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文檔簡介
1、病毒病:由病毒引起的病害病毒?。河刹《疽鸬牟『?病毒是一種核蛋白,由于太小,在光學(xué)顯微鏡下見不到,病毒是一種核蛋白,由于太小,在光學(xué)顯微鏡下見不到,只能在活的寄主細胞內(nèi)完本錢身復(fù)制,并具有侵染才干,又只能在活的寄主細胞內(nèi)完本錢身復(fù)制,并具有侵染才干,又稱分子寄生物。病毒可侵染動、植物及微生物,可引起人的稱分子寄生物。病毒可侵染動、植物及微生物,可引起人的流行性感冒、小兒麻木癥、狂犬病、天花和腫瘤等。也能損流行性感冒、小兒麻木癥、狂犬病、天花和腫瘤等。也能損害真菌、細菌和菌原體。害真菌、細菌和菌原體。 包括:病毒、類病毒包括:病毒、類病毒病癥:植株生長不良,矮化、萎縮、畸形、變色病癥:植株生長
2、不良,矮化、萎縮、畸形、變色危害危害: : 病毒總數(shù)已超越病毒總數(shù)已超越20002000種,其中種,其中1/41/4可危害植物。一種病可危害植物。一種病毒可危害一至幾種植物,一種植物可被一至幾種病毒侵染。毒可危害一至幾種植物,一種植物可被一至幾種病毒侵染。病毒是僅次于真菌的第二大病原物。病毒是僅次于真菌的第二大病原物。 病毒為基因工程的研討提供了資料。病毒為基因工程的研討提供了資料。 關(guān)于植物病毒病害的記載關(guān)于植物病毒病害的記載 荷蘭郁金香雜色病荷蘭郁金香雜色病(1576) 歐洲馬鈴薯退化病歐洲馬鈴薯退化病(1775) Dubos(1958)曾描畫了當時流行的曾描畫了當時流行的“郁金香熱郁金香
3、熱: 一一株受侵染的球根可以換到數(shù)頭公牛、豬或者綿羊,幾噸株受侵染的球根可以換到數(shù)頭公牛、豬或者綿羊,幾噸谷物,成千磅干酪,甚至一個磨房。一個年青的姑娘以谷物,成千磅干酪,甚至一個磨房。一個年青的姑娘以擁有一只雜色花作為她的嫁妝而感到無比的幸福。擁有一只雜色花作為她的嫁妝而感到無比的幸福。嚴厲寄生性的細胞內(nèi)專性寄生物。嚴厲寄生性的細胞內(nèi)專性寄生物。真菌病毒一病毒的形狀 病毒粒體:形狀完好(成熟)的侵染性病毒粒子。 大部分病毒為球狀,桿狀和線狀,少數(shù)為彈狀,桿菌狀和雙聯(lián)體狀等。1、球狀病毒:直徑大多在、球狀病毒:直徑大多在20-35nm,少數(shù)可以到達,少數(shù)可以到達70-80nm, 也稱為多面體病
4、毒或十二面體病毒,球體構(gòu)造并不是也稱為多面體病毒或十二面體病毒,球體構(gòu)造并不是光滑的球面,光滑的球面, 而是由很多正三角形有規(guī)那么地陳列組而是由很多正三角形有規(guī)那么地陳列組合成的,典型的有二十個。合成的,典型的有二十個。2、桿狀病毒:為、桿狀病毒:為20-80nm100-250nm, 兩端平齊,少數(shù)兩端鈍圓。桿狀病毒粒體剛直兩端平齊,少數(shù)兩端鈍圓。桿狀病毒粒體剛直,不易不易彎曲。彎曲。3、線狀病毒:為、線狀病毒:為11-13nm750nm,個別可達個別可達2000nm以上;以上; 線狀病毒的兩端也是平齊的,粒體有不同程度的彎曲線狀病毒的兩端也是平齊的,粒體有不同程度的彎曲。4、彈狀病毒:、彈狀
5、病毒: 58-240nm18-90nm5、聯(lián)體病毒:病毒由大小一樣的兩個近球形粒體組成。、聯(lián)體病毒:病毒由大小一樣的兩個近球形粒體組成。1 1、球狀病毒:、球狀病毒: 球狀病毒的構(gòu)造較復(fù)雜,其實并非光滑球狀病毒的構(gòu)造較復(fù)雜,其實并非光滑的球體,而是由二十個正三角形組合而成。它的球體,而是由二十個正三角形組合而成。它有二十個面、十二個頂點和三十個邊,面、頂有二十個面、十二個頂點和三十個邊,面、頂點或邊都是對稱的。點或邊都是對稱的。二植物病毒的構(gòu)造 病毒粒體是由一或多個核酸分子DNA or RNA包被在蛋白或脂蛋白衣殼Capsid里構(gòu)成的。彈狀病毒粒體外面有囊膜包被。 2 2、桿狀或線條狀植物病毒
6、粒體的中間是螺旋狀、桿狀或線條狀植物病毒粒體的中間是螺旋狀的核酸鏈,的核酸鏈,外面是由許多蛋白質(zhì)亞基組成的衣殼,中間是外面是由許多蛋白質(zhì)亞基組成的衣殼,中間是空管??展?。蛋白質(zhì)亞基也陳列成螺旋狀,核酸鏈就嵌在亞基的凹痕處。以煙草花葉病毒的粒體為例,每個粒體大致有2100個蛋白質(zhì)亞基,排成130圈,每圈亞基間隔約2.3nm,每三圈有49個亞基。其粒體直徑是18nm,核酸鏈的直徑是8nm。三植物病毒的組分三植物病毒的組分 植物病毒主要成分是核酸和蛋白質(zhì),核酸在內(nèi)部,外部由蛋植物病毒主要成分是核酸和蛋白質(zhì),核酸在內(nèi)部,外部由蛋白質(zhì)包被,稱為外殼。合稱為核蛋白或核衣殼。有的病毒粒體白質(zhì)包被,稱為外殼。
7、合稱為核蛋白或核衣殼。有的病毒粒體中還含有少量的糖蛋白或中還含有少量的糖蛋白或脂類。脂類。 類病毒那么沒有蛋白質(zhì)外殼,僅為類病毒那么沒有蛋白質(zhì)外殼,僅為RNA的分子。的分子。1、 蛋白質(zhì):占粒體分量蛋白質(zhì):占粒體分量6090,由多種氨基酸構(gòu)成多肽鏈,由多種氨基酸構(gòu)成多肽鏈,對核酸起維護作用對核酸起維護作用 病毒的核酸決議了衣殼蛋白的氨基酸組成,蛋白多肽鏈經(jīng)病毒的核酸決議了衣殼蛋白的氨基酸組成,蛋白多肽鏈經(jīng)過三維折疊構(gòu)成衣殼的根本構(gòu)造單位,稱作蛋白亞基,多個蛋過三維折疊構(gòu)成衣殼的根本構(gòu)造單位,稱作蛋白亞基,多個蛋白亞基聚集構(gòu)成殼基,因聚集的蛋白亞基數(shù)目不同,又有二聚白亞基聚集構(gòu)成殼基,因聚集的蛋
8、白亞基數(shù)目不同,又有二聚體、三聚體、五鄰體、六鄰體。體、三聚體、五鄰體、六鄰體。 植物病毒有兩種根本構(gòu)造方式:螺旋對稱型構(gòu)造和等面體植物病毒有兩種根本構(gòu)造方式:螺旋對稱型構(gòu)造和等面體對稱型構(gòu)造。對稱型構(gòu)造。 病毒蛋白的抗原決議蔟病毒蛋白的抗原決議蔟 蛋白種類:構(gòu)造蛋白衣殼蛋白、囊膜蛋白蛋白種類:構(gòu)造蛋白衣殼蛋白、囊膜蛋白 非構(gòu)造蛋白復(fù)制所需的酶、運動功能蛋白非構(gòu)造蛋白復(fù)制所需的酶、運動功能蛋白 2、 核酸:核酸: 占粒體分量占粒體分量540 ,由多核苷酸構(gòu)成;核酸是病毒的中心,由多核苷酸構(gòu)成;核酸是病毒的中心,組成了病組成了病毒的遺傳信息組毒的遺傳信息組-基因組基因組(genome),決議病毒
9、的增殖、遺傳、變異和致病,決議病毒的增殖、遺傳、變異和致病性。性。1植物病毒的核酸類型植物病毒的核酸類型 植物病毒的核酸只需植物病毒的核酸只需RNA或或DNA兩種,兩種, 按照復(fù)制過程中功能的不同,可分為按照復(fù)制過程中功能的不同,可分為5種類型:種類型:正單鏈正單鏈RNA病毒病毒positive single strand RNA,+ssRNA 單鏈單鏈RNA可以直接翻譯蛋白,起可以直接翻譯蛋白,起mRNA的作用。的作用。70%以上的病毒屬于以上的病毒屬于此類。如此類。如TMA、CMA、PVX、PVY。負單鏈負單鏈RNA病毒病毒negative single strand RNA,-ssRNA
10、 RNA必需先轉(zhuǎn)錄成互補鏈,才干翻譯蛋白。必需先轉(zhuǎn)錄成互補鏈,才干翻譯蛋白。 如小麥叢矮病毒如小麥叢矮病毒W(wǎng)RDV,彈狀,外有囊膜。,彈狀,外有囊膜。 雙鏈RNAdouble strand RNA, dsRNA 核酸為互補的雙鏈,其中負鏈RNA轉(zhuǎn)錄出正鏈RNA,才干作為mRNA翻譯蛋白。如呼腸孤病毒、水稻矮縮病毒RDV和玉米粗縮病毒MRDV,粒體為多面體。單鏈DNA病毒 ssDNA 復(fù)制時,單鏈DNA先合成雙鏈DNA,以常規(guī)途徑轉(zhuǎn)錄mRNA。如雙聯(lián)病毒科。雙鏈DNA dsDNA 為互補雙鏈DNA。 如花耶菜花葉病毒CaMV。植物病毒核酸類型和病毒種類數(shù)植物病毒核酸類型和病毒種類數(shù)據(jù)據(jù)ICTVI
11、CTV病毒分類第七次報告統(tǒng)計病毒分類第七次報告統(tǒng)計2核酸的比例 球型粒體病毒 1545%, 線性病毒 56%, 彈狀病毒 1%。 3核酸的多分表達象和多分體病毒 植物病毒所特有,僅存在于+ssRNA病毒中。 指病毒的基因組分布在不同的核酸鏈上,分別包裝在不同的病毒粒體里。由于遺傳信息分開了,單獨一個粒體不能侵染,必需是一組幾個同時侵染才干全部表達遺傳特性,這種分段的基因組為多組分基因組;含多組分基因組的病毒為多分體病毒。 單分體病毒:指整個遺傳信息存在于一條核酸鏈上,包被在一種粒體中的病毒 如TMV、PVX、PVY雙分體病毒:指遺傳信息為雙組分基因組包被在兩種粒體里的病毒, 如煙草脆裂病毒屬T
12、obravirus)、蠕傳病毒屬三分體病毒:指核酸包被在三種粒體中的病毒。 如CMV 、AMV有四條核酸鏈但被包裝在三種或四種粒子中。 4衛(wèi)星病毒 在某些多分體病毒內(nèi)發(fā)現(xiàn)了小分子量的RNA,與病毒RNA沒有同源性,單獨不能侵染,要依賴病毒的核酸才干侵染和增殖,這就是sRNAsatellite RNA。 sRNA與它依賴的輔助病毒包在同一衣殼內(nèi),能抑制輔助病毒的復(fù)制,可以看成是輔助病毒的寄生物,常用于生防和基因工程。3、水分、礦質(zhì)元素、脂類物質(zhì)、水分、礦質(zhì)元素、脂類物質(zhì) 除核蛋白外,還含有水分,如在蕪菁黃花葉病毒的結(jié)晶體除核蛋白外,還含有水分,如在蕪菁黃花葉病毒的結(jié)晶體中,含水量達中,含水量達5
13、8%。 彈狀病毒囊膜中含碳水化合物,有的含糖蛋白。彈狀病毒囊膜中含碳水化合物,有的含糖蛋白。 有些病毒含多胺,主要是精胺和亞精胺。用于穩(wěn)定折疊的有些病毒含多胺,主要是精胺和亞精胺。用于穩(wěn)定折疊的核酸分子;有的含鈣、鈉、鎂離子,穩(wěn)定核酸和蛋白的結(jié)合。核酸分子;有的含鈣、鈉、鎂離子,穩(wěn)定核酸和蛋白的結(jié)合。四、植物病毒的復(fù)制和增殖四、植物病毒的復(fù)制和增殖 植物病毒的復(fù)制要完成核酸的復(fù)制和病毒植物病毒的復(fù)制要完成核酸的復(fù)制和病毒核酸信息的表核酸信息的表達兩個過程。達兩個過程。一病毒基因組的復(fù)制一病毒基因組的復(fù)制 從親代向子代病毒傳送核酸性狀的過程,從親代向子代病毒傳送核酸性狀的過程,即病毒的基因傳送即
14、病毒的基因傳送 植物病毒與普通細胞生物遺傳信息傳送的植物病毒與普通細胞生物遺傳信息傳送的主要不同點是主要不同點是反轉(zhuǎn)錄,反轉(zhuǎn)錄,RNA-DNARNA-DNA,大部分是由,大部分是由RNARNA直接復(fù)制直接復(fù)制RNARNA。 寄主細胞要提供場所、原資料、能量、酶、寄主細胞要提供場所、原資料、能量、酶、膜系統(tǒng)。膜系統(tǒng)。 病毒提供膜版核酸、?;木酆厦?。病毒提供膜版核酸、?;木酆厦?。 二植物病毒基因組信息的表達 1、病毒核酸的轉(zhuǎn)錄 無論植物病毒含何種核酸,要翻譯出蛋白必需經(jīng)過mRNA過程。+ssRNA可作為mRNA直接運用。其他病毒都需求轉(zhuǎn)錄。 DNA病毒需求寄主的轉(zhuǎn)錄酶; -ssRNA需求隨病毒
15、粒體一同帶入的復(fù)制酶; dsRNA部分可作為mRNA運用,另外一部分需求轉(zhuǎn)錄。這類核酸又被稱為雙義RNA。2、植物病毒核酸的表達 +ssRNA基因組在真核生物蛋白合成中的五種翻譯戰(zhàn)略。1亞基因組RNAs戰(zhàn)略 由基因組3末端轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生一到多個亞基因組RNA,從各個亞基因組5端的開放閱讀框架翻譯出功能性蛋白,如TMV。2多聚蛋白戰(zhàn)略 如PVY3多分體基因組戰(zhàn)略 如 CMV4通讀蛋白戰(zhàn)略 如TMV復(fù)制酶的翻譯5核糖體移碼戰(zhàn)略 普通RNA病毒翻譯產(chǎn)物在4-5種,有得多達9種,包括病毒編碼復(fù)制酶、衣殼蛋白、運動蛋白、傳播輔助蛋白、蛋白酶等,有些產(chǎn)物會與病毒核酸或寄主蛋白聚集起來構(gòu)成內(nèi)含體。3、植物病毒的基
16、因組構(gòu)造及功能 以煙草花葉病毒為例。1基因組構(gòu)造及表達 TMV為+ssRNA,基因組核酸全長6395個核苷酸,共有5個開放閱讀框架。核酸的5端有帽子構(gòu)造,3端有類似tRNA的構(gòu)造。2TMV蛋白質(zhì) 的生物學(xué)功能 三植物病毒的增殖 病毒進入活細胞后脫殼,病毒核酸復(fù)制,亞基因組核酸翻譯出3種蛋白,其中包括衣殼蛋白,然后核酸和衣殼蛋白組成新的病毒粒體。 二病毒的傳播 介體傳播 非介體傳播 病毒均為被動傳播,傳播間隔普通較短。 從表4-1看出,機械傳播和蚜蟲傳播的病毒屬最多, 均在十個屬以上。種子、葉蟬、葉甲、線蟲、真菌傳播5-8個屬,飛虱、粉虱、薊馬、螨類和花粉傳播的屬較少。 甲蟲傳播的病毒都可以機械
17、傳播, 蚜蟲傳播的病毒大多也可機械傳播, 花粉傳播的病毒均可種子傳播。1、介體傳播 植物病毒的介體很多,主要有昆蟲、螨類、線蟲、真菌、菟絲子等,其中以昆蟲最為重要。 知昆蟲介體400多種, 其中1/2為蚜蟲,1/3為葉蟬。同翅目介體傳毒的根本概念 昆蟲介體 土壤中的介體介體傳毒的根本概念介體傳毒的根本概念(1)介體傳毒過程可分為幾個時期介體傳毒過程可分為幾個時期: 獲毒獲毒(取食取食)期是指介體獲得病毒所需的取食時間。期是指介體獲得病毒所需的取食時間。 埋伏期是指介體從獲得病毒到能傳播病毒的時間。埋伏期是指介體從獲得病毒到能傳播病毒的時間。 接毒接毒(取食取食)期期 是指介體傳播病毒所需的取食
18、時間。是指介體傳播病毒所需的取食時間。 持毒期是指介體能堅持傳毒才干的時間。持毒期是指介體能堅持傳毒才干的時間。(2) 介體與所傳病毒之間的關(guān)系:介體與所傳病毒之間的關(guān)系比較復(fù)雜,主要根介體與所傳病毒之間的關(guān)系:介體與所傳病毒之間的關(guān)系比較復(fù)雜,主要根據(jù)病毒能否在蟲體內(nèi)循環(huán)、能否增殖以及介體持毒時間長短來劃分。病毒經(jīng)口針、據(jù)病毒能否在蟲體內(nèi)循環(huán)、能否增殖以及介體持毒時間長短來劃分。病毒經(jīng)口針、前消化道、后消化道,進入血液循環(huán)后到達唾液腺,再經(jīng)口針傳播的過程稱為循前消化道、后消化道,進入血液循環(huán)后到達唾液腺,再經(jīng)口針傳播的過程稱為循回回,這種病毒與介體的關(guān)系稱為循回型關(guān)系。這種病毒與介體的關(guān)系稱
19、為循回型關(guān)系。植物病毒與介體昆蟲的生物學(xué)傳毒關(guān)系植物病毒與介體昆蟲的生物學(xué)傳毒關(guān)系非循回型全是非耐久性的。 蚜蟲傳非耐久型病毒,飛虱和葉蟬傳耐久型病毒。 帶毒蚜蟲在2-3株健株上取食后,喪失傳毒才干;獲毒后禁時1小時也喪失傳毒才干;飼毒前禁食15-60分鐘可提高傳毒率。根據(jù)介體持毒時間的長短可以分為非耐久性、半耐久性和耐久性三種相互關(guān)系。根據(jù)介體持毒時間的長短可以分為非耐久性、半耐久性和耐久性三種相互關(guān)系。3介體與病毒?;宰R別的能夠機制 蚜蟲的試探取食習(xí)性 介體內(nèi)的?;猿侄疚稽c: 前消化道、口針、后腸壁。與衣殼蛋白?;?。 輔助因子:病毒編碼的蛋白。昆蟲介體昆蟲介體 蚜蟲蚜蟲葉蟬和飛虱葉蟬和
20、飛虱其它昆蟲介體還有刺吸式口器的白粉虱、粉蚧,刮吸式口器的薊馬、其它昆蟲介體還有刺吸式口器的白粉虱、粉蚧,刮吸式口器的薊馬、咀嚼式口器的甲蟲、蚱蜢等等咀嚼式口器的甲蟲、蚱蜢等等.土壤中的介體土壤中的介體主要是土壤的線蟲或真菌傳播病毒主要是土壤的線蟲或真菌傳播病毒線蟲傳毒線蟲傳毒 真菌傳毒真菌傳毒昆蟲介體蚜蟲: 可傳160多種病毒,馬鈴薯蚜可傳40-50種病毒,桃蚜可傳100多種。CMV可由75種蚜蟲傳播。 非耐久性病毒多在寄主表皮細胞、薄壁細胞或柵狀組織中。 半耐久性病毒多在韌皮部內(nèi),需求較長的獲毒時間。 耐久性病毒有38種,病毒可在介體內(nèi)繁衍,有的可經(jīng)卵傳。葉蟬和飛虱 在15000種葉蟬中,
21、只需49種是病毒的傳播介體; 飛虱亞目中的一部分是傳播介體;介體寄主主要是禾本科植物的如水稻矮縮病,小麥叢矮病和玉米粗縮病。 葉蟬和飛虱傳播的大多是增殖型病毒,大多終生傳毒,灰飛虱傳播的小麥叢矮病毒、黑尾葉蟬傳播的水稻矮縮病毒可經(jīng)卵傳40代。 白粉虱、粉蚧、薊馬、咀嚼式口器的甲蟲、蚱蜢也可傳播。土壤中的介體 土壤中的介體主要指線蟲和真菌。曾經(jīng)知道5個屬的38種線蟲可傳播80種病毒。其中多數(shù)屬于蠕傳病毒屬和煙草脆裂病毒屬的病毒。 傳毒真菌主要是油壺菌屬、多粘菌屬和粉痂菌屬的5種真菌,能傳播20種病毒。 土壤中的介體傳毒間隔有限,主要是由根部侵染,遠距離傳播主要靠種子和苗木。1,線蟲傳毒 主要是外
22、寄生性線蟲,屬于毛線目的長針線蟲、劍線蟲和擬長針線蟲。傳播的病毒屬于蠕傳病毒屬和煙草脆裂病毒屬。 獲毒時間普通為1560分鐘,不經(jīng)潛育即可傳毒。病毒粒體被選擇性吸附在前消化道,隨分泌的唾液一同傳給寄主細胞。病毒在線蟲體內(nèi)雖不能復(fù)制,但能堅持相當長的時間,有時可長達一年。線蟲蛻皮后失去傳毒才干。 線蟲與所傳病毒之間是專化的,毛刺線蟲只能傳播煙草脆裂病毒,長針線蟲科只能傳播蠕傳病毒屬病毒。在種和株系間也表現(xiàn)專化性。2,真菌傳毒 油壺菌可傳12種病毒,如煙草壞死病毒、萵苣巨脈病毒、黃瓜壞死病毒。 根腫菌目可傳17種病毒,如多粘菌傳的甜菜壞死黃脈病毒和麥類黃化葉病毒。 菌傳病毒可分為耐久性和非耐久性兩
23、類。耐久性傳毒可經(jīng)游動孢子傳播,如多粘菌和馬鈴薯粉痂病菌傳播的棒狀病毒。 銹菌和白粉菌也有傳播線蟲的報道。2、非介體傳播 一機械傳播 如煙草花葉病毒、馬鈴薯X病毒、黃瓜花葉病毒。 引起花葉病癥的病毒或由蚜蟲、線蟲傳播的病毒較易機械傳播,黃化型病毒和存在于韌皮部的病毒那么不易。二無性繁衍資料和嫁接傳播 病毒都是系統(tǒng)侵染,除植物莖尖外,各部都能帶毒。如馬鈴薯、大蒜、蘋果樹病毒病等。 嫁接能傳播病毒、菌原體和類病毒等。三種子和花粉傳播 大約1/5的病毒可以種傳。種傳的主要危害表如今早期侵染和遠間隔傳播。 種傳病毒的寄主以豆科、葫蘆科、菊科植物為多,茄科植物很少。母株早期受侵染,病毒才干侵染花器,病毒
24、進入種胚才干產(chǎn)生帶毒種子,僅在種皮或胚乳帶毒常不能種傳。 種子帶毒率變化很大,如大麥條紋花葉病毒可達90%-100%,黃瓜花葉病毒可達1%-50%。 種傳病毒大多可以機械傳,表現(xiàn)花葉,也可由蚜蟲非持久性傳播。 隨種子成熟度提高,帶毒率降低,剛采收的種子帶毒率高,儲存后逐漸降低。 部分木本植物的病毒可由花粉傳播,如桃環(huán)斑病毒、懸鉤子環(huán)斑病毒等。蜜蜂可間接傳毒。二病毒在寄主體內(nèi)的挪動是被動的二病毒在寄主體內(nèi)的挪動是被動的1細胞間轉(zhuǎn)移:經(jīng)過胞間連絲,轉(zhuǎn)移慢細胞間轉(zhuǎn)移:經(jīng)過胞間連絲,轉(zhuǎn)移慢, 810個細胞個細胞d0.01-2mm/d)胞間聯(lián)絲是細胞間物質(zhì)運輸?shù)耐ǖ?。?nèi)含鏈管,兩個膜之間的胞間聯(lián)絲是細胞
25、間物質(zhì)運輸?shù)耐ǖ?。?nèi)含鏈管,兩個膜之間的空間約為空間約為5納米,胞間聯(lián)絲的分子排阻限是納米,胞間聯(lián)絲的分子排阻限是8001000u,病毒,病毒粒體或核酸的分子量在粒體或核酸的分子量在105-6u,是運動蛋白擴展胞間聯(lián)絲通透,是運動蛋白擴展胞間聯(lián)絲通透性。性。 另外病毒并不是總以完好粒體方式經(jīng)過。另外病毒并不是總以完好粒體方式經(jīng)過。 病毒挪動速度受溫度影響,病毒挪動速度受溫度影響,普通每小時幾個納米。普通每小時幾個納米。 不同部位病毒含量不一致。不同部位病毒含量不一致。2長間隔挪動:篩管:快速長間隔挪動:篩管:快速轉(zhuǎn)移,轉(zhuǎn)移,0.1-0.5cm/hr 不完全是被動不完全是被動經(jīng)過韌皮部,甲蟲傳播
26、的病毒是經(jīng)過木質(zhì)部。 挪動速度每分鐘幾個厘米。 病毒運動蛋白在運動中發(fā)揚很大作用。病毒挪動的主流方向是與營養(yǎng)方向一致。六六 植物病毒的分類與命名植物病毒的分類與命名 病毒作為一界,動、植物和微生物病毒實現(xiàn)了科、屬、病毒作為一界,動、植物和微生物病毒實現(xiàn)了科、屬、種的分類。種的分類。一植物病毒的分類一植物病毒的分類1 1、分類根據(jù)、分類根據(jù) 核酸類型,鏈數(shù),粒體核酸類型,鏈數(shù),粒體有無脂蛋白包膜,病毒形狀有無脂蛋白包膜,病毒形狀和核酸分段。和核酸分段。 植物病毒共分為15個科,73個屬,977個種或能夠種。見圖4-11。2、分類方法 明確科、屬、種的關(guān)系,科下為屬,屬下有典型種、種和暫定種。 病
27、毒類似物 衛(wèi)星病毒:能編碼衣殼蛋白 衛(wèi)星核酸衛(wèi)星RNA:不能編碼衣殼蛋白,能夠是 寄主對病毒侵染產(chǎn)生的一類捍衛(wèi)性物質(zhì)。 類病毒:雙鏈環(huán)狀的RNA,單獨能引起侵染。 擬病毒 :粒體小,屬于RNA病毒遺傳物質(zhì)的一部分, 單獨不能增殖。 朊病毒:只需蛋白質(zhì)的侵染因子。3、病毒的株系strain:是病毒種下的變種,具有消費上的重要性。當分別到一種病毒,但還未完全了解其特征、不能確定分類位置時,常稱為“分別物或“分別株isolate。二植物病毒的命名 寄主 + 病癥 + virus Tobacco mosaic virus TMV Cucumber mosaic virus CMV屬名采用縮寫,如煙草花
28、葉病毒屬為: Tobamovirus 類病毒viroid在命名中采用縮寫Vd,如馬鈴薯紡錘塊莖類病毒Potato spindle tuber viroid縮寫為PSTVd。八、八、 植物病毒的鑒定原理植物病毒的鑒定原理 鑒定是要確定一種病毒在分類系統(tǒng)中的位置。以前多采鑒定是要確定一種病毒在分類系統(tǒng)中的位置。以前多采用生物學(xué)實驗方法,如今添加了分子生物學(xué)方法和手段。用生物學(xué)實驗方法,如今添加了分子生物學(xué)方法和手段。一生物學(xué)實驗一生物學(xué)實驗 用實驗方法證明病毒與病害的直接相關(guān)性。明確傳播方用實驗方法證明病毒與病害的直接相關(guān)性。明確傳播方式、病癥類型、寄主范圍等。式、病癥類型、寄主范圍等。 鑒別寄主
29、是必需的。常用機械、嫁接以及菟絲子傳播方鑒別寄主是必需的。常用機械、嫁接以及菟絲子傳播方式,蟲傳實驗較費事。式,蟲傳實驗較費事。 方法簡單,反響靈敏,但任務(wù)量大,反復(fù)性差。方法簡單,反響靈敏,但任務(wù)量大,反復(fù)性差。 TMVTMV和和CMVCMV在三種鑒別寄主上的反響在三種鑒別寄主上的反響 負染技術(shù):經(jīng)過重金屬鹽在樣品周圍的堆積而加強樣品外圍的電子密度,是樣品顯示負的反差。負染色比正染色速度快,分辨率高。 免疫電鏡技術(shù)。 抗血清三血清學(xué)技術(shù) 抗血清制備。 瓊脂雙分散法。 抗原1 抗原2 酶聯(lián)免疫吸附 enzyme linked immune sorbent assay-ELISA。 靈敏度高、快
30、速、?;詮姟⒎磸?fù)性好、檢測面廣。見圖4-13。 二電子顯微鏡技術(shù) 電鏡運用的是短波電子流,分辨率達10-10nm,比光學(xué)顯微鏡高千倍以上。樣品厚度在10100nm。四核酸雜交及PCR技術(shù) 血清學(xué)是檢測蛋白,核酸雜交和聚合酶鏈式反響PCR是檢測核酸。 核酸雜交主要在DNA和RNA之間進展,由于二者之間存在著堿基互補關(guān)系。在一定條件下,RNADNA構(gòu)成異質(zhì)雙鏈的過程稱為雜交。其中預(yù)先分別純化或合成的知核酸序列片斷叫做雜交探針,也稱為cDNA探針。經(jīng)過分子雜交可檢測出相近病毒間的同源程度。 PCR是體外基因擴增法,可在試管內(nèi)將所研討的目的基因或DNA片斷在數(shù)小時內(nèi)擴增上百萬倍。 PCR反響最重要的
31、是引物普通20個核苷酸長度和Taq DNA聚合酶。反響要經(jīng)過加熱變性-退火結(jié)合-DNA合成這一循環(huán)。退火溫度普通在75度。 PCR可檢測特定DNA能否存在。五物理化學(xué)等特性 1,稀釋限點(DEP):堅持病毒侵染力的最高稀釋度。 2,鈍化溫度(TIP):處置非常種使病毒喪失活性的最低溫度。 普通在5570C,TMV在97C。 3,體外存活期(LIP):在室溫下,病毒抽提液堅持侵染力的 最長時間。普通在數(shù)天到數(shù)月。 4,沉降系數(shù)S:指病毒在20度水中在1達因的引力下 的沉降速度。單位厘米/秒。 5,光譜吸收特性:260/280紫外線峰值比表示核酸與蛋白 質(zhì)含量的比值。比值小多為線型。 6,病毒的化
32、學(xué)特性:指核酸的類型、核酸的鏈數(shù)以及分子量。九、九、 重要的植物病毒屬及典型種重要的植物病毒屬及典型種1 1、煙草花葉病毒、煙草花葉病毒TMVTMV 病毒直桿狀,直徑病毒直桿狀,直徑18nm18nm,長,長300nm300nm。核酸占。核酸占5%5%,蛋白,蛋白質(zhì)占質(zhì)占95%95%。核酸為。核酸為 + ssRNA+ ssRNA。 寄主范圍廣,傳播不需求介體,靠接觸傳播,有時靠寄主范圍廣,傳播不需求介體,靠接觸傳播,有時靠種子傳播。種子傳播。 TMVTMV體外存或期在幾個月以上,在枯燥的葉片中可以體外存或期在幾個月以上,在枯燥的葉片中可以存活存活5050多年。稀釋限點多年。稀釋限點10-410-
33、710-410-7,鈍化溫度,鈍化溫度90C90C左右。左右。 主要侵染煙草、番茄等作物,引起花葉病?;煊胁堉饕秩緹煵?、番茄等作物,引起花葉病?;煊胁報w的肥料、種子、土壤、煙末都可成為初侵染來源。體的肥料、種子、土壤、煙末都可成為初侵染來源。 干旱少雨發(fā)病重,前茬為茄科植物或油菜、蘿卜發(fā)病干旱少雨發(fā)病重,前茬為茄科植物或油菜、蘿卜發(fā)病重。重。 鑒別寄主是心葉煙和珊西煙,鑒別寄主是心葉煙和珊西煙,區(qū)分不同株系要血清學(xué)或分子生物區(qū)分不同株系要血清學(xué)或分子生物學(xué)手段。學(xué)手段。2、馬鈴薯Y病毒屬及PVY Potyvirus是植物病毒中最大的一個屬,含有75個種和93個能夠種。屬于馬鈴薯Y病毒科。
34、病毒線狀,長750nm,直徑11-15nm。主要由蚜蟲非耐久性傳播,也可經(jīng)過機械傳播。 一切種均產(chǎn)生風(fēng)輪狀內(nèi)含體。大部分病毒寄主范圍限于特定的科,如PVY-茄科、MDMV玉米矮花葉病毒-禾本科,SMV大都花葉病毒-豆科。 病毒為 +ssRNA,核酸占56%。體外存活期24天,鈍化溫度5065C,稀釋限點10-210-6。 主要侵染馬鈴薯、番茄、煙草等,引起伸展花葉、明脈、斑駁、壞死條斑和脈帶花葉等。 PVY在茄科植物和雜草上越冬,以桃蚜和機械方式傳播,抗病種類和藥劑有一定防效。3、黃瓜花葉病毒屬及CMV 此屬有3個成員。 CMV粒體球形,直徑28nm。為三分體病毒,核酸占18%。 已發(fā)現(xiàn)CMV
35、有衛(wèi)星RNA存在。 寄主范圍廣泛,67科470種植物,被稱為“流感性病毒,不同株系在外形上有差別。 花葉是根本病癥,在番茄上表現(xiàn)厥葉。最好的繁衍寄主是煙草和黃瓜,部分枯斑寄主為莧色藜、昆諾藜和豇豆。 75種蚜蟲均能傳毒,主要為棉蚜和桃蚜,非耐久性傳毒,也可機械傳播或由種子傳播。野生寄主是初侵染來源。 在消費上難于防治。主要是寄主范圍廣,介體多,傳毒效率高,無抗性種類。4、南方菜豆花葉病毒SBMV 病毒球形,直徑30nm。核酸占21%,為 +ssRNA。 主要引起菜豆和豇豆的花葉和斑駁病。 傳播介體是甲蟲。 病毒體外存活期20165天,鈍化溫度9095C,稀釋限點10-510-6。 株系分化明顯
36、,菜豆株系不侵染豇豆,豇豆株系不侵染菜豆;在有些種類上表現(xiàn)部分壞死斑,有些種類上病癥較輕。 葉甲獲毒時間124小時,保毒時間214天,甲蟲活動范圍大,傳毒快。 種子帶毒率可達34%,調(diào)種時應(yīng)加強檢疫。5、蠕傳病毒屬及TRSV 典型種為煙草環(huán)斑病毒Tobacco ringspot virus-TRSV寄主主要是果樹,主要由線蟲傳播,也可經(jīng)過種子、機械傳播。 有兩條 +ssRNA核酸基因組。病毒球狀,與線蟲之間的關(guān)系相當?;2《驹诰€蟲體內(nèi)存活時間很長,但不能扶植。 體外存活期610天,鈍化溫度5565C,稀釋限點10-4。在煙草、黃瓜上引起環(huán)斑??稍诙喾N多年生植物及種子上越冬。 汁液、甲蟲和薊馬也可傳播。6、黃癥病毒屬及BYDV 此屬有16個種和14個能夠種,典型種為大麥黃矮病毒,僅
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