《論文_中藥成分生化轉(zhuǎn)化研究(定稿)》

1、淮北師范大學(xué)2008屆學(xué)士學(xué)位論文中藥成分生化轉(zhuǎn)化技術(shù)的研究學(xué)院、專業(yè)化學(xué)與材料科學(xué)學(xué)院化學(xué)研究方向分析化學(xué)學(xué)生姓名胡曉龍學(xué)號(hào)20081441066指導(dǎo)教師姓名 皆言勤指導(dǎo)教師職稱2012 年 2 月 24 0中藥成分生化轉(zhuǎn)化技術(shù)研究摘要： 生物轉(zhuǎn)化是實(shí)現(xiàn)中藥現(xiàn)代化的重要途徑之一。闡明了生物轉(zhuǎn)化中藥化學(xué)成分的研 究?jī)?nèi)容和應(yīng)用范圍，討論了 li前存在的問題和解決辦法,并對(duì)牛物轉(zhuǎn)化中藥化學(xué)成分的發(fā)展 趙勢(shì)進(jìn)行了展望。關(guān)鍵詞: 生物轉(zhuǎn)化中藥化學(xué)研究traditional chinese medicine composition biochemical transformations technolo

2、gy researchabstract: biological transformation is to realize the modernization of traditional chinese medicine one of the important ways to clarify the biological transformation. study of the chemical ingredients of traditional chinese medicine content and application scope, discussed the existing p

3、roblems and solutions, and the biological transformation the trend of the development of traditional chinese medicine chemical composition was discussed keywords： bioactive compounds; biotransformation; traditional chinese medicine;目錄摘要2abstract 3生化轉(zhuǎn)化技術(shù)定義41生化轉(zhuǎn)化的研究方法42生化轉(zhuǎn)化的影響因素52.1轉(zhuǎn)化反應(yīng)的時(shí)間和溫度52 . 2底物添

4、加法52.3酶誘導(dǎo)劑的使用62.4酶抑制劑 63.中跖成分的牛化化學(xué)研究 63.1蟾賒帑烯類化合物的生物轉(zhuǎn)化研究732砧類化合物的生物轉(zhuǎn)化研究83.2.1.倍半菇的生物轉(zhuǎn)化83.22 二菇類10323三祜類研究 10.3.3生物堿的生化轉(zhuǎn)化研究 114中藥活性成分研究展望115致謝126參考文獻(xiàn)13生化轉(zhuǎn)化定義： 以外源性的天然或合成的有機(jī)化合物為底物，添加至處于生長狀態(tài) 的生物體系或酶體系中，在適宜的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，使得底物與生物體系中的酶發(fā)生相互作 用，從而產(chǎn)生結(jié)構(gòu)改變，這一過程稱為生物轉(zhuǎn)化(biotransformation),亦稱生物催化 (biocatalysis),其實(shí)質(zhì)是酶催化反

5、應(yīng)。它不同于生物降解與生物合成，牛物降解則是將大 分子的底物分解為簡(jiǎn)單的化合物，而牛物合成是利用生物體系口身特有的酶體系將簡(jiǎn)單結(jié)構(gòu) 的前體化合物轉(zhuǎn)變?yōu)榕Ｎ矬w自身所固有的次生代謝產(chǎn)物的一系列牛物反應(yīng)。用于轉(zhuǎn)化研究的 生物體系主要有真菌、細(xì)菌、藻類、植物懸浮細(xì)胞、組織或器官以及動(dòng)物細(xì)胞、組織等，其 中應(yīng)用最多的是植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)體系和微生物體系。生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)具有選擇性強(qiáng)、催化效 率高、反應(yīng)條件溫和、反應(yīng)種類多以及環(huán)境污染小等特點(diǎn)，并且往往nj以用于催化有機(jī)合成 中難以完成的化學(xué)反應(yīng)。利用生物體對(duì)底物作用的多樣性，可以豐富屮藥活性化合物的結(jié)構(gòu), 從屮找到活性更好的先導(dǎo)化合物，從而進(jìn)行新線的研究開發(fā)。

6、目前釆用牛物轉(zhuǎn)化技術(shù)已經(jīng) 獲取了人量結(jié)構(gòu)新穎的化合物，這其中包括眾多的具有較好活性的天然產(chǎn)物的衍生物，為新 藥的研制提供了極為有價(jià)值的先導(dǎo)化合物。有些生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)還達(dá)到了工業(yè)化生產(chǎn)規(guī)模，創(chuàng) 造了巨大的經(jīng)濟(jì)效益。本文旨在結(jié)合近年來本課題組在中藥活性成分牛物轉(zhuǎn)化方面所取得的研究成果，對(duì)牛物轉(zhuǎn) 化的研究方法與思路進(jìn)行探討。1生物轉(zhuǎn)化的研究方法一般的生物轉(zhuǎn)化研究過程是先將所使用的牛物體系接種于培養(yǎng)液小進(jìn)行預(yù)培養(yǎng)，調(diào)節(jié)生 物體的生長狀態(tài)，使其中的酶系具有較高的反應(yīng)活性，然后投加底物。底物町以固體粉末的 形式加入，亦可以適量的溶劑溶解后加入。若底物為脂溶性成分，可以用乙醇、丙酮、二甲 某亞呱等有機(jī)溶劑溶解

7、,但有機(jī)溶劑在培養(yǎng)液屮的終濃度不宜超過1%,以免彫響酶的活性。 底物的加入量一般為每升培養(yǎng)液中加入30loomg。轉(zhuǎn)化時(shí)間一般為28d,有的則需持 續(xù)十余天。生物轉(zhuǎn)化是一個(gè)動(dòng)態(tài)的過程，隨著轉(zhuǎn)化時(shí)間的延長，產(chǎn)物的種類和轉(zhuǎn)化率會(huì)不斷 發(fā)生變化。此外，隨培養(yǎng)時(shí)間的延長，生物體系自身分泌的物質(zhì)也有所不同，會(huì)對(duì)轉(zhuǎn)化結(jié)杲 產(chǎn)牛影響。所以，培養(yǎng)液的后處理方法的使用也很重要。傳統(tǒng)的牛物轉(zhuǎn)化方法主要包括： 分批培養(yǎng)轉(zhuǎn)化法；靜止細(xì)胞轉(zhuǎn)化法；應(yīng)用微生物砲子進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化，空白背景干擾小, 生物轉(zhuǎn)化活力較高；應(yīng)用固定化細(xì)胞進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化，可以反復(fù)使用，具有產(chǎn)物提取簡(jiǎn)單， 便于自動(dòng)化和大規(guī)模的工業(yè)化生產(chǎn)的優(yōu)勢(shì)；應(yīng)用滲透細(xì)胞

8、進(jìn)行牛物轉(zhuǎn)化，適合于胞內(nèi)酶作 用的生物轉(zhuǎn)化；利用酶進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化，具有專-性強(qiáng)的特點(diǎn)。2生物轉(zhuǎn)化的影響因素生物轉(zhuǎn)化本質(zhì)上是一個(gè)酶促反應(yīng)，它受到諸多因素的制約，如轉(zhuǎn)化時(shí)間、溫度、底物添加方式、酶的誘導(dǎo)劑、抑制劑以及生長調(diào)節(jié)劑的加入都對(duì)轉(zhuǎn)化冇一定的影響?，F(xiàn)分述如下:2.1轉(zhuǎn)化反應(yīng)的時(shí)間和溫度酶催化反應(yīng)，都有一個(gè)最佳的反應(yīng)時(shí)間，時(shí)間過短轉(zhuǎn)化不完全，時(shí)間太長生物體衰老從 而導(dǎo)致晦的活力下降甚至失活。轉(zhuǎn)化時(shí)間因轉(zhuǎn)化反應(yīng)的種類、微牛物牛長速度和嗨的活性不 同而有所差別，可以利用iiuc等分析手段，進(jìn)行動(dòng)態(tài)檢測(cè)來獲取一個(gè)最佳的轉(zhuǎn)化時(shí)間。同 樣，溫度也影響著酶的催化能力。一般來說,最為簡(jiǎn)單的選擇轉(zhuǎn)化溫度的方法就

9、是根據(jù)生物 體系的牛氏狀態(tài)即牛物體的最適牛心溫度。2.2底物添加方法a.水溶性底物相對(duì)來說容易轉(zhuǎn)化，但應(yīng)注意底物的添加量、添加速度和底物的毒性大小。b.脂溶性底物的添加方法主要有三種：溶于適量有機(jī)溶劑中投料、細(xì)粉末直接投藥、應(yīng)用 葉溫-80等表面活性劑助溶后投料。2.3酶誘導(dǎo)劑的使用酶可分為組成酶和誘導(dǎo)酶兩類，組成酶是在細(xì)胞的生長過程中產(chǎn)生的酶類，并參與生物 體自身的新陳代謝，而誘導(dǎo)酶只有衣加入一定的誘導(dǎo)物后才會(huì)產(chǎn)生或明顯地增加。對(duì)于組成 酶來說，牛物轉(zhuǎn)化的酶量主耍與牛物體的數(shù)量和牛長狀態(tài)有關(guān)。誘導(dǎo)酶則除了與牛物量有關(guān) 以外，還與酶誘導(dǎo)劑的使用直接相關(guān)，通常'是在對(duì)數(shù)生長前期加入較為合

10、適。外源性底物對(duì) 轉(zhuǎn)化酶多具有誘導(dǎo)作用，所以可在培養(yǎng)棊中預(yù)先加入微量的底物進(jìn)行酶誘導(dǎo)，可以提高轉(zhuǎn)化 效率。2.4酶抑制劑在確切了解參與轉(zhuǎn)化的酶系統(tǒng)性質(zhì)的詢提下，可以適當(dāng)加入抑制劑來抑制轉(zhuǎn)化過程中的 副反應(yīng)，以保證獲得足夠的目的產(chǎn)物。例如應(yīng)用微生物降解膽固醇側(cè)鏈的方法來制取帑體激 素類紗物亜要中間體雄笛二酮過程屮添加二價(jià)鐵的鰲合劑來抑制開裂笛體母核酶的副反應(yīng)。 再如，1-氨基苯并三1*(l-anunobenzotriazole)可以作為細(xì)胞色素p-450酶和過氧化酶的抑 制劑，來抑制氧化反應(yīng)的發(fā)生。此外，轉(zhuǎn)化液的ph、光照、通氣量和培養(yǎng)基的選擇等培養(yǎng)條件均會(huì)對(duì)轉(zhuǎn)化效率產(chǎn)牛較 人的影響。3中藥活性

11、成分的生化轉(zhuǎn)化研究中藥的活性成分是中藥治療與預(yù)防疾病的物質(zhì)基礎(chǔ)，也是藥物化學(xué)家尋找新的藥理活性 分子的重耍來源。近一個(gè)多世紀(jì)以來，隨著分離技術(shù)的h益成熟，人們己經(jīng)從中跖中分離純 化出數(shù)以萬計(jì)的活性化合物，其屮許多化合物被成功地開發(fā)成為藥物，諸如利血平、地高辛、 青養(yǎng)素、麻黃堿、紫杉醉等。但很多中藥活性成分由于含量低、藥理作用不顯著、毒副作用 大、水溶性差等原因極大地限制了它們的廣泛應(yīng)用。為了克服這些缺點(diǎn)，0 2000年來，作 者所在課題組對(duì)一些常用中藥屮的活性化合物進(jìn)行了生物轉(zhuǎn)化研究，其屮包括帑體類、詁類 和生物堿類化合物，發(fā)現(xiàn)了數(shù)目眾多的新化合物，為豐富天然產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)，以及進(jìn)一步發(fā)現(xiàn) 高效低

12、毒的藥物，提供了良好的物質(zhì)基礎(chǔ)。3.1蟾賒笛烯類化合物的生物轉(zhuǎn)化研究蟾賒曲烯(bufadienolides)是中藥贍酥(來源于中華大蟾賒bufo bufo gargarizans cantor或黑眶蟾賒bufo melanostictus schneider的干燥分泌物)的主要有效成分,其 中華蟾毒精(cinobufagin) 蟾毒靈(bufalin)及脂蟾毒配基(resibufogenin)在蟾酥 一藥材中的含量故高，三者約占其十重的10%。蟾賒笛烯是一類g- 17位連接六元不飽和內(nèi) 酯環(huán)的猙體化合物，具有強(qiáng)心、局部麻醉、抗休克、抗病毒等多種生理活性，近年乂發(fā)現(xiàn)有 顯著的抗腫瘤作用，受到了國

13、內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注。研究表明，蟾賒箔烯類化合物對(duì)腫瘤細(xì) 胞的多在io"10血1間，其小以嫦毒靈的活性尤為顯著。但由于此類化合物對(duì)人體有一定的毒副作川，主要表現(xiàn)為呼吸急促和心律不齊，過量則 會(huì)因麻痹而致死亡，從而嚴(yán)車影響了其臨床應(yīng)用。此外，游離型蟾賒笛烯一般水溶性較差, 也阻礙其在臨床上的應(yīng)用。因此我們利用微牛物和植物細(xì)胞懸浮體系對(duì)華蟾毒精、蟾毒靈、 脂蟾毒配基、蟾毒它靈進(jìn)行了生物轉(zhuǎn)化研究，獲得了 80余個(gè)轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，其屮50余個(gè)為新化合物。其中c-7b、0-15及c-16 a等位點(diǎn)的疑基取代對(duì)于天然瞪賒綃烯而言均屬罕見, 并初步總結(jié)了蟾賒毎烯的細(xì)胞毒活性構(gòu)效關(guān)系。還發(fā)現(xiàn)鏈格砲(alte

14、rnaria altemata)對(duì) 華蟾毒精的輕棊化反應(yīng)具有很強(qiáng)的選擇性，主要產(chǎn)物均在c- 12 b發(fā)生拜基化，該反應(yīng)亦為 mucor展真菌對(duì)蠟毒靈及脂贍毒配基的主要轉(zhuǎn)化反應(yīng)z -，此反應(yīng)在有機(jī)合成屮有著潛在的 應(yīng)用價(jià)值。上述研究結(jié)果充分表明了牛物轉(zhuǎn)化是一種豐富天然產(chǎn)物結(jié)構(gòu)的絕佳手段，但作者認(rèn)為“微牛物代謝模型模擬哺乳動(dòng)物體內(nèi)藥物代謝”也是牛物轉(zhuǎn)化在中約活性成分研究中不對(duì)忽 視的一個(gè)研究方向。smith flirosazza在1974年提出了 “哺乳動(dòng)物藥物代謝的微生物代謝 模型”理論。該理論創(chuàng)造性的提出了利用微牛物轉(zhuǎn)化系統(tǒng)來研究哺乳動(dòng)物藥物代謝情況。其 理論基礎(chǔ)在于，真菌和哺乳動(dòng)物均為真核牛

15、物，主要牛理功能和涉及的酶系較為相似。這- 理論提出至今c經(jīng)進(jìn)行了大杲的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)了真菌対藥物的代謝結(jié)果與哺乳動(dòng)物具有很 大的相似性。在眾多的研究范例中，主要是用于化學(xué)藥的代謝研究，而應(yīng)用丁中藥活性化合 物的代謝研究的例子則鮫少。利川微生物轉(zhuǎn)化模型制備體內(nèi)代謝產(chǎn)物具有如下特點(diǎn)：成本低，操作簡(jiǎn)單；易于控 制和調(diào)節(jié)；可以得到足夠量的代謝產(chǎn)物用丁活性研究；減少動(dòng)物的使用量；菌種種 類多，轉(zhuǎn)化多樣性好。因此，該項(xiàng)技術(shù)完全可以用來輔助鑒定藥物代謝中的微量乃至痕量的 代謝產(chǎn)物，并可以人量制備以深入研究。例如，作者發(fā)現(xiàn)fusarium solani對(duì)于華蠟毒耕, 蟾毒靈和脂蟾毒配基，表現(xiàn)出良好的轉(zhuǎn)化能力

16、，分別專一性的得到3-按基華蟾毒精，3-表 蟾毒靈和3-表脂蟾毒配基，產(chǎn)率分別為91%, 48%和92%。更重要的是上述3個(gè)轉(zhuǎn)化產(chǎn)物分 別為華蟾毒粘:、貼毒靈和脂蟾毒配基在人鼠體內(nèi)的主要代謝產(chǎn)物。因此，可以利川這一轉(zhuǎn)化 反應(yīng)獲取3種主要蟾賒輜烯類化合物的體內(nèi)代謝產(chǎn)物對(duì)照品，并對(duì)其活性和毒性進(jìn)行全|僑 評(píng)價(jià)，從而闡明悄酥在體內(nèi)發(fā)揮藥效的物質(zhì)某礎(chǔ)。3.2菇類化合物的生物轉(zhuǎn)化研究3.2.1倍半菇的生物轉(zhuǎn)化去氫木香內(nèi)酯和木香烯內(nèi)酯為常用中藥木香的主要活性成 分，具有抗腫瘤、抗病毒、增強(qiáng)胃腸蠕動(dòng)等藥理活性。但其水溶性較差，為尋找活性和水溶 性都更好的藥物，我們對(duì)其進(jìn)行了生物轉(zhuǎn)化研究。利用多型砲毛每(mu

17、cor polymorphospo rus as 3. 3443)等真菌對(duì)去氫木香內(nèi)酯進(jìn)行制備型轉(zhuǎn)化，分離得到9個(gè)化合物，分別為： 去氫木香內(nèi)酯(dehydrocostuslactone, 1) ； 11a, 13-二氫去氫木香內(nèi)酯(11a, 13-di hydrodehydrocostus- lactone, 2) ； 10 ci , 14 p -環(huán)氧基 tib, 13-二氫去氫木香內(nèi)酯(1 0 a , 14 p -epoxy-11 0 , 13-dihydrodehydmcostus- lactone, 3) ； 10 a , 14 3 -環(huán)氧基t la, 13-二氫去氫木香內(nèi)酯(10a,

18、 14 3 -epoxy-11 a , 13di hydrodehydrocostus- lacto ne, 4) : 2 b _羥基tib, 13 - 二氫去氫木香內(nèi)酯(2 p - hydroxytib, 13di hydrodehyd rocostuslactone, 5) ； 3 b-疑基-4 b, 15, 11a, 13-四氫去氫木香內(nèi)酯(33 -hydroxy-4 p , 15, 11a, 13-tetrahydrocostuslactone, 6) ； 3 a _輕基-11a,13-二氫去氫木香內(nèi)(3 a-hydroxytl a , 13 -dihydrodehyd - rocos

19、tuslactone, 7) ； 10 a , 14-二輕基 tib, 1 3-二氫去氫木香內(nèi)酯(10a, 14-dihydmxy-ll 0 , 13-dihydrodehyd- rocostuslactone, 8) : 10a , 14-二經(jīng)基-11 a , 13-二氫去氫木香內(nèi)酯(10a , 14-dihydroxy-ll a , 13-dih ydrodehyd- rocostuslactone, 9),其中化合物47和9為新化合物。同時(shí),対多型抱毛 霧(mucor polymorphosponas as 3. 3443)對(duì)去氫木香內(nèi)酷的轉(zhuǎn)化動(dòng)態(tài)進(jìn)行了研究。發(fā)現(xiàn)多 型抱毛霉首先將底物的

20、11、13位雙鍵加氫還原為單鍵，并且特異性生成11- me為b取向 的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，在24 h達(dá)到最大轉(zhuǎn)化率(80%)。隨即將化合物的10、14雙鍵環(huán)氧化，立體 專一性的生成10a , 14p取向的三元氧環(huán)，48 h達(dá)到最大產(chǎn)率40%。然后在環(huán)氧水解酶的 作川下開環(huán)，該反應(yīng)仍為立體專一性的反應(yīng)得到新化合物9, 72 h達(dá)到最人轉(zhuǎn)化率58.6%。 利用酶的抑制劑，初步確定的參與上述拜基化反應(yīng)的酶系為細(xì)胞色素p450酶，并可通過此 方法將去氫木香內(nèi)酯定向轉(zhuǎn)化為ha , 13-二氫去氫木香內(nèi)酯，而不發(fā)生異構(gòu)化副反應(yīng)。一般，在有機(jī)合成中雙鍵的還原和氧環(huán)的開裂會(huì)出現(xiàn)相對(duì)構(gòu)型差異的一對(duì)立體異構(gòu)體，而h反 應(yīng)一

21、般較為劇烈，副產(chǎn)物較多，產(chǎn)率不高。而該轉(zhuǎn)化反應(yīng)為雙鍵立體專-性和區(qū)域?qū)Ｒ恍缘?還原和環(huán)氧化以及氧環(huán)立體專一-性的開裂提供了 i個(gè)良好的方法，有關(guān)酶v方而的研究有待 深一步進(jìn)行。另外，対38種微生物菌株進(jìn)彳亍了篩選，選定刺囊毛莓(mucor alternate)等菌種対木 香烯內(nèi)酯進(jìn)行了轉(zhuǎn)化研究，得到4個(gè)轉(zhuǎn)化產(chǎn)物分別為costunolide (10) ： 11a, 13-dihy dro- a -cyclocostunilide (11) ； 11a, 13-dihydro- p -cyclocostun訂ide (12) : 1 p - dihydroxy-11a-epicolartin (1

22、3) ； iip, 13-dihydro -p - cyclocostunilide (14)。莪二酮（15）為屮藥莪術(shù)根莖中主要成分之一，抗腫瘤、抗血栓方面成效顯著，且具有 抗早孕、抗菌、保肝、抗銀屑病等作用。作者利用植物細(xì)胞和微生物對(duì)莪二酮進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化 研究。其h的在于通過對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，來改進(jìn)其水溶性和藥理活性。通過篩選，利用桔 梗懸浮細(xì)胞和刺囊毛每對(duì)莪二酮進(jìn)行了轉(zhuǎn)化研究，分離并鑒定了 10個(gè)化合物：1 a, 10b- 環(huán)氧基莪二酮（16） ； ib, 10 a-環(huán)氧基莪二酮（17） ； 11-疑基-莪二酮（18） ； 3 a-疑基 -莪二酮（19） ； 2b-疑基-莪二酮（20） ；

23、 la , 10 p-環(huán)氧基-11-疑基莪二酮（21） ； 2 a-拜基-莪二酮（22） ； 2p, 11-二輕基-莪二酮（23） , 2a, 11-二超基-莪二酮（24）,11, 15-二輕基-莪二酮（25）,其中18, 19,21, 23, 24和25為新化合物。另外，利用 刺囊毛需對(duì)莪二酮進(jìn)行轉(zhuǎn)化，可以高產(chǎn)率（45.6%）,獲得新化合物11-疑基-莪二酮，該反 應(yīng)在有機(jī)合成中是很難發(fā)生的。3.2.2二祜的生物轉(zhuǎn)化 雷公藤二茹是衛(wèi)矛科植物雷公藤的主要有效成分，屬松香烷型 二菇，多數(shù)具有a, b-不飽和內(nèi)酯結(jié)構(gòu)。雷公藤二祜具有免疫抑制、抗炎、抗生育、抗腫 瘤等多種顯著的生理活性，但由于腎毒性

24、大，其臨床應(yīng)川一直受到限制。木研究組采用生物 轉(zhuǎn)化技術(shù)對(duì)雷公藤的主要成分雷公藤甲素（triptolide）和雷公藤內(nèi)酯（triptonide）進(jìn)行 結(jié)構(gòu)修飾，以得到高效低毒的衍生物。利用短刺小克銀漢霉（cunninghamella blakeslean a as 3.970)對(duì)雷公藤甲素進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化，得到7個(gè)產(chǎn)物，分別是5 a -拜基雷公藤甲素、1 9 a-輕棊雷公藤甲素、19 拜基雷公藤甲索、雷公藤乙索、16-輕基雷公藤甲索、雷醇內(nèi)酯 和10-輕基雷公藤甲素，其小4個(gè)為新化合物。黑曲霉aspergillus niger as 3.739對(duì)雷 公藤內(nèi)酯酮的轉(zhuǎn)化分離并鑒定了 4個(gè)產(chǎn)物，分別是17

25、-拜基雷公藤內(nèi)酯酮、16-經(jīng)基雷公藤 內(nèi)酯酮、5/經(jīng)基雷公爆內(nèi)酯酮和雷公藤甲索，其中詢3個(gè)為新化合物。利用長春花和桔梗細(xì)胞懸浮體系對(duì)雷公藤內(nèi)醋酮進(jìn)行牛物轉(zhuǎn)化，得到10個(gè)產(chǎn)物，分別 是雷公藤甲素、雷公藤乙素、12 b, 13 a-二拜基雷公藤內(nèi)酯酮、5 a-拜基雷公藤內(nèi)酯酮、2 b-徑基雷公藤內(nèi)酯酮、12a, 13a-二疑基雷公藤內(nèi)酯酮、12a, 13a-表二疑基雷公藤內(nèi) 酯酮、知2, 13-雷公藤內(nèi)酯酮、14-0- b-d-葡萄糖-表雷公藤甲素和17-輕基雷公藤內(nèi)酯酮, 其中5個(gè)為新化合物。3.2.3三菇的生物轉(zhuǎn)化 h草次酸為中藥甘草中的主要成分，具有顯著的中樞性神經(jīng)鎮(zhèn)咳 作用和抗炎作用。辛秀

26、蘭等人利用多型抱毛霉(mucor polymorphosporus)對(duì)ii"草次酸進(jìn)彳亍 了生物轉(zhuǎn)化研究，分離得到7個(gè)化合物，其中5個(gè)為新化合物，豐富了廿草次酸類三詁化合 物的結(jié)構(gòu)，為進(jìn)一步研究英構(gòu)效關(guān)系提供了物質(zhì)基礎(chǔ)。3.3生物堿的生化轉(zhuǎn)化研究李麗等人利用紫微青霉(penici 11 ium janthinellum)對(duì)左旋四氫巴馬汀進(jìn)彳亍了轉(zhuǎn)化研 究，分離并鑒定了3個(gè)轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，并利川該模型對(duì)左旋四氫巴馬汀在人鼠體內(nèi)的代謝產(chǎn)物進(jìn) 行了研究，初步鑒定了英中6個(gè)代謝產(chǎn)物。該研究進(jìn)一步表明利用微生物模型研究中藥活性 化合物的體內(nèi)代謝的優(yōu)勢(shì)。此外，李麗等人還利用紫微青每對(duì)吳茱萸堿的生物轉(zhuǎn)化

27、進(jìn)行了研 究，分離并鑒定了2個(gè)化合物，均為新化合物，并以其為對(duì)照需對(duì)吳茱英堿的人鼠體內(nèi)代謝 進(jìn)行了研究。4中藥活性成分生物轉(zhuǎn)化研究展望廿前，牛物轉(zhuǎn)化用丁中藥活性成分的結(jié)構(gòu)修飾還處丁-初級(jí)階段，尤:其缺乏對(duì)某類中藥活 性成分系統(tǒng)的牛物轉(zhuǎn)化研究。近幾年來，我們研究小組為充分利用中藥化學(xué)資源，尋找具有 新穎結(jié)構(gòu)的藥物先導(dǎo)化合物，在這一方面做了探索性的嘗試，取得了初步的成果?，F(xiàn)已較為 系統(tǒng)地研究了蟾賒綃烯、紫杉烷、雷公藤內(nèi)酯、莪二酮、去氫木香內(nèi)酯、木香烯內(nèi)酯、廿草 次酸、吳茱萸堿以及青篙素等活性化合物的牛物轉(zhuǎn)化。從這些結(jié)果中可以發(fā)現(xiàn)，中約活性成 分的生物轉(zhuǎn)化思路主要集中在如下兒點(diǎn)：(1) 利川牛物轉(zhuǎn)化

28、往往易丁-牛成新穎的化學(xué)結(jié)構(gòu)，很多轉(zhuǎn)化產(chǎn)物往往是從口然界或有 機(jī)合成方法難以獲取的，從而為新藥開發(fā)提供了難得的先導(dǎo)化合物。中藥活性成分的結(jié)構(gòu)優(yōu) 化還可以增強(qiáng)活性并降低毒性，改善天然產(chǎn)物作為藥物前體的開發(fā)潛質(zhì)。利川生物體系酶的 多樣性，同類天然產(chǎn)物系統(tǒng)的牛物轉(zhuǎn)化研究往往會(huì)產(chǎn)牛一系列結(jié)構(gòu)類似的衍牛物，并結(jié)合現(xiàn) 代藥理v的實(shí)驗(yàn)手段，對(duì)該類化合物的構(gòu)效關(guān)系進(jìn)行系統(tǒng)研究。(2) 牛物轉(zhuǎn)化在中藥活性化合物的全合成或半合成中的應(yīng)用，即利用酶促反應(yīng)的專屈性 和高產(chǎn)率，將一些廉價(jià)的原料，轉(zhuǎn)化成為目標(biāo)產(chǎn)物。2006年，美國學(xué)者在nature ±發(fā)表 了一篇冇關(guān)生物轉(zhuǎn)化方而的研究論文。利用工程菌將amorpha-4, 11-diene定向轉(zhuǎn)化為ar temisinic acid, ifij后者是合成青篙素