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1、會計學(xué)1實驗葉綠素的提取和分離實驗葉綠素的提取和分離 ?水水第1頁/共25頁第2頁/共25頁第3頁/共25頁 一、葉綠體 形態(tài):形態(tài):橢圓球形橢圓球形 結(jié)構(gòu):結(jié)構(gòu):外膜、內(nèi)膜、外膜、內(nèi)膜、葉綠體基質(zhì)、葉綠體基質(zhì)、基?;? (由由單層膜單層膜的類囊體垛疊構(gòu)成的類囊體垛疊構(gòu)成) )第4頁/共25頁一、葉綠體 葉綠體內(nèi)的物質(zhì):葉綠體內(nèi)的物質(zhì):酶(光合作用有關(guān))酶(光合作用有關(guān)) 光反應(yīng)的酶光反應(yīng)的酶葉綠體基粒葉綠體基粒 暗反應(yīng)的酶暗反應(yīng)的酶葉綠體基質(zhì)葉綠體基質(zhì)少量少量DNADNA和和RNARNA色素色素第5頁/共25頁二、葉綠體色素 分布:分布:葉綠體葉綠體類囊體膜類囊體膜上上 分類:分類:色素色
2、素葉綠素葉綠素類胡蘿卜素類胡蘿卜素葉綠素葉綠素a a(藍(lán)綠色藍(lán)綠色)葉綠素葉綠素b b (黃綠色黃綠色)葉黃素葉黃素(黃色黃色)胡蘿卜素胡蘿卜素(橙黃色橙黃色)第6頁/共25頁二、葉綠體色素 功能:功能:選擇選擇吸收吸收光能,光能,傳遞和轉(zhuǎn)化傳遞和轉(zhuǎn)化光能光能葉綠素:主要吸收主要吸收紅橙光紅橙光和和藍(lán)紫光藍(lán)紫光類胡蘿卜素:主要吸收主要吸收藍(lán)紫光藍(lán)紫光葉綠素葉綠素a a葉綠素葉綠素b b葉黃素葉黃素胡蘿卜素胡蘿卜素葉綠素葉綠素a a光合作用光合作用直接用于直接用于( (轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化光能光能) )吸收和傳遞吸收和傳遞光能光能第7頁/共25頁第8頁/共25頁第9頁/共25頁一、實驗原理葉綠體色素易溶于無
3、水乙醇等有機(jī)溶劑中,可以用無水乙醇提取綠葉中的葉綠體色素。紙層析法不同的葉綠體色素隨層析液在濾紙上擴(kuò)散速度不同。(不同的色素會在擴(kuò)散過程中分離開來,形成條帶)(不同的色素會在擴(kuò)散過程中分離開來,形成條帶) 第10頁/共25頁一、實驗原理p 不同的色素不同的色素會在擴(kuò)散過會在擴(kuò)散過程中分離開程中分離開來,形成條來,形成條帶帶第11頁/共25頁二、實驗材料材料:材料:菠菜綠葉菠菜綠葉藥品:藥品:混合的混合的層析液層析液,無水乙醇無水乙醇,石英砂,碳酸鈣,石英砂,碳酸鈣用具:用具:干燥濾紙,干燥濾紙,帶塞層析管帶塞層析管,研缽,玻璃漏斗,紗布,研缽,玻璃漏斗,紗布,滴管,滴管,載玻片,蓋玻片載玻片,
4、蓋玻片,剪刀,試管,培養(yǎng)皿,藥匙,剪刀,試管,培養(yǎng)皿,藥匙第12頁/共25頁二、實驗步驟第13頁/共25頁提取葉綠體色素取取2-32-3片菠菜葉,撕去葉脈,盡量剪碎,放入研缽片菠菜葉,撕去葉脈,盡量剪碎,放入研缽。向研缽中放入少量向研缽中放入少量石英砂石英砂和和碳酸鈣碳酸鈣,加入,加入一滴管一滴管無水乙醇無水乙醇,邊加無水乙醇邊研磨,進(jìn)行充分地研磨至勻漿,邊加無水乙醇邊研磨,進(jìn)行充分地研磨至勻漿狀態(tài)。狀態(tài)。在玻璃漏斗上放入單層紗布,將研磨液倒入漏斗在玻璃漏斗上放入單層紗布,將研磨液倒入漏斗,漏斗下端放置培養(yǎng)皿,過濾制備得到濾液。,漏斗下端放置培養(yǎng)皿,過濾制備得到濾液?!咀⒆ⅰ縫加石英砂是為了使
5、研磨充分加石英砂是為了使研磨充分p加碳酸鈣是為了防止葉綠體色素被破壞加碳酸鈣是為了防止葉綠體色素被破壞p加入加入CaCOCaCO3 3和石英砂的量均很少,無水乙醇的量不應(yīng)太少和石英砂的量均很少,無水乙醇的量不應(yīng)太少第14頁/共25頁分離葉綠體色素將干燥的定性濾紙制成如右將干燥的定性濾紙制成如右圖所示,用鉛筆劃線圖所示,用鉛筆劃線(已準(zhǔn)備好)(已準(zhǔn)備好)。用用蓋玻片蓋玻片蘸取少量濾液,沿鉛筆線蘸取少量濾液,沿鉛筆線均均勻壓出勻壓出細(xì)線。待濾液干后,細(xì)線。待濾液干后,重復(fù)重復(fù)畫線畫線3-43-4次。次?!咀⒆ⅰ縫畫濾液線時盡量畫濾液線時盡量畫直、畫細(xì)、畫濃畫直、畫細(xì)、畫濃p每次畫完,要等濾液干時再
6、重復(fù)畫,以防濾液擴(kuò)散開使每次畫完,要等濾液干時再重復(fù)畫,以防濾液擴(kuò)散開使濾液線過寬,影響結(jié)果濾液線過寬,影響結(jié)果第15頁/共25頁分離葉綠體色素將將4mL4mL層析液層析液倒入層析管中倒入層析管中,將畫好線的濾紙條固定于右圖裝置中。,將畫好線的濾紙條固定于右圖裝置中。10min10min后,將濾紙條取出,后,將濾紙條取出,風(fēng)干。觀察色素帶及其顏色,作好記錄。風(fēng)干。觀察色素帶及其顏色,作好記錄?!咀⒆ⅰ縫放濾液條時,要避免放濾液條時,要避免濾液細(xì)線濾液細(xì)線浸沒到浸沒到層析液。不要層析液。不要讓濾紙條貼在層析管壁上。讓濾紙條貼在層析管壁上。p層析液中一些成分易揮發(fā),要避免開放在空氣中。層析液中一些
7、成分易揮發(fā),要避免開放在空氣中。濾液細(xì)線濾液細(xì)線第16頁/共25頁三、注意事項v 實驗中各種用液很多有毒(丙酮、苯等)且易燃,屬危實驗中各種用液很多有毒(丙酮、苯等)且易燃,屬危險試劑,實驗時保持通風(fēng),安全操作險試劑,實驗時保持通風(fēng),安全操作v 實驗注重團(tuán)隊合作,組員們共同完成實驗。實驗注重團(tuán)隊合作,組員們共同完成實驗。第17頁/共25頁第18頁/共25頁第19頁/共25頁一、實驗結(jié)果可以看出可以看出:v 色素擴(kuò)散距離不同。色素擴(kuò)散距離不同。v 色素帶寬度不同;色素帶寬度不同;?第20頁/共25頁二、實驗總結(jié)p 最寬(最多):最寬(最多):葉綠素葉綠素a ap 最窄(最少):最窄(最少):胡蘿卜素胡蘿卜素p 相鄰距離最近:相鄰距離最近:葉綠素葉綠素a a和和葉綠素葉綠素b bp 色素在濾紙上自上而下分布依次為:色素在濾紙上自上而下分布依次為: 胡蘿
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