植物組織培養(yǎng)試卷及答案6套(共21頁(yè))

1、植物組織培養(yǎng)試題(一)一、填空題（每空0.5分，共10分）1.    植物組織培養(yǎng)按培養(yǎng)基的物理狀態(tài)分為_(kāi)培養(yǎng)和_培養(yǎng)。2.    在組織培養(yǎng)中，IAA等植物激素必須用_法滅菌，而接種室空間可采用_或_法滅菌。3.    植物的胚胎培養(yǎng)，包括_、_、_以及_等四個(gè)內(nèi)容。4.    1960年，英國(guó)學(xué)者Cocking用_分離原生質(zhì)體成功，從而開(kāi)創(chuàng)原生質(zhì)體培養(yǎng)技術(shù)。5.    對(duì)植物材料進(jìn)行表面滅菌時(shí)，常采用的滅菌藥劑為_(kāi)、_、_。6. &

2、#160;  器官培養(yǎng)時(shí)，其營(yíng)養(yǎng)器官的培養(yǎng)有_、_、_三種方式。7.    大多數(shù)植物組織培養(yǎng)的適宜溫度范圍是_，培養(yǎng)基的pH值范圍是_。8.    用烘箱迅速干燥洗凈后的玻璃器皿時(shí)溫度可以設(shè)在_的溫度范圍內(nèi)，而若用它高溫干燥滅菌則需在_的溫度下13小時(shí)。二、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共10分）1. 下列不屬于生長(zhǎng)素類(lèi)的植物激素是_。A 6-BA；B IAA；C NAA；D IBA2. 在原生質(zhì)體的培養(yǎng)中，滲透穩(wěn)定劑的作用是_。A 穩(wěn)定原生質(zhì)體的形態(tài)而不使其被破壞；B 支持作用；C 提供營(yíng)養(yǎng)；D 調(diào)節(jié)PH值3. MS培養(yǎng)基中，下

3、列不屬于大量元素的鹽是_。A NH4NO3；B KNO3；C ZnSO4.7H2O；D MgSO4.7H2O4. 下列實(shí)驗(yàn)中可能獲得單倍體植株的是_。A 小麥的莖尖培養(yǎng)；B番茄花柱培養(yǎng)；C玉米胚乳培養(yǎng)；D玉米花粉培養(yǎng)5. 同一植株下列_部位病毒的含量最低。A 葉片細(xì)胞；B 莖尖生長(zhǎng)點(diǎn)細(xì)胞；C 莖節(jié)細(xì)胞；D 根尖生長(zhǎng)點(diǎn)細(xì)胞三、判斷題（對(duì)畫(huà)，錯(cuò)畫(huà)×。每題2分，共10分）1.    幼嫩的組織比成熟的老組織脫分化難。（ ）2.    對(duì)于含有瓊脂糖的培養(yǎng)基而言，在pH值高于6.5時(shí)，培養(yǎng)基不能很好地凝固；低于5.0時(shí)，培養(yǎng)基會(huì)變硬

4、。（ ）3.    常用的生長(zhǎng)素作用的強(qiáng)弱順序?yàn)椋?,4-D>NAA > IAA>IBA。（ ）4.    由性細(xì)胞發(fā)育而成的胚叫做胚狀體，而由體細(xì)胞發(fā)育而成的胚叫做合子胚。（ ）5.    經(jīng)過(guò)花藥培養(yǎng)所獲得的植株一定都是單倍體。（ ）四、名詞解釋?zhuān)款}3分，共15分）1. 培養(yǎng)基母液2. 植物細(xì)胞全能性3. 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)4. 細(xì)胞脫分化5. 無(wú)菌操作。五、簡(jiǎn)答題（每題5分，共25分）1. 培養(yǎng)基的主要成分及作用?2. 什么是廣義的和狹義的植物組織培養(yǎng)?3. 簡(jiǎn)述脫除植物病毒的方法

5、。4. 植物組織培養(yǎng)中，培養(yǎng)基的pH值起什么作用?如果pH值過(guò)高或過(guò)低會(huì)有什么后果?5. 單倍體育種的技術(shù)流程。六、論述題（每題10分，共30分）1.    請(qǐng)你設(shè)計(jì)一個(gè)組培實(shí)驗(yàn)室，都需要哪些儀器設(shè)備，說(shuō)明你設(shè)計(jì)組培實(shí)驗(yàn)室的各分室及其所需儀器設(shè)備的作用。2.    請(qǐng)論述植物原生質(zhì)體的培養(yǎng)方法、操作流程、以及在體細(xì)胞雜交中的應(yīng)用。植物組織培養(yǎng)的三大難題及解決辦法。 植物組織培養(yǎng)試題(二)一、填空題（每空0.5分，共10分）9.      大多數(shù)植物組織培養(yǎng)的適宜溫度范圍是_，

6、培養(yǎng)基的pH值范圍是_。10.  1960年，英國(guó)學(xué)者Cocking用_分離原生質(zhì)體成功，從而開(kāi)創(chuàng)原生質(zhì)體培養(yǎng)技術(shù)。11.  植物組織培養(yǎng)按培養(yǎng)基的物理狀態(tài)分為_(kāi)培養(yǎng)和_培養(yǎng)。12.  用烘箱迅速干燥洗凈后的玻璃器皿時(shí)溫度可以設(shè)在_的溫度范圍內(nèi)，而若用它高溫干燥滅菌則需在_的溫度下13小時(shí)。13.  對(duì)植物材料進(jìn)行表面滅菌時(shí)，常采用的滅菌藥劑為_(kāi)、_、_。14.  器官培養(yǎng)時(shí)，其營(yíng)養(yǎng)器官的培養(yǎng)有_、_、_三種方式。15.  植物的胚胎培養(yǎng)，包括_、_、_以及_等四個(gè)內(nèi)容。16.  在組織培養(yǎng)中，IAA等植物激素必須用_法滅菌

7、，而接種室空間可采用_或_法滅菌。二、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共10分）1. 同一植株下列_部位病毒的含量最低。A 葉片細(xì)胞；B 莖尖生長(zhǎng)點(diǎn)細(xì)胞；C 莖節(jié)細(xì)胞；D 根尖生長(zhǎng)點(diǎn)細(xì)胞2. 在原生質(zhì)體的培養(yǎng)中，滲透穩(wěn)定劑的作用是_。A 穩(wěn)定原生質(zhì)體的形態(tài)而不使其被破壞；B 支持作用；C 提供營(yíng)養(yǎng)；D 調(diào)節(jié)PH值3. 下列實(shí)驗(yàn)中可能獲得單倍體植株的是_。A 小麥的莖尖培養(yǎng)；B番茄花柱培養(yǎng)；C玉米胚乳培養(yǎng)；D玉米花粉培養(yǎng)4. MS培養(yǎng)基中，下列不屬于大量元素的鹽是_。A NH4NO3；B KNO3；C ZnSO4.7H2O；D MgSO4.7H2O5. 下列不屬于生長(zhǎng)素類(lèi)的植物激素是_。A 6-BA；B

8、IAA；C NAA；D IBA三、判斷題（對(duì)畫(huà)，錯(cuò)畫(huà)×。每題2分，共10分）1. 常用生長(zhǎng)素作用的強(qiáng)弱順序?yàn)椋?,4-D>NAA>IAA>IBA。（ ）2. 由性細(xì)胞發(fā)育而成的胚叫做胚狀體，而由體細(xì)胞發(fā)育而成的胚叫做合子胚。（ ）3. 幼嫩的組織比成熟的老組織脫分化難。（ ）4. 經(jīng)過(guò)花藥培養(yǎng)所獲得的植株一定都是單倍體。（ ）5. 對(duì)于含有瓊脂糖的培養(yǎng)基而言，在pH值高于6.5時(shí)，培養(yǎng)基不能很好地凝固；低于5.0時(shí)，培養(yǎng)基會(huì)變硬。（ ）四、名詞解釋?zhuān)款}3分，共15分）1. 植物細(xì)胞全能性2. 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)3. 無(wú)菌操作4. 培養(yǎng)基母液5. 細(xì)胞脫分化五、簡(jiǎn)答題

9、（每題5分，共25分）1. 簡(jiǎn)述脫除植物病毒的方法。2. 什么是廣義的植物組織培養(yǎng)?什么是狹義的植物組織培養(yǎng)?3. 植物組織培養(yǎng)中，培養(yǎng)基的pH值起什么作用?如果pH值過(guò)高或過(guò)低會(huì)有什么后果?4. 培養(yǎng)基的主要成分及作用?5. 人工種子的制作方法。六、論述題（每題10分，共30分）3.      請(qǐng)論述植物原生質(zhì)體的培養(yǎng)方法、操作流程、以及在體細(xì)胞雜交中的應(yīng)用。4.      請(qǐng)你設(shè)計(jì)一個(gè)組培實(shí)驗(yàn)室，都需要哪些儀器設(shè)備，說(shuō)明你設(shè)計(jì)組培實(shí)驗(yàn)室的各分室及其所需儀器設(shè)備的作用。5. 

10、0;    植物單細(xì)胞的培養(yǎng)方法及在誘變育種中的應(yīng)用。 植物組織培養(yǎng)試題（一）答案一、填空題（每空0.5分，共10分）（1） 固體培養(yǎng) 液體培養(yǎng)；（2） 過(guò)濾 熏蒸 照射；（3） 胚培養(yǎng) 胚珠培養(yǎng) 胚乳培養(yǎng) 試管受精；（4） 真菌纖維素酶；（5） 75%酒精 次氯酸鈉 升汞；（6） 離體根培養(yǎng) 離體莖培養(yǎng) 離體葉培養(yǎng)；（7）24-28，5.6-6.5；（8） 80 150二、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共10分）1. A； 2. A； 3. C； 4. D； 5. B三、判斷改錯(cuò)題（對(duì)畫(huà)；錯(cuò)畫(huà)×。每題2分，共10分）1. ×；2. 

11、5;；3. ×；4. ×；5. ×四、名詞解釋?zhuān)款}4分，共20分）1.       培養(yǎng)基母液是指：在配制培養(yǎng)基時(shí)，預(yù)先配制好不同組分的濃溶液，分別是使用濃度的10倍或100倍，甚至1000倍。這些母液包括無(wú)機(jī)鹽、維生素以及在水溶液中穩(wěn)定的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)。2.       植物細(xì)胞全能性是指：植物細(xì)胞具有該植物體全部遺傳的可能性，在一定條件下如同受精卵一樣，具有發(fā)育成完整植物體的潛在能力。3.    

12、60;  植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)是指能影響植物的細(xì)胞分化、分裂及發(fā)育，和影響植物的形態(tài)建成、開(kāi)花、結(jié)實(shí)、成熟、萌發(fā)等生理生化過(guò)程，對(duì)外植體愈傷組織的誘導(dǎo)和器官分化起著重要和明顯的調(diào)節(jié)作用，其中以生長(zhǎng)素類(lèi)和細(xì)胞分裂素類(lèi)最為常用。4.       細(xì)胞脫分化是指：使以分化的細(xì)胞失去已分化細(xì)胞的典型特征，或消除了細(xì)胞分工，使之回復(fù)到分生組織狀態(tài)或胚性細(xì)胞狀態(tài)，從而恢復(fù)細(xì)胞分化的能力。5.       在無(wú)菌的空間環(huán)境下，對(duì)植物材料進(jìn)行組織培養(yǎng)操作的一系列動(dòng)作過(guò)程，包括植物材料的

13、處理、接種及后續(xù)處理，以及培養(yǎng)基的滅菌處理。五、簡(jiǎn)答題（每題6分，共24分）1. 不論液體培養(yǎng)還是固體培養(yǎng)，大多數(shù)植物組織培養(yǎng)中所用的培養(yǎng)基都是由水、無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)物（無(wú)機(jī)鹽）、碳源、維生素、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)、瓊脂和有機(jī)附加物等幾大類(lèi)物質(zhì)組成。培養(yǎng)基中的水是植物細(xì)胞各種生理、生化反應(yīng)的介質(zhì)，起著維持細(xì)胞一定滲透壓與膨壓的作用，并為植物機(jī)體提供氫、氧元素；無(wú)機(jī)鹽包括大量元素和微量元素，主要提供無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；碳源是培養(yǎng)基中作為植物材料生長(zhǎng)發(fā)育的能源；維生素類(lèi)與植物體內(nèi)各種酶的形成有關(guān)；生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)是培養(yǎng)基中不可缺少的關(guān)鍵物質(zhì)，對(duì)外植體愈傷組織的誘導(dǎo)和器官分化起著重要和明顯的調(diào)節(jié)作用；瓊脂的主要作用是使培養(yǎng)基

14、在常溫下凝固，但不參與代謝；有機(jī)附加物包括各種氨基酸，是培養(yǎng)基中重要的有機(jī)氮源。2. 廣義的植物組織培養(yǎng)泛指將植物體的各種結(jié)構(gòu)成分，如植物細(xì)胞、植物原生質(zhì)體、植物組織以及植物器官甚至幼小植株放在離體的、無(wú)菌的人工環(huán)境中讓其生長(zhǎng)發(fā)育的方法。也叫離體培養(yǎng)或試管培養(yǎng)。包括植株的培養(yǎng)、植物胚胎培養(yǎng)、植物器官培養(yǎng)、植物組織培養(yǎng)、植物細(xì)胞培養(yǎng)、植物原生質(zhì)體培養(yǎng)。狹義的植物組織培養(yǎng)是指對(duì)植物小塊組織的培養(yǎng)。3. 脫除植物病毒的方法有四種：1.莖尖培養(yǎng)脫毒法；2.熱處理脫毒法；3.微體嫁接離體培養(yǎng)脫毒法；4.珠心組織脫毒法。莖尖培養(yǎng)脫除病毒的依據(jù)：病毒在植物體內(nèi)分布是不均一的，越接近生長(zhǎng)點(diǎn)病毒濃度越稀，因此可

15、采用小的莖尖離體培養(yǎng)而脫除植物病毒。熱處理脫毒法的原理：熱處理法并不殺死病毒，只能鈍化病毒的活性，使病毒在植物體內(nèi)增殖減緩或增殖停止，而失去侵染的能力；同時(shí)可以加速植物細(xì)胞的分裂，使植物細(xì)胞在與病毒繁殖的競(jìng)爭(zhēng)中取勝。微體嫁接離體培養(yǎng)脫毒法原理：把極小的莖尖作為接穗嫁接到種子實(shí)生苗砧木上，然后連同砧木一起在培養(yǎng)基上培養(yǎng)。珠心組織脫毒法的原理：病毒是通過(guò)維管組織傳播的，而珠心組織與維管組織沒(méi)有直接聯(lián)系，故可以通過(guò)珠心組織培養(yǎng)獲得無(wú)病毒植株。4. 植物組織培養(yǎng)中，一般調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值至一合適的范圍，其作用是：首先提供大多數(shù)植物材料要求的弱酸性環(huán)境，以便能進(jìn)行正常的生理生化活動(dòng)，其次是影響固體培養(yǎng)基

16、的凝固程度。一般調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值至5.0-6.0的范圍，pH值過(guò)高或過(guò)低都會(huì)導(dǎo)致植物材料不能正常生長(zhǎng)發(fā)育，而且pH值過(guò)高會(huì)導(dǎo)致固體培養(yǎng)基的過(guò)硬，不利于營(yíng)養(yǎng)成分的吸收，pH值過(guò)低則導(dǎo)致固體培養(yǎng)基不能正常凝固。六、論述題（每題13分，共26分）1. 一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)具備進(jìn)行下列工作所必需的設(shè)施與儀器：1）玻璃器皿、塑料器皿和其他實(shí)驗(yàn)器皿的清洗和貯存；2）培養(yǎng)基的制備、滅菌和貯存；3）植物材料的無(wú)菌操作；4）將培養(yǎng)物保持在溫度、光照、可能時(shí)還有濕度可控的條件下；5）培養(yǎng)物的觀察。植物組織培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)室，通常包括通用實(shí)驗(yàn)室、無(wú)菌操作室（接種室）、恒溫培養(yǎng)室、檢查培養(yǎng)情況并做記錄的細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)

17、室。通用實(shí)驗(yàn)室主要用于植物組織培養(yǎng)所需器具的洗滌、干燥和保存，培養(yǎng)基的配制、分裝和滅菌，化學(xué)試劑的存放及配制，重蒸餾水的生產(chǎn)，待培養(yǎng)植物材料的預(yù)處理及培養(yǎng)物的常規(guī)生理生化分析等操作。為了配制各種培養(yǎng)基，室內(nèi)必須有一個(gè)較大的平面工作臺(tái)及供放置各種培養(yǎng)器具的櫥柜。室內(nèi)主要應(yīng)有滅菌設(shè)備、稱量設(shè)備、pH值測(cè)定設(shè)備、蒸餾水器、烘箱、冰箱、藥品柜、攪拌器、無(wú)菌操作室主要用于植物材料的消毒和接種，培養(yǎng)物的繼代轉(zhuǎn)移等等。它應(yīng)是無(wú)塵、無(wú)對(duì)流空氣的非常潔凈的實(shí)驗(yàn)室。室內(nèi)主要應(yīng)有超凈工作臺(tái)和通風(fēng)換氣設(shè)備。恒溫培養(yǎng)室是培養(yǎng)試管苗的場(chǎng)所，要滿足外植體生長(zhǎng)所需的溫度、光照、濕度和氣體等條件。室內(nèi)主要應(yīng)有培養(yǎng)架和控制溫度和

18、光照的設(shè)備，以及搖床、小型的光照培養(yǎng)箱。細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)室主要用于隨時(shí)觀察和記錄培養(yǎng)物的細(xì)胞學(xué)和形態(tài)解剖學(xué)的變化，可進(jìn)行顯微觀察、顯微攝影和普通攝影、組織切片、細(xì)胞染色等工作。室內(nèi)主要應(yīng)有雙筒實(shí)體顯微鏡、普通或超薄切片機(jī)、磨刀機(jī)、染色缸、烘片器以及照相沖洗設(shè)備。2原生質(zhì)培養(yǎng)流程包括：1）原生質(zhì)體分離、2）原生質(zhì)體純化、3）原生質(zhì)體培養(yǎng)、4）原生質(zhì)體胞壁再生、5）細(xì)胞團(tuán)形成和器官發(fā)生。原生質(zhì)體分離方法：1）機(jī)械分離法 先將細(xì)胞放在高滲糖溶液中預(yù)處理，待細(xì)胞發(fā)生輕微質(zhì)壁分離，原生質(zhì)體收縮成球形后，再用機(jī)械法磨碎組織，從傷口處可釋放出完整的原生質(zhì)體。2）酶解分離法 用細(xì)胞壁降解酶脫除植物細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體

19、的方法。原生質(zhì)體純化方法：沉降法（離心）、漂浮法（比重大的高滲溶液）、界面法（兩種比重不同的溶液）。原生質(zhì)體的培養(yǎng)技術(shù)：1) 固體培養(yǎng)法、2) 淺層液體培養(yǎng)法、3) 雙層培養(yǎng)法。體細(xì)胞雜交：兩種異源(種、屬間)原生質(zhì)體，在誘導(dǎo)劑誘發(fā)下相互接觸，從而發(fā)生膜融合，胞質(zhì)融合和核融合并形成雜種細(xì)胞，進(jìn)一步發(fā)育成雜種植物體，稱為細(xì)胞雜交，或細(xì)胞融合，如取材為體細(xì)胞則稱體細(xì)胞雜交。體細(xì)胞雜交流程如圖所示。植物組織培養(yǎng)試題（二）答案一、填空題（每空0.5分，共10分）（1）24-28 5.6-6.5；（2）纖維素酶；（3）固體培養(yǎng) 液體培養(yǎng)；（4） 80 150（5）75%酒精 次氯酸鈉 升汞；（6）離體根

20、培養(yǎng) 離體莖培養(yǎng) 離體葉培養(yǎng)；（7）胚培養(yǎng) 胚珠培養(yǎng) 胚乳培養(yǎng) 試管受精；（8）過(guò)濾 熏蒸 照射二、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共10分）1. B； 2. A； 3. D； 4. C； 5. A 三、判斷改錯(cuò)題（對(duì)畫(huà)；錯(cuò)畫(huà)×。每題2分，共10分）1. ×；2. ×；3. ×；4. ×；5. ×四、名詞解釋?zhuān)款}4分，共20分）1. 植物細(xì)胞全能性是指：植物細(xì)胞具有該植物體全部遺傳的可能性，在一定條件下如同受精卵一樣，具有發(fā)育成完整植物體的潛在能力。2. 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)是指能影響植物的細(xì)胞分化、分裂及發(fā)育，和影響植物的形態(tài)建成、開(kāi)花、結(jié)實(shí)、

21、成熟、萌發(fā)等生理生化過(guò)程，對(duì)外植體愈傷組織的誘導(dǎo)和器官分化起著重要和明顯的調(diào)節(jié)作用，其中以生長(zhǎng)素類(lèi)和細(xì)胞分裂素類(lèi)最為常用。3. 在無(wú)菌的空間環(huán)境下，對(duì)植物材料進(jìn)行組織培養(yǎng)操作的一系列動(dòng)作過(guò)程，包括植物材料的處理、接種及后續(xù)處理，以及培養(yǎng)基的滅菌處理。4. 培養(yǎng)基母液是指：在配制培養(yǎng)基時(shí)，預(yù)先配制好不同組分的濃溶液，分別是使用濃度的10倍或100倍，甚至1000倍。這些母液包括無(wú)機(jī)鹽、維生素以及在水溶液中穩(wěn)定的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)。5. 細(xì)胞脫分化是指：使以分化的細(xì)胞失去已分化細(xì)胞的典型特征，或消除了細(xì)胞分工，使之回復(fù)到分生組織狀態(tài)或胚性細(xì)胞狀態(tài)，從而恢復(fù)細(xì)胞分化的能力。五、簡(jiǎn)答題（每題6分，共24分）

22、1. 脫除植物病毒的方法有四種：1.莖尖培養(yǎng)脫毒法；2.熱處理脫毒法；3.微體嫁接離體培養(yǎng)脫毒法；4.珠心組織脫毒法。莖尖培養(yǎng)脫除病毒的依據(jù)：病毒在植物體內(nèi)分布是不均一的，越接近生長(zhǎng)點(diǎn)病毒濃度越稀，因此可采用小的莖尖離體培養(yǎng)而脫除植物病毒。熱處理脫毒法的原理：熱處理法并不殺死病毒，只能鈍化病毒的活性，使病毒在植物體內(nèi)增殖減緩或增殖停止，而失去侵染的能力；同時(shí)可以加速植物細(xì)胞的分裂，使植物細(xì)胞在與病毒繁殖的競(jìng)爭(zhēng)中取勝。微體嫁接離體培養(yǎng)脫毒法原理：把極小的莖尖作為接穗嫁接到種子實(shí)生苗砧木上，然后連同砧木一起在培養(yǎng)基上培養(yǎng)。珠心組織脫毒法的原理：病毒是通過(guò)維管組織傳播的，而珠心組織與維管組織沒(méi)有直接

23、聯(lián)系，故可以通過(guò)珠心組織培養(yǎng)獲得無(wú)病毒植株。2. 廣義的植物組織培養(yǎng)泛指將植物體的各種結(jié)構(gòu)成分，如植物細(xì)胞、植物原生質(zhì)體、植物組織以及植物器官甚至幼小植株放在離體的、無(wú)菌的人工環(huán)境中讓其生長(zhǎng)發(fā)育的方法。也叫離體培養(yǎng)或試管培養(yǎng)。包括植株的培養(yǎng)、植物胚胎培養(yǎng)、植物器官培養(yǎng)、植物組織培養(yǎng)、植物細(xì)胞培養(yǎng)、植物原生質(zhì)體培養(yǎng)。狹義的植物組織培養(yǎng)是指對(duì)植物小塊組織的培養(yǎng)。3. 植物組織培養(yǎng)中，一般調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值至一合適的范圍，其作用是：首先提供大多數(shù)植物材料要求的弱酸性環(huán)境，以便能進(jìn)行正常的生理生化活動(dòng)，其次是影響固體培養(yǎng)基的凝固程度。一般調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值至5.0-6.0的范圍，pH值過(guò)高或過(guò)低都會(huì)導(dǎo)

24、致植物材料不能正常生長(zhǎng)發(fā)育，而且pH值過(guò)高會(huì)導(dǎo)致固體培養(yǎng)基的過(guò)硬，不利于營(yíng)養(yǎng)成分的吸收，pH值過(guò)低則導(dǎo)致固體培養(yǎng)基不能正常凝固。4. 不論液體培養(yǎng)還是固體培養(yǎng)，大多數(shù)植物組織培養(yǎng)中所用的培養(yǎng)基都是由水、無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)物（無(wú)機(jī)鹽）、碳源、維生素、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)、瓊脂和有機(jī)附加物等幾大類(lèi)物質(zhì)組成。培養(yǎng)基中的水是植物細(xì)胞各種生理、生化反應(yīng)的介質(zhì)，起著維持細(xì)胞一定滲透壓與膨壓的作用，并為植物機(jī)體提供氫、氧元素；無(wú)機(jī)鹽包括大量元素和微量元素，主要提供無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；碳源是培養(yǎng)基中作為植物材料生長(zhǎng)發(fā)育的能源；維生素類(lèi)與植物體內(nèi)各種酶的形成有關(guān)；生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)是培養(yǎng)基中不可缺少的關(guān)鍵物質(zhì)，對(duì)外植體愈傷組織的誘導(dǎo)和器官分

25、化起著重要和明顯的調(diào)節(jié)作用；瓊脂的主要作用是使培養(yǎng)基在常溫下凝固，但不參與代謝；有機(jī)附加物包括各種氨基酸，是培養(yǎng)基中重要的有機(jī)氮源。六、論述題（每題13分，共26分）1.原生質(zhì)培養(yǎng)流程包括：1）原生質(zhì)體分離、2）原生質(zhì)體純化、3）原生質(zhì)體培養(yǎng)、4）原生質(zhì)體胞壁再生、5）細(xì)胞團(tuán)形成和器官發(fā)生。原生質(zhì)體分離方法：1）機(jī)械分離法 先將細(xì)胞放在高滲糖溶液中預(yù)處理，待細(xì)胞發(fā)生輕微質(zhì)壁分離，原生質(zhì)體收縮成球形后，再用機(jī)械法磨碎組織，從傷口處可釋放出完整的原生質(zhì)體。2）酶解分離法 用細(xì)胞壁降解酶脫除植物細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體的方法。原生質(zhì)體純化方法：沉降法（離心）、漂浮法（比重大的高滲溶液）、界面法（兩種比重不

26、同的溶液）。原生質(zhì)體的培養(yǎng)技術(shù)：1) 固體培養(yǎng)法、2) 淺層液體培養(yǎng)法、3) 雙層培養(yǎng)法。體細(xì)胞雜交：兩種異源(種、屬間)原生質(zhì)體，在誘導(dǎo)劑誘發(fā)下相互接觸，從而發(fā)生膜融合，胞質(zhì)融合和核融合并形成雜種細(xì)胞，進(jìn)一步發(fā)育成雜種植物體，稱為細(xì)胞雜交，或細(xì)胞融合，如取材為體細(xì)胞則稱體細(xì)胞雜交。體細(xì)胞雜交流程如圖所示。2. 一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)具備進(jìn)行下列工作所必需的設(shè)施與儀器：1）玻璃器皿、塑料器皿和其他實(shí)驗(yàn)器皿的清洗和貯存；2）培養(yǎng)基的制備、滅菌和貯存；3）植物材料的無(wú)菌操作；4）將培養(yǎng)物保持在溫度、光照、可能時(shí)還有濕度可控的條件下；5）培養(yǎng)物的觀察。植物組織培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)室，通常包括通用實(shí)驗(yàn)室、

27、無(wú)菌操作室（接種室）、恒溫培養(yǎng)室、檢查培養(yǎng)情況并做記錄的細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)室。通用實(shí)驗(yàn)室主要用于植物組織培養(yǎng)所需器具的洗滌、干燥和保存，培養(yǎng)基的配制、分裝和滅菌，化學(xué)試劑的存放及配制，重蒸餾水的生產(chǎn)，待培養(yǎng)植物材料的預(yù)處理及培養(yǎng)物的常規(guī)生理生化分析等操作。為了配制各種培養(yǎng)基，室內(nèi)必須有一個(gè)較大的平面工作臺(tái)及供放置各種培養(yǎng)器具的櫥柜。室內(nèi)主要應(yīng)有滅菌設(shè)備、稱量設(shè)備、pH值測(cè)定設(shè)備、蒸餾水器、烘箱、冰箱、藥品柜、攪拌器、無(wú)菌操作室主要用于植物材料的消毒和接種，培養(yǎng)物的繼代轉(zhuǎn)移等等。它應(yīng)是無(wú)塵、無(wú)對(duì)流空氣的非常潔凈的實(shí)驗(yàn)室。室內(nèi)主要應(yīng)有超凈工作臺(tái)和通風(fēng)換氣設(shè)備。恒溫培養(yǎng)室是培養(yǎng)試管苗的場(chǎng)所，要滿足外植體生長(zhǎng)

28、所需的溫度、光照、濕度和氣體等條件。室內(nèi)主要應(yīng)有培養(yǎng)架和控制溫度和光照的設(shè)備，以及搖床、小型的光照培養(yǎng)箱。細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)室主要用于隨時(shí)觀察和記錄培養(yǎng)物的細(xì)胞學(xué)和形態(tài)解剖學(xué)的變化，可進(jìn)行顯微觀察、顯微攝影和普通攝影、組織切片、細(xì)胞染色等工作。室內(nèi)主要應(yīng)有雙筒實(shí)體顯微鏡、普通或超薄切片機(jī)、磨刀機(jī)、染色缸、烘片器以及照相沖洗設(shè)備。 植物組織培養(yǎng)試題(三)一、填空題(每空1分,共20分，)1、一般培養(yǎng)室控制的溫度是_，培養(yǎng)基常選用的pH值是_。2、在組織培養(yǎng)中，培養(yǎng)基常用_法滅菌，不耐熱物質(zhì)用_法滅菌。3、非洲菊的葉片_,故沒(méi)有直立的莖，在組織培養(yǎng)的繼代過(guò)程中用_法繁殖。4、1962年，Mura

29、shige 和Skoog為培養(yǎng)煙草細(xì)胞設(shè)計(jì)了_培養(yǎng)基，其特點(diǎn)是_濃度較高，且為較穩(wěn)定的_。5、從單個(gè)細(xì)胞或外植體形成的愈傷組織 ，大致要經(jīng)歷 _、_和期。6、6-BA / NAA 的高低決定著外植體的發(fā)育方向，其比值高時(shí)_，比值低時(shí)_。7、脫毒苗培養(yǎng)的常用兩種方法是_和_。8、菊花在生產(chǎn)實(shí)踐中常用 _法繁殖，在組織培養(yǎng)可用_作為外植體進(jìn)行培養(yǎng)。9、草莓屬于_科植物，用微尖培養(yǎng)草莓主要使其，從而提高產(chǎn)量和質(zhì)量。二、判斷題（每題2分,共10分，）（）1、對(duì)外植體材料用酒精消毒目的只是滅菌。（）2、菊花屬于球根花卉，而蘭花屬于宿根花卉。（）3、誘導(dǎo)愈傷組織重新脫分化出各種不同的器官和組織，這個(gè)過(guò)程稱

30、為脫分化。（）4、MS0培養(yǎng)基是沒(méi)有激素的培養(yǎng)基。（）5、受精卵和體細(xì)胞都具有全能性。 三、名詞解釋?zhuān)款}2分，共10分）1、細(xì)胞全能性2、滅菌3、玻璃化現(xiàn)象4、指示植物5、馴化四、選擇題（每題1分,共10分）（）1、下列哪種不是原生質(zhì)體分離所用的酶A纖維素酶B半纖維素酶C果膠酶D淀粉酶（）2、下列哪種不是組織培養(yǎng)常用的維生素A：維生素B2、B：維生素B1、C：維生素B6、 D：維生素C（）3、在花藥培養(yǎng)中下列哪種不是花粉的發(fā)育過(guò)程。A營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞發(fā)育途徑B生殖細(xì)胞發(fā)育途徑C胚狀體發(fā)育途徑D花粉均等分裂途徑（）4、下列哪種激素不屬于生長(zhǎng)素類(lèi)IAAIBA6-BANAA（）5、在未成熟胚胎培養(yǎng)中下列哪

31、種不常見(jiàn)的生長(zhǎng)方式A“胚性”生長(zhǎng)B早熟萌發(fā)C先胚根后胚芽D先形成愈傷組織再分化（）6、適于花粉培養(yǎng)的最佳時(shí)期是A雙核期B單核期C多核期D無(wú)核期（）7、下面哪種是MS培養(yǎng)基大量元素所用藥劑A硫酸鎂B硫酸亞鐵C硫酸鋅D硫酸銅（）8、下列哪種不是在MS培養(yǎng)基起作用的有機(jī)物A氨基酸B肌醇C維生素D瓊脂（）9、常見(jiàn)的組織培養(yǎng)程序包括取材接種滅菌做培養(yǎng)基ABCD（）10、和組織培養(yǎng)相似的代名詞是A克隆B有性生殖C孤雌生殖D單性生殖五、簡(jiǎn)答題（共50分）1、6-BA在組織培養(yǎng)中有何作用？(6分)2、 述活性炭在組織培養(yǎng)中有哪些作用及使用注意事項(xiàng)？(6分)3、什么叫花粉看護(hù)培養(yǎng)法？原理是什么？(6分)4、 尖

32、培養(yǎng)脫毒的原理是什么？接種時(shí)應(yīng)注意什么？(6分)5、 移栽馴化香石竹時(shí)怎樣選用基質(zhì)和搭配基質(zhì)？(6分)6、接種室有哪些技術(shù)要求？(6分)7、用濕熱法進(jìn)行高壓滅菌的大致步驟有哪些？(7分)8、怎樣用指示植物法鑒定草莓是否含有病毒？(7分)植物組織培養(yǎng)試題 (四) 一、填空題(每空1分,共20分)1、在分離原生質(zhì)體酶溶液內(nèi)，需加入一定_穩(wěn)定劑，其作用是_。2、花藥是植物的_器官，用其進(jìn)行組織培養(yǎng)可培養(yǎng)出_植物 。3、選用馴化基質(zhì)主要考慮_性和_性問(wèn)題4、組織培養(yǎng)的特點(diǎn)包括_、_和_三個(gè)方面。5、從單個(gè)細(xì)胞或外植體形成的愈傷組織 ，大致要經(jīng)歷 _、_和_期。6、非洲菊的葉片_故沒(méi)有直立的莖，在組織培

33、養(yǎng)的繼代過(guò)程中用_法繁殖。7、脫毒培養(yǎng)的常用兩種方法是_和_。8、6-BA /NAA 的高低決定著外植體的發(fā)育方向，其比值高時(shí)_，比值低時(shí)_。9、草莓屬于_科植物，組織培養(yǎng)草莓主要使其_。10、矮牽牛屬于_科植物，組織培養(yǎng)中常用_或_作外植體。二、判斷題（每題2分,共10分）（）1、非洲菊常用莖尖作為外植體接種（）2、濕熱滅菌時(shí)滅菌時(shí)間與培養(yǎng)容器的關(guān)系是：容器越大滅菌時(shí)間應(yīng)越長(zhǎng)。（）3、愈傷組織就是由傷口處產(chǎn)生的愈合組織（）4、MS0培養(yǎng)基是沒(méi)有激素的培養(yǎng)基。（）5、升汞靠氯氣滅菌，次氯酸鈣靠汞離子來(lái)滅菌。三、名詞解釋?zhuān)款}2分,共10分）1、細(xì)胞全能性2、滅菌3、White培養(yǎng)基4、指示植物

34、5、馴化四、選擇題（每題1分共10分）（）1、下列哪種激素示屬于生長(zhǎng)素類(lèi)IAAIBA6-BANAA（）2、通過(guò)酶解法提取的原生質(zhì)體，影響其活性的主要因素有A：pH值、B：溫度、C：所用酶的濃度、 D：滲透穩(wěn)定劑（）3、下面哪種是MS培養(yǎng)基大量元素所用藥劑A硫酸鎂B硫酸亞鐵C硫酸鋅D硫酸銅（）4、在剝離微莖尖或幼胚時(shí)，必須應(yīng)用的儀器是 A低倍顯微鏡B高倍顯微鏡C解剖鏡D放大鏡（）5、常見(jiàn)的組織培養(yǎng)程序包括取材接種滅菌做培養(yǎng)基ABCD（）6、適于花粉培養(yǎng)的最佳時(shí)期是A雙核期B單核期C多核期D無(wú)核期（）7、在花藥培養(yǎng)中下列哪種不是花粉的發(fā)育過(guò)程。A營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞發(fā)育途徑B生殖細(xì)胞發(fā)育途徑C胚狀體發(fā)育途徑D

35、花粉均等分裂途徑（）8、下列哪種在MS培養(yǎng)基不起促進(jìn)生長(zhǎng)作用A氨基酸B肌醇C維生素D瓊脂（）9、 和組織培養(yǎng)相似的代名詞是A克隆B有性生殖C孤雌生殖D單性生殖在未成熟胚胎培養(yǎng)中（）10、下列哪種是不常見(jiàn)的組織培養(yǎng)生長(zhǎng)方式A胚狀生長(zhǎng)B早熟萌發(fā)C先胚根后胚芽D先形成愈傷組織再分化五、簡(jiǎn)答題（共50分）1、簡(jiǎn)述活性炭在組織培養(yǎng)中有哪些作用及使用注意事項(xiàng)？(6分)2、什么是玻璃化現(xiàn)象？解決玻璃化現(xiàn)象的方法主要有哪幾點(diǎn)？(6分)3、NAA有什么特點(diǎn)？在組織培養(yǎng)中有何作用？(6分)4、 什么叫花粉看護(hù)培養(yǎng)法？原理是什么？(6分)5、 莖尖培養(yǎng)脫毒的原理是什么？接種時(shí)應(yīng)注意什么？(6分)6、 接種室有哪些技

36、術(shù)要求？(6分)7、 愈傷組織形態(tài)怎樣，什么條件可以誘導(dǎo)其形成？(7分)8、 簡(jiǎn)述無(wú)菌接種的大致過(guò)程？(7分)植物組織培養(yǎng)試題 (五)一、填空題(每空1分,共20分，)1、配制培養(yǎng)時(shí)，一般先配制母液，其目的在于_和_。2、壓力單位中1kg/cm2相當(dāng)于_MPa，在0.1 MPa時(shí)鍋內(nèi)溫度為_(kāi)。3、微量元素母液可配成_倍，配制培養(yǎng)基時(shí)移取_毫升。4、培養(yǎng)基是_濃度較高，為較穩(wěn)定_的溶液。5、高壓滅菌可以對(duì)_及_、_、_等進(jìn)行滅菌。6、凡是_的物體，_的物體，其表面都有菌。7、細(xì)胞的全能性是植物的每個(gè)細(xì)胞都具有該植物的全部_和_發(fā)育成完整植株的能力。8、愈傷組織除了可植株再生培養(yǎng)外。可進(jìn)行懸浮培養(yǎng)

37、而_。9、危害植物的病毒主要是靠_的作物10、分生區(qū)域內(nèi)無(wú)維管束，病毒只能通過(guò)_傳遞。11、花序軸應(yīng)選取具該品種典型特征的、其上生長(zhǎng)的飽滿充實(shí)的_。二、選擇題（每題1分,共10分）1、微量元素母液的配制濃度（） 10倍100倍1mg/ml10mg/ml2、接種工具滅菌常采用（）灼燒高壓過(guò)濾熏蒸3、下列哪種不是組織培養(yǎng)常用的維生素A：維生素B2B：維生素B1C：維生素B6、 D：維生素C4、下面哪種是MS培養(yǎng)基大量元素所用藥劑A硫酸鎂B硫酸亞鐵C硫酸鋅D硫酸銅5、下列哪種不是使甲醛揮發(fā)的方式A 加高錳酸鉀 B 加熱 C 加水6、下面哪種基質(zhì)具有一定的肥力A 珍珠巖 B蛭石 C 草炭土 D河砂7、

38、愈傷組織是一種組織A淡黃色且能分裂，B綠色不能分裂，C有一些變形的組織D是一種成熟組織8、下面哪一個(gè)是分化期的明顯表現(xiàn)?A細(xì)胞增加B細(xì)胞增大 C細(xì)胞變形 D細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上變化9、下列那種不是無(wú)性繁殖的器官A塊莖 B枝條 C種子 D塊根10、下列那種方法脫毒效果較好A微莖尖 B熱處理 C愈傷組織 D化學(xué)藥劑11、菊花的果實(shí)是下列哪一種A 漿果 B瘦果 C 核果 D蒴果12、下面哪些不是菊花植物所含有的花A舌狀花；B漏斗狀花；C管狀花；D輪狀花三、名詞解釋?zhuān)款}2分，共10分）1、母液2、初代培養(yǎng)3、松散型愈傷組織4、抗血清鑒定5、直接分化四、判斷題（每題2分,共10分，）1、MS0培養(yǎng)基是沒(méi)有激素的培養(yǎng)基。2、瓊脂只起固化作用，本身并不提供任何營(yíng)養(yǎng)。3、熏蒸滅菌適于空氣和物體表面的滅菌。4、生根培養(yǎng)可采用1/2或者M(jìn)S培養(yǎng)基。5、500600目金鋼砂起傳播病毒的作用。6、隔蟲(chóng)網(wǎng)的網(wǎng)眼為0.