實(shí)驗(yàn)一雞胚接種實(shí)用教案

1、一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊?、?shí)驗(yàn)?zāi)康?了解雞胚的基本結(jié)構(gòu)與功能，掌握了解雞胚的基本結(jié)構(gòu)與功能，掌握常用常用(chn yn)(chn yn)的雞胚接種方法。的雞胚接種方法。第1頁/共26頁第一頁，共26頁。二、原理二、原理 雞胚為活的動(dòng)物雞胚為活的動(dòng)物(dngw)(dngw)機(jī)體，機(jī)體，組織分化程度低，病毒易于增殖，可組織分化程度低，病毒易于增殖，可選擇不同的日齡和接種途徑，感染病選擇不同的日齡和接種途徑，感染病毒的組織和液體中含大量病毒。毒的組織和液體中含大量病毒。第2頁/共26頁第二頁，共26頁。二、材料二、材料(cilio)(cilio)第3頁/共26頁第三頁，共26頁。三、雞胚的結(jié)構(gòu)三、雞胚的結(jié)構(gòu)(

2、jigu)與功能與功能第4頁/共26頁第四頁，共26頁。第5頁/共26頁第五頁，共26頁。5.5. 尿囊腔尿囊腔 胚胎的排泄器官，內(nèi)含有尿囊液，胚胎的排泄器官，內(nèi)含有尿囊液，初為透明液體初為透明液體(yt)(yt)，是單純生理鹽溶液，是單純生理鹽溶液，以后尿囊液中尿酸鹽迅速增加，胚胎發(fā)育到以后尿囊液中尿酸鹽迅速增加，胚胎發(fā)育到第第12-1312-13天后，尿囊液開始變得混濁。天后，尿囊液開始變得混濁。第6頁/共26頁第六頁，共26頁。6 6、第7頁/共26頁第七頁，共26頁。第8頁/共26頁第八頁，共26頁。五、孵育五、孵育(f (f y)y)第9頁/共26頁第九頁，共26頁。第10頁/共26

3、頁第十頁，共26頁。 自孵育后的第自孵育后的第4 4天開天開始檢卵，每天一次。始檢卵，每天一次。 孵育孵育4-54-5日后即可于日后即可于檢卵燈上檢查雞胚受精檢卵燈上檢查雞胚受精(shu jng)(shu jng)與否及發(fā)育與否及發(fā)育情況。情況。第11頁/共26頁第十一頁，共26頁。第12頁/共26頁第十二頁，共26頁。八、接種八、接種(jizhng)(jizhng)途徑途徑第13頁/共26頁第十三頁，共26頁。（一）卵黃囊接種（一）卵黃囊接種(jizhng)(jizhng)法法 主要用于蟲媒披膜病毒以及鸚鵡主要用于蟲媒披膜病毒以及鸚鵡熱衣原體和立克次氏體等的分離和增熱衣原體和立克次氏體等的分

4、離和增殖。殖。方法一：方法一：第14頁/共26頁第十四頁，共26頁。第15頁/共26頁第十五頁，共26頁。方法方法(fngf)(fngf)二：二：1. 2. 1. 2. 同方法同方法(fngf)(fngf)一一第16頁/共26頁第十六頁，共26頁。（二）絨毛尿囊膜接種（二）絨毛尿囊膜接種 主要用于痘主要用于痘V V和皰疹和皰疹(po zhn)V(po zhn)V的的分離和增殖。分離和增殖。方法一：方法一：第17頁/共26頁第十七頁，共26頁。方法方法(fngf)(fngf)二：（做人二：（做人工氣室）工氣室）第18頁/共26頁第十八頁，共26頁。第19頁/共26頁第十九頁，共26頁。第20頁/

5、共26頁第二十頁，共26頁。（三）（三） 尿囊腔接種尿囊腔接種 主要用于正粘主要用于正粘V V和副粘和副粘V V，如流感，如流感(li n)V(li n)V、新城疫新城疫V V的分離和增殖。的分離和增殖。第21頁/共26頁第二十一頁，共26頁。第22頁/共26頁第二十二頁，共26頁。九、九、NDVNDV接種雞胚后對雞胚的影響接種雞胚后對雞胚的影響 尿囊腔接種尿囊腔接種9-109-10日齡雞胚日齡雞胚 強(qiáng)毒株在接種后強(qiáng)毒株在接種后30-60h30-60h死亡，弱毒株死亡，弱毒株3-6d3-6d死亡。以尿囊液含毒量最高，胚胎全死亡。以尿囊液含毒量最高，胚胎全身出血，以頭部、足趾、翅膀身出血，以頭部、足趾、翅膀(chbng)(chbng)出血最為明顯。出血最為明顯。第23頁/共26頁第二十三頁，共26頁。十、收毒十、收毒 收毒前將雞胚直立放置于收毒前將雞胚直立放置于44冰箱冰箱半小時(shí)以上，凍死胚胎，防止出血。半小時(shí)以上，凍死胚胎，防止出血。 根據(jù)接種途徑的不同，收獲根據(jù)接種途徑的不同，收獲(shuhu)(shuhu)相應(yīng)的材料相應(yīng)的材料第24頁/共26頁第二十四頁