項(xiàng)目名稱基于毛細(xì)管電泳技術(shù)篩查中藥擴(kuò)血管活性成分的研

1、項(xiàng)目名稱：基于毛細(xì)管電泳技術(shù)篩查中藥擴(kuò)血管活性成分的研究和應(yīng)用推薦單位（專家）：陜西省教育廳項(xiàng)目簡介：項(xiàng)目立項(xiàng)背景：近年來，人們廣泛應(yīng)用生物模型及藥物作用靶標(biāo)進(jìn)行藥物篩選的研究工作，已經(jīng)建立的藥物篩選模型主要有整體動(dòng)物模型、受體模型、細(xì)胞模型、基因芯片技術(shù)和色譜技術(shù)等。這些方法各具優(yōu)勢，也存在各自的不足，其共同缺陷是樣品須經(jīng)過純化處理、篩選周期長等。雖然親和色譜等方法也可獲得藥物-靶標(biāo)之間的結(jié)合常數(shù)，但存在受體固定相制備成本較大的缺陷，而毛細(xì)管電泳（CE）微量操作的特征恰好解決了這一問題；且不需要進(jìn)行樣品純化、分析速度快、可在生理環(huán)境或接近生理環(huán)境下運(yùn)行，可獲得較為真實(shí)的生物分子間相互作用信息

2、。有望發(fā)展成為一種非常有潛力、高效、準(zhǔn)確的藥物篩選新手段。然而，CE在藥物與生物分子相互作用研究中還面臨一些問題：從研究對象上講，對生物酶及運(yùn)輸?shù)鞍祝ㄑ灏椎鞍祝┑难芯枯^為廣泛，但對藥物在人體內(nèi)的主要作用靶點(diǎn)即受體的研究還有待深入；從CE本身來講，研究藥物-受體相互作用時(shí)存在受體經(jīng)非定向固定化反應(yīng)鍵合到毛細(xì)管內(nèi)壁后可能喪失活性等不足之處。為了克服受體等功能蛋白非定向固定化產(chǎn)生的弊端，其定向固定化已成為發(fā)展方向，研究結(jié)果表明，生物大分子的定向固定化可以顯著提高其穩(wěn)定性和生物活性。但是，該方法尚未應(yīng)用到毛細(xì)管電泳藥物篩選研究中。科學(xué)價(jià)值：本項(xiàng)目通過2-AR分子胞外結(jié)構(gòu)域N-末端含有的2個(gè)糖基（此區(qū)

3、域與配體結(jié)合的特異性無關(guān)且遠(yuǎn)離跨膜區(qū)），將其定向鍵合在毛細(xì)管內(nèi)壁，建立了受體在毛細(xì)管內(nèi)壁的定向鍵合新方法；并建立了定向固定化受體鍵合量的定量測定新方法；表征了定向和非定向固定化受體的生物活性；以與受體有特異性及非特異性作用的藥物為例，闡明了受體定向鍵合在藥物篩選中的先進(jìn)性、選擇性、重復(fù)性和可靠性；建立了歸一化容量因子、結(jié)合常數(shù)等多參數(shù)方法評價(jià)受體對藥物選擇性作用；以具有明確抗心血管疾病功效但藥效物質(zhì)尚待深入研究的赤芍為例，對其擴(kuò)血管活性成分進(jìn)行篩選，得出了各提取物與2-AR作用活性強(qiáng)弱順序，發(fā)現(xiàn)B18-19-與2-AR之間存在較強(qiáng)作用力，并結(jié)合在線質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。建立以G-蛋白偶聯(lián)受

4、體毛細(xì)管電泳為核心的擴(kuò)血管活性成分篩選新方法，可為藥物活性成分的毛細(xì)管電泳高通量篩選研究提供思路，對于合理解釋藥物的作用機(jī)理及開發(fā)新型抗心血管疾病藥物具有重要意義；可加快抗心血管疾病藥物的研發(fā)步伐，降低心血管疾病死亡病例。同行引用及評價(jià)情況： 在此基礎(chǔ)上，發(fā)表相關(guān)論文40余篇，其中SCI檢索13篇，EI 3篇，專著1部；培養(yǎng)青年教師3人，1人博士在讀，培養(yǎng)本科生50余名；所發(fā)論文被Analytical Chemistry、Talanta、Journal of Chromatography A等權(quán)威期刊引用，其中浙江大學(xué)Wang Yi教授在molecule期刊指出該項(xiàng)目所建方法是從天然產(chǎn)物中篩選

5、活性組分的一種非常有潛力的方法；意大利Sassart大學(xué)Zinellu教授在權(quán)威期刊Journal of Chromatography A中指出本項(xiàng)目所建方法為研究相互作用的有效方法，其他論文也被多次引用，證明了該項(xiàng)目研究成果的先進(jìn)性。主要完成人情況表：姓名劉春葉技術(shù)職稱教授排名第一工作單位西安醫(yī)學(xué)院完成單位西安醫(yī)學(xué)院曾獲科技獎(jiǎng)勵(lì)情況2015年3月作為第一完成人獲得陜西省教育廳頒發(fā)的陜西高等學(xué)?？茖W(xué)技術(shù)獎(jiǎng)二等獎(jiǎng)（項(xiàng)目名稱：心血管類藥物的提取分離、活性評價(jià)及篩選研究）。本人對本項(xiàng)目主要學(xué)術(shù)貢獻(xiàn)：（限300字）建立了毛細(xì)管內(nèi)壁2-AR鍵合量的定量分析方法；采用親和毛細(xì)管電色譜法，以歸一化容量因子、

6、結(jié)合常數(shù)、結(jié)合位點(diǎn)數(shù)等為參數(shù)，對藥物及赤芍提取物與受體的相互作用進(jìn)行測定，從而對活性進(jìn)行評價(jià)。姓名張劍技術(shù)職稱講師排名第二工作單位西安醫(yī)學(xué)院完成單位西安醫(yī)學(xué)院曾獲科技獎(jiǎng)勵(lì)情況2015年3月作為第二完成人獲得陜西省教育廳頒發(fā)的陜西高等學(xué)?？茖W(xué)技術(shù)獎(jiǎng)二等獎(jiǎng)（項(xiàng)目名稱：心血管類藥物的提取分離、活性評價(jià)及篩選研究）。本人對本項(xiàng)目主要學(xué)術(shù)貢獻(xiàn)：（限300字）承擔(dān)受體非定向鍵合條件的優(yōu)化，包括反應(yīng)物濃度、反應(yīng)溫度、微波功率、微波時(shí)間等對受體鍵合量的影響；根據(jù)靶點(diǎn)2-AR受體已知陽性藥物為參考，嘗試合成系列待篩選化合物。姓名苗延青技術(shù)職稱副教授排名第三工作單位西安醫(yī)學(xué)院完成單位西安醫(yī)學(xué)院曾獲科技獎(jiǎng)勵(lì)情況20

7、15年3月作為第三完成人獲得陜西省教育廳頒發(fā)的陜西高等學(xué)校科學(xué)技術(shù)獎(jiǎng)二等獎(jiǎng)（項(xiàng)目名稱：心血管類藥物的提取分離、活性評價(jià)及篩選研究）。本人對本項(xiàng)目主要學(xué)術(shù)貢獻(xiàn)：（限300字）承擔(dān)受體定向鍵合條件的優(yōu)化，包括反應(yīng)物濃度、反應(yīng)溫度、微波功率、微波時(shí)間等對受體鍵合量的影響；根據(jù)靶點(diǎn)2-AR受體已知陽性藥物為參考，嘗試合成系列待篩選化合物；承擔(dān)了鍵合毛細(xì)管的紅外表征、掃描電鏡等定性表征，并對所得結(jié)果進(jìn)行分析。6 / 6姓名衛(wèi)引茂技術(shù)職稱教授排名第四工作單位西北大學(xué)完成單位西北大學(xué)曾獲科技獎(jiǎng)勵(lì)情況2015年3月作為第四完成人獲得陜西省教育廳頒發(fā)的陜西高等學(xué)?？茖W(xué)技術(shù)獎(jiǎng)二等獎(jiǎng)（項(xiàng)目名稱：心血管類藥物的提取分

8、離、活性評價(jià)及篩選研究）。本人對本項(xiàng)目主要學(xué)術(shù)貢獻(xiàn)：（限300字）從家兔體內(nèi)獲取受體2-AR受體并進(jìn)行純化，指導(dǎo)受體在毛細(xì)管內(nèi)壁的定向鍵合。姓名張雪嬌技術(shù)職稱副教授排名第五工作單位西安醫(yī)學(xué)院完成單位西安醫(yī)學(xué)院曾獲科技獎(jiǎng)勵(lì)情況2015年3月作為第三完成人獲得陜西省教育廳頒發(fā)的陜西高等學(xué)校科學(xué)技術(shù)獎(jiǎng)二等獎(jiǎng)（項(xiàng)目名稱：心血管類藥物的提取分離、活性評價(jià)及篩選研究）。本人對本項(xiàng)目主要學(xué)術(shù)貢獻(xiàn)：（限300字）承擔(dān)受體定向鍵合條件的優(yōu)化，包括反應(yīng)物濃度、反應(yīng)溫度、微波功率、微波時(shí)間等對受體鍵合量的影響；根據(jù)靶點(diǎn)2-AR受體已知陽性藥物為參考，嘗試合成系列待篩選化合物；承擔(dān)了鍵合毛細(xì)管的紅外表征、掃描電鏡等定

9、性表征，并對所得結(jié)果進(jìn)行分析。姓名楊黎燕技術(shù)職稱教授排名第六工作單位西安醫(yī)學(xué)院完成單位西安醫(yī)學(xué)院曾獲科技獎(jiǎng)勵(lì)情況本人對本項(xiàng)目主要學(xué)術(shù)貢獻(xiàn)：（限300字）以索氏提取法對赤芍中活性成分進(jìn)行分離提??；利用Box-Behnken 中心組合試驗(yàn)設(shè)計(jì)和響應(yīng)面分析法，對提取條件進(jìn)行優(yōu)化；對藥物與受體相互作用進(jìn)行研究。姓名張寒技術(shù)職稱副教授排名第七工作單位西安醫(yī)學(xué)院完成單位西安醫(yī)學(xué)院曾獲科技獎(jiǎng)勵(lì)情況2015年3月作為第七完成人獲得陜西省教育廳頒發(fā)的陜西高等學(xué)校科學(xué)技術(shù)獎(jiǎng)二等獎(jiǎng)（項(xiàng)目名稱：心血管類藥物的提取分離、活性評價(jià)及篩選研究）。本人對本項(xiàng)目主要學(xué)術(shù)貢獻(xiàn)：（限300字）確定以赤芍提取物為心腦血管藥物篩選目標(biāo)

10、，并參與赤芍、丹參的微波輔助提取方法的優(yōu)化與評價(jià)。代表性論文專著目錄1.不超過10篇代表性論文、專著序號論文、專著名稱/刊名/作者影響因子年卷頁碼年(卷):頁碼發(fā)表年月通訊作者/第一作者(中文名)SCI他引次數(shù)他引總次數(shù)是否國內(nèi)完成1毛細(xì)管電泳在藥物分析中的應(yīng)用，西北工業(yè)大學(xué)出版社，劉春葉20132013.09劉春葉2A Microfluidic Paper-Based Device to Assess Acetylcholinesterase Activity. . Electrophoresis. Liu CY, Gomez F.A.2.742017, 38, 1002-10062017.

11、04劉春葉22否3Research on drug-receptor interactions and prediction of drug activity via oriented immobilized receptor capillary electrophoresis. Electrophoresis. Liu C.Y., Zhang X.J., Jing H., Miao Y.Q., Zhao L.Z., Han Y., Cui C.X.2.742015, 36(19): 2433-24412015.09劉春葉22是4Modified CaO Catalyzed Heterogen

12、eous Synthesis of 3,5-diphenyl-4,5-dihydroisoxazole. J. J. Chem. Soc. Pak. Miao Y.Q., Zhang X.Q., Liu C.Y.0.332015, 37(4): 739-7452015.04苗延青00是5Determination of Polymer Molecular weight and gyration radius of DNA by Capillary Electrophoresis. Analytical Letters . Liu C.Y., Wei Y.M., Yang L.Y., Yang

13、L.Y., Chen W.1.152013, 46(5): 776-7892014劉春葉00是6nteraction between Isoprenaline Hydrochloride and BSA in Capillary Zone Electrophoresis and Affinity Capillary Electrophoresis. J. Pharmazie. Liu C.Y., Wei Y.M., Miao Y.Q., Miao Y.Q., Zhang Y.Y.1.002012, 67: 839-8432012劉春葉55是7Effects of frying and micr

14、owave heating on decomposition of benzoyl peroxide in flour. Cereal Chemistry. Liu C.Y., Zhang J., Bei Q., Miao Y.Q., Yang L.Y.1.422011, 88(4): 352-3552011劉春葉11是8Tris(3-hydroxyimino-1-methylindolin-2-one) monohydrate. Acta Crystallographica Section E. Miao YQ, Zhang XQ, Liu CY, You Jing.0.402011, E67, o12912011苗延青33是9Poly(m5-3,5-dinitrobenzoato)rubidium.