微生物學復習資料-周德慶-期末總結(共16頁)

1、精選優(yōu)質文檔-傾情為你奉上微生物學復習資料第一章 原核微生物的形態(tài)、構造和功能伴孢晶體：少數芽孢桿菌在形成芽孢的同時，會在芽孢旁形成一顆菱形、方形或不規(guī)則形的堿溶性蛋白質晶體，稱為伴孢晶體（即ð內毒素）。L型細菌：在某些環(huán)境條件下（實驗室或宿主體內）通過自發(fā)突變而形成的遺傳性穩(wěn)定的細胞壁缺陷變異型。1沒有完整而堅韌的細胞壁，細胞呈多形態(tài)，有些能通過細菌濾器，故又稱“濾過型細菌”。對滲透敏感，在固體培養(yǎng)基上形成“油煎蛋”似的小菌落（直徑在0.1mm左右）古生菌：又稱古細菌，是一個在進化途徑上很早就與真細菌和真核生物相互獨立的生物類群，主要包括一些獨特生態(tài)類型的原核生物，如產甲烷菌及大多

2、數嗜極菌。4、試比較G+和G-細菌細胞壁的異同。 成 分革蘭氏陽性細菌革蘭氏陰性細胞肽聚糖磷壁酸類脂質蛋白質含量很高（30-95）含量較高（<50）一般無（<2）0 含量很低（520）0含量較高（約20）含量較高         5、簡述革蘭氏染色法的機制并說明此法的重要性。革蘭氏染色機制：結晶紫液初染和碘液媒染：在細菌的細胞膜內可形成不溶于水的結晶紫與碘的復合物。乙醇脫色：G細胞壁較厚、肽聚糖網層次多和交聯(lián)致密且不含類脂，把結晶紫與碘的復合物牢牢留在壁內，使其保持紫色；G-細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄

3、和交聯(lián)度差，結晶紫與碘復合物的溶出，使細胞退成無色。復染: G-細菌呈現紅色，而G+細菌則仍保留最初的紫色。重要性: 革蘭氏染色有著十分重要的理論與實踐意義。通過這一染色，幾乎可把所有的細菌分成革蘭氏陽性菌與革蘭氏陰性菌兩個大類，因此它是分類鑒定菌種時的重要指標。又由于這兩大類細菌在細胞結構、成分、形態(tài)、生理、生化、遺傳、免疫、生態(tài)和藥物敏感性等方面都呈現出明顯的差異，因此任何細菌只要通過簡單的革蘭氏染色，就可提供不少其他重要的生物學特性方面的信息。第二章 真核微生物的形態(tài)、構造和功能1子實體：是指在其里面或上面可產生無性或有性孢子，有一定形狀和構造的任何菌絲體組織2 菌物界：指與動物界，植物

4、界相并列的一大群無葉綠素，依靠細胞表面吸收有機養(yǎng)料，細胞壁一般含幾丁質的真核微生物3 二級菌絲：又稱氣生菌絲，由基內營養(yǎng)長出外伸向空間的絲。它是中由相應的異性的進行體細胞接合而形成的菌絲。其具有分枝狀者稱為次生菌絲體。4 鎖狀聯(lián)合: 擔子菌亞門中多數擔子菌的雙核菌絲，在進行細胞分裂時，于菌絲的分隔處形成的一個側生的喙狀結構稱鎖狀聯(lián)合。生理意義：保證了雙核菌絲在進行細胞分裂時，每節(jié)（每個細胞）都能含有兩個異質（遺傳型不同）的核，為進行有性生殖，通過核配形成擔子打下基礎。鎖狀聯(lián)合是雙核菌絲的鑒定標準，凡是產生鎖狀聯(lián)合的菌絲均可斷定為雙核。鎖狀聯(lián)合也是擔子菌亞門的明顯特征之一。簡答題1、細菌、放線菌

5、、酵母菌、霉菌四大類微生物的菌落有何不同？為什么？菌落        細菌        酵母菌        放線菌        霉菌含水形態(tài)        很濕或較濕        較濕        干燥或較干燥        干燥外觀形態(tài)    &#

6、160;   小而突起或大而平坦        大而突起        小而緊密        大而疏松或大而致密菌落透明度        透明或稍透明        稍透明        不透明        不透明菌落與培養(yǎng)基結合程度    不結合     

7、;   不結合        牢固結合        較牢固結合菌落顏色      多樣      單調，一般呈乳脂或礦燭色，少數紅色或黑色      十分多樣    十分多樣菌落正反面顏色的差別     相同        相同        一般不同    

8、0;   一般不同菌落邊緣        一般看不到細胞        可見球狀，卵圓狀或假絲狀細胞        有時可見細絲狀細胞        可見粗絲狀細胞氣味        一般有臭味        多帶酒香味        帶有泥腥味        往往有霉

9、味原因：因為細菌、放線菌、酵母菌和霉菌的形態(tài)和生理類型不盡相同，所以在其菌落形態(tài)，構造等特征上也有各自的特點。2、試比較細菌、放線菌、酵母菌和霉菌細胞壁成分的異同。 細菌分為G+和G-，G+肽聚糖含量高，G-含量低；G+磷壁酸含量較高，而G-不含磷壁酸；G+類脂質一般無，而G-含量較高；G+不含蛋白質，G-含量較高。放線菌為G+，其細胞壁具有G+所具有的特點。酵母菌和霉菌為真菌，酵母菌的細胞壁外層為甘露聚糖，內層為葡聚糖；而霉菌的細胞壁成分為幾丁質、蛋白質、葡聚糖。3青霉素只對處于生長繁殖旺盛時期的細胞有抑制作用，而對處于休止狀態(tài)的細胞沒有抑制作用，請分析這種說法的正誤，并說明你的理由。原因：

10、青霉素抑制肽聚糖的合成過程，形成破裂的細胞壁，代謝旺盛的細菌才存在肽聚糖的合成，因此此時有青霉素作用時細胞易死亡。作用機制：青霉素破壞肽聚糖合成過程中肽尾與肽橋間的轉肽作用。對革蘭陽性菌有效，由于革蘭陰性菌缺乏五肽交連橋所以青霉素對其作用不大。補充：第三章 病毒和亞病毒 1 溫和性噬菌體：噬菌體侵染宿主后，并不增殖，裂解，而與宿主DNA結合，隨宿主DNA復制而復制，此時細胞中找不到形態(tài)上可見的噬菌體，這種噬菌體稱為溫和性噬菌體或溶源噬菌體。2 溶原菌：含有溫和性噬菌體的細菌稱為溶源性細菌。   溶源性噬菌體附著或整合在宿主染色體上，一道復制。

11、3包涵體： 4類病毒：是一類只含RNA一種成分，專性寄生在活細胞內的分子病原體。1、什么叫烈性噬菌體？簡述其裂解性生活史。    烈性噬菌體：凡在短時間內能連續(xù)完成吸附、侵入、增殖、成熟、 裂解這五個階段而實現其繁殖的噬菌體，稱為烈性噬菌體。   吸附 噬菌體尾絲散開，固著于特異性受點上。   侵入 尾鞘收縮，尾管推出并插入到細胞壁和膜中，頭部的核酸注入到宿主細胞中，而蛋白質衣殼留在細胞壁外。   增殖 增殖過程包括核酸的復制和蛋白質的生物合成。注入細胞的核酸操縱宿主細胞代謝機構，以寄主個體及細胞降解物和培養(yǎng)基介質

12、為原料，大量復制噬菌體核酸，并合成蛋白質外殼。   成熟（裝配）寄主細胞合成噬菌體殼體(T4噬菌體包括頭部、尾部),并組裝成完整的噬菌體粒子。   裂解（釋放）子代噬菌體成熟后，脂肪酶和溶菌酶促進宿主細胞裂解，從而釋放出大量子代噬菌體。 第四章 微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基1 生長因子：一類對微生物正常代謝必不可少且又不能從簡單的碳、氮源自行合成的所需極微量的有機物。2 基團移位：指一類既需特異性載體蛋白的參與，又需耗能的一種物質運送方式。其機制分兩步：（1）HPr被PEP激活，（2）糖經磷酸化而進入細胞內。3 選擇性培養(yǎng)基：選擇培養(yǎng)基是一類根據某微生

13、物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養(yǎng)基，具有使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌的功能，廣泛用于菌種篩選等領域。如酵母富集培養(yǎng)基中的孟加拉紅抑制細菌的生長而對酵母菌無影響，偏酸性的環(huán)境有利于酵母菌的生長。4 鑒別性培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入能于某一菌的無色代謝產物發(fā)生顯色反應的指示劑，從而用肉眼就能使該菌菌落與外形相似的它種菌落相區(qū)分的培養(yǎng)基就稱鑒別性培養(yǎng)基。  1試比較細胞膜運輸營養(yǎng)物質的四種方式。比較項目    單純擴散 促進擴散主動運輸基因移位特異載體蛋白無慢由濃至稀內外相等無特異性不需要不變     

14、;   無無競爭性無H2O、CO2、O2甘油、乙醇、少數氨基酸、鹽類、代謝抑制劑有快由濃至稀內外相等特異性不需要不變有有競爭性有SO42+、PO43+、糖（真核生物）有快由稀至濃內部濃度高得多特異性需要不變有有競爭性有有快由稀至濃內部濃度高得多特異性需要改變有有競爭性有運送速度溶質運送方向平衡時內外濃度運送分子能量消耗運送前后溶質分子載體飽和效應與溶質類似物運送抑制劑運送對象舉例氨基酸、乳糖等糖類、Na+、Ca2+等無機離子葡萄糖、果糖、甘露糖、嘌呤、核苷、脂肪酸等2、什么是鑒別性培養(yǎng)基？試以EMB培養(yǎng)基為例，分析其鑒別作用的原理。   鑒別性培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入

15、能于某一菌的無色代謝產物發(fā)生顯色反應的指示劑，從而用肉眼就能使該菌菌落與外形相似的它種菌落相區(qū)分的培養(yǎng)基就稱鑒別性培養(yǎng)基。     EMB作用原理    其中的伊紅和美藍兩種苯胺染料可抑制革蘭氏陽性細菌和一些難培養(yǎng)的革蘭氏陰性細菌。在低酸度時，這兩種染料結合形成沉淀，起著產酸指示劑的作用。因此試樣中的多種腸道細菌會在EMB培養(yǎng)基上產生相互易區(qū)分的特征菌落，因而易于辨認。尤其是大腸桿菌，因其強烈分解乳搪而產生大量的混合酸，菌體帶H+故可染上酸性染料伊紅，又因伊紅與美藍結合，所以菌落染上深紫色，從菌落表面的反射光中還可看到綠色金屬閃光。

16、3、簡述配制培養(yǎng)基的基本原則:P91 培養(yǎng)基是人工配制的供不同微生物生長繁殖，或用于積累代謝產物的營養(yǎng)基質。所以配制培養(yǎng)基時應注意以下原則：1目的明確 2營養(yǎng)協(xié)調 3理化適宜 4 經濟節(jié)約1.根據微生物的不同選用不同的培養(yǎng)基， 2.注意各種營養(yǎng)物質的濃度與配比。3.注意將培養(yǎng)基的pH值控制在一定范圍內。6、試述配制培養(yǎng)基的基本過程及應該注意的問題。配制培養(yǎng)基的基本過程是:按培養(yǎng)基的配方稱取各種藥品，用量太少的藥品應配制成溶液后再取一定量加入。將各種藥品加水溶解，通常是加所需水量的一半。若配固體培養(yǎng)基，按2%的用量稱取瓊脂，用水將瓊脂浸濕一下，用手擠去瓊脂中過多的水分，加入2的溶液中。加熱至瓊脂

17、全部溶解，并補足所需的全部水量。用1molNaOH和1molHCL調節(jié)pH至要求值。用分裝器將培養(yǎng)基分裝入試管或三角瓶中，塞上棉塞并包扎，滅菌后備用。注意事項:配制過程中，在加熱熔化瓊脂時，要不斷攪拌，以防糊底。分裝時不要讓培養(yǎng)基沾染試管口或瓶口，以防培養(yǎng)過程中容易污染雜菌。同時還應考慮培養(yǎng)基的氧化還原電位及原材料的經濟、易購和來源廣泛的原則。Ashby無氮培養(yǎng)基：（富集好氧性自生固氮菌用） 甘露醇1%，KH2PO4 0.25%，MgSO4.7H2O 0.02%，NaCL 0.02% ，CaSO4.2H2O 0.01%，CaCO3 0.05%。試述其碳源 氮源 能源物質各是什么？ CaCO3起

18、什么作用？該 培 養(yǎng) 基 的 C 素 來 源 和 能 量 來 源 均 來 自 甘 露 醇 。該 培 養(yǎng) 基 未 提 供 氮 素 來 源 ，根據 所 學 知 識 ，只 有 能 固 氮 的 微 生 物 才 能 在 無 氮 培 養(yǎng) 基 上 生 長 。該 培 養(yǎng) 基 的 礦 質 營 養(yǎng) 物 質 包 括 ：Mg2+, K+, Cu2+ , Na+, PO43-, SO42- HPO42-, PO43-, CaCO3 主 要 用 來 作 緩 沖 物 質 調 節(jié) 培 養(yǎng) 基 的 pH 值 , 以 保 持 pH 不 變 。 據 此 我 們 可 推 知 該培 養(yǎng) 基 可 用 于 培 養(yǎng) 自 生 固 氮 菌 等

19、微 生 物 。第五章  微生物的新陳代謝1次生代謝產物：指某些微生物生長到穩(wěn)定期前后，以結構簡單，代謝途徑明確，產量較大的初生代謝產物作前體，通過復雜的次生代謝途徑所合成的各種結構復雜的化學物。如抗生素，生物堿，信息素等。2 ED途徑:  ED 是少數EMP途徑不完整的細菌所特有的利用葡萄糖的替代途徑，為微生物所特有。一分子葡萄糖經ED途徑可生成兩個丙酮酸并凈生成一個ATP、一個NADH+H+和一個NADPH+H+。ED途徑的特點：aKDPG裂解為丙酮酸和3-磷酸甘油醛b存在一特征性酶KDPG 醛縮酶c其終產物兩分子丙酮酸來歷不同，其一由KDPG直接裂解

20、而成，另一則有3-磷酸甘油醛經EMP 途徑轉化而來d產能效率低。TCA循環(huán)特點：a氧雖不直接參與其中反應，但必須在有氧條件下運轉b每分子丙酮酸可產生4個NADH+H+，一個FADH2，一個GTP, 總共相當于15個ATP，因此產能效率極高cTCA位于一切分解代謝和合成代謝的樞紐地位，不僅可以為微生物的合成代謝提供各種碳架原料，而且還與人類的發(fā)酵生產密切相關。3 發(fā)酵：目前泛指任何好氧型或厭氧型微生物來生產有用代謝產物或食品飲料的一類生產方式。（ 無氧等外源氫受體的條件下，底物脫氫后產生的還原力不經呼吸鏈而直接傳遞給某一內源性中間代謝物接受，以實現底物水平磷酸化的一類生物氧化反應。）4 異型乳酸

21、發(fā)酵（HMP）：凡葡萄糖經乳酸發(fā)酵后除主要產生乳酸外，還產生乙醇，乙酸和CO2等多種產物的發(fā)酵稱異型乳酸發(fā)酵。5 生物固氮：大氣中的分子氮通過微生物固氮酶的催化作用而還原成氨的過程，生物界中只有原核生物才有固氮能力。生物固氮6要素：ATP的供應，還原力及其傳遞載體， 固氮酶，還原底物N2，鎂離子，嚴格的厭氧環(huán)境。固氮酶除了催化N2生產NH3外，還具有催化2H+ +2e-H2反應的氫化酶活性。肽聚糖分成分3個階段：a在細胞質中合成，合成PARK核苷酸，UDP作為糖載體。B在細胞膜中合成，合成肽聚糖單體 ， 稱作細菌萜醇的類脂載體。C在細胞膜外合成，交聯(lián)作用形成肽聚糖。青霉素作用于肽聚糖的合成過程

22、，對肽聚糖已合成好的細菌（處于停滯期）無作用。轉肽作用可被青霉素抑制，其作用機制是：青霉素是肽聚糖單體五鈦尾末端的D-丙氨酰-D-丙氨酸的結構類似物。應用營養(yǎng)缺陷型菌株解除正常的反饋調節(jié)。舉例：a賴氨酸發(fā)酵b肌氨酸的生產生物氧化的形式包括某物質與氧結合，脫氫和失去電子3種。生物氧化的過程可分為脫H,遞H,受H3個階段，生物氧化的功能有產能，產還原力，和產小分子中間代謝產物3種。生物氧化的類型包括呼吸，無氧呼吸，發(fā)酵3種。底物脫氫4種途徑：EMP,HMP,ED,TCA循環(huán)。EMP途徑的特點和意義：供應ATP形式的能量和NADH2形式的還原力，連接其他三個重要途徑的橋梁，為微生物合成提供多種重要的

23、中間產物，通過逆向反應可進行多糖合成。HMP當葡萄糖經一次磷酸化脫氫生成6-磷酸葡萄糖酸后，在6-磷酸葡萄糖酸脫酶作用下，再次降解為14分子CO2和1分子磷酸戊糖。作用：供應合成原料；產還原力；作為固定CO2的中介；擴大碳源的利用范圍；連接EMP途徑。特點：葡萄糖不經EMP途徑和TCA循環(huán)而得到徹底氧化，并能產生大量NADPH+H+形式的還原力及多種重要的中間產物。 呼吸，又稱好氧呼吸，特點是底物按常規(guī)方式脫氫后，脫下的氫經完整的呼吸鏈又稱電子傳遞鏈傳遞，最終被外源分子氧接受，產生水并釋放ATP 形式的能量。無氧呼吸：指一類呼吸鏈末端的H受體為外源無機氧化物(少數為有機物)的生物氧化。特點：底

24、物按常規(guī)方式脫氫后，經部分呼吸鏈遞氫，最終由氧化態(tài)的無機物或有機物受氫，并完成氧化磷酸化途徑產能反應。碳酸鹽呼吸：是一類以CO2或碳酸鹽作為呼吸鏈末端氫受體的無氧呼吸。根據其還原產物不同分為兩類;產甲烷菌產生的甲烷的碳酸鹽呼吸，其二是產乙酸菌產生乙酸的碳酸鹽呼吸。第六章  微生物的生長及其控制。1恒濁器：根據培養(yǎng)器內微生物的生長密度，借光電控制系統(tǒng)控制培養(yǎng)液流速，以達到菌體密度高，生長速率恒定的連續(xù)培養(yǎng)器。2恒化器：通過保持有一種生長限制因子的培養(yǎng)液的流速不變，可使微生物始終處在低于其最高生長速率的條件下進行生長繁殖的連續(xù)培養(yǎng)器。3同步生長：通過獲得同步培養(yǎng)物的手段，使細胞

25、群體中各個體都處于分裂步調一致的生長狀態(tài)4連續(xù)培養(yǎng)：指微生物接種到培養(yǎng)基里以后的整個生長期間，微生物能持續(xù)地以比較恒定的生長速率常數進行生長，從而導致微生物的生長過程能“不斷”地進行下去的一種培養(yǎng)方法。優(yōu)點：高效、低耗、利于自控、產品質量穩(wěn)定。缺點 菌種易于退化；容易污染；營養(yǎng)物的利用率低于分批培養(yǎng)。 因此連續(xù)時間是有限的5 石碳酸系數：在一定時間內，被試藥劑能殺死全部供試菌的最高稀釋度與達到同效的石碳酸的稀釋度之比。P1791、什么是典型生長曲線？它可分幾期？劃分的依據是什么？各期特點如何？ 典型生長曲線 ：將少量純種單細胞微生物接種到恒容積的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)。在適宜條件

26、下，其群體就會有規(guī)律地生長，定時取樣測定細胞含量，以細胞數目的對數值作縱坐標，以培養(yǎng)時間作橫坐標，就可以畫出一條有規(guī)律的曲線，這就是微生物的典型生長曲線。   劃分的依據：單細胞微生物。   (1)延滯期(停滯期、調整期) 特點：a.生長速率常數為零；b.細胞形態(tài)變大或增大；c.細胞內RNA尤其是rRNA含量增高，原生質呈嗜堿性。d.合成代謝活躍；e.對外界不良條件的反應敏感。   (2) 對數期 特點：此時菌體細胞生長的速率常數R最大，分裂快，代時短，細胞進行平衡生長，菌體內酶系活躍，代謝旺盛，菌體數目以幾何級數增加，群體的形態(tài)與生

27、理特征最一致，抗不良環(huán)境的能力強。穩(wěn)定期 特點：a.生長速率常數為零；b.菌體產量達到最高；c.活菌數相對穩(wěn)定；d.細胞開始貯存貯藏物；e.芽孢在這個時期形成；f.有些微生物在此時形成次生代謝產物。 衰亡期 特點：a.細胞形態(tài)多樣；b.出現細胞自溶現象；c.有次生代謝產物的形成；d.芽孢在此時釋放。      2、延滯期有何特點？如何縮短延滯期？影響延滯長短的因素。 特點：a.生長速率常數為零；b.細胞形態(tài)變大或增大；c.細胞內RNA尤其是rRNA含量增高，原生質呈嗜堿性。d.合成代謝活躍；e.對外界不良條件的反應敏感。消除：a. 以對數期的菌

28、體作種子菌 ；b. 適當增大接種量 ：一般采用3%8%的接種量，根據生產上的具體情況而定，最高不超過1/10。c. 培養(yǎng)基的成分：種子培養(yǎng)基盡量接近發(fā)酵培養(yǎng)基 。影響延滯長短的因素：1接種齡 2接種量 3培養(yǎng)基成分。3、微生物培養(yǎng)過程中pH變化的規(guī)律如何？如何調整？ 微生物的生命活動過程中會自動地改變外界環(huán)境的pH，其中發(fā)生pH改變有變酸和變堿兩種過程，在一般微生物的培養(yǎng)中往往以變酸占優(yōu)勢，因此，隨著培養(yǎng)時間延長，培養(yǎng)基的pH會逐漸下降。PH的變化還與培養(yǎng)基的組分尤其是碳氮比有很大關系，碳氮比高的培養(yǎng)基經培養(yǎng)后pH會明顯下降；相反，碳氮比低的培養(yǎng)基經培養(yǎng)后，其pH常會明顯上升。措施：

29、分為“治標”和“治本”兩大類，前者指根據表面現象而進行直接、及時、快速但不持久的表面化調節(jié)，后者指根據內在機制而采用的間接、緩效但可發(fā)揮持久作用的調節(jié)。治標：1）過酸時：加NaOH等堿液中和2）過堿時：加H2SO4等酸液中和治本：1）過酸時：加適當氮源：加尿素，NaNO3或蛋白質。提高通氣量2）過堿時：加適當碳源：加糖，乳酸，醋酸，檸檬酸或油脂。 降低通氣量4、試述高溫滅菌的方法。1、干熱滅菌法（1）原理：干熱可使細胞膜破壞、蛋白質變性和原生質干燥，并可使各種細胞成分發(fā)生氧化變質。（2）應用范圍：1）烘箱內熱空氣滅菌法（150170，12hr）：金屬器械、洗凈的玻璃器皿。2）火焰灼燒法：接種環(huán)

30、、接種針等。2、濕熱滅菌： 即以100以上的加壓蒸氣進行滅菌。（1）相同溫度及相同作用時間下，濕熱滅菌法比干熱滅菌法更有效：濕熱空氣穿透力強，能破壞維持蛋白質空間結構和穩(wěn)定性的氫鍵，能加速其變性。（2）種類： 1)常壓法a.巴氏消毒法： 用較低的溫度處理牛乳或其他液態(tài)食品，殺死其中可能存在的無芽孢病原菌而又不損害營養(yǎng)與風味的消毒方法。a)低溫維持法(LTH)：要求62.8保持30min；b)高溫瞬時法(HTST)：要求71.7維持至少15s； b.煮沸消毒法：a)適用范圍：一般用于飲用水的消毒。b)條件：100下數分鐘。c.間隙滅菌法：又稱丁達爾滅菌法或分段滅菌法。a) 適用范圍：適用于不耐熱

31、培養(yǎng)基的滅菌。b) 條件：80一100下蒸煮1560分鐘，三天。2)加壓法：a.常規(guī)加壓法a) 適用范圍：適合于一切微生物學實驗室、醫(yī)療保健機構或發(fā)酵工廠中對培養(yǎng)基及多種器材、物料的滅菌。b) 條件：121(壓力為lkgcm2)，時間維持1520分鐘，也可采用在較低的溫度(115，即0.7kgcm2下維持35分鐘的方法。b.連續(xù)加壓滅菌法：在發(fā)酵行業(yè)里也稱“連消法”。a) 適用范圍：在大規(guī)模的發(fā)酵工廠中作。培養(yǎng)基滅菌用。主要操作是將培養(yǎng)基在發(fā)酵罐外連續(xù)不斷地進行加熱、維持和冷卻，然后才進入發(fā)酵罐。b) 條件：在135140下處理5一l 5秒鐘率的菌體      &

32、#160;實驗室為主微生物的抗藥性：抗藥性主要通過遺傳途徑產生，如基因突變，遺傳重組和質粒轉移等。 產生原因：a產生一種能使藥物失去活性的酶b把藥物作用的靶位加以修飾和改變c形成救護途徑d使藥物不能透過細胞膜e通過主動外排系統(tǒng)把進入細胞內的藥物泵出細胞外。第八章 微生物的生態(tài)名詞解釋1互生：指兩種可以單獨生活的生物，當其生活在一起時，通過各自的代謝活動而有利于對方或偏利于一方的生活方式。2拮抗：指由某種生物所產生的某種代謝產物可抑制他種生物的生長發(fā)育甚至殺死它們的一種相互關系。3大腸菌群：指任何可發(fā)酵乳糖產酸產氣的G-，桿狀，無芽孢，兼性厭氧的腸道細菌，典型代表是E.coli。4 BOD5：即

33、五日生化需氧量。指在20下，1L污水中所含的有機物，在進行微生物氧化時，五日內所消耗的分子氧的 毫克數。1 簡述微生物與生物環(huán)境間五種常見的關系，并各舉一例。 互生:指兩種可以單獨生活的生物，當其生活在一起時，通過各自的代謝活動而有利于對方或偏利于一方的生活方式。共生:指兩種生物共居在一起，相互分工協(xié)作、相依為命，甚至達到難分難解、合二為一的一種相互關系。寄生:指一種小型生物生活在另一種較大型生物的體內或體表，從中攝取營養(yǎng)進行生長繁殖，并使后者蒙受損害甚至死亡的現象.拮抗: 指由某種生物所產生的某種代謝產物可抑制他種生物的生長發(fā)育甚至殺死它們的一種相互關系?；炀囵B(yǎng): 又稱混菌發(fā)酵或混合發(fā)酵指

34、在發(fā)酵工業(yè)中采用兩種或兩種以上的具有互補性質的菌種進行混合培養(yǎng)我國衛(wèi)生部門對飲用水的衛(wèi)生標準為：每ml水細菌總數不超過100個，大腸菌群數每升水不超過3個。 舉例1. 互生。金黃色葡萄球菌的生長為本來在平板上不能生長的嗜血流感菌提供生長因子，后者在其菌苔周圍形成衛(wèi)星菌落。2. 共生。根瘤菌與豆科植物間的共生形成根瘤共生體，根瘤菌固定大氣中的氣態(tài)氮為植物提供氮素養(yǎng)料；豆科植物的根的分泌物能刺激根瘤菌的生長，同時 還為根瘤菌提供保護和穩(wěn)定的生長條件。3.寄生。冬蟲夏草是子囊菌寄生于鱗翅目幼蟲而形成的。第九章1 類毒素：若用0.3%-0.4%的甲醛溶液對外毒素進行脫毒處理，可獲得失去毒性但仍保留其原

35、有免疫原性的生物制品，稱為類毒素。2 半抗原：缺乏免疫原性而有免疫反應性的的抗原。3 干擾素：是高等動物細胞在病毒或dsRNA等誘生劑的刺激下，所產生的具有高活性的，廣譜抗病毒等功能的特異性糖蛋白，相對分子質量很小。4.抗原：抗原是指一類能誘導機體發(fā)生免疫應答并能與相應抗體或T淋巴細胞受體發(fā)生特異性免疫反應的大分子物質?？乖话銘瑫r具備兩個特征：a免疫原性b免疫反應性。外毒素：指在病原細菌生長過程中不斷向外界環(huán)境分泌的一類毒性蛋白，有的屬于酶有的屬于酶原，有的屬于毒蛋白。內毒素：G-細胞壁外層的組分之一，其化學成分是脂多糖。炎癥:是機體對病原體的侵入或其他損失的一種保護性反應，它既是一種病理

36、過程，又是一種防御病原體入侵的積極的免疫反應。補體：實為一補體系統(tǒng)，是存在于正常人體和高等動物血清中的一組非特異性血清蛋白。主要成分是B球蛋白?？贵w：是高等動物在抗原物質的刺激下，由漿細胞所產生的能與相應抗原在體內外發(fā)生特異性結合的免疫球蛋白。有5個特點：a僅有魚類以上的脊椎動物漿細胞所產生b必須有相應抗原刺激免疫細胞后才能產生c能與相應抗原發(fā)生特異性，非共價和可逆的結合d其化學本質是一類具有體液免疫功能的球蛋白e因抗體是蛋白質，故具抗體功能也可作抗原去刺激異種生物產生相應的抗體，即抗抗體。目前，純化后的Ig已分五類，其統(tǒng)一名稱為IgM，A,D,G,E.典型的Ig分子是由一長一短兩對多肽鏈對稱

37、排列而成的一個Y型分子。近對稱軸的一對較長的肽鏈稱為重鏈或H鏈，外側一對較短的肽鏈稱為輕鏈或L鏈。8.用什么方法可獲得大腸桿菌(E.coli)的組氨酸缺陷型？篩選營養(yǎng)缺陷型菌株一般要經過誘變、淘汰野生型，檢出和鑒定營養(yǎng)缺陷型4個環(huán)節(jié)。將篩選得到的缺陷型菌株分別涂在不加任何氨基酸的基本培養(yǎng)基和加有組氨酸的基本培養(yǎng)基上，若前者不長后者長出菌落，即為組氨酸缺陷型。 第七章1質粒：凡游離于原核生物核基因組以外，具有獨立復制能力的小型共價閉合環(huán)狀的dsDNA分子。2 F因子：又稱F質?；蛐砸蜃?，是大腸桿菌等細菌決定性別并有轉移能力的質粒3溶源轉變：當正常的溫和噬菌體感染其宿主而使其發(fā)生溶源化時

38、，因噬菌體基因整合到宿主的核基因組上，而使宿主獲得了除免疫性外的新遺傳性狀的現象。4Ames實驗：利用細菌營養(yǎng)缺陷型的回復突變來檢測環(huán)境或食品中是否存在化學致癌劑的有效方法。5光復活作用：把經UV照射后的微生物立即暴露于可見光下時，就可出現明顯降低其死亡率的現象，此即光復活作用。6 準性生殖：是一種類似有性生殖但比它更原始的兩性生殖方式，這是一種在同種而不同菌株的體細胞間發(fā)生的融合，它可不借減數分裂而導致低頻率的基因重組并產生重組子。其過程是：a菌絲聯(lián)結b形成異核體c核融合d體細胞交換和單倍體化。7 營養(yǎng)缺陷型：營養(yǎng)缺陷型是指通過誘變而產生的缺乏合成某些營養(yǎng)物質如氨基酸、維生素和堿基等的能力，

39、必須在其基本培養(yǎng)基中加入相應的營養(yǎng)成分才能正常生長的變異株1什么叫基因重組？簡述原核生物和真核生物基因重組的主要形式。P223兩個獨立基因組內的遺傳基因通過一定的途徑轉移到一起，形成新的穩(wěn)定基因組的過程，稱基因重組。原核生物的基因重組：1轉化 2轉導 3接合真核：1有性雜交 2準性雜交2什么叫營養(yǎng)缺陷型菌株？在實驗室中如何從野生型菌株獲得營養(yǎng)缺陷型菌株，請設計一個具體的方案。3簡述營養(yǎng)缺陷型菌株篩選的主要步驟和方法P221篩選營養(yǎng)缺陷型菌株一般要經過誘變、淘汰野生型,檢出和鑒定營養(yǎng)缺陷型4個步驟。S1 誘變劑處理；紫外線S2淘汰野生型：1青霉素法 2菌絲過濾法S3 檢出缺陷型：1夾層培養(yǎng)法；先

40、在培養(yǎng)皿的底部到一層不含菌的基本培養(yǎng)基，待凝，添加一層混有經誘變劑處理菌液的基本培養(yǎng)基，其上再澆一層不含菌的基本培養(yǎng)基，經培養(yǎng)后，對首次出現的菌落用記號筆一一標在皿底。然后，再向培養(yǎng)皿內到一層含有特定生長因子的基本培養(yǎng)基，長出的形態(tài)較小的菌株，多數是營養(yǎng)缺陷型菌株。2限量補充培養(yǎng)法 3逐個檢出法 4影印平板法S4 鑒定缺陷型：生長譜法：把營養(yǎng)缺陷型細胞制成適當濃度的懸液，取0.1ml與基本培養(yǎng)基混合后，傾注在培養(yǎng)基內，待凝固，表面干燥后，然后再在培養(yǎng)皿表面加上微量待鑒定缺陷型所需的營養(yǎng)物粉末，如氨基酸，維生素，堿基等。經培養(yǎng)后，若發(fā)現此營養(yǎng)物的表面有生長圈產生，就說明此菌就是該營養(yǎng)物的缺陷型突

41、變株。4簡述誘變育種中應堅持的基本原則1選擇簡便有效的誘變劑 2挑選優(yōu)良的出發(fā)菌株 3處理單細胞或單孢子懸液 4選用最適的誘變劑量 5充分利用復合處理的協(xié)調效應 6利用和創(chuàng)造形態(tài)，生理與產量間的相關指標 7設計高效篩選方案8創(chuàng)造新型篩選方法。5簡述5種生物菌種保藏的方法1冰箱保藏法 2石蠟油封藏法 3甘油懸液保藏法4冷凍干燥保藏法 5液氮保藏法6試述從自然界中進行菌種分離篩選的一般步驟1）采集菌樣2） 富集培養(yǎng)：利用選擇性培養(yǎng)基原理，向所采土樣中加入某些特殊營養(yǎng)物并創(chuàng)造一些有利于待分離對象生長的條件，使樣品中少量的能分解利用該營養(yǎng)物的微生物大量繁殖，以提高其在群體中的比例，以便于分離。Eg：通

42、過配制選擇性培養(yǎng)基，選擇一定的培養(yǎng)條件來控制無關的微生物至少是數量上減少盡量無關的微生物如：碳源利用的控制，可選定糖，淀粉、纖維素，或者石油等，以其中的一種為唯一碳源，選擇利用這唯一碳源才能大量正常生長的微生物，而淘汰其它微生物。3 ）純種分離：將增殖培養(yǎng)效果顯著的優(yōu)勢菌種（混雜生長的微生物）。進步控制富集培養(yǎng)的選擇性條件，采用劃線分離法、稀釋分離法等純化方法獲取單菌落純種分離法：（1）菌落純：a 平板表面涂布法 b 平板劃線分離法 c 瓊脂培養(yǎng)基澆注法。（2）細胞純：a 用分離小室進行單細胞分離 b 用顯微操縱器 c 用菌絲尖端切割4 ）性能測定11、如何從土壤中分離得到一個微生物的純培養(yǎng)體

43、?首先要根據分離對象選擇適宜的培養(yǎng)基。若要分離真菌應選用馬丁-孟加拉紅選擇培養(yǎng)基；若要分離細菌應選用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基；若要分離放線菌應選用高氏培養(yǎng)基。土樣采回來后，用常規(guī)的十倍稀釋分離法進行稀釋分離，若分離細菌，一般稀至10-8,若分離放線菌,一般稀至10-6；若分離真菌，一般稀至10-4。取最后三個稀釋度倒平板獲得單個菌落。將平板上出現的單菌落轉接斜面培養(yǎng)，同時鏡檢菌體的純度，若不純，應將培養(yǎng)的單菌落斜面再次進行稀釋分離。倒平板獲得單菌落，轉接斜面培養(yǎng)，同時鏡檢菌體的純度。反復幾次直到得到菌體單一的單菌落方可認為是某一微生物的純培養(yǎng)體。制作菌種稀釋液：稱取10g甜酒曲壓成粉狀，放入已滅菌的

44、盛有90mL無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中溶解。接著用1mL的無菌移液管吸取1mL甜酒曲稀釋液加入盛有9mL無菌水的試管中充分搖勻，此為10-2稀釋液，以此類推制成10-3，10-4，10-5，10-6幾種稀釋度的甜酒曲溶液2。涂布：將上述凝固好的培養(yǎng)基平板底部用記號筆分別寫好稀釋度字樣，然后用1mL的無菌移液管分別由10-4，10-5和10-6的試管中吸取稀釋液0.1mL對號放入已寫好稀釋度的平板中，用無菌玻璃涂棒，在各培養(yǎng)基表面輕輕地涂布均勻，室溫下靜置5-10min，使菌液吸附進培養(yǎng)基3。劃線：在近火焰處，蘸取10-2，10-3的稀釋液一環(huán)在平板上劃線。培養(yǎng)：將上述平板倒置于28培養(yǎng)箱中

45、培養(yǎng)1星期。挑菌落：取出培養(yǎng)基觀察單菌落的生長情況。由根霉菌落的特點挑取少許單個菌落的菌絲接到斜面培養(yǎng)基上，放置培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1星期。檢查其特征是否一致，若不一致，即發(fā)現雜菌，則需在斜面上繼續(xù)挑取菌絲培養(yǎng)，繼續(xù)純化，直至獲得純培養(yǎng)。7某藥廠生產林可霉素，該廠為了提高產量，請你從微生物遺傳變異的角度來為該廠設計獲得高產菌株的方案。誘變得三個環(huán)節(jié)：a突變的誘發(fā)，b突變株的篩選，c突變高產基因的表型基本步驟出發(fā)菌株的選擇 處理菌懸液的制備誘變處理中間培養(yǎng)分離和篩選誘變育種基本原則：1選擇簡便有效的誘變劑 2挑選優(yōu)良的出發(fā)菌株3處理單細胞或單孢子懸液4選用最適的誘變劑量5充分利用復合處理的協(xié)同效應6利用

46、和創(chuàng)造形態(tài)生理與產量間的相關指標7設計高效篩選方案8創(chuàng)造新型篩選方案 出發(fā)菌株的選擇選擇野生型菌株，對誘變處理較敏感，效果好出發(fā)菌株選23株，在處理比較后，取更適合的出發(fā)菌株作繼續(xù)誘變。 菌懸液的制備制備單細胞和單孢子、活力類似的菌懸液。 誘變處理根據誘變劑特性，結合誘變對象的實際，設計誘變處理方案。 中間培養(yǎng)（穩(wěn)定性試驗）突變表型有一個表現延遲的過程，即細胞內原有酶量的稀釋過程(生理延遲)，需3代以上的繁殖才能將突變性狀表現出來。方法：處理后細胞在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)幾小時，讓細胞繁殖5代，以得到純的變異細胞。 分離和篩選初篩以迅速篩出大量的達到初步要求的分離菌落為目的，以量為主。以變色圈或透明

47、圈的大小將90%的菌落淘汰復篩則是精選，以質為主，也就是以精確度為主。以效價和穩(wěn)定性選得優(yōu)秀菌株操作步驟1. 菌液以3000rmin離心5min，棄上清，沉淀用無菌生理鹽水再離心洗滌2. 將菌液用無菌玻璃珠的三角瓶內搖勻，細胞數可達108個ml左右，作為待處理菌懸液。3.分別取梯度105 ,106,107,108個細胞數ml 菌液4m1于9cm培養(yǎng)皿內，預熱紫外燈10min，開啟皿蓋,無菌磁力攪拌照射1050s。操作均避免白熾光,在紅燈下進行，或用黑紙包住。4. 取未照射的菌液和照射菌液各o.5ml進行稀釋分離，計數活菌細胞數。5. 取照射菌液2ml于液體培養(yǎng)基中(300ml三角瓶內裝30ml

48、培養(yǎng)液)，120rmin振蕩培養(yǎng)46h。6取中間培養(yǎng)液稀釋分離、培養(yǎng)。7挑取菌落進行篩選。8. 計算致死率,正突變率,負突變率出發(fā)菌株林可霉素產生菌菌種復壯；狹義；指在菌種已發(fā)生衰退的情況下，通過純種分離和測定典型性狀，生產性能等指標從以衰退的群體中篩選出少量未退化的個體。措施；純種分離法；1純種分離法2通過宿主體復壯3淘汰以衰退的個體第十章1試述在菌種鑒定中常用的甲基紅(MR)和V.P.試驗的原理（1）甲基紅試驗原理：某些細菌在糖代謝過程中，分解葡萄糖產生丙酮酸，丙酮酸可進一步分解，產生甲酸、乙酸、乳酸等，使培養(yǎng)基的pH降至4.5以下，當加入甲基紅試劑則呈紅色，為甲基紅試驗陽性。若細菌分解葡

49、萄糖產酸量少，或產生的酸進一步轉化為其他物質（如醇、酮、醚、氣體和水等），則培養(yǎng)基的酸度仍在pH6.2以上，故加入甲基紅指示劑呈黃色，是為陰性。 （2）培養(yǎng)基：葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基醫(yī)學教|育網搜集整理。 （3）方法：將待檢菌接種于上述培養(yǎng)基中，培養(yǎng)24d，于培養(yǎng)基內加入甲基紅試劑，立即觀察結果。 （4）結果：呈現紅色為陽性；橘紅色為弱陽性；黃色為陰性。 （5）應用：主要用于鑒別大腸埃希菌與產氣腸桿菌，前者為陽性，后者為陰性。此外腸桿菌科中沙門菌屬、志賀菌屬、枸櫞酸桿菌屬、變形桿菌屬等為陽性，而腸桿菌屬、哈夫尼亞菌屬則為陰性。 V.P2 原理 某些細菌在葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)液中能分解葡萄糖產生丙酮

50、酸，丙酮酸縮合，脫羧成乙酰甲基甲醇，后者在強堿環(huán)境下，被空氣中氧，氧化為二乙酰，二乙酰與蛋白胨中的胍基生成紅色化合物，稱VP（+）反應。2簡述微生物菌株鑒定的主要步驟和微生物的分裂鑒定方法。a獲得該種微生物的純種培養(yǎng) b 測定一系列必要的鑒定指標 c 查找權威性的鑒定手冊方法：a 經典方法：1 經典的鑒定指標 2 微生物的微型，簡便，快速或自動化鑒定技術 b 現代方法：1通過核酸分析鑒定微生物遺傳型 2 細胞化學成分用作鑒定指標 3 數值分類法第十章分類學的3個具體任務：分類，鑒定，命名。微生物的種是一個基本分類單元，它是一大群表型特征高度相似，親緣關系極其接近，與同屬內其他物種有著明顯差異的

51、一大群菌株的總稱。在微生物中，一個種只能用該種內的一個典型菌株當做他的具體代表，故此典型菌株就成了該種的模式種。雙名法是由前面一個屬名和后面一個種名加詞構成。菌株：它表示任何一個由獨立分離的單細胞繁殖而成的純遺傳性群體及其一切后代。在同一菌種的不同菌株間，作為鑒定用的一些主要形狀上雖個個相同，但不作為鑒定用的一些小性狀卻可以有很大差異，尤其是一些生化形狀，代謝產物的產量性狀等。三域學說：三域指古細菌域，真核生物域，真細菌域。伯杰氏手冊，原核生物Ainsworth等人的菌物分類系統(tǒng)綱要，真菌微生物分類鑒定方法的4個不同水平：a細胞形態(tài)和習性水平b細胞組分水平c蛋白質水平d核酸水平：包括G+Cmo

52、l%值測定，核算分子雜交，rRNA寡核苷酸編目分析。菌種鑒定基本步驟：a獲得該微生物的純培養(yǎng)物b測定一系列必要的鑒定指標c查找權威性的菌種鑒定手冊。數值分類法：是一種依據數值分析的原理，借助現代計算機技術對擬分類的微生物對象按大量表型形狀的相似性程度進行統(tǒng)計，歸類的方法。B.s 枯草芽孢桿菌E.c 大腸桿菌S.a 金黃色葡萄球菌S.c釀酒酵母橢圓變種A.放線菌屬S.g 灰色鏈霉菌C.u 產朊假絲酵母A.f 黃曲霉A.n 黑曲霉R o 米根霉名詞解釋1伴孢晶體：少數芽包桿菌在形成芽孢的同時，會在芽孢旁側形成一顆方形，菱形或不規(guī)則形的堿溶性蛋白質晶體。2L型細菌：指在實驗室或宿主細胞內，通過自發(fā)突變而形成的遺傳性穩(wěn)定的細胞壁缺損菌株。3古生菌：又稱古細菌。是一個在進化途徑上很早就與真核生物與真細菌相互獨立的生物類群，主要包括一些獨特生態(tài)類型的原核生物。4菌物界：指和植物界動物界相并列的一類無葉綠