粉針無(wú)菌灌裝工藝過(guò)程驗(yàn)證方案

1、粉針無(wú)菌灌裝工藝過(guò)程驗(yàn)證方案 方案編號(hào)：文件類別：技術(shù) 車 間：起草人： 日期： 年 月 日審核人： 日期： 年 月 日審核人： 日期： 年 月 日批準(zhǔn)人： 日期： 年 月 日目 錄1、 目的 32、 范圍 33、 職責(zé) 34、 內(nèi)容 34.1設(shè)備概述 34.2設(shè)備條件確認(rèn) 34.3試驗(yàn)條件確認(rèn) 44.4培養(yǎng)基模擬分裝前各項(xiàng)準(zhǔn)備試驗(yàn) 44.5培養(yǎng)基模擬試驗(yàn)過(guò)程 54.6實(shí)驗(yàn)過(guò)程監(jiān)測(cè) 65、驗(yàn)證偏差處理 86、驗(yàn)證周期 8記錄9驗(yàn)證結(jié)論及評(píng)價(jià)方案18驗(yàn)證方案批準(zhǔn)書(shū)191、目的在廠房及空調(diào)凈化系統(tǒng)、工藝用水系統(tǒng)及設(shè)備已驗(yàn)證合格，無(wú)菌室按規(guī)定方法和要求清潔消毒，無(wú)菌作業(yè)所用的工器具等物品已滅菌,工藝

2、規(guī)程、標(biāo)準(zhǔn)操作程序、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和檢驗(yàn)操作規(guī)程等技術(shù)文件已制訂并批準(zhǔn)執(zhí)行，人員已經(jīng)過(guò)培訓(xùn)的基礎(chǔ)上,進(jìn)行培養(yǎng)基模擬分裝試驗(yàn)。通過(guò)培養(yǎng)基模擬分裝試驗(yàn),證明分裝過(guò)程所采用的各種方法和各種規(guī)程在防止微生物污染的水平達(dá)到可接受的合格標(biāo)準(zhǔn)的能力，提供保證所生產(chǎn)產(chǎn)品的無(wú)菌性的可信限度達(dá)到可接受的合格標(biāo)準(zhǔn)的證據(jù)，綜合評(píng)價(jià)粉針車間無(wú)菌保證能力。2、范圍適用于粉針車間培養(yǎng)基模擬分裝試驗(yàn)。3、職責(zé)3.1 驗(yàn)證小組負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案及報(bào)告的起草。3.2 質(zhì)管部負(fù)責(zé)驗(yàn)證過(guò)程的監(jiān)督、取樣及檢驗(yàn)工作。 3.3驗(yàn)證小組組長(zhǎng)負(fù)責(zé)結(jié)果的評(píng)估。3.4驗(yàn)證委員會(huì)主任負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案及報(bào)告的批準(zhǔn)。3.5驗(yàn)證小組部門姓名驗(yàn)證小組組長(zhǎng)質(zhì) 管 部車 間4

3、、內(nèi)容：4.1設(shè)備概述：粉針劑無(wú)菌藥品的分裝采用XLF型西林瓶高速螺桿分裝機(jī)。共5臺(tái)，編號(hào)分別為1號(hào)機(jī)、2號(hào)機(jī)、3號(hào)機(jī)、4號(hào)機(jī)、5號(hào)機(jī)。4.2設(shè)備條件確認(rèn) ： 項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)要求檢查結(jié)果1號(hào)機(jī)2號(hào)機(jī)3號(hào)機(jī)4號(hào)機(jī)5號(hào)機(jī)設(shè)備資料齊全設(shè)備預(yù)確認(rèn)完成安裝確認(rèn)（IQ）完成運(yùn)行確認(rèn)（OQ）完成 性能確認(rèn)（PQ）完成設(shè)備清潔、滅菌完成檢查人日期結(jié)論：5臺(tái)設(shè)備均可承擔(dān)培養(yǎng)基模擬分裝試驗(yàn)。（是 否）確認(rèn)人： 日期： 4.3試驗(yàn)條件確認(rèn)項(xiàng) 目標(biāo)準(zhǔn)要求檢查結(jié)果分裝加塞機(jī)驗(yàn)證完成甲醛熏蒸消毒效果驗(yàn)證完成無(wú)菌壓縮空氣驗(yàn)證完成干熱滅菌過(guò)程驗(yàn)證完成濕熱滅菌過(guò)程驗(yàn)證完成空氣凈化系統(tǒng)驗(yàn)證完成純化水系統(tǒng)驗(yàn)證完成注射用水系統(tǒng)驗(yàn)證完成操作

4、人員培訓(xùn)完成廠房設(shè)施已消毒并按無(wú)菌區(qū)管理完成檢查人日期結(jié)論：具備進(jìn)行培養(yǎng)基模擬分裝試驗(yàn)的條件。（是 否）確認(rèn)人： 日期： 4.4培養(yǎng)基模擬分裝前各項(xiàng)準(zhǔn)備試驗(yàn)4.4.1胰酶酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基滅菌效果試驗(yàn)方法：培養(yǎng)基分裝于1000毫升錐形瓶中，于121濕熱滅菌20min，冷卻至室溫,取樣10支于32培養(yǎng)14天（附表1）。合格標(biāo)準(zhǔn)：應(yīng)無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)。結(jié)論：無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)。（是 否） 確認(rèn)人： 日期： 4.4.2培養(yǎng)基的微生物生長(zhǎng)性能及乳糖對(duì)其影響試驗(yàn)方法：取30支裝有經(jīng)滅菌的胰酶酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基的無(wú)菌管制瓶，每10支一組，共分三組，每一組中5支各加0.25g乳糖，5支不加乳糖。a. 第一組10支無(wú)菌管制瓶

5、進(jìn)行枯草芽孢桿菌接種，接種量100cfu，30-35培養(yǎng)3-5天。b. 第二組10支無(wú)菌管制瓶進(jìn)行生孢梭菌接種，接種量100 cfu，30-35培養(yǎng)3-5天。c. 第三組10支無(wú)菌管制瓶進(jìn)行白色念珠菌接種，接種量100cfu，23-28培養(yǎng)3-5天（附表2）。合格標(biāo)準(zhǔn)：均應(yīng)出現(xiàn)明顯的所接種的微生物的生長(zhǎng)。結(jié)論：均出現(xiàn)明顯的所接種的微生物的生長(zhǎng)。（是 否）確認(rèn)人： 日期： 4.4.3乳糖無(wú)菌性試驗(yàn)方法：乳糖分裝于雙層塑料袋中，密封，用鈷60射線照射滅菌。將滅菌乳糖粉末在無(wú)菌室取樣，按無(wú)菌檢查法檢驗(yàn)。 合格標(biāo)準(zhǔn)：應(yīng)無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)。結(jié)論：無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)。（是 否） 確認(rèn)人： 日期： 4.4.4乳糖溶解性試驗(yàn)

6、 方法：在兩個(gè)裝有1.0 g無(wú)菌乳糖粉末的20ml西林瓶中，分別加入溫度約為25和32的SCDM培養(yǎng)基適量，振搖，使乳糖粉末全部溶解，計(jì)算濃度，取濃度數(shù)值小的作為乳糖溶解性結(jié)果。結(jié)論：乳糖能溶解于25和35的SCDM培養(yǎng)基中，最大濃度約為 %（g/ml）。 確認(rèn)人： 日期： 4.5培養(yǎng)基模擬分裝試驗(yàn)過(guò)程4.5.1人員數(shù)量及人員行為：在分裝室內(nèi)當(dāng)班工作的操作人員14名、QA監(jiān)督員1名、車間管理人員1名、其他人員4名（附表3）。所有人員均按實(shí)際生產(chǎn)時(shí)狀態(tài)工作或移動(dòng)。4.5.2試驗(yàn)方法：西林瓶在超聲波洗瓶機(jī)中，用純化水粗洗、注射用水精洗，在隧道烘箱內(nèi)350以上干熱滅菌不少于5分鐘，除菌、除熱原。鹵化

7、丁基膠塞經(jīng)注射用水漂洗，在121濕熱滅菌30分鐘，干燥。乳糖粉末在100級(jí)潔凈度層流保護(hù)下經(jīng)螺桿分裝機(jī)定量分裝到西林瓶中，每瓶0.25g，分裝機(jī)速度調(diào)至最低。用蠕動(dòng)泵（配裝時(shí)間繼電器）手工注入SCDM培養(yǎng)基，每瓶2.5ml（其硅膠管應(yīng)經(jīng)121，濕熱滅菌20分鐘），壓塞、軋蓋，按分裝時(shí)間對(duì)每個(gè)盛裝西林瓶的托盤編號(hào)，并記錄每盤的分裝時(shí)間。模擬分裝進(jìn)行3批，每批不少于1050011000瓶。將模擬分裝生產(chǎn)的全部樣品上下顛倒振搖，使乳糖全部溶解，并使培養(yǎng)基與整個(gè)瓶子的內(nèi)表面及膠塞內(nèi)表面充分接觸。然后放入培養(yǎng)房中，先在23-28，培養(yǎng)7天，再轉(zhuǎn)入30-35條件下，培養(yǎng)7天。檢查培養(yǎng)的全部樣品的微生物生長(zhǎng)

8、情況并分別記錄。若發(fā)現(xiàn)污染應(yīng)明確記錄瓶數(shù)，同時(shí)應(yīng)檢查鋁蓋、膠塞的密封情況，若有破損應(yīng)記錄并檢查破損原因（附表4）。微生物生長(zhǎng)瓶數(shù)污染率（陽(yáng)性生長(zhǎng)率）=×100% 分裝總瓶數(shù)-破損瓶數(shù)合格標(biāo)準(zhǔn)：可信限為95時(shí)污染率0.1%，即10000瓶模擬分裝允許染菌的瓶數(shù)量不得超過(guò)4瓶。結(jié)論：污染率0.1%,符合規(guī)定。（是 否） 確認(rèn)人： 日期： 4.5.3陽(yáng)性對(duì)照方法：在模擬分裝過(guò)程中，隨機(jī)取出30支裝有培養(yǎng)基的西林瓶，其中10支接入小于100 cfu的白色念珠菌，在23-28培養(yǎng)3-5天；10支接入小于100 cfu的枯草芽孢桿菌；10支接入小于100 cfu的生孢梭菌，在30-35各培養(yǎng)3-

9、5天。做為陽(yáng)性對(duì)照（附表5）。合格標(biāo)準(zhǔn)：3-5天內(nèi)至少50%的西林瓶中加菌培養(yǎng)基中有明顯的接種微生物的生長(zhǎng)。結(jié)論：符合規(guī)定。（是 否） 確認(rèn)人： 日期： 4.5.4陰性對(duì)照在模擬分裝過(guò)程結(jié)束時(shí)，取僅裝有培養(yǎng)基的西林瓶10支，壓塞、軋蓋，作為陰性對(duì)照（附表5。合格標(biāo)準(zhǔn)：應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。結(jié)論：無(wú)菌生長(zhǎng)。（是 否）確認(rèn)人： 日期： 4.6 實(shí)驗(yàn)過(guò)程監(jiān)測(cè)4.6.1空瓶、膠塞無(wú)菌檢查在分裝前、中、后分別從每臺(tái)分裝線上隨機(jī)抽取膠塞、空西林瓶，5臺(tái)機(jī)共抽60支膠塞、30支空瓶，進(jìn)行無(wú)菌檢驗(yàn)（附表5）。合格標(biāo)準(zhǔn)：應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。結(jié)論：無(wú)菌生長(zhǎng)。（是 否） 確認(rèn)人： 日期： 4.6.2人員檢測(cè)人員更衣完畢，在實(shí)驗(yàn)操作前

10、、實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后隨機(jī)抽取5人，用棉簽擦拭法（滅菌棉簽用無(wú)菌生理鹽水濕潤(rùn)）在易污染部位取樣（如手、前胸、手臂）等考察微生物污染情況，每棉簽約10×102，結(jié)果見(jiàn)附表6。合格標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌1cfu/棉簽結(jié)論：符合規(guī)定。（是 否） 確認(rèn)人： 日期： 4.6.3無(wú)菌區(qū)環(huán)境動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)及監(jiān)測(cè)頻次潔凈室(區(qū))空氣潔凈度級(jí)別動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)潔凈度級(jí)別塵粒最大允許數(shù)/立方米微生物最大允許數(shù)0.5µm5µm浮游菌/立方米沉降菌/皿100級(jí)3,50005110,000級(jí)350,00020001003依據(jù)空氣凈化系統(tǒng)驗(yàn)證方案檢測(cè)方法檢測(cè)，檢測(cè)頻次為每批分裝前、中、后三次。如果監(jiān)測(cè)結(jié)

11、果不符合潔凈室(區(qū))空氣潔凈度級(jí)別動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，則應(yīng)對(duì)該區(qū)域內(nèi)的人員進(jìn)行精減,直至監(jiān)測(cè)合格。結(jié)論： 確認(rèn)人： 日期： 4.6.4實(shí)驗(yàn)前及結(jié)束后，用棉簽擦拭法在操作臺(tái)面，墻面，地面等處各取樣1次，考察微生物污染情況，每棉簽約10×102（附表7）。合格標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌1 cfu /棉簽結(jié)論：符合規(guī)定。（是 否） 確認(rèn)人： 日期： 4.6.5無(wú)菌操作區(qū)最多人員數(shù)量確認(rèn)：培養(yǎng)基模擬分裝驗(yàn)證結(jié)果合格，則在培養(yǎng)基模擬分裝試驗(yàn)過(guò)程中操作、管理、監(jiān)督的人數(shù)即為無(wú)菌區(qū)最多人數(shù)。結(jié)論： 確認(rèn)人： 日期： 4.6.6分別在西林瓶滅菌后4、6小時(shí)（置于100級(jí)垂直層流保護(hù)下），各取10支，分別分10管，每管1支

12、瓶，對(duì)不同暫存時(shí)間的瓶分別進(jìn)行無(wú)菌檢查。（附表8）分別取滅菌后貯存于暫存間24、36、48小時(shí)的膠塞各50支，分別分10管，每管5支膠塞，對(duì)不同暫存時(shí)間的膠塞分別進(jìn)行無(wú)菌檢查。（附表9）合格標(biāo)準(zhǔn)：應(yīng)無(wú)菌。結(jié)論：無(wú)菌生長(zhǎng)。（是 否）確認(rèn)人： 日期： 4.6.7分別取滅菌后存放于三更24、36、48小時(shí)的無(wú)菌服各兩件，用一無(wú)菌鑷子夾住無(wú)菌鹽水棉簽在每件衣服各取五點(diǎn)擦拭，將取樣后的5個(gè)棉簽分別用無(wú)菌吸管加水2ml，在旋渦振蕩器上振蕩2分鐘，用吸管吸取加入的水，分別置于5個(gè)培養(yǎng)皿中，向培養(yǎng)皿中注入培養(yǎng)基，待其凝固后在30-35培養(yǎng)2天，同時(shí)作空白對(duì)照。（附表10）合格標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌1 cfu /棉簽結(jié)論：

13、符合規(guī)定。（是 否）確認(rèn)人： 日期： 5、驗(yàn)證偏差處理在整個(gè)驗(yàn)證過(guò)程中，對(duì)于不合格的條項(xiàng)，應(yīng)進(jìn)行有針對(duì)性的分析，查明原因及時(shí)整改，并對(duì)該條項(xiàng)加倍驗(yàn)證，直到驗(yàn)證合格為止。6、驗(yàn)證周期6.1大修后或重大生產(chǎn)工藝的變更后要進(jìn)行再驗(yàn)證。6.2出現(xiàn)無(wú)菌檢查陽(yáng)性、內(nèi)毒素不合格質(zhì)量問(wèn)題時(shí)進(jìn)行再驗(yàn)證。6.3每年至少進(jìn)行一次培養(yǎng)基分裝試驗(yàn)每次至少一批。6.4無(wú)菌分裝生產(chǎn)線的每位員工每年至少參加一次培養(yǎng)基分裝試驗(yàn)，以檢定無(wú)菌作業(yè)人員的操作是否規(guī)范。附表1 培養(yǎng)基無(wú)菌性試驗(yàn)記錄培養(yǎng)基名稱分裝量培養(yǎng)時(shí)間 年 月 日 年 月 日培養(yǎng)溫度瓶號(hào)12345678910培養(yǎng)情況試驗(yàn)人審核人時(shí)間注：培養(yǎng)后瓶中培養(yǎng)基無(wú)任何微生物生

14、長(zhǎng)填“”，否則填：“+”。附表2 培養(yǎng)基微生物生長(zhǎng)性能試驗(yàn)記錄接種菌名枯草芽孢桿菌接種量培養(yǎng)溫度30-35培養(yǎng)時(shí)間年 月 日 年 月 日樣品瓶號(hào)加乳糖不加乳糖12345678910培養(yǎng)情況試驗(yàn)人審核人接種菌名生孢梭菌接種量培養(yǎng)溫度30-35培養(yǎng)時(shí)間年 月 日 年 月 日樣品瓶號(hào)加乳糖不加乳糖12345678910培養(yǎng)情況試驗(yàn)人審核人接種菌名白色念珠菌接種量培養(yǎng)溫度23-28培養(yǎng)時(shí)間年 月 日 年 月 日樣品瓶號(hào)加乳糖不加乳糖12345678910培養(yǎng)情況試驗(yàn)人審核人注：培養(yǎng)后瓶中培養(yǎng)基無(wú)任何微生物生長(zhǎng)填“”，否則填“+”。附表3培養(yǎng)基模擬分裝試驗(yàn)無(wú)菌室人員簽名表姓名職務(wù)姓名職務(wù)總?cè)藬?shù)QA附表4

15、污染率監(jiān)測(cè)記錄車間： 批次項(xiàng)目第一批第二批第三批23-2830-3523-2830-3523-2830-35總培養(yǎng)瓶數(shù)微生物數(shù)生長(zhǎng)瓶數(shù)破損瓶數(shù)污染率（陽(yáng)性生長(zhǎng)率）%結(jié)論方案日期監(jiān)測(cè)人復(fù)核人附表 5 對(duì)照品培養(yǎng)記錄樣品陰性對(duì)照品種類培養(yǎng)基10支第一批第二批第三批培養(yǎng)結(jié)果微生物生長(zhǎng)率%培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時(shí)間14天試驗(yàn)人復(fù)核人取樣日期方案日期樣品陽(yáng)性對(duì)照品種類白色念珠菌10支第一批第二批第三批培養(yǎng)結(jié)果微生物生長(zhǎng)率%培養(yǎng)溫度23-28培養(yǎng)時(shí)間14天試驗(yàn)人審核人取樣日期方案日期樣品陽(yáng)性對(duì)照品種類枯草芽孢桿菌10支第一批第二批第三批培養(yǎng)結(jié)果微生物生長(zhǎng)率%培養(yǎng)溫度30-35培養(yǎng)時(shí)間14天試驗(yàn)人審核人取樣日期方案日

16、期樣品陽(yáng)性對(duì)照品種類生孢梭菌10支第一批第二批第三批培養(yǎng)結(jié)果微生物生長(zhǎng)率%培養(yǎng)溫度30-35培養(yǎng)時(shí)間14天試驗(yàn)人審核人取樣日期方案日期附表6實(shí)驗(yàn)過(guò)程無(wú)菌監(jiān)測(cè)記錄 結(jié)果名稱分裝前分裝中分裝后結(jié)論123451234512345第一批需、厭菌瓶塞真菌瓶塞第二批需、厭菌瓶塞真菌瓶塞第三批需、厭菌瓶塞真菌瓶塞人員擦拭第一批第二批第三批第一批第二批第三批取樣人取樣日期檢測(cè)人方案日期審核人注：培養(yǎng)后培養(yǎng)基中無(wú)任何微生物生長(zhǎng)填“”，否則填：“+”。附表7實(shí)驗(yàn)過(guò)程潔凈室空氣潔凈度（環(huán)境）監(jiān)測(cè)記錄結(jié)果名稱分裝前分裝中分裝后結(jié)論123123456789123塵粒數(shù)/m3第一批0.5µm5µm第二

17、批0.5µm5µm第三批0.5µm5µm浮游菌/m3第一批第二批第三批沉降菌/皿第一批第二批第三批表面擦拭菌第一批第二批第三批第一批第二批第三批取樣人取樣日期檢驗(yàn)人方案日期復(fù)核人附表8空瓶無(wú)菌監(jiān)測(cè)記錄 結(jié)果名稱空瓶4h空瓶6h結(jié)果1234512 345第一批需、厭菌真菌第二批需、厭菌真菌第三批需、厭菌真菌第一批取樣日期方案日期第二批取樣日期方案日期第三批取樣日期方案日期取樣人檢測(cè)人復(fù)核人注：培養(yǎng)后培養(yǎng)基中無(wú)任何微生物生長(zhǎng)填“”，否則填：“+”。附表9膠塞無(wú)菌監(jiān)測(cè)記錄 結(jié)果名稱24h（暫存室）36h（暫存室）48h（暫存室）結(jié)果123451234512345第一批需、