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1、會計學1蛋白質(zhì)的通性蛋白質(zhì)的通性PrCOOHNH3+PrCOO-NH3+PrCOO-NH2+H+OH-+H+OH-陰離子pHpI等電點pH=pI陽離子pHpI蛋白質(zhì)等電點定義,用pI 表示。蛋白質(zhì)在等電點時的特點蛋白質(zhì)的pI可在實驗室測得,也與組成蛋白質(zhì)的氨基酸種類有關。2、蛋白質(zhì)的等電點一、蛋白質(zhì)的酸堿性質(zhì) 二、蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)蛋白質(zhì)膠體溶液穩(wěn)定的原因:1)蛋白質(zhì)顆粒大?。簆r顆粒大小恰好適于形成膠體2)帶有電荷:在非pI的pH條件下,由于同種Pr顆粒表面帶有相同電荷。3)形成水化膜:由于Pr分子表面分布許多帶電基團和極性基團,它們對水有高度親和力,在水溶液中會把水分子吸附在分子的表面形成一

2、層較厚的水化膜。 三、 蛋白質(zhì)的沉淀反應可逆性沉淀:沉淀的蛋白質(zhì),內(nèi)部結構基本上沒發(fā)生變化,仍保持原有生物學功能,消除沉淀或降低沉淀因素后蛋白質(zhì)仍會溶解在原來的溶液中。不可逆沉淀:沉淀出的蛋白質(zhì)內(nèi)部結構發(fā)生了變化,失去了生物學功能,消除沉淀因素后,不會溶解1. 鹽析法:向Pr溶液加大量高濃度中性鹽(硫酸銨、硫酸鈉、氯化鈉)能使蛋白質(zhì)沉淀析出。蛋白質(zhì)的分段鹽析。l鹽溶:在鹽濃度很稀時,隨著鹽濃度的增高,球狀蛋白質(zhì)的溶解度增高。 三、 蛋白質(zhì)的沉淀反應三、 蛋白質(zhì)的沉淀反應反應名稱試 劑顏色反應有關基團有 此 反 應的Pr或aa雙縮脲反應NaOH、CuSO2紫紅色二個以上肽鍵所有蛋白質(zhì)米倫反應Hg

3、NO3、Hg(NO3)及HNO3、HNO2混合物紅色 Tyr黃色反應濃HNO3黃色、橘色 Tyr、Phe乙醛酸反應乙醛酸試劑沿 管 壁 慢 加 濃H2SO4兩液層間出現(xiàn)紫色環(huán) Trp( 白 明 膠 不含Trp)坂口反應Sakaguch反應)-萘酚、NaClO在NaOH溶液中紅色胍基Arg酚試劑反應堿性CuSO4、磷鎢酸及鱗鉬酸藍色酚基、吲哚基Tyr茚三酮反應茚三酮藍色自由氨基及羧基-氨基酸 OHN四、 蛋白質(zhì)的顏色反應根據(jù)分子大小不同透析和超過濾凝膠過濾根據(jù)溶解度不同等電點沉淀鹽溶和鹽析有機溶劑沉淀根據(jù)電荷不同純化電泳離子交換層析1、概念:天然蛋白質(zhì)受物理或化學因素的影響使次級鍵斷裂,天然構象

4、改變,導致生物學活性喪失,理化特性改變,但其共價鍵不變,這種現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)的變性。發(fā)生變性的蛋白質(zhì)叫變性蛋白。2、變性因素:化學因素:強酸、強堿、尿素、胍、去污劑、重金屬鹽、苦味酸、濃乙醇;物理因素:加熱、劇烈振蕩、攪拌、紫外線、超聲波。3、變性特點及表現(xiàn):變性蛋白主要特點。1.首先喪失生物學活性(如,酶失去催化能力,)2.理化性質(zhì)改變,蛋白變性后,疏水基團外露,溶解度降低,易沉淀析出;結晶能力喪失;分子形狀改變,球蛋白變成松散結構,既肽鏈松散,反應基團(如:SH)增加,易被水解酶消化;黏度增加。.一級結構沒破壞,高級結構破壞。組分及分子量未變九、蛋白質(zhì)的變性PrCOOHNH3+PrCOO-N

5、H3+PrCOO-NH2+H+OH-+H+OH-陰離子pHpI等電點pH=pI陽離子pHpI蛋白質(zhì)等電點定義,用pI 表示。蛋白質(zhì)在等電點時的特點蛋白質(zhì)的pI可在實驗室測得,也與組成蛋白質(zhì)的氨基酸種類有關。2、蛋白質(zhì)的等電點一、蛋白質(zhì)的酸堿性質(zhì)反應名稱試 劑顏色反應有關基團有 此 反 應的Pr或aa雙縮脲反應NaOH、CuSO2紫紅色二個以上肽鍵所有蛋白質(zhì)米倫反應HgNO3、Hg(NO3)及HNO3、HNO2混合物紅色 Tyr黃色反應濃HNO3黃色、橘色 Tyr、Phe乙醛酸反應乙醛酸試劑沿 管 壁 慢 加 濃H2SO4兩液層間出現(xiàn)紫色環(huán) Trp( 白 明 膠 不含Trp)坂口反應Sakaguch反應)-萘酚、NaClO在Na

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