高效液相色譜柱常見故障

1、一、高效液相色譜柱常見故障表1高效液相色譜柱常見故障的判斷及排除現(xiàn)象斷排除方法1.柱壓高于正常值(1)柱端過濾器堵塞(1)拆下過濾器用硝酸超聲清洗(2)長期使用柱端固定相板結(jié)(2)挖掉板結(jié)部分修補柱端(3)分析生化、染料等易污染固定相(3)采用保護柱的樣品2.柱壓低于正常值n連接處泄漏高壓查找泄漏處，拆下柱子適當擰緊或襯聚四氟乙烯薄膜3.塔板數(shù)下降(i)超齡服役(1)柱再生成換柱(2)柱被污染(2)清洗根據(jù)色譜圖的變化判斷儀器故障表2根據(jù)色譜圖的變化判斷儀器故障或方法失誤故障現(xiàn)象，能的原因排除方法此樣后不出峰(1)檢測器選擇不當，樣品無吸收(1)正確選擇檢測器，如樣品無紫外吸收就不應(yīng)選UV檢測

2、器，而應(yīng)選其它的檢測器(2)試樣溶液濃度太低，而檢測靈敏(2)應(yīng)適當提高樣品濃度和進樣量，并n不高提高檢測靈敏度(3)檢測器到記錄儀之間的輸入信號(3)修理接好信號并將靈敏度調(diào)到適宜*連接不好或斷開的位置(4)記錄儀的信號線接錯(4)檢查接線，并正確連接(5)進樣用注射器堵塞后泄漏，使樣(5)修理注射器或更換新注射器品溶液不能進入進樣閥樣不出峰或者峰*不正常(1)注射器泄漏(1)更換新注射器(2)閥轉(zhuǎn)子上針頭密封墊磨損導(dǎo)致泄露(2)更換新的零件(3)選用的注射器針頭與閥不匹配(3)更換合適的針管(4)定子與轉(zhuǎn)子接觸密封面損壞引起內(nèi)(4)損壞不嚴重時經(jīng)重新研磨，使之恢通道斷路復(fù)性能，否者更換新的

3、轉(zhuǎn)子(5)定量管堵塞(5)設(shè)法打通，或者換新的出現(xiàn)無名峰(1)轉(zhuǎn)子針頭密封墊及進樣針導(dǎo)管污染(1)清洗閥的樣品通路(2)閥樣品通路清洗不干凈(2)方法同(1 )峰形拖尾(1)定體積量管與閥連接處出現(xiàn)死區(qū)(1)更換新管消除死區(qū)(2)進樣命內(nèi)有污染或不干凈(2)可選用2 : 1 : 4的硫酸-硝酸-水的混合溶液清洗，接著用蒸熠水清洗，然后用丙酮或乙醍等溶劑清洗，烘干(3)色譜柱選擇不當，試樣與固定相(3)更換色譜柱間有作用(4)進樣技術(shù)差(4)提高進樣技術(shù)(5)樣品在流動中相中溶解度小(5)選用對試樣溶解能力強的溶劑作為流動相(6)進樣量太大(6)減少進樣量(7)色譜柱與閥的連接管連接處出現(xiàn)死區(qū)(

4、7)重新裝柱或更換分離度變差(1)柱端固定相反結(jié)(1)挖掉修補、重填固定相(2)柱端床層塌陷(2)修補柱端(3)柱子壽命已到(3)更換新柱(4)進樣量過大(4)減少進樣量(5)樣品濃度過大(5)減少配樣濃度(6)試樣溶解不完全(6)換溶劑使其完全溶解(7)試樣粘度大(7)減少進樣量，降低進樣濃度(8)色譜柱污染柱效下降(8)更換柱子或以級性溶劑沖洗k留時間不重復(fù)(1)更換流動相對舊流動相未完全被頂(1)延長平衡時間替綽(2)正相柱中流動相脫水不完全(2)重新脫水(3)柱溫變化(3)柱恒溫(4)緩沖液容量不夠(4)用較濃的緩沖液(5)柱內(nèi)條件變化(5)穩(wěn)定進樣條件，調(diào)節(jié)流動相(6)柱塌陷或形成短

5、路通道(6)更換色譜柱出現(xiàn)無規(guī)則色譜峰長期進樣滯留在柱中的組分被洗脫用強極性溶劑沖洗再用流動相平衡”頂峰(1)色譜柱超載(1)減少進樣量(2)記錄儀靈敏度過高(2)適當降低記錄儀的靈敏度(3)記錄儀機械部分有故障(3)參照有關(guān)說明進行修理(4)記錄儀接收的信號超過了測量范圍(4)改變記錄儀量程(5)檢測池及其透鏡、池窗等光學(xué)附件(5)清洗檢測池以及透鏡、池窗等光學(xué)污染附件«負峰(1)記錄儀或檢測器極性接反(1)糾正極性連接錯誤(2)用示差折光檢測器檢測時，樣品的(2)若要得到正峰，可改變檢測器或記折光指數(shù)小于流動相溶劑的折光指數(shù)錄儀的極性(3)使用的流動相不純凈(3)使用純凈的流動相

6、(4)樣品池與參比池接反(4)掉換(5)進樣故障(5)使用進樣閥，確認在進樣期間樣品環(huán)中沒有氣泡(6)光電池與放大器接錯(6)檢查后正確連接(7)用UV檢測器時，溶解樣品所用的溶(7)應(yīng)盡量采用能與流動相溶劑互溶的劑與流動相溶劑不能互溶或兩溶劑溶劑來溶解樣品，最好用流動相作pH值不同。當溶劑流過檢測池時，為樣品溶劑光在兩種互不溶溶劑的界面上產(chǎn)生折射，從而使光電池接受到不同強度的光，光強度減弱，以至于低于，參比也可出負峰。色譜峰未分開(1)色譜柱分離度低，柱效不高(1)選擇高效柱或重裝柱(2)色譜柱或色譜條件(溶劑、檢測器、(2)再行試驗選擇最佳色譜柱分離條件"度、流逮、柱子拿)選擇不

7、當(3)柱子過載(3)減少進樣量或采用再循壞分離”技術(shù)(4)流動相流速過大(4)適當降低流速(5)柱中填料流失過多，增加了柱外效應(yīng)(5)更換色譜主(6)進樣技術(shù)不佳(6)提高進樣技術(shù)基線不能回零(1)樣品粘度大(1)適當減小樣品濃度，并采用低粘度流動相溶劑(2)進樣量太大，柱超載(2)減小進樣量(3)溶解樣品的溶劑與流動相溶劑互溶(3)盡量采用能互溶的溶劑來溶解試樣(4)柱效低，柱內(nèi)空隙(4)改用高效柱或重新裝柱(5)進樣裝置部分堵塞(5)檢修進樣器并清洗之有空峰(假峰)(1)不同批號不同處理條件的溶劑分別(1)最好使用同一批，又是在同一條件“來溶樣或作為流動相時，易出空下處理過的溶劑，用它分

8、別作為流峰動相或溶樣，則有可能避免出假峰(2)流動相溶劑中有雜質(zhì)或氣泡，用該(2)對流動相溶劑，應(yīng)堅持先以0.45um流動相配樣會出空峰過濾膜過濾和脫氣后再使用(3)樣品中未知物(3)處理樣品(4)柱未平衡(尤其是離子對色譜)(4)重新平衡柱：用流動相作樣品溶劑(5)進樣閥殘余峰(5)每次使用后用強溶劑清洗閥(6)與流動相組成不同的樣品溶劑洗脫(6)用流動相溶解樣品：大大減少進樣量(7)用不同批號的溶劑溶解樣品(7)應(yīng)盡量采用同一溶劑和相同處理條件的溶劑溶樣，若非用不同溶劑時，應(yīng)注意空峰對實驗帶來的影響k線有噪音(1)記錄儀與檢測器信號輸出接觸不良(1)檢查并接好信號線(2)電壓不穩(wěn)(2)采取

9、穩(wěn)壓措施(3)接地線不好(3)應(yīng)改用良好的接地線(4)泵中有氣泡，泵壓不穩(wěn)(4)用前述的方法趕除聚集于泵頭內(nèi)的氣泡(5)溶劑純度不高，背景吸收強，透光(5)提純?nèi)軇┗蜻x純度比較高(至少應(yīng)為分析純級)、透光性好的溶劑作為流動相(6)檢測池污染(6)清洗檢測池(7)示差折光檢測器液槽漏(7)檢修或更換液槽(8)用RI檢測時，環(huán)境溫度變化太大(8)應(yīng)采用恒溫或溫度變化不大的環(huán)境作實驗(9)樣品池或參比池中有氣泡(9)突然加大流量趕出氣泡，在監(jiān)測器出口加上限流器以增大池內(nèi)壓(如果檢測池耐壓的話)(10)檢測器光源(燈泡)故障(10)更換光源(11)緊固件或連接件泄漏(11)擰緊或更換緊固件(12)進樣

10、裝置部分堵塞(12)檢修進樣器并清洗(13)由泵的沖程引起的規(guī)則脈沖(13)連接脈沖阻尼裝置：使用無脈沖泵(14)隔膜泄漏(14)更換隔膜：最好使用進樣閥n線漂移(1)溶劑貯槽污染(1)清洗貯槽裝入新流動相沖洗柱子(2)前次分離樣品中的強吸附組分從(2)在分離之前用強流動相從柱子中洗柱上洗脫脫所有的組分：使溶劑梯度清洗柱子(3)由微粒造成柱入口、進樣閥、柱入(3)清洗進樣系統(tǒng)和柱入口過濾片口的部分堵塞(4)溶劑分層(4)采用合適溶劑(5)泵輸出的緩慢改變(5)檢測流量：如果泵的輸出隨溫度變化，應(yīng)控制溫度(6)檢測器污染(6)清洗檢測器(7)柱污染或流失”(7)再生或更換(如再生不成功)柱子：使

11、用預(yù)柱(8)檢測器溫度變化(8)使系統(tǒng)恒溫(9)光源故障(9)更換光源燈陸線噪聲大，且漂 移(1)環(huán)境溫度變化大(1)采取恒溫措施(2)色譜系統(tǒng)未達平衡(2)延長色譜系統(tǒng)流動相平衡時間(3)柱子污染(3)用大流量極性溶劑沖洗柱子，如還不解決問題應(yīng)更換柱子(4)示差折光檢測器池裂開(4)檢查更換£線不規(guī)則地轉(zhuǎn)移(1)色譜柱污染變臟(1)沖洗柱子、重新裝柱或更換新柱子(2)溶劑純度差(2)更換純?nèi)軇?3)泵密封不好(3)檢查維修泵密封或更換密封圈(4)用RI檢測時，兩溶劑互溶性不好(4)使兩溶劑能很好地互溶混合，必要時可采取攪拌方式(5)環(huán)境溫度變化大(指使用RI檢測器)(5)應(yīng)采取恒溫

12、措施(6)管路漏(6)檢查管路，并消除泄漏處(7)色譜柱沒有完全平衡(7)延長沖洗時間，使柱子達到平衡(8)溶劑直接吸收了空氣中的水分，(8)阻止溶劑與潮濕空氣接觸或用干燥使RI檢測器不穩(wěn)定劑干燥溶劑n線上出現(xiàn)大的尖 a(1)檢測池內(nèi)有氣泡通過(1)溶劑脫氣并徹底沖洗系統(tǒng)：檢查緊固件是否有空氣漏入系統(tǒng)(2)實驗室內(nèi)其他電器(如：烘箱，(2)消除噪音來源：確保裝置接地良好：n他色譜儀等)的影響用絕緣變壓器使儀器絕緣峰重現(xiàn)性差(D注射器針頭太長，樣品液部分漏(1)選用合適的針頭對 U6K進樣裝置以卓(3.8-5.0 ) cm 為宜(2)進樣技術(shù)欠佳，表現(xiàn)為峰面積(2)認真掌握注射器進樣技術(shù)，使注射死大忽小器進樣重復(fù)性誤差小于 5%(3)管路有泄漏處(3)檢查并修復(fù)(4)儀器沒有充分穩(wěn)定(4)對儀器再次預(yù)熱穩(wěn)定沖洗平衡(5)實驗條件發(fā)生變化(5)使實驗條件(檢測器靈敏度、流速、溫度等)盡可能一致(6)注射器有泄漏或堵塞現(xiàn)象(6)修復(fù)或更換注射器(7)進樣速度不一致(7)掌握一樣的進樣速度(8)進樣閥開關(guān)不靈，閥門沒有充(8)檢查維修進樣閥開關(guān)*打開(9)樣品