實訓一 微量移液器的使用

1、實驗室安全及管理1.實驗室守則2.實驗室安全操作規(guī)程3.主要物質(zhì)的危險，有害性4.衛(wèi)生PPT模板下載： 行業(yè)PPT模板： 節(jié)日PPT模板： PPT素材下載： PPT圖表下載： 優(yōu)秀PPT下載： PPT教程： Word教程： Excel教程： 資料下載： PPT課件下載： 范文下載： 試卷下載： 教案下載： 實驗?zāi)康膶嶒災(zāi)康恼莆瘴⒘恳埔浩鞯牟僬莆瘴⒘恳埔浩鞯牟僮骷夹g(shù)作技術(shù)實驗原理實驗原理 操作操作按鈕、控制螺桿和活塞縱向連按鈕、控制螺桿和活塞縱向連成一體，活塞腔內(nèi)活塞的上下移動控制成一體，活塞腔內(nèi)活塞的上下移動控制移液過程。壓下操作按鈕時，帶動控制移液過程。壓下操作按鈕時，帶動控制螺桿并使活塞向

2、下移動，排出活塞腔內(nèi)螺桿并使活塞向下移動，排出活塞腔內(nèi)的氣體；松開按鈕的同時，復位彈簧使的氣體；松開按鈕的同時，復位彈簧使活塞恢復原位，吸頭內(nèi)吸入一定量的液活塞恢復原位，吸頭內(nèi)吸入一定量的液體；再次按鈕，排出吸頭內(nèi)的液體，完體；再次按鈕，排出吸頭內(nèi)的液體，完成一次移液操作成一次移液操作儀器材料儀器材料微量移液器；吸頭；酶標儀；96孔板；考馬斯亮藍；G250染色液；蛋白質(zhì)標準溶液；樣品溶液；稀釋液移液器移液器移液器移液器手動手動電動電動種類種類移液器移液器常量常量微量微量種類種類結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)按鈕、體積調(diào)節(jié)輪、手柄、按鈕、體積調(diào)節(jié)輪、手柄、體積顯示窗、控制螺桿、彈體積顯示窗、控制螺桿、彈簧、活塞、密封

3、圈、套筒簧、活塞、密封圈、套筒（又稱吸頭連接圓錐）以及（又稱吸頭連接圓錐）以及吸頭彈射器吸頭彈射器操作規(guī)程操作規(guī)程正向移液正向移液反向移液反向移液正向移液法正向移液法 1）操作按鈕按至第一停點。）操作按鈕按至第一停點。 2）移液器吸頭尖插入液體樣品液面下）移液器吸頭尖插入液體樣品液面下23mm處，慢慢松開按鈕吸入液體。待吸入液處，慢慢松開按鈕吸入液體。待吸入液體平衡后，移出加樣器。體平衡后，移出加樣器。 3）移液器吸頭放入容器內(nèi)，盡可能使吸頭尖）移液器吸頭放入容器內(nèi)，盡可能使吸頭尖下伸至容器最低處，并貼住容器內(nèi)壁，輕輕下伸至容器最低處，并貼住容器內(nèi)壁，輕輕壓下操作按鈕至第一停點，排出液體。約壓

4、下操作按鈕至第一停點，排出液體。約1秒秒鐘后，繼續(xù)下壓操作按鈕至第二停點，待吸鐘后，繼續(xù)下壓操作按鈕至第二停點，待吸頭內(nèi)液體徹底排出后，撤出加樣器。頭內(nèi)液體徹底排出后，撤出加樣器。 4）松開按鈕，使操作按鈕回復至起點。）松開按鈕，使操作按鈕回復至起點。反向移液法反向移液法 1）操作按鈕按至第二停點。）操作按鈕按至第二停點。 2）移液器吸頭尖插入液體樣品液面下）移液器吸頭尖插入液體樣品液面下23mm處，慢慢松開按鈕吸入液體。待吸入處，慢慢松開按鈕吸入液體。待吸入液體平衡后，移出加樣器。液體平衡后，移出加樣器。 3）移液器吸頭放入容器內(nèi)，盡可能使吸頭）移液器吸頭放入容器內(nèi)，盡可能使吸頭尖下伸至容器

5、的最低處，并貼住容器內(nèi)壁尖下伸至容器的最低處，并貼住容器內(nèi)壁，輕輕壓下操作按鈕至第一停點，排出液，輕輕壓下操作按鈕至第一停點，排出液體，撤出加樣器。（吸頭內(nèi)的液體可以隨體，撤出加樣器。（吸頭內(nèi)的液體可以隨吸頭棄去或放回原樣品管內(nèi)）吸頭棄去或放回原樣品管內(nèi)）反復移液法反復移液法對于相同的樣品、相同體積的對于相同的樣品、相同體積的液體，可以采用重復移液法液體，可以采用重復移液法保養(yǎng)維護保養(yǎng)維護應(yīng)用應(yīng)用考馬斯亮藍蛋白質(zhì)含量的測定考馬斯亮藍蛋白質(zhì)含量的測定原理根據(jù)蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)根據(jù)蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)，考馬斯亮藍，考馬斯亮藍G-250G-250是是比色法與色素發(fā)結(jié)合的復合方法?？捡R斯亮藍比色法與色素發(fā)結(jié)

6、合的復合方法?？捡R斯亮藍G-250G-250是一種染料，在游離狀態(tài)下呈是一種染料，在游離狀態(tài)下呈棕紅色棕紅色，當與蛋白質(zhì)結(jié)合后呈當與蛋白質(zhì)結(jié)合后呈藍青色藍青色。在一定范圍內(nèi)，。在一定范圍內(nèi)，也就是蛋白質(zhì)含量在也就是蛋白質(zhì)含量在01000ug01000ug范圍內(nèi)，蛋白質(zhì)范圍內(nèi)，蛋白質(zhì)- -色素結(jié)合物色素結(jié)合物595nm595nm下的吸光度與蛋白質(zhì)含量成下的吸光度與蛋白質(zhì)含量成正比，所以可用比色法測定正比，所以可用比色法測定標準孔樣品孔12345678916稀釋液（l）20191816128400蛋白質(zhì)標準溶液 （l）01248121620-樣品溶液（l）-20考馬斯亮藍蛋白質(zhì)含量的測定考馬斯亮藍蛋白質(zhì)含量的測定2. 2. 各孔加入各孔加入200200l G250l G250染色液