大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)計(jì)劃項(xiàng)目申請書

1、附件貴州大學(xué)“大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃” 項(xiàng)目申請書（2012 年）項(xiàng)目名稱：提高古尼蟲草多糖物質(zhì)的研究項(xiàng) 目 類別：、口新訓(xùn)練、口創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練、口創(chuàng)業(yè)實(shí)踐項(xiàng)目負(fù)責(zé)人：專業(yè)名稱：生物科學(xué)類指導(dǎo)教師：_申報(bào)單位：生命科學(xué)學(xué)院申報(bào)日期：2012年3月30日貴州大學(xué)教務(wù)處填寫要求1 填寫申請書前，請認(rèn)真查閱關(guān)于做好2010 年校級、國家級大學(xué)生創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)計(jì)劃項(xiàng)目組織申報(bào)工作的通知的要求。2 申請書按照要求，逐項(xiàng)認(rèn)真填寫，填寫內(nèi)容必須實(shí)事求是，表達(dá)明確嚴(yán)謹(jǐn)?？杖表?xiàng)要填 “無” 。3 格式要求：申報(bào)書中各項(xiàng)內(nèi)容以 Word 文檔格式填寫；表格空間不足的，可以擴(kuò)展或另附紙張；均用 A4 紙雙 面打印，于左側(cè)裝訂

2、成冊。4 凡選擇性欄目，請?jiān)谙鄳?yīng)的等之上畫“ ” 。5 聯(lián)系單位：教務(wù)處實(shí)踐教學(xué)管理中心6 聯(lián)系電話：、基本情況項(xiàng)目名稱提高古尼蟲草多糖物質(zhì)的研究項(xiàng)目類型建新訓(xùn)練項(xiàng)目創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練項(xiàng)目創(chuàng)業(yè)實(shí)踐項(xiàng)目項(xiàng)目來源自立項(xiàng)目師科研課題的子項(xiàng)目其它項(xiàng)目類型辦驗(yàn)研究軟件制作 以實(shí)驗(yàn)為手段的其他類型經(jīng)費(fèi)來源國學(xué)校資助學(xué)院資助B師課題資助企業(yè)資助經(jīng)費(fèi)額度2500 元項(xiàng)目實(shí)施時 問起始時間：2012年04月完成時間：2013年04月團(tuán) 隊(duì)角色姓名年級學(xué)院專業(yè)聯(lián)系電話E-mail主持 人成員姓名承擔(dān) 課程微生物遺傳學(xué)、昆蟲病原微生物資 源及其利用、昆蟲病理學(xué)及病原微 生物利用方向?qū)ｎ}討論等主要研究力 向蛹蟲草菌種選育 及蟲

3、草素中試生產(chǎn)工藝研兗主要成果科研項(xiàng)目、教改項(xiàng)目、發(fā)表文章、指導(dǎo)大學(xué)生創(chuàng)新、競賽等立項(xiàng)或獎勵（填寫項(xiàng)目不超10項(xiàng)）（3） ZL4.8紅曲協(xié)同發(fā)酵提高蛹蟲草子實(shí)體和蟲草菌素的產(chǎn)量（4） 9.X提高蛹蟲草固體培養(yǎng)基中蟲草菌素含量的方法（公開號：CNA）（5） 0.5 一種提高蛹蟲草液體發(fā)酵蟲草菌素產(chǎn)量的方法（公開號：CN）（6） 4.9 刺梨涂膜保鮮劑的制備與低溫保鮮配套工藝（公開號：CNA）（7） 9.4 利用酒糟生產(chǎn)畜禽健康養(yǎng)殖綠色飼料添加劑的方法 （公開號：CN）（8） 2.6高純度蟲草菌素分離提純的方法 （公開號：CN ）1貴州省科技進(jìn)步三等獎（1項(xiàng)）6.2005年貴州省優(yōu)秀青年科技人才7.

4、2007年貴州省省管專家二、立論依據(jù)2-1項(xiàng)目研究內(nèi)容簡介多糖廣泛存在于動物、植物和微生物細(xì)胞壁中，它毒性小、安全性高、功能廣泛，具 有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、降血糖、降血脂、抗病毒、抗炎癥、抗氧化、抗突變、抗菌、抗衰老等生物活性。古尼蟲草Cordyceps gunnii (Berk.) Berk.是蟲草菌屬中一種大型蟲草，主產(chǎn)于澳大 利亞、新西蘭和我國的貴州、湖南和安徽等省份。具有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力、抗癌、增強(qiáng)記憶等多種藥理作用(何勁等，2009)。古尼蟲草多糖是古尼蟲草的主要活性物質(zhì),具有抗癌、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力、抗氧化、抗衰老、增強(qiáng)記憶等生理活性。本項(xiàng)目，擬通過培養(yǎng)條件的優(yōu)化，對古尼蟲草中

5、多糖的含量進(jìn)行研究，找出提高古尼蟲草 中多糖的含量的最優(yōu)組合條件，為古尼蟲草的研究開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。2-2項(xiàng)目實(shí)施的目的、意義(社會調(diào)查情況、文獻(xiàn)查閱情況、現(xiàn)狀分析及獨(dú)特認(rèn)識)多糖廣泛存在于動物、植物和微生物細(xì)胞壁中，是由醛基和酮基通過糖普鍵連接而成的高分子聚合物，也是構(gòu)成生命的四大基本物質(zhì)之一。它毒性小、安全性高、功能廣泛，具有非常重要和特殊的生理活性。某些多糖，如纖維素和幾丁質(zhì)，可構(gòu)成植物或動物骨架；淀粉和糖原等多糖可作為生物體儲存能量的物質(zhì)；有些多糖通過共價鍵與蛋白質(zhì)構(gòu)成蛋白聚糖發(fā)揮多種生物學(xué)功能，如作為機(jī)體潤滑劑、識別外來組織的細(xì)胞、血型物質(zhì)的基本成分等。自從20世紀(jì)5 0年代發(fā)現(xiàn)

6、真菌多糖具有抗癌作用以來，陸續(xù)發(fā)現(xiàn)多糖類化合物具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤 、降血糖、降血脂、抗病毒、抗炎癥、抗氧化、抗突變、抗菌、抗衰老 等生物活性。古尼蟲草Cordyceps gunnii (Berk.) Berk.是蟲草菌屬中一種大型蟲草，主產(chǎn)于澳 大利亞、新西蘭和我國的貴州、湖南和安徽等省份。梁宗琦(1983, 1985)教授首次分離、確證其無性型為古尼擬青霉 Paecilomyces gunnii Z.Q.Liang 。古尼蟲草具有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力、抗癌、增強(qiáng)記憶等多種藥理作用(何勁等，2009)。古尼蟲草古尼蟲草多糖是古尼蟲草的主要活性物質(zhì)，具有抗癌、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力、抗氧化、抗

7、衰老、增強(qiáng)記憶等生理活性。具體的分述如下。抗癌。貴州大學(xué)梅德強(qiáng)和文庭池等(2006)證實(shí)，古尼擬青霉菌絲體多糖MPPG可明顯降低腫瘤細(xì)胞的免疫抑制作用，間接提高免疫細(xì)胞活性，起到抗腫瘤作用。李義勇等(2009)發(fā)現(xiàn)古尼蟲草在12株供試蟲草抗腫瘤活性中表現(xiàn)突出的2株蟲草之一(包括古尼蟲草、戴氏蟲草和高雄山蟲草等)。李淑芳等用小鼠證實(shí)古尼擬青霉，對淋巴內(nèi)瘤180( S180)、子宮頸癌14 (U14)及肝癌實(shí)體型均有明顯抑制作用，腫瘤抑制率均大于30%;體外抗癌實(shí)驗(yàn)結(jié)果亦表明，其能顯著降低腫瘤活細(xì)胞率。古尼擬青霉水-醇提取液能使小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬百分率、吞噬指數(shù)顯著增高，能明顯增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞

8、噬能力；能使處于免疫抑 制狀態(tài)小鼠的體液免疫功能得以恢復(fù)正常。古尼擬青霉菌絲體提取液有誘生及促誘生干擾素的作用, 發(fā)揮此作用的主要有效成分是多糖；其胞外多糖和解聚后的胞內(nèi)多糖具有免疫抑制的生物活性。Zhu,ZY （2009）研究表明古尼蟲草水溶性多糖有較好的抗癌作用。調(diào)節(jié)免疫力。肖建輝等（2005）也證實(shí)古尼蟲草多糖解聚后能明顯提高免疫活性古尼擬青霉能顯著增強(qiáng)機(jī)體的非特異性和特異性免疫功能，對某些過敏反應(yīng)又有免疫抑制作用，雙向調(diào)節(jié)免疫功能，調(diào)節(jié)的藥化成分可能與多糖組分有關(guān)（何勁等，2009）。抗氧化。Zhenyuan ZHU （2011）分離出一種水溶性多糖 CPS50-I,用D-半乳糖造模的

9、老鼠模型實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明其具有顯著的抗氧化活性?？顾ダ?。劉安軍（2008）研究表明古尼蟲草多糖可提高小鼠腦組織和血清中SOD （P<0.01 ）和GSH-Px （ P <0.01 ）活力，明顯抑制小鼠腦組織和血清中MDA （P<0.01 ）的形成。古尼蟲草多糖有很好的抗衰老作用.增強(qiáng)記憶。李淑芳（1991）、張永明（2007）等先后采用動物模型（記憶鞏固障礙與記憶再現(xiàn)障礙模型，進(jìn)行跳臺、避暗和迷宮試驗(yàn)），小鼠皮下給藥或灌胃方式，證明古尼擬青霉水溶性提取液、多糖和黃酮均有改善和提高小鼠記憶的功能。其原因可能是古尼多糖 和黃酮能夠減緩小鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡，改善腦供血量，提高大腦蛋白

10、質(zhì)與超氧化歧化酶 含量，降低腦中丙二醛含量等作用有關(guān)。目前，對古尼蟲草的培養(yǎng)研究很少，僅幾篇關(guān)于古尼蟲草菌絲體的培養(yǎng)研究，還未見對古尼蟲草主要活性成分古尼蟲草多糖的培養(yǎng)研究。本項(xiàng)目，擬通過培養(yǎng)條件的優(yōu)化，對 古尼蟲草中多糖的含量進(jìn)行研究，找出提高古尼蟲草中多糖的含量的最優(yōu)組合條件，為古 尼蟲草的研究開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù) 。參考文獻(xiàn)：1施松善，王順春.多糖生物活性研究進(jìn)展J.生命科學(xué)，2011,23(7):662-670.2肖建輝，蟲草發(fā)酵及其代謝產(chǎn)物的分離與生物活性研究D.上海:華東理工大學(xué),2010.3梁宗琦.中國真菌志第三十二卷蟲草屬M(fèi).北京:科學(xué)出版社,2007.4 Zhenyuan Z

11、HU, Chuanling SI, Yueru ZHONG, Changmei ZHU, Jiaping Zhou.The purification and antioxidative activities in D-galactose-induced aging mice of a water-soluble polysaccharide from Cordyceps gunnii (berk.) Berk. Mycelium. Journal of Food Biochemistry. 2011, 35 :303-322.5 Zhu, ZY; Si, CL; Zhang, YM., Pur

12、ification and antitumor activities of a water-soluble polysaccharide isolated from Cordyceps gunnii (berk.) Berk. mycelium, PLANTA MEDICA 2009, 75 (9) , 942-943,.6梅德強(qiáng)，文庭池，梁宗琦.古尼擬青霉菌絲體多糖(MPPG )對腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生免疫抑制因子的 影響J.貴州大學(xué)學(xué)報(bào),2006,23( 2): 19州195.7何勁，雷幫星，文庭池，等.古尼擬青霉的毒理及藥用價值研究概況J. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué),2009,37(1):87 89.8肖建輝

13、梁宗琦，胡錫階，等.古尼蟲草多糖及其解聚物的免疫活性J.免疫學(xué)雜志，2005, 21(1) :51-53,58.9李義勇，章衛(wèi)民，張亞雄.蟲草的抗菌抗腫瘤活性研究進(jìn)展J.微生物學(xué)雜志,2009, 29(6):65-69.10劉安軍，祝長美，朱振元，等.古尼蟲草多糖對衰老模型小鼠的影響J.現(xiàn)代食品科技.2008,24(3):201 -203.11李淑芳，鮑淑娟，韓君勇，等.古尼擬青霉藥理作用研究in.古尼擬青霉對記億的促進(jìn)作 用J.貴陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào).1991,16 (1) : 45-46 .12張永明.古尼蟲草的益智作用及其活性物質(zhì)的相關(guān)性研究D.貴陽：貴州大學(xué)，2007.13張倩,張永明，陸衛(wèi)群

14、，等.古尼蟲草多糖改善小鼠學(xué)習(xí)記憶作用的研究J.營養(yǎng)學(xué)報(bào)， 2007,29(4):393-395,400三、項(xiàng)目研究基礎(chǔ)與保障3-1項(xiàng)目研究與實(shí)施基礎(chǔ)貴州大學(xué)生化工程中心是省級重點(diǎn)生化中試基地，2006年6月列入國家教育部“西南特色藥用生物資源開發(fā)利用教育部工程研究中心”建設(shè)項(xiàng)目。擁有國內(nèi)較先進(jìn)的研究開發(fā)實(shí)驗(yàn)室：生物活性成分分離及檢測技術(shù)研究室，配有較完善先進(jìn)的研 究開發(fā)及檢測儀器設(shè)備：HPLC分析型和制備型、紫外可見分光光度計(jì)、真空旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)器、專用分離柱、超濾裝置、微波提取器等20余臺件。正在籌建細(xì)胞培養(yǎng)室、動物實(shí)驗(yàn)室等，有二氧化碳培養(yǎng)箱、小鼠自主活動測試儀等，能完成細(xì)胞、動物、組 織器官

15、等不同水平的藥理實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)室長期從事蟲草的分類、人工培養(yǎng)、活性物質(zhì) 檢測、藥理等方面的研究，具備實(shí)施本項(xiàng)目所需要的實(shí)驗(yàn)條件。3-2學(xué)院、指導(dǎo)教師可提供的條件保障指導(dǎo)老師所在的實(shí)驗(yàn)室，具有 HPLC分析型和制備型、紫外可見分光光度計(jì)、真 空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器、專用分離柱、超濾裝置、微波提取器等20余臺件。有二氧化碳培養(yǎng)箱、小鼠自主活動測試儀等，能完成細(xì)胞、動物、組織器官等不同水平的藥理實(shí)驗(yàn)。 實(shí)驗(yàn)室長期從事蟲草的分類、人工培養(yǎng)、活性物質(zhì)檢測、藥理等方面的研究，具備 實(shí)施本項(xiàng)目所需要的實(shí)驗(yàn)條件。指導(dǎo)教師所在的研究團(tuán)隊(duì)主要是從事蟲草的研究工 作，完全掌握了本研究所需要的各種實(shí)驗(yàn)技術(shù)，因此也具備了開展本研究所

16、需要的 工作環(huán)境，所以可以指導(dǎo)好學(xué)生完成本項(xiàng)目，取得項(xiàng)目預(yù)期成果。四、項(xiàng)目研究實(shí)施方案4-1項(xiàng)目研究的目標(biāo)、內(nèi)容和擬解決的關(guān)鍵問題一、目標(biāo)提高古尼蟲草中多糖的含量，找出培養(yǎng)其最優(yōu)培養(yǎng)條件。二、內(nèi)容1 .文獻(xiàn)資料的查閱，準(zhǔn)備。2 .古尼蟲草菌株的搜集。菌株是整個實(shí)驗(yàn)的前體基礎(chǔ)，有好的菌株會給后續(xù)實(shí)驗(yàn)打 下良好的基礎(chǔ)。3 .古尼蟲草的培養(yǎng)。采用固體或液體發(fā)酵培養(yǎng)。用單因素法依次研究不同氮源、碳源，無機(jī)鹽、生長因子等營養(yǎng)因子對古尼蟲草中 多糖的含量的影響，找出最適氮源、不同碳源，無機(jī)鹽、生長因子。再通過正交實(shí)驗(yàn)優(yōu) 化生產(chǎn)古尼蟲草中多糖各營養(yǎng)因子的最佳配比。4 .多糖的檢測。(1)葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立

17、。(2)多糖這制備。古尼蟲草菌絲體低溫烘干，60目粉碎，3熱水提取，減壓濃縮,乙醇沉淀，沖洗，得到古尼蟲草多糖。(3)含量測定：用苯酚-硫酸法和慈酮-硫酸法檢測三、擬解決的關(guān)鍵問題1 .有合適的菌株，這是整個實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)。2 .接種必須注意無菌操作。3 .多糖的檢測。4-2項(xiàng)目研究計(jì)劃、技術(shù)線路、進(jìn)展安排等實(shí)施方案（文獻(xiàn)查閱、社會調(diào)查、 實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)、組織設(shè)備和材料、實(shí)施實(shí)驗(yàn)、分析處理數(shù)據(jù)、研制開發(fā)、撰 寫論文或研究報(bào)告、結(jié)題和答辯、項(xiàng)目鑒定、成果推廣或論文發(fā)表、其他等, 按所需執(zhí)行環(huán)節(jié)填寫）本項(xiàng)目計(jì)劃1年完成。具體計(jì)劃及預(yù)期結(jié)果如下：2012年1月至2012年2月：1 .項(xiàng)目所需文獻(xiàn)資料、儀器設(shè)備、藥品試劑等相關(guān)研究工作的前期準(zhǔn)備。2 .菌種搜集。2012年3月至2012年9月：古尼蟲草多糖的含量提高優(yōu)化培養(yǎng)，找出其的最佳培養(yǎng)條件。2012年10月至12月：撰寫科學(xué)論文，在國內(nèi)核心期刊發(fā)表論文1篇。五、預(yù)期成果成果研究形式：論文、設(shè)計(jì)、產(chǎn)品研制、軟件開發(fā)、專利、研究報(bào)告等，至少選其中一項(xiàng)填寫在國內(nèi)核心期刊發(fā)表論文 1篇，畢業(yè)論文23篇。六、經(jīng)費(fèi)預(yù)算支出科目金額 （元）預(yù)算根據(jù)及理由資料費(fèi)200資料復(fù)印、打印試劑費(fèi)1300