑（多為親電子反應(yīng)物），內(nèi)酯類，烯化環(huán)氧化物，活性鹵代烴類等2）間接致癌物：本身并不直接致癌，必須在體內(nèi)經(jīng)代謝轉(zhuǎn)化，其所形成的代謝產(chǎn)物才具致癌作用：多環(huán)芳烴、芳香胺類化合物等3）無(wú)機(jī)致癌物：可能是親電子劑，或通過(guò)選擇性改變DNA復(fù)制保真性，導(dǎo)致DNA改變：鎳、鉻、鎘、鈦、砷等2.表觀遺傳毒性致癌物：不作用于機(jī)體遺傳物質(zhì)的化學(xué)致癌物1）促長(zhǎng)劑（具有促長(zhǎng)作用的物質(zhì)） 增強(qiáng)致癌物的致癌作用 如佛波酯及其衍生物、苯巴比妥等2）內(nèi)分泌調(diào)控劑 改變內(nèi)分泌系統(tǒng)平衡及細(xì)胞正常分化，起促長(zhǎng)劑作用 如乙烯雌酚、雌二醇、硫脲3）免疫抑制劑 對(duì)病毒誘導(dǎo)的惡性轉(zhuǎn)化起增強(qiáng)作用，如嘌呤同

49、型物4）細(xì)胞毒劑 引起細(xì)胞死亡，導(dǎo)致細(xì)胞增殖活躍及癌發(fā)展如次氮基三乙酸及氯仿5）過(guò)氧化物酶體增殖劑 導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)氧自由基過(guò)量生成如氯貝丁酯，鄰苯二甲酸乙基己酯6）固態(tài)物質(zhì) 可能涉及細(xì)胞毒性 如塑料、石棉等3. 未分類 如二噁烷、美舍吡倫助致癌物：不具有引發(fā)作用和促長(zhǎng)作用，但促進(jìn)引發(fā)作用和增強(qiáng)促長(zhǎng)作用如乙醇、二氧化硫六.化學(xué)致癌的評(píng)價(jià)：確定致癌的基本方法（短期實(shí)驗(yàn)（初篩），哺乳動(dòng)物致癌實(shí)驗(yàn)，流行病學(xué)資料），初篩需要哪些實(shí)驗(yàn)，長(zhǎng)期致癌實(shí)驗(yàn)：動(dòng)物種屬、年齡，性別、數(shù)量、劑量設(shè)計(jì) 染毒時(shí)間，觀察指標(biāo)（一）化學(xué)致癌物篩查的基本方法：人群流行病學(xué)調(diào)查（確定人類致癌物的唯一手段）、動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果是評(píng)價(jià)化學(xué)物致癌

50、危險(xiǎn)性的兩類主要證據(jù)。但是艱巨、耗時(shí)、復(fù)雜。目前通常先進(jìn)行化學(xué)物構(gòu)效分析、致突變組合試驗(yàn)、細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化試驗(yàn)等對(duì)化學(xué)物的致癌性進(jìn)行初步的篩查。定量構(gòu)效關(guān)系（QSAR）：利用理論計(jì)算和統(tǒng)計(jì)分析工具來(lái)研究化合物結(jié)構(gòu)與其生物學(xué)效應(yīng)之間的定量關(guān)系，從有害物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)來(lái)評(píng)估化合物潛在的致癌危險(xiǎn)性 (二)哺乳動(dòng)物致癌實(shí)驗(yàn)1.哺乳動(dòng)物短期致癌試驗(yàn)短期，非終生，靶器官為單個(gè)，發(fā)展迅速常用試驗(yàn)：小鼠肺腫瘤誘發(fā)試驗(yàn)，小鼠皮膚腫瘤誘發(fā)試驗(yàn)，雌性大鼠乳腺癌誘發(fā)試驗(yàn)和大鼠肝轉(zhuǎn)變?cè)钤囼?yàn)，國(guó)際上上述試驗(yàn)成為中期致癌試驗(yàn)。方法：給予受試物后，多次持續(xù)給予促長(zhǎng)劑，在20-30周左右觀察局部(如肺、肝、皮膚和乳腺等)組織有無(wú)

51、腫瘤意義：陽(yáng)性結(jié)果意義與長(zhǎng)期動(dòng)物致癌試驗(yàn)相當(dāng)；陰性的意義較差（試驗(yàn)期短，檢查器官有限）I致突變?cè)囼?yàn)?zāi)康模撼醪胶Y選致癌物依據(jù)：化學(xué)物的致突變性與致癌性相聯(lián)系，即大多數(shù)化學(xué)致癌物具有致突變性，大多數(shù)非致癌物無(wú)致突變性。結(jié)果：檢出遺傳毒性致癌物，非遺傳毒性致癌物（假陰性）和遺傳毒性非致癌物（假陽(yáng)性）Ames試驗(yàn)II細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)惡性轉(zhuǎn)化：外源因素對(duì)在體外培養(yǎng)的細(xì)胞所誘發(fā)的惡性表型改變，包括細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞增殖速度、生長(zhǎng)特性、染色體畸變等變化，裸鼠荷瘤試驗(yàn)（+）目的：揭示惡性表型改變觀察終點(diǎn)：細(xì)胞惡變，可檢出非遺傳毒性致癌物和遺傳毒性致癌物，常用3類細(xì)胞：原代細(xì)胞；動(dòng)物細(xì)胞系；病毒感染的永生化細(xì)胞2.哺乳

52、動(dòng)物長(zhǎng)期致癌試驗(yàn)經(jīng)典方法，哺乳動(dòng)物終生試驗(yàn)與化學(xué)致癌的長(zhǎng)期性特點(diǎn)一致，易于控制條件大鼠致癌試驗(yàn)，試驗(yàn)期為2年，相當(dāng)于人類大半生的時(shí)間局限性：結(jié)果外推至人存在不肯定性1) 動(dòng)物選擇選擇依據(jù)：對(duì)誘發(fā)腫瘤的易感性物種：由受試物特定靶器官，自發(fā)腫瘤率年齡：選擇斷乳后的性別：雌雄各半數(shù)量：每組雌雄各50只2) 劑量設(shè)計(jì)一般設(shè)3個(gè)染毒劑量組和1個(gè)對(duì)照組染毒劑量組：低 中 高（MTD）最高劑量應(yīng)盡可能加大，以使染毒組的腫瘤發(fā)生率顯著地高于對(duì)照組的腫瘤自發(fā)率3) 試驗(yàn)期限和染毒時(shí)間原則要求長(zhǎng)期或終生一般情況下小鼠最少1.5年，大鼠2年4) 結(jié)果的觀察、分析和評(píng)定腫瘤發(fā)生率：最重要，包括腫瘤總發(fā)生率、惡性腫瘤總

53、發(fā)生率、各器官或組織腫瘤發(fā)生率和惡性腫瘤發(fā)生率，以及各種類型腫瘤發(fā)生率多發(fā)性：指一個(gè)動(dòng)物出現(xiàn)多個(gè)腫瘤或一個(gè)器官出現(xiàn)多個(gè)腫瘤 一般計(jì)算每一組的平均腫瘤數(shù)潛伏期：通常用各組第一個(gè)腫瘤出現(xiàn)的時(shí)間作為該組潛伏期（適用于能在體表觀察的腫瘤）對(duì)于內(nèi)臟腫瘤的潛伏期，則需分枇剖殺，計(jì)算平均潛伏期陽(yáng)性結(jié)果：存在劑量反應(yīng)關(guān)系，并與對(duì)照組差異顯著時(shí)；或染毒組發(fā)生對(duì)照組未出現(xiàn)的腫瘤類型。僅在較高劑量才出現(xiàn)與對(duì)照組顯著性差異，其毒理學(xué)意義較小。陰性結(jié)果：認(rèn)定應(yīng)非常慎重-陰性結(jié)果判定的最低要求：兩個(gè)種屬的動(dòng)物；兩種性別；包括最大耐受劑量；每組動(dòng)物數(shù)大于等于50只（三）人群流行病學(xué)調(diào)查流行病學(xué)資料具有決定意義，確定人類致癌

54、物唯一手段方法：發(fā)現(xiàn)潛在人類致癌物（動(dòng)物致癌試驗(yàn)、描述流行病學(xué)調(diào)查或臨床觀察）分析性流行病學(xué)調(diào)查（隊(duì)列調(diào)查、病例對(duì)照調(diào)查）分子流行病學(xué)（生物標(biāo)志物）七.重要概念的區(qū)分：直接、間接致癌物，前、近，終致癌物 直接、間接致癌物：第五題有前致癌物：間接致癌物在代謝活化前也稱為前致癌物近致癌物：活化過(guò)程的中間產(chǎn)物稱為近致癌物終致癌物：近致癌物進(jìn)一步代謝活化生成的產(chǎn)物稱為終致癌物。通常是帶正電子的親電子物質(zhì)八.致癌致突變的關(guān)系大多數(shù)化學(xué)致癌物具有致突變性，大多數(shù)非致癌物無(wú)致突變性。第九章 發(fā)育毒性與致畸作用一、發(fā)育毒性，發(fā)育毒理學(xué) 發(fā)育毒性的四種主要表現(xiàn) 出生缺陷 胚體-胎體毒性 1.發(fā)育毒性：出生前后接

55、觸有害因素，子代個(gè)體發(fā)育為成體之前誘發(fā)的各種有害影響。能造成發(fā)育毒性的物質(zhì)稱為發(fā)育毒物，應(yīng)是在未誘發(fā)母體毒性的劑量下產(chǎn)生發(fā)育毒性的物質(zhì)。2.發(fā)育毒理學(xué)：研究出生前暴露于環(huán)境有害因子導(dǎo)致的異常發(fā)育結(jié)局及有關(guān)的作用機(jī)制、發(fā)病原理、影響因素和毒物動(dòng)力學(xué)等。3.發(fā)育毒性的四種主要表現(xiàn)：1）發(fā)育生物體死亡：早早孕丟失、自然流產(chǎn)、死胎2）生長(zhǎng)改變：生長(zhǎng)遲緩3）結(jié)構(gòu)異常：畸形4）功能缺陷：生理、生化、免疫、行為、智力等異常4.出生缺陷：指嬰兒出生前即已形成的發(fā)育障礙。包括形態(tài)結(jié)構(gòu)異常(畸形)和功能缺陷(如智力低下，代謝和行為的異常)。5. 胚體-胎體毒性孕體：從受精卵直到出生的整個(gè)發(fā)育生物體，包括胚胎兒和胎膜。胚體毒性：對(duì)著床前后直到器官形成期結(jié)束的孕體所產(chǎn)生的毒性胎體毒性(