微生物學(xué)法檢測面包蝦的相關(guān)致病菌

1、福建農(nóng)林大學(xué)本科畢業(yè)論文 論文題目：微生物學(xué)法檢測面包蝦的相關(guān)致病菌 學(xué) 院： 專業(yè)年級： 學(xué) 號： 姓名： 指導(dǎo)教師、職稱： 年 月 日 Pathogens detection of bread shrimp by microbiological methodSubmitted in partial fulfillment of the requirements for the degree of Bachelor in School of Life Sciences, FAFU College: School of Life Sciences Speciality: Biology Ent

2、rance year: I.D. No.: Candidate: Supervisor: （lecturer） Submitted: 目 錄摘要11 引言21.1 面包蝦致病菌檢測的重要性21.2 面包蝦致病菌檢測的作用31.3 面包蝦檢測的項目與方法32 材料與方法42.1面包蝦沙門氏菌的檢測42.1.1 材料42.1.2 方法52.1.3 步驟52.2 面包蝦單核細胞增生李斯特氏菌檢測52.2.1 材料52.2.2 方法62.2.3 步驟62.3面包蝦的金黃色葡萄球菌的檢測62.3.1 材料62.3.2 方法72.3.3 步驟72.4面包蝦的副溶血性弧菌的檢測72.4.1 材料72.4.2

3、 方法82.4.3 步驟83 結(jié)果與分析83.1 沙門氏菌的檢測結(jié)果83.1.1 檢測結(jié)果83.1.2 結(jié)果分析93.2 單核細胞增生李斯特氏菌的檢測結(jié)果93.2.1 檢測結(jié)果93.2.2 結(jié)果與分析103.3 金黃色葡萄球菌的檢測結(jié)果103.3.1 檢測結(jié)果103.3.2 結(jié)果分析123.4 副溶血性弧菌的檢測結(jié)果123.4.1 檢測結(jié)果123.4.2 結(jié)果與分析134 結(jié)論145 實習(xí)心得體會14參考文獻16致 謝18微生物學(xué)法檢測面包蝦的相關(guān)致病菌 吳曉慧摘要：隨著社會的發(fā)展，人們生活水平的提高，水產(chǎn)品也從自然生長發(fā)展到人工養(yǎng)殖。在人們的日常膳食中所占比例也不斷提高，其質(zhì)量安全也顯得越發(fā)

4、重要。通過對產(chǎn)品的微生物檢測，是保證食品的質(zhì)量與安全的措施之一。本文著重介紹了面包蝦的不同致病微生物檢測的方法。對沙門氏菌、單核細胞增生李斯特氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血性弧菌的檢測進行實驗，得出結(jié)果，對結(jié)果進行討論與分析。并把實驗所運用的檢測方法與國內(nèi)外的其他方法相比較，對企業(yè)提出建議。關(guān)鍵詞：面包蝦 微生物檢測 沙門氏菌 單核細胞增生李斯特氏菌 金黃色葡萄球菌 副溶血性弧菌 1 引言1.1 面包蝦致病菌檢測的重要性食品安全關(guān)系到廣大人民群眾的身體健康和生命安全，關(guān)系到經(jīng)濟健康發(fā)展和社會穩(wěn)定，關(guān)系到政府和國家的形象。食品安全已成為衡量人民生活質(zhì)量、社會管理水平和國家法制建設(shè)的一個重要方面。隨

5、著生活水平的提高，人們對食品的安全要求越來越高，而一些食品的安全問題也越來越引起人們的關(guān)注，成為現(xiàn)階段我國亟待解決的問題1。根據(jù)問題的重要性來排列，目前我國存在的主要食品安全問題依次為：微生物引起的食源性疾病、農(nóng)藥殘留、獸藥殘留、重金屬、天然毒素、有機污染等引起的化學(xué)性污染；以及非法使用食品添加劑。而大部分食源性疾病是由致病微生物引起的。沙門氏菌、單核細胞增生李斯特氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血性弧菌都是常見的致病微生物2。 沙門氏菌(Salmonella)可以引起：腸熱型(傷寒、副傷寒)，開始出現(xiàn)發(fā)熱不適、全身疼痛，此后患者出現(xiàn)持續(xù)高熱、相對脈緩、肝脾腫大，外周白細胞下降、皮膚出現(xiàn)玫瑰疹。嚴重

6、腸局部壞死和潰瘍，有出血、穿孔等并發(fā)癥。急性胃腸炎型(食物中毒)，潛伏期1224小時，突然惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉、發(fā)熱，如果細菌已產(chǎn)生毒素，可引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，出現(xiàn)體溫升高、痙攣等；重者有寒戰(zhàn)，驚厥，抽搐與昏迷，病程37天，預(yù)后良好。類霍亂型，類傷寒型，類感冒型，敗血癥型3。單增李斯特菌(Listeria monocytogenes)4是一種人畜共患食源性致病菌，可使人畜患腦膜炎、心肌炎、敗血癥、早產(chǎn)等疾病，危害較大。對孕婦、嬰兒、老年人級免疫力低下者更容易發(fā)生。金黃色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)是人類化膿感染中最常見的病原菌，可引起局部化膿感染，也可引起肺炎、偽

7、膜性腸炎、心包炎等，甚至敗血癥、膿毒癥等全身感染。副溶血性弧菌（Vibrio parahemolyticus），進食含有該菌的食物可致食物中毒，臨床上以急性起病、腹痛、嘔吐、腹瀉及水樣便為主要癥狀。 FAO/WHO于2002年公布了沙門菌病在一些主要國家的年發(fā)生率，即每10萬人中每年發(fā)生的病人數(shù)：澳大利亞為38、德國為120、日本為73、荷蘭為16、美國為145。沙門菌的危害程度可見一斑。因此，對以上各類病原微生物的檢測非常重要。而微生物學(xué)檢驗，是用細菌學(xué)的方法來檢查水產(chǎn)品的質(zhì)量、水產(chǎn)品加工過程的衛(wèi)生措施情況和水產(chǎn)品保藏方法是否有效5，這對保證食品安全來說是至關(guān)重要的一個環(huán)節(jié)。1.2 面包蝦致

8、病菌檢測的作用 在面包蝦的安全檢測上，目前對面包蝦的微生物檢測作用主要是6：嚴格控制原輔料的質(zhì)量，保證食品的質(zhì)量與安全；掌握生產(chǎn)過程情況和產(chǎn)品決定工藝條件的依據(jù)；控制產(chǎn)品質(zhì)量，把好出口關(guān)；進行經(jīng)濟核算的依據(jù)；進行科學(xué)研究工作的手段。以此來保證半成品和種產(chǎn)品的衛(wèi)生符合產(chǎn)品標準，保證消費者的權(quán)益。保證食品的衛(wèi)生質(zhì)量即安全，避免食物中毒的發(fā)生。 另外，通過微生物的檢測結(jié)果，我們可以監(jiān)測生產(chǎn)過程中是否存在嚴重偏差（如半成品受到污染），以便及時糾正和召回產(chǎn)品；二是積累數(shù)據(jù)并定期分析，并根據(jù)分析結(jié)果來監(jiān)測生產(chǎn)過程、工藝、產(chǎn)品質(zhì)量等是否出現(xiàn)波動、偏差和漂移，以便糾正和調(diào)整（回顧性驗證）5。如大腸菌群被檢出，

9、表明食品被糞便直接或間接污染，食品就有可能污染了致病菌。金黃色葡萄球菌被檢出表明食物被人或動物接觸過。就目前狀況看，除肉類食品在屠宰中被糞便污染造成沙門氏菌污染、蛋從糞便污染、奶源由于乳房炎污染外，大都與人手接觸有關(guān)。人手上有時就有大腸桿菌、沙門氏菌和志賀氏菌。副溶血性弧菌是由海產(chǎn)品污染的。如果微生物學(xué)檢驗中出現(xiàn)不合格的情況時，就要查看相關(guān)的生產(chǎn)環(huán)節(jié)。因此對生產(chǎn)也是有指導(dǎo)意義的。1.3面包蝦檢測的項目與方法 在面包蝦的生產(chǎn)中，其檢測項目包括7：微生物檢測中一般污染（菌落總數(shù)，大腸桿菌）和致病菌（單核細胞增生李斯特氏菌，霍亂弧菌，副溶血性弧菌，沙門氏菌，金黃色葡萄球菌等），常規(guī)微生物檢驗以分離培

10、養(yǎng)、生化試驗、血清學(xué)試驗來進行判定。也有理化檢測項目為氯霉素、呋喃唑酮、磺胺類、孔雀石綠、砷、汞8等，依據(jù)產(chǎn)品出口的不同國家有不同標準。近年來，由于養(yǎng)殖環(huán)境污染，養(yǎng)殖魚蝦貝類受到污染已成為世界許多地方的問題。常規(guī)的培養(yǎng)法無法檢測到處于這種狀態(tài)的細菌，造成漏檢，從而形成危害，因此尋找一種準確快速的檢測方法非常重要。病原微生物快速檢測方法包括分子生物學(xué)技術(shù)、免疫學(xué)技術(shù)、代謝技術(shù)、紙片法、細菌直接計數(shù)法、噬菌體鑒定技術(shù)、全自動微生物分析系統(tǒng)等。和傳統(tǒng)方法比較，更快、更方便、更靈敏。 其中，ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）9檢測微生物的優(yōu)點受到人們越來越多的關(guān)注。主要用于檢測水產(chǎn)品中微生物、水產(chǎn)動物致病

11、微生物檢測等，ELISA在水產(chǎn)微生物檢測中的應(yīng)用在國內(nèi)剛起步。預(yù)測微生物技術(shù)在濕潤的蛋白質(zhì)食品（魚蝦、乳制品、紅肉和家禽）中應(yīng)用比較廣泛10。這是借助計算機微生物數(shù)據(jù)庫，在確定相關(guān)溫度、pH、水分活度、防腐劑等環(huán)境因素下，應(yīng)用預(yù)測微生物的數(shù)字模型，快速對重要微生物的生長、存活和死亡進行預(yù)測，應(yīng)用柵欄技術(shù)，確保水產(chǎn)品生產(chǎn)、運輸、儲存等過程中的安全和穩(wěn)定。因此，在常規(guī)的微生物學(xué)檢驗為基礎(chǔ)，結(jié)合酶聯(lián)免疫法或預(yù)測微生物技術(shù)等其他先進技術(shù)進行產(chǎn)品的綜合檢測，是未來進行面包蝦病原微生物檢測的主流方向。目前國內(nèi)大多在采用微生物學(xué)檢測方法。2 材料與方法2.1面包蝦沙門氏菌的檢測2.1.1 材料 （1）樣品

12、待檢測的面包蝦。（2）試劑 緩沖蛋白胨水（BPW）、四硫磺酸鈉煌綠（TTB）增菌液、亞硒酸鹽胱氨酸（SC）增菌液、亞硫酸鉍（BS）瓊脂、沙門氏菌屬顯色培養(yǎng)基。（所用試劑均用北京陸橋公司的產(chǎn)品，按其使用方法進行配制）。（3）儀器和設(shè)備 冰箱（2-5 ）、恒溫培養(yǎng)箱（36 ±1 、42 ±1 ）、無菌杯、電子天平（感應(yīng)量0.0001 g）、滅菌錐形瓶（500 ml、250 ml）、滅菌移液管（1ml、10 ml）、滅菌培養(yǎng)皿（直徑90 mm）、滅菌試管、滅菌手術(shù)剪和鑷子。2.1.2 方法 通過培養(yǎng)基中的微生物培養(yǎng)，觀察有無沙門氏菌的存在。2.1.3 步驟（1） 前增菌11：面包

13、蝦在2 -5 解凍，不超過18 h。無菌操作，稱取25 g樣品，用手術(shù)剪剪碎，放入盛有225 mlBPW的無菌杯中，混勻。無菌操作將樣品轉(zhuǎn)至500 ml錐形瓶中，于36 ±1 培養(yǎng)8 h-18 h。（2） 増菌：輕輕搖動培養(yǎng)過的樣品混合物，移液管移取1 ml，轉(zhuǎn)種于10 mlTTB內(nèi)，在42 ±1 培養(yǎng)18 h-24 h。同時，另移取1 ml，轉(zhuǎn)種于SC內(nèi)，在36 ±1 培養(yǎng)18 h-24 h。（3） 分離：分別用接種環(huán)取增菌液1環(huán)，劃線接種于一個BS瓊脂平板和一個沙門氏菌屬顯色培養(yǎng)基平板。于36 ±1 培養(yǎng)18 h-24 h（沙門氏菌屬顯色培養(yǎng)基平板）

14、或40 h-48 h（BS瓊脂平板），觀察各個平板上生長的菌落。（4） 鑒定：自BS瓊脂平板上挑取黑色有金屬光澤、棕色至綠色和沙門氏菌屬顯色培養(yǎng)基上挑取圓形、光滑突起的（淺）紅紫色的可疑菌落，進行生化鑒定。2.2 面包蝦單核細胞增生李斯特氏菌檢測2.2.1 材料（1） 樣品 待檢測的面包蝦。（2） 試劑 李氏增菌肉湯 LB（LB1 ，LB2）、李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基、生化鑒定試劑盒。（所用試劑均用北京陸橋公司的產(chǎn)品，按其使用方法進行配制）（3） 儀器和設(shè)備 冰箱（2-5 ）、恒溫培養(yǎng)箱（30 ±1 、36 ±1 ）、無菌杯、電子天平（感應(yīng)量0.0001 g）、無菌錐形瓶（50

15、0 ml、250 ml）、無菌培養(yǎng)皿（直徑90 mm）、無菌試管、無菌手術(shù)剪和鑷子。2.2.2 方法 通過培養(yǎng)基中的微生物培養(yǎng)，觀察有無單核細胞增生李斯特氏菌的存在。2.2.3步驟 （1） 増菌12：面包蝦在2 -5 解凍，不超過18 h。無菌操作，稱取25 g樣品，用手術(shù)剪剪碎，加入到含有225 ml LB1前增菌液的無菌杯中，混勻。于30 ±1 培養(yǎng)24 h ，移取0.1 ml ，轉(zhuǎn)種于 10 ml LB2增菌液內(nèi)，于30 ±1 培養(yǎng)18 h-24 h 。（2） 分離：取LB2二次增菌液劃線接種于李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基上，于36 ±1 培養(yǎng)24 h-48 h ，

16、觀察各個平板上生長的菌落。典型菌落在李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基上的特征為紫紅色。（3） 鑒定：挑取純培養(yǎng)的單個可疑菌落，進行過氧化氫酶試驗，過氧化氫酶陽性反應(yīng)的菌落繼續(xù)進行糖發(fā)酵試驗和 MR-VP 試驗（生化試劑盒）。2.3面包蝦的金黃色葡萄球菌的檢測2.3.1 材料 （1） 樣品 待檢測的面包蝦。（2） 試劑 10 %氯化鈉胰酪胨大豆肉湯、Baird-Parker瓊脂平板、腦心浸出液肉湯（BHI）、血漿凝固酶培養(yǎng)基（商品試劑盒）。（所用試劑均用北京陸橋公司的產(chǎn)品，按其使用方法進行配制）（3） 儀器和設(shè)備 冰箱（2-5 ）、恒溫培養(yǎng)箱（36±1、42±1）、均質(zhì)器、電子天平（感應(yīng)

17、量0.0001 g）、無菌錐形瓶（500 ml、250 ml）、無菌吸管（10 ml）、無菌培養(yǎng)皿（直徑90 mm）、無菌試管、無菌手術(shù)剪和鑷子。2.3.2 方法 通過培養(yǎng)基中的微生物培養(yǎng)，觀察有無金黃色葡萄球菌的存在。2.3.3 步驟（1） 增菌13：面包蝦在2-5解凍，不超過18h。無菌操作，稱取25g樣品，用手術(shù)剪剪碎，放入盛有225 ml 10%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯的無菌杯中，混勻，于36 ±1 培養(yǎng)18 h-24 h。（2） 分離：將上述培養(yǎng)物，接種到Baird-Parker平板，36 ±1 培養(yǎng)18 h-24 h。（3） 鑒定：金黃色葡萄球菌在Baird-Par

18、ker平板上，菌落直徑2 mm-3 mm，顏色呈灰色到黑色，邊緣為淡色，周圍為渾濁帶，在其外層有一圈透明圈。挑取可疑菌落進行血漿凝固酶試驗。（4） 血漿凝固酶試驗：挑取可疑菌落1個或以上，接種到5 ml BHI試管中，36 ±1 培養(yǎng)18 h-24 h。接種到血漿凝固酶培養(yǎng)基上，觀察結(jié)果。2.4面包蝦的副溶血性弧菌的檢測2.4.1 材料 （1）樣品 待檢測的面包蝦。（2）試劑 3 %氯化鈉堿性蛋白胨水、3 %氯化鈉三糖鐵（TSI）、弧菌顯色平板。（所用試劑均用北京陸橋公司的產(chǎn)品，按其使用方法進行配制）。（3）儀器和設(shè)備 冰箱（2-5）、恒溫培養(yǎng)箱（36 ±1 ）、均質(zhì)器、電

19、子天平（感應(yīng)量0.0001 g）、無菌錐形瓶（500 ml、250 ml）、無菌吸管（1 ml、10 ml）、無菌培養(yǎng)皿（直徑90 mm）、無菌試管、無菌手術(shù)剪和鑷子。2.4.2 方法 通過培養(yǎng)基中的微生物培養(yǎng)，觀察有無副溶血性弧菌的存在。2.4.3 步驟（1） 增菌14：面包蝦在2 -5 解凍，不超過18 h。無菌操作，稱取25 g樣品，用手術(shù)剪剪碎，放入盛有225 ml 3%氯化鈉堿性蛋白胨水的無菌杯中，混勻，制備成1:10的均勻稀釋液。于36 ±1 培養(yǎng)8 h-18 h。（2） 分離：在上述增菌液中用接種環(huán)沾取一環(huán)，于弧菌顯色平板上劃線分離，于36 ±1 培養(yǎng)18 h

20、-24 h。（3） 鑒定：典型的副溶血性弧菌在弧菌顯色平板上呈品紅色菌落。（4） 初步生化試驗：挑取純培養(yǎng)的單個可疑菌落，轉(zhuǎn)種3 %氯化鈉三糖鐵瓊脂斜面并穿刺底層，36 ±1 培養(yǎng)24 h，觀察結(jié)果。如還是可疑，再進行生化鑒定。3 結(jié)果與分析3.1 沙門氏菌的檢測結(jié)果 3.1.1 檢測結(jié)果 圖1 所示為BS平板，圖2所示為沙門氏菌顯色平板，如下： 圖1 BS平板 圖2 沙門氏菌顯色平板 結(jié)論：綜合菌落形態(tài)，報告每25 g樣品中未檢出沙門氏菌，所檢樣品為合格的產(chǎn)品。3.1.2 結(jié)果分析 （1） BS瓊脂平板上看出并無有金屬光澤的疑似菌落，沙門氏菌屬顯培色養(yǎng)基上也無紅紫色的可疑菌落。因此

21、沒有進行接下來的生化檢測，就可以確定樣品中不含沙門氏菌。（2） 由于面包蝦樣品中沙門氏菌數(shù)量較少，對其分離，一次直接作選擇培養(yǎng),常不易成功。特別對生長速率緩慢的沙門氏菌,如雞白痢沙門氏菌和雞沙門氏菌更是如此,因而常常先作增菌培養(yǎng)。在此操作過程中前增菌時間要相應(yīng)長點，一般為十小時。確保因加工而受傷瀕死的沙門氏菌恢復(fù)活力。（3） 亞硫酸鉍（BS）瓊脂不可加熱過度，使用前一天配制，且48小時內(nèi)使用，傾注平板前需搖勻，平板需要避光存于室溫環(huán)境15。3.2 單核細胞增生李斯特氏菌的檢測結(jié)果 3.2.1 檢測結(jié)果 從顯色平板中可看見紫紅色疑似單核細胞增生李斯特氏菌的菌落，見圖3。進一步進行了生化鑒定，單核

22、細胞增生李斯特氏菌的過氧化氫酶試驗為圖4所示。 圖3 單核細胞增生李斯特氏菌顯色平板 圖4 過氧化氫酶試驗結(jié)論：綜合菌落形態(tài)和生化特征，報告每25 g樣品中未檢出單核細胞增生李斯特氏菌，所試樣品為合格的產(chǎn)品。3.2.2 結(jié)果與分析（1） 由過氧化氫酶試驗圖片看出，該管不產(chǎn)氣泡，結(jié)果為陰性 16。因此，不需要再做糖發(fā)酵試驗和 MR-VP 試驗。（2） 由于單增李斯特氏菌在4 下仍然能生長繁殖17，當樣品取來后，樣品在冰箱中易滋生單增李斯特氏菌，應(yīng)盡快進行檢測。（3） 本實驗采用增菌液兩步增菌,并使用了選擇性強、特異性高的分離培養(yǎng)基,克服了傳統(tǒng)李斯特菌檢測方法檢測周期較長、所需試劑繁多、菌落生長慢

23、等缺點,使李斯特菌的檢測更加快速、簡便、特異、敏感。該方法使李斯特菌檢測具有更好的適用性和可操作性18。3.3 金黃色葡萄球菌的檢測結(jié)果 3.3.1 檢測結(jié)果 圖5 檢測金黃色葡萄球菌的BP平板 金黃色葡萄球菌的BP平板如圖5所示，檢測平板中有黑色菌落出現(xiàn)。因此進行了下一步的血漿凝固酶試驗檢測。血漿凝固酶試驗的判斷標準見圖6。所試樣品血漿凝固酶試驗時未發(fā)生凝固，呈水狀，結(jié)果為陰性，如圖7。 圖6所示為血漿凝固酶試驗陰性、陽性判斷標準 圖7 血漿凝固酶試驗 結(jié)論：綜合菌落形態(tài)和血漿凝固酶結(jié)果，報告每25g樣品中未檢出金黃色葡萄球菌，所檢樣品為合格的產(chǎn)品。3.3.2 結(jié)果分析（1） 由于原料蝦的來

24、源是每年收蝦季（9月-11月）冷凍儲存下來的。所以后期產(chǎn)品都經(jīng)過長期冷凍，而BP平板中長期保存的冷凍或干燥食品中所分離的菌落黑色較典型菌落淺些，且外觀可能較粗糙，質(zhì)地較干燥19。 （2） 做血漿凝固酶試驗時，要共觀察6 h，隔半小時觀察一次，一般2 h-4 h凝固，培養(yǎng)時間過長凝固后因菌體生長較多或液化而溶化，造成結(jié)果判定的準確性。 （3） 金黃色葡萄球菌能產(chǎn)生數(shù)種引起急性胃腸炎的蛋白質(zhì)性腸毒素20，腸毒素可耐受100 煮沸30 min 而不被破壞。應(yīng)在低溫和通風良好的條件下貯藏食物，以防腸毒素形成；在氣溫高的春夏季，食物置冷藏或通風陰涼地方也不應(yīng)超6 h。夏季從車間取樣到化驗室最好避開陽光。

25、（4） 金黃色葡萄球菌在自然界中可以說無處不在，大氣、土壤、灰塵、水及人和動物的排泄物中都可找到，有25 %- 40 %的人群為健康攜帶者(存在于皮膚、鼻子、咽喉等處)。由此可見，在面包蝦的整個生產(chǎn)、檢測過程都極易引入金黃色葡萄球菌。這需要工作人員做好著裝和消毒工作。3.4 副溶血性弧菌的檢測結(jié)果3.4.1 檢測結(jié)果 樣品中副溶血性弧菌檢測的顯色平板如圖8所示，樣品3 %氯化鈉三糖鐵瓊脂檢驗結(jié)果表明（圖9，表1）。結(jié)論：綜合菌落形態(tài)和生化特征，報告每25 g樣品中未檢出副溶血性弧菌為合格的產(chǎn)品。 圖8 弧菌的顯色平板 圖9 3%氯化鈉三糖鐵瓊脂 表1 3 %氯化鈉三糖鐵瓊脂檢測結(jié)果3 %氯化鈉

26、三糖鐵瓊脂檢測判斷結(jié)果斜面底層產(chǎn)氣硫化氫有無動力菌株AA無非副溶血性弧菌注：K：產(chǎn)堿，A：產(chǎn)酸；+：陽性；：陰性；+（）：多數(shù)陽性，少數(shù)陰性；+/：陰性或陽性3.4.2 結(jié)果與分析（1） 溶血性弧菌有海洋細菌之稱。主要來自海產(chǎn)品，如魚、蝦、蟹、貝類和海藻等。從弧菌顯色平板可以看出明顯的品紅色的疑似菌落。取該菌落接種于3% 氯化鈉三糖鐵瓊脂，其結(jié)果不符合副溶血性弧菌底層不變黃，不變黑，無氣泡，斜面顏色不變或紅色加深，有動力的特點14。所以該樣品中未檢出副溶血性弧菌。（2）副溶血性弧菌在適宜溫度下繁殖較快17，但不適于低溫生存，在寒冷的情況下容易死亡。所以檢測時既要防止待檢材料冷凍導(dǎo)致副溶血性弧菌

27、受傷瀕死，也要注意室溫下該菌可以生長繁殖。4 結(jié)論常規(guī)的微生物學(xué)檢驗通常以分離培養(yǎng)、生化試驗及血清學(xué)試驗來進行判斷。傳統(tǒng)的檢測方法，主要包括形態(tài)檢查和生化方法，其準確性、靈敏性均較高；但涉及的實驗較多、操作繁瑣、需要時間較長、準備和收尾工作繁重，還要有大量人員參與。而且無法對難以培養(yǎng)的病原菌進行檢測，因此病原微生物的檢測結(jié)果往往存在不同程度的滯后性。這不僅不利于食品安全管理體系及時驗證控制措施實施效果，也不利于對潛在不安全產(chǎn)品迅速采取糾正和處理措施21。要想生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品，必須要有良好的衛(wèi)生。要做好衛(wèi)生監(jiān)控的好與壞，除了遵守SSOP等基礎(chǔ)生產(chǎn)操作規(guī)范以外，還要靠微生物檢測來衡量衛(wèi)生是否合格，衛(wèi)

28、生不合格，產(chǎn)品的微生物污染的風險就會增高，產(chǎn)品不合格率就會提升。如果生產(chǎn)出來的都是不合格品，企業(yè)就要提高生產(chǎn)成本來重新處理不合格品，所以，微生物檢測作為衛(wèi)生的監(jiān)督員，至關(guān)重要，它把良好的生產(chǎn)衛(wèi)生控制在生產(chǎn)過程中，降低了微生物污染的風險，提高了產(chǎn)品的合格率，降低了公司的成本。面包蝦的檢測是及其重要的，其產(chǎn)品都要達到國家標準要求。對于致病菌有很多種檢測方法，我們在檢測中要選擇合適且能達到國家標準的方法進行檢測。對于企業(yè)來說，講究的是利潤，所以想要在質(zhì)量檢測和品質(zhì)控制這一模塊提高效益，要在條件允許的情況下，建立比較正規(guī)的實驗室，運用先進的儀器設(shè)備。不但檢測速度高效便捷，而且一定程度地節(jié)約了人力、物力

29、，從而為企業(yè)帶來更大的效益。5 實習(xí)心得體會我來到這里實習(xí)已經(jīng)有二個多月的時間了，在實習(xí)的這段日子里，讓我體會到了很多，最大的滿足就是學(xué)到了很多的書本以外的知識和處世的道理。這個工作不僅僅需要感清晰，更需要果斷的判斷力，不能有一點點的馬虎。日積月累經(jīng)驗也就多了不少，這些都是我在書本上學(xué)不到的。剛開始上由于和別人一起工作都是別人做著我看著，并沒有感受到工作所帶給我的壓力，當有一天我自己獨立工作的時候才真正體會到了自己肩上的擔子有多么的重，體會到了作為一名化驗員所承擔的責任。公司里的領(lǐng)導(dǎo)對待員工都很好。在我們完成了自己工作的前提下，可以有自己的空間，做一些自己喜歡做的事情。公司的領(lǐng)導(dǎo)對待員工就象自

30、己的親人一樣，員工之間相處的也很融洽。在這樣的環(huán)境下工作是比較輕松和愉快的，這樣我們會更加熱愛自己的崗位和工作。我能有今天的收獲要感謝公司給我的這次工作的機會，是公司讓我學(xué)會了很多的東西。也要感謝領(lǐng)導(dǎo)對我的信任和關(guān)心，讓我圓滿的完成了這次實習(xí)任務(wù)并獲得了工作的機會。我能有今天的收獲要感謝公司領(lǐng)導(dǎo)給我的這次工作的機會，是公司讓我學(xué)會很多東西，我將在今后的工作中，更加努力的。參考文獻1 蔡特.關(guān)于食品微生物檢測問題分析J. 健康必讀雜志,2011,2(2):226.2 中國工程院醫(yī)藥衛(wèi)生學(xué)部編, 中國食品安全M. 北京：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)出版社，2007,30(10):13-14.3 胡全勝. 一起

31、沙門氏菌和副溶血性弧菌引起食物中毒的調(diào)查和分析J.山東醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校學(xué)報,2011,5:341-342.4 郭桂萍，葛紅梅，王勻，張文國，倪鵬. 單增李斯特菌檢測技術(shù)研究進展J，中國食物與營養(yǎng)2011, 17(3):12-15.5 姚勇芳. 食品微生物檢驗技術(shù)M. 北京：科學(xué)出版社，2011. 67-69.6 林洪. 水產(chǎn)品安全性M. 北京：中國輕工業(yè)出版社，2005. 21-25.7 James M. Jay 編著，徐巖等譯. 現(xiàn)代食品微生物學(xué) M.北京：輕工業(yè)出版社，2001. 94-97.8 陳紅霞，李翠華主編；食品微生物學(xué)及實驗技術(shù)M. 北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2008. 11-17.9 陳思強，鐘偉強，曾振興，等.自動酶聯(lián)熒光免疫分析系統(tǒng)檢測凍肉中沙門菌的評價J中國國境衛(wèi)生檢疫雜志,2004,27(5):309.10 韓北忠，李敏，張琳，張娜. 預(yù)測微生