第三次20131022網(wǎng)織紅細(xì)胞、壓積血沉

1、血液沉降率、血液沉降率、血細(xì)胞比容測定、網(wǎng)織紅細(xì)胞血細(xì)胞比容測定、網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)計數(shù)臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)教研室臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)教研室目的 掌握魏氏法測定血沉的原理及方法。原理 將一定量的枸櫞酸鈉抗凝全血置于魏氏血沉管中，直立于血沉架上，由于紅細(xì)胞比重大于血漿，克服血漿阻力而下沉，1h后讀取上層血漿高度的毫米數(shù)。器材 魏氏管、血沉架、洗耳球。（血沉管）試劑 109mmol/L枸櫞酸鈉溶液。標(biāo)本 外周血。一、血液沉降率測定（魏氏法）一、血液沉降率測定（魏氏法）1.加抗凝劑 取109mmol/L枸櫞酸鈉溶液0.4ml加入試管中2.采血 采靜脈血1.6ml加入含抗凝劑的試管中，混勻3.吸血 混勻血吸入血沉管內(nèi)

2、至刻度“0”處，拭去管外殘余血4.立血沉管 將血沉管直立于血沉架上5.讀數(shù) 1h末準(zhǔn)確讀取紅細(xì)胞下沉后露出的血漿高度6.報告方式 XX mm/h操作操作一、血液沉降率測定（魏氏法）一、血液沉降率測定（魏氏法）注意事項(xiàng)注意事項(xiàng) 1.嚴(yán)格控制采血量，使抗凝劑與血液比例為1：4。 2.血沉管放置要垂直，不得傾斜。 3.測量時，血沉架應(yīng)避免直接光照、移動和振動。 4.本實(shí)驗(yàn)最適宜溫度為1825，并要求在采血后2h內(nèi)完成。 5.紅細(xì)胞沉降率在1h沉降過程中，并不是均衡等速度的沉降，絕不可以只觀察30min沉降率，將結(jié)果乘以2作為1h血沉結(jié)果。一、血液沉降率測定（魏氏法）一、血液沉降率測定（魏氏法）參考值

3、參考值成年男性：015mmh。成年女性：020mmh。一、血液沉降率測定（魏氏法）一、血液沉降率測定（魏氏法）二、血細(xì)胞比容測定（溫氏法）二、血細(xì)胞比容測定（溫氏法）目的：掌握溫氏法的原理、操作方法及注意事項(xiàng)原理：將定量的抗凝血以一定的速度和時間離心后，血液中的各種成分互相分離，計算壓實(shí)紅細(xì)胞占全血的比值，即為血細(xì)胞比容。器材器材 專用離心機(jī)、專用毛細(xì)管、微量吸管、專用離心機(jī)、專用毛細(xì)管、微量吸管、膠吸頭、棉簽?zāi)z吸頭、棉簽標(biāo)本標(biāo)本 EDTAEDTA或肝素抗凝靜脈血或肝素抗凝靜脈血操作步驟操作步驟1 1 采血采血 將抗凝血吸入專用毛細(xì)管中，避免氣泡產(chǎn)生2 2 加血加血 用細(xì)長毛細(xì)滴管吸取混勻的抗

4、凝血，插入溫氏管底部，然后將血液緩慢注入至刻度“10”處，并用小橡皮塞塞緊管口3 3 離心離心 RCF2264g離心30min，讀取壓實(shí)紅細(xì)胞層柱高的毫米數(shù)，然后再以同樣速度離心10min，至紅細(xì)胞層高度不再下降為止4 4 讀數(shù)讀數(shù) 以還原紅細(xì)胞層表面為準(zhǔn)，讀取紅細(xì)胞層柱高的毫米數(shù)，乘以0.01，即為HCT值5 5 報告結(jié)果報告結(jié)果 血細(xì)胞比容：0.XX操作步驟操作步驟注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)1 1 抗凝劑抗凝劑2 2 標(biāo)本采集標(biāo)本采集3 3 標(biāo)本處理標(biāo)本處理4 4 溶血的情況溶血的情況網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù) 目的目的 掌握計數(shù)原理、操作方法、注意事項(xiàng) 原理原理 胞質(zhì)內(nèi)殘存核糖核酸等嗜堿性物質(zhì)，經(jīng)煌焦油藍(lán)等染

5、液活體染色后，在顯微鏡下呈藍(lán)色網(wǎng)狀或點(diǎn)狀結(jié)構(gòu)，可與成熟紅細(xì)胞相區(qū)別。 器材 顯微鏡、試管、玻片、推片、香柏油、拭鏡紙、清潔液、（Miller窺盤） 試劑 煌焦油藍(lán)染液（10g/l） 標(biāo)本 新鮮全血操作步驟操作步驟 1 加染液加染液 將Ret染液2滴加至小試管中，做好標(biāo)記 2 加血加血 在已加入染液的小試管內(nèi)注入新鮮全血2滴，立即混勻 3 染色染色 室溫下染色10min 4 涂片制備涂片制備 取染色血1小滴推制成薄血涂片，自然干燥 5 觀察觀察 低倍鏡下選擇紅細(xì)胞分布均勻、著色好、背景清晰的部位進(jìn)行計數(shù) 6 計數(shù)計數(shù) 常規(guī)法 7 計算計算 Ret百分?jǐn)?shù)=（1000個RBC中的Ret數(shù)/1000）100% 8 結(jié)果報告結(jié)果報告 網(wǎng)織紅細(xì)胞百分?jǐn)?shù)：X.X%注意事項(xiàng)注意事項(xiàng) 1. 試劑準(zhǔn)備試劑準(zhǔn)備 推薦使用新亞甲藍(lán)染液，試劑應(yīng)定期配制，用前過濾。 2. 染色染色 染液與血液比以1:1為宜。 3. 標(biāo)本標(biāo)本 應(yīng)及時染色，及時測