倫理審查申請表空表

1、.西安交通大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院生物醫(yī)學(xué)科學(xué)研究倫理審查申請表編號(N)：西交生命科（2017） 號 申請日期： 年 月 日項目名稱： 人腸道防御素HD5促進(jìn)志賀菌吸附及感染的機(jī)制研究項目負(fù)責(zé)人： 許丹職稱： 副教授電話：子信箱：danyatou86 研究單位: 西安交通大學(xué)合作研究單位：負(fù)責(zé)人： 聯(lián)系電話傳真：郵編：研究者： 方堃職稱：主治醫(yī)師研究者： 廖崇兵職稱： 博士在讀擬研究時間： 2018年 1 月1日至2021年12月31日研究課題來源：政府 基金會 公司 國際組織 其他：遞交審查資料：國家自然科學(xué)基金標(biāo)書研究內(nèi)容摘要本項目擬在前期發(fā)現(xiàn)人腸道HD5促志賀菌

2、吸附和感染的基礎(chǔ)上，在細(xì)胞水平系統(tǒng)全面研究HD5促進(jìn)志賀菌吸附感染的時序規(guī)律和作用范疇；利用并改造已有的感染模型，探討HD5促進(jìn)志賀菌吸附感染的在體和離體效果及其生理意義；利用結(jié)構(gòu)生物學(xué)手段對HD5的結(jié)構(gòu)功能關(guān)系進(jìn)行解析；利用電子顯微鏡深入觀察HD5促感染的作用特征，通過基因定點突變體系篩選鑒定HD5在細(xì)菌和宿主細(xì)胞上的作用靶點；在此基礎(chǔ)上結(jié)合多種生物物理學(xué)手段對其中關(guān)鍵相互作用的特點及規(guī)律做以深入表征和分析。在本項目中，涉及到如下人體組織標(biāo)本實驗和動物實驗： （1）利用豚鼠角膜炎模型（Serény測試）、豚鼠直腸感染模型初步確定HD5促進(jìn)志賀菌感染的在體效果；豚鼠角膜炎實驗（Ser

3、ény測試）是檢測志賀氏桿菌毒力和侵襲力的經(jīng)典方法。取對數(shù)生長期菌液離心后重懸于37的PBS中，按1×106 CFU/25l/眼接種于白化豚鼠結(jié)膜囊，每日觀察是否發(fā)生角結(jié)膜炎，連續(xù)觀察1周。在整個實驗過程中，我們將把動物用量減少至最小需要量，保證優(yōu)化實驗方案，善待動物，保障動物福利措施。實驗結(jié)束后動物將通過二氧化碳處死。（2）利用新鮮離體人體結(jié)直腸組織確定HD5促進(jìn)志賀菌對人體組織感染的效果和規(guī)律；將取材于人結(jié)直腸癌手術(shù)切除組織中分離健康的結(jié)腸粘膜組織（切除手術(shù)中除了癌變組織還需切除5-8cm癌變組織前后的健康結(jié)腸），所有取材都事先得到了患者同意，并簽署知情同意書。新鮮組織

4、的粘膜層剝離后切塊后置于1%軟瓊脂固化的組織培養(yǎng)基上培養(yǎng)。將培養(yǎng)至對數(shù)期的志賀菌接種于腸道粘膜在瓊脂平皿上形成的凹陷中，培養(yǎng)若干時間后收集組織，10%福爾馬林固定后行HE染色，觀察組織損傷情況。審查結(jié) 果醫(yī)學(xué)生物科研倫理委員會意見 同意 不同意 修改倫理委員會主任委員簽章（Signature of Ethics Committee Director）：倫理委員會簽章（Signature of Ethics Committee）：2017年 月 日西安交通大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院生物醫(yī)學(xué)科研倫理審批件 編號(N)：西交生命科（2017） 號我院 許丹 申請的國家自然科學(xué)基金項目人腸道防御素HD5促進(jìn)志賀菌吸附及感染的機(jī)制研究經(jīng)過生物醫(yī)學(xué)倫理委員會的審核，符合倫理