美國CLIA88臨床檢驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)量控制文件

1、美國CLIA88臨床檢驗(yàn)各專業(yè)室內(nèi)質(zhì)量限制文件(一)美國CLIA88質(zhì)量限制要求美國臨床實(shí)驗(yàn)室改良修正法案最終規(guī)那么(CLIAfinalrule)于2022年1月24日通過,2022年4月24日實(shí)施.其中K-非豁免試驗(yàn)的質(zhì)量體系,分析系統(tǒng)中493.1256標(biāo)準(zhǔn)：限制程序(controlprocedures)對(duì)各專業(yè)質(zhì)量限制提出具體要求.1、限制程序根據(jù)美國CLIA88最終規(guī)那么Sec.493.1256標(biāo)準(zhǔn)：限制程序(a)對(duì)于每一檢測系統(tǒng),實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)制定限制程序,監(jiān)測整個(gè)分析過程的準(zhǔn)確度和精密度.(b)實(shí)驗(yàn)室必須建立檢測限制物的數(shù)量、類型和頻率,如果適合,實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按Sec.493.1256(b)

2、(3)規(guī)定驗(yàn)證或建立性能標(biāo)準(zhǔn).(c)限制程序必須(1)立即檢測出由于檢測系統(tǒng)故障、不利的環(huán)境條件及操作者性能而產(chǎn)生的誤差.(2)長期監(jiān)測由于檢測系統(tǒng)性能和環(huán)境條件改變和操作者性能變化而可能影響到的準(zhǔn)確度和精密度性能.(d)除了CMS比準(zhǔn)的程序,如國家操作手冊附錄C中規(guī)定(CMSPub.7)的外,提供了等效質(zhì)量檢測,實(shí)驗(yàn)室必須(1)執(zhí)行本節(jié)規(guī)定的質(zhì)量限制程序,除非在493.1261到493.1278局部其他專業(yè)和亞專業(yè)有其他的規(guī)定.(2)對(duì)于每一檢測系統(tǒng),當(dāng)他們滿足或超出本節(jié)(d)(3)局部要求時(shí),執(zhí)行的質(zhì)量限制程序使用廠家規(guī)定或?qū)嶒?yàn)室建立的個(gè)數(shù)和頻率.(3)每天檢測患者標(biāo)本時(shí)至少每天檢測一次限

3、制品,或執(zhí)行如下的步驟(i)每一定量檢測程序,包括兩個(gè)不同濃度水平的限制品；(ii)對(duì)每一定性的檢測程序,包括一個(gè)陰性和一個(gè)陽性限制品；(iii)對(duì)于產(chǎn)生分級(jí)或滴度結(jié)果的檢測程序,分別包括陰性限制品和具有分級(jí)或滴度反響性的限制品；(iV)對(duì)于具有提取階段的每一檢測系統(tǒng),包括兩個(gè)限制品,其中一種能夠檢出提取階段的誤差；(v)對(duì)于每一種分子擴(kuò)增程序,包括兩個(gè)限制品,如果反響抑制性是假陰性結(jié)果的顯著性來源,一個(gè)限制品能夠檢出抑制性作用.(4)對(duì)于薄層層析(i)如果適當(dāng)時(shí),在每一板或卡上點(diǎn)上含有所有的物質(zhì)或藥物組的校準(zhǔn)品,其經(jīng)薄層層析識(shí)別,由實(shí)驗(yàn)室報(bào)告；(11)適當(dāng)時(shí),在每板或卡上包括至少一個(gè)限制品,

4、應(yīng)與患者標(biāo)本檢測步驟一樣處理,包括提取過程.(5)對(duì)于每個(gè)電泳程序,和患者標(biāo)本一樣處理,至少有一個(gè)限制品,其含有確定或檢測的物質(zhì).(6)當(dāng)引入完全改變的試劑,執(zhí)行了主要的預(yù)防性維護(hù)； 或更換影響試驗(yàn)性能的任何關(guān)鍵部件時(shí),在恢復(fù)患者檢測之前,應(yīng)根據(jù)本節(jié)的規(guī)定進(jìn)行限制品的檢測.(7)在整個(gè)檢測時(shí)間內(nèi),所有進(jìn)行試驗(yàn)的檢驗(yàn)人員均使用相同的限制品進(jìn)行檢測.(8)應(yīng)與檢測患者標(biāo)本一樣的方式來檢測限制品.(9)當(dāng)校準(zhǔn)品作為限制品時(shí),使用與用于建立切值或校準(zhǔn)檢測系統(tǒng)不同批號(hào)的校準(zhǔn)品.(10)建立或驗(yàn)證所有限制品的可接受的標(biāo)準(zhǔn).(i)當(dāng)使用的限制品提供定量的結(jié)果時(shí),必須確定每一批號(hào)限制品的統(tǒng)計(jì)參數(shù)(如：均值和標(biāo)

5、準(zhǔn)差).(ii)實(shí)驗(yàn)室可使用商品化定值的限制品,其定值是與實(shí)驗(yàn)室所使方法和儀器有關(guān)；實(shí)驗(yàn)室需要對(duì)其值進(jìn)行驗(yàn)證.(iii)通過長時(shí)期同時(shí)檢測已有統(tǒng)計(jì)學(xué)參數(shù)的限制品,實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立起非定值限制品的統(tǒng)計(jì)學(xué)參數(shù).(e)對(duì)于試劑、培養(yǎng)基和供給品的檢查,實(shí)驗(yàn)室必須做如下的工作：(1)當(dāng)制備或翻開時(shí),假設(shè)適宜,檢查每批自制的、或商品的每個(gè)批號(hào)的試劑、培養(yǎng)基平板、染色液、抗血清和鑒定系統(tǒng)(使用兩個(gè)或更多物質(zhì)、或兩個(gè)或更多以上的試劑、或各種組合的系統(tǒng))的陽性和陰性反響性,以及反響性等級(jí).(2)每個(gè)工作日(除了本亞章的規(guī)定外),檢查染色物質(zhì)的反響性以保證出現(xiàn)預(yù)期的染色特征.如適當(dāng),應(yīng)包括陽性和陰性反響性的限制品.(

6、3)每次使用時(shí),檢查熒光和免疫組織化學(xué)染色劑對(duì)反響陰性和陽性時(shí)的反響性.(4)在之前,或與最初同時(shí)使用(i)如果檢測要求無菌,應(yīng)對(duì)每一批號(hào)培養(yǎng)基進(jìn)行無菌試驗(yàn)；(ii)檢測每批培養(yǎng)基對(duì)各菌種的支持生長的水平,必要時(shí),可選擇或抑制特定的生物,或產(chǎn)生生化反響.(iii)當(dāng)向廠家報(bào)告培養(yǎng)基任何的變質(zhì)時(shí),文件記錄培養(yǎng)基的物理特征.(5)根據(jù)制造商說明書,使用試劑、培養(yǎng)基和供給品,并對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果負(fù)責(zé).(f)在報(bào)告患者試驗(yàn)結(jié)果之前,限制品的結(jié)果必須滿足實(shí)驗(yàn)室的,以及必要時(shí),廠家檢測系統(tǒng)可接受準(zhǔn)那么的要求.(g)實(shí)驗(yàn)室必須記錄執(zhí)行的所有限制程序.(h)如果無法獲得限制品,實(shí)驗(yàn)室必須有替代機(jī)制檢出即刻的誤差及長期

7、監(jiān)測檢測系統(tǒng)性能.必須文件記錄替代限制程序的性能.2、Sec.493.1261標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌學(xué)(a)實(shí)驗(yàn)室必須使用限制生物體來檢查以下的陽性和陰性的反響性：(1)每日檢查所使用的3-內(nèi)酰胺酶.(2)每周要檢查所做的革蘭染色.(3)當(dāng)制備或翻開每一批(實(shí)驗(yàn)室自制)、批號(hào)(商品制備)和抗血清的運(yùn)輸時(shí),需要每6個(gè)月檢查一次.(b)對(duì)于抗生素敏感試驗(yàn),實(shí)驗(yàn)室必須在之前、同時(shí)、最初使用時(shí),使用批準(zhǔn)的限制生物體,來檢查每批培養(yǎng)基、抗生素.(1)對(duì)于每天進(jìn)行的試驗(yàn),實(shí)驗(yàn)室必須使用適當(dāng)?shù)南拗频纳矬w來檢查程序.(2)在報(bào)告患者結(jié)果之前,實(shí)驗(yàn)室限制生物體的區(qū)帶大小或最低抑制濃度必須在規(guī)定的界限之內(nèi).(c)實(shí)驗(yàn)室必須

8、文件記錄如本節(jié)規(guī)定執(zhí)行的所有限制程序.3、Sec.493.1262標(biāo)準(zhǔn)：分枝桿菌學(xué)(a)每日檢查,實(shí)驗(yàn)室必須用至少一種快酸生物體,其可產(chǎn)生陽性反響和一種快酸生物體產(chǎn)生陰性反響來檢查用于分枝桿菌鑒定的所有試劑或檢測程序.(b)對(duì)于抗分枝桿菌敏感試驗(yàn),實(shí)驗(yàn)室必須在之前、或同時(shí)在最初使用,使用批準(zhǔn)的限制生物體,來檢查每批培養(yǎng)基、抗分支桿菌劑.(1)實(shí)驗(yàn)室必須建立可接受限制結(jié)果的界限.(2)每周執(zhí)行的試驗(yàn),實(shí)驗(yàn)室必須使用適當(dāng)?shù)馁|(zhì)控生物體來檢查程序.(3)在報(bào)告患者結(jié)果之前,限制生物體的結(jié)果必須在建立的界限之內(nèi).(c)實(shí)驗(yàn)室必須文件記錄如本節(jié)規(guī)定執(zhí)行的所有限制程序.4、Sec.493.1263標(biāo)準(zhǔn)：真菌

9、學(xué)(a)當(dāng)制備或翻開時(shí),用限制生物體檢查每批自制的、或商品的每個(gè)批號(hào)的試劑和乳(酸)酚棉藍(lán)的運(yùn)輸?shù)姆错懶?(b)對(duì)于真菌敏感試驗(yàn),實(shí)驗(yàn)室必須在之前或同時(shí)、 最初使用,使用適當(dāng)?shù)南拗粕矬w,來檢查每一批號(hào)的培養(yǎng)基、抗真菌試劑.(1)實(shí)驗(yàn)室必須建立可接受質(zhì)控結(jié)果的界限.(2)每天執(zhí)行的試驗(yàn),實(shí)驗(yàn)室必須使用適當(dāng)?shù)馁|(zhì)控生物體來檢查程序.(3)在報(bào)告患者結(jié)果之前,質(zhì)控生物體的結(jié)果必須在建立的界限之內(nèi).(c)實(shí)驗(yàn)室必須文件記錄如本節(jié)規(guī)定執(zhí)行的所有限制程序.5、Sec.493.1264標(biāo)準(zhǔn)：寄生蟲學(xué)(a)實(shí)驗(yàn)室必須具有可獲得的參考標(biāo)本的載物片或照片,如果可獲得寄生蟲鑒定的粗的標(biāo)本,可使用這些作為實(shí)驗(yàn)室與診斷

10、標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)比擬的參考.(b)實(shí)驗(yàn)室必須校準(zhǔn)和使用校準(zhǔn)的目鏡測微計(jì)來確定卵和寄生蟲的大小,如果大小是關(guān)鍵參數(shù).(c)每月使用,實(shí)驗(yàn)室必須使用糞便樣本限制品檢查永久的染色將證實(shí)染色特征.(d)實(shí)驗(yàn)室必須文件記錄如本節(jié)規(guī)定執(zhí)行的所有限制程序.6、Sec.493.1265標(biāo)準(zhǔn)：病毒學(xué)(a)當(dāng)使用細(xì)胞培養(yǎng)來別離或鑒定病毒時(shí),實(shí)驗(yàn)室必須同時(shí)培養(yǎng)一種細(xì)胞底物的限制品或非接種的細(xì)胞作為陰性限制品.(b)實(shí)驗(yàn)室必須文件記錄本節(jié)規(guī)定的執(zhí)行的所有限制程序.7、Sec.493.1267標(biāo)準(zhǔn)：常規(guī)化學(xué)對(duì)于血?dú)夥治?實(shí)驗(yàn)室必須執(zhí)行如下步驟：(a)根據(jù)廠家的說明書和廠家推薦的最少的頻次進(jìn)行校準(zhǔn)或驗(yàn)證校準(zhǔn).(b)每8小時(shí)檢

11、測一個(gè)限制品樣本,每天檢測應(yīng)使用低和高值的限制品.(c)除非自動(dòng)化儀器至少每30分鐘內(nèi)部驗(yàn)證校準(zhǔn),每次檢測標(biāo)本都應(yīng)同時(shí)測一份限制品.(d)文件記錄本局部規(guī)定的執(zhí)行的所有限制程序.8、Sec.493.1269標(biāo)準(zhǔn)：血液學(xué)(a)對(duì)于使用血球計(jì)數(shù)器手工進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)的(1)每8個(gè)小時(shí)操作必須檢測一個(gè)限制品.(2)患者標(biāo)本和限制品必須進(jìn)行雙份檢測.(b)對(duì)于所有非手工的凝血檢測系統(tǒng),每8個(gè)小時(shí)的操作和每次更換試劑,實(shí)驗(yàn)室必須包括兩個(gè)水平的限制品.(c)對(duì)于手工凝血試驗(yàn)(1)在檢測患者樣本和每次更換試劑之前,每次執(zhí)行的試驗(yàn)必須檢測兩個(gè)水平的限制品；(2)患者標(biāo)本和限制品必須以雙份進(jìn)行檢測.(d)實(shí)驗(yàn)室必須

12、文件記錄本節(jié)規(guī)定的所執(zhí)行的所有限制程序.9、Sec.493.1271標(biāo)準(zhǔn)：免疫血液學(xué)(a)患者檢測(1)實(shí)驗(yàn)室必須根據(jù)廠家的說明書執(zhí)行AB0型,D(Rho)型,未預(yù)見到抗體檢測、抗體識(shí)別和相容性試驗(yàn),如果適用,從21CFR606.151(a)至U(e).I(2)實(shí)驗(yàn)室必須通過用抗-A和抗-B試劑與未知紅細(xì)胞同時(shí)進(jìn)行檢測來確定AB0血型.對(duì)于確認(rèn)AB0血型,用Al和B紅細(xì)胞與未知血清進(jìn)行檢測.l(3)實(shí)驗(yàn)室必須通過未知紅細(xì)胞與抗-D(抗-RhD)血型試劑一起檢測來確定D(RhD)型(b)免疫血液學(xué)檢測和血液和血制品的分配.血液和血產(chǎn)品的檢測和分配必須遵守21CFR606.100(b)(12);6

13、06.160(b)(3)(ii)和(b)(3)(v);610.40;640.5(a),(b),(c),和(e);和640.11(b).(c)血液和血液產(chǎn)品的保存.血液和血液產(chǎn)品必須保存在適當(dāng)?shù)臈l件下,應(yīng)包括適當(dāng)?shù)臏囟染瘓?bào)系統(tǒng),并定期對(duì)其檢查.(1)可聽見的警報(bào)系統(tǒng)必須監(jiān)測適當(dāng)?shù)难汉脱寒a(chǎn)品24小時(shí)時(shí)間內(nèi)的保存溫度.(2)必須文件記錄警報(bào)系統(tǒng)的檢查.(d)保存輸血的樣本.根據(jù)實(shí)驗(yàn)室已建立的程序,輸完血的每一單位的樣本必須保存為出現(xiàn)輸血反響后的進(jìn)一步檢測.實(shí)驗(yàn)室必須立即處理已過有效期不用保存作進(jìn)一步檢測的血液.(e)輸血反響的調(diào)查.(1)根據(jù)其已建立的程序,實(shí)驗(yàn)室執(zhí)行相容性試驗(yàn),或發(fā)出血液或血液

14、產(chǎn)品,必須迅速地調(diào)查機(jī)構(gòu)內(nèi)發(fā)生的所有輸血反響,機(jī)構(gòu)有調(diào)查責(zé)任及給醫(yī)護(hù)人員提供關(guān)于輸血程序改良的建議.(2)假設(shè)適用時(shí),實(shí)驗(yàn)室必須文件記錄采取所有必需的糾正舉措,預(yù)防輸血反響的再發(fā)生,以及審核所有的政策和程序保證它們對(duì)于保證輸血平安是適當(dāng)?shù)?(f)實(shí)驗(yàn)室必須文件記錄本節(jié)規(guī)定的所執(zhí)行的所有限制程序.(二)臨床化學(xué)檢驗(yàn)質(zhì)量限制根據(jù)美國CLIA88最終規(guī)那么規(guī)定的質(zhì)量限制程序如下：每一定量檢測程序,包括兩個(gè)不同濃度的限制品.通過上述的質(zhì)量限制方法選擇和設(shè)計(jì)指南(允許總誤差、不精密度和不準(zhǔn)確度,90%誤差檢出概率和小于5%的假失控概率等)對(duì)常規(guī)化學(xué)檢驗(yàn)工程設(shè)計(jì)質(zhì)控方法,其誤差檢出概率可滿足要求.如果選擇

15、的質(zhì)控方法其誤差檢出概率處于中度和低度的情況,根據(jù)全面質(zhì)控策略(totalQCstrategy),可采用其他的質(zhì)量限制方法和質(zhì)量改良舉措.(三)臨床血液學(xué)檢驗(yàn)質(zhì)量限制其統(tǒng)計(jì)質(zhì)控方法設(shè)計(jì)方案同常規(guī)化學(xué)檢測工程.由于限制品有效期較短,不可能完全使用上述臨床化學(xué)使用的繪制質(zhì)控圖方法,此時(shí)可采用短期限制品繪制質(zhì)控圖的方式,另一方面可采用保存患者樣品、患者樣品雙份測定的方法進(jìn)行質(zhì)量限制.對(duì)于紅細(xì)胞指數(shù)工程更多的是采用患者數(shù)據(jù)方式,即BullS移動(dòng)均值法.(四)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)質(zhì)量限制定性檢驗(yàn)工程的質(zhì)量限制根據(jù)美國CLIA88最終規(guī)那么規(guī)定的質(zhì)量限制程序如下：對(duì)每一定性的檢測程序,每一分析批應(yīng)包括一個(gè)陰性和

16、一個(gè)陽性限制品；對(duì)于產(chǎn)生分級(jí)或滴度結(jié)果的檢測程序,分別包括陰性限制品和具有分級(jí)或滴度反響性的陽性限制品.兩種限制品的選擇應(yīng)基于雙重反響的不可靠性,即限制品在C0和CI濃度應(yīng)可獲得來執(zhí)行這一方法：在.濃度的限制品A(+)(臨界值限制品),在Q濃度的限制品B(-).通過使用這兩個(gè)限制品,可制作如圖17-3所示的圖形,根據(jù)可建立四種不同的區(qū)間：區(qū)間(1)代表處于限制狀態(tài)；區(qū)間(2)和(3),相當(dāng)于單一假反響：區(qū)間(2)為假陽性反響,區(qū)間(3)為假陰性反響；區(qū)間(4),代表雙重的假反響：假陽性及假陰性(此種限制圖可由Clinet-IQC軟件制作).在定性分析中這種質(zhì)控圖的主要目的是限制提供雙重反響的儀

17、器/系統(tǒng)的性能.這種質(zhì)控圖的目的是檢出假陽性反響和假陰性反響,看來為了這一目的同時(shí)使用兩個(gè)限制品是非常方便的.圖17-317-3雙直反響室內(nèi)質(zhì)拄制的質(zhì)控圖(五)臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)質(zhì)量限制中國合格評(píng)定國家認(rèn)可委員會(huì)CNAS-CL31醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和水平認(rèn)可準(zhǔn)那么在臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用說明.I、檢驗(yàn)前程序1.檢驗(yàn)申請單應(yīng)包括標(biāo)本來源,必要時(shí)說明感染類型和/或目標(biāo)微生物.2 .除一般要求外,微生物標(biāo)本的采集及運(yùn)送指南,應(yīng)特別注意以下內(nèi)容：(1)不同部位標(biāo)本的采集方法.如：血培養(yǎng)應(yīng)明確說明并執(zhí)行標(biāo)本采集的消毒技術(shù)、適宜的標(biāo)本量；(2)合格的標(biāo)本類型、送檢次數(shù)、標(biāo)本量.如：糞便常規(guī)培養(yǎng)宜包括未向?qū)I(yè)

18、人員咨詢前.每位患者采集標(biāo)本不多于2份；(3)應(yīng)明確規(guī)定需要盡快運(yùn)送的標(biāo)本,以便最大程度地減少延誤并盡快處理；(4)適宜的運(yùn)送培養(yǎng)基；(5)延遲運(yùn)送時(shí),標(biāo)本的貯藏方法；(6)平安運(yùn)送標(biāo)本的方法(如：密封容器、無標(biāo)本外漏等)；(7)標(biāo)本標(biāo)識(shí).3.應(yīng)制定標(biāo)本接收標(biāo)準(zhǔn),如無肉眼可見的滲漏、適宜的標(biāo)本類型/量、正確的保存、預(yù)防拭子枯燥、正確的運(yùn)送培養(yǎng)基等.應(yīng)評(píng)估標(biāo)本合格與否.不合格的痰標(biāo)本應(yīng)盡快通知醫(yī)生、護(hù)士或患者(門診)以便重新采集.n、檢驗(yàn)程序細(xì)菌：所選擇的涂片、染色技術(shù)、培養(yǎng)基應(yīng)能從標(biāo)本中別離、識(shí)別相應(yīng)的病原菌鑒定方法應(yīng)符合要求(如：通過血清學(xué)、革蘭染色、茵落形態(tài)、生長條件、代謝反響、生化和酶活

19、性、抗茵藥物耐藥性譜等特性鑒定)；應(yīng)能處理組織標(biāo)本.抗菌藥物敏感性試驗(yàn)方法包括紙片擴(kuò)散法、稀釋法(瓊脂稀釋法、液體稀釋法)、濃度梯度擴(kuò)散法(E試3)或自動(dòng)化儀器檢測.實(shí)驗(yàn)室應(yīng)遵循一定的準(zhǔn)那么,提供與效勞相適應(yīng)的抗菌藥物敏感性試驗(yàn),并能檢測苯嚏西林耐藥金黃色葡萄球菌、萬古霉素耐藥腸球菌青霉素不敏感肺炎鏈球菌等病原菌.痰培養(yǎng)應(yīng)包括肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、腸桿菌科細(xì)菌的別離,假設(shè)標(biāo)本被唾液嚴(yán)重污染,可以不鑒定全部細(xì)菌或不做藥敏試驗(yàn)；呼吸道和耳鼻喉標(biāo)本應(yīng)能分離3溶血鏈球菌和嗜血桿菌；支氣管肺泡灌洗液和支氣管鏡檢查標(biāo)本應(yīng)能定量培養(yǎng).尿液常規(guī)進(jìn)行定量培養(yǎng)(菌落計(jì)數(shù)),應(yīng)能別離、鑒定革蘭陽

20、性和/或革蘭陰性細(xì)菌.泌尿生殖道標(biāo)本應(yīng)有適宜條件培養(yǎng)淋病奈瑟菌； 陰道炎患者標(biāo)本應(yīng)進(jìn)行革蘭染色； 最好能開展孕婦懷孕3537周B群鏈球菌的篩查,藥敏實(shí)驗(yàn)應(yīng)包括林可霉素和紅霉素.糞便標(biāo)本應(yīng)能別離、鑒定腹瀉相關(guān)病原菌如沙門菌、志賀菌、耶爾森桿菌、彎曲菌、腸出血性大腸桿菌、嗜水氣單胞菌,結(jié)果報(bào)告應(yīng)標(biāo)明具體的細(xì)菌名稱,如未檢出沙門菌、志賀菌等；無病癥攜帶者,常規(guī)使用增菌培養(yǎng)基或選擇培養(yǎng)基；應(yīng)能檢測霍亂弧菌、艱難梭菌；粘性較低的培養(yǎng)標(biāo)本,(1)在限制以陽性反響假陰性反響解)假性和收陰性樣本MSMSi樣本網(wǎng)-)- -+ +宜進(jìn)行直接顯微鏡檢查.年齡大于6個(gè)月,有抗菌藥物治療史的嚴(yán)重腹瀉患者,糞便常規(guī)培養(yǎng)無

21、異常發(fā)現(xiàn)時(shí),可檢測艱難梭菌毒素.腦脊液培養(yǎng)標(biāo)本應(yīng)立即處理,常規(guī)進(jìn)行革蘭染色,培養(yǎng)基和孵育條件保證能培養(yǎng)常見苛養(yǎng)菌腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌、單核細(xì)胞李斯特菌、奴卡菌等；應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)室制定的危急值處理規(guī)程報(bào)告陽性結(jié)果包括顯微鏡檢查結(jié)果；抗原試驗(yàn),無論結(jié)果為陽性還是陰性,都應(yīng)再進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)；最好有其他方法檢測不能培養(yǎng)或難培養(yǎng)的細(xì)菌.傷口標(biāo)本應(yīng)明確培養(yǎng)程序,深部傷口感染應(yīng)至少包括標(biāo)本采集、需氧菌及厭氧菌的培養(yǎng)及鑒定.如果不具備厭氧培養(yǎng)條件,那么應(yīng)有程序說明,標(biāo)本置合格的運(yùn)送系統(tǒng)迅速送有條件的實(shí)驗(yàn)室.應(yīng)有適當(dāng)?shù)姆椒z測苛養(yǎng)菌如放線菌,快速生長的分枝桿菌.最好進(jìn)行直接涂片革蘭染色檢查并報(bào)告結(jié)果.厭氧菌培養(yǎng)

22、時(shí)間與標(biāo)本類型、診斷有關(guān),但在第一次培養(yǎng)評(píng)估之前應(yīng)有足夠的培養(yǎng)時(shí)間至少48小時(shí).應(yīng)有適宜的液體培養(yǎng)基如疏基乙酸鹽培養(yǎng)基,有適宜的鑒定方法適用時(shí).分枝桿菌：檢查標(biāo)本應(yīng)置密閉的防滲漏容器內(nèi)；某些標(biāo)本如：尿液、痰液抗酸染色及培養(yǎng)前應(yīng)濃縮.應(yīng)以密閉的螺旋蓋試管置密封的離心架內(nèi)離心,以最大程度減少氣溶膠危害.應(yīng)進(jìn)行原始標(biāo)本涂片分枝桿菌熒光染色；常規(guī)培養(yǎng)在3537C,當(dāng)臨床有特殊說明某些特殊菌屬時(shí),可置3032.C或42C.標(biāo)本量大時(shí),宜至少接種2類培養(yǎng)基.應(yīng)在收到標(biāo)本24小時(shí)內(nèi)報(bào)告抗酸染色結(jié)果.真菌：應(yīng)選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基和環(huán)境,以保證別離重要的致病菌,并盡量減少污染；別離和鑒定程序應(yīng)包括直接或染色如10%

23、KOH墨汁染色或吉姆薩染色初篩、適宜的選擇性培養(yǎng)基、孵育溫度以及藥敏試驗(yàn).應(yīng)準(zhǔn)備兩種培養(yǎng)基含或不含抗菌藥物.如果在室溫下培養(yǎng),應(yīng)每天監(jiān)測并記錄室溫2226C以確定室溫持續(xù)滿足真菌的生長.提供鑒定效勞的實(shí)驗(yàn)室,應(yīng)建立完善的真菌鑒定程序,包括玻片培養(yǎng)必要時(shí),生化反應(yīng),營養(yǎng)試驗(yàn)必要時(shí).否那么應(yīng)送有條件的實(shí)驗(yàn)室鑒定.經(jīng)空氣傳播有高度傳染性的微生物標(biāo)本、含菌絲體的真菌應(yīng)在生物平安柜或平安罩內(nèi)處理.假設(shè)采用平板培養(yǎng),應(yīng)有適當(dāng)?shù)钠桨才e措如封蓋,以預(yù)防平板意外翻開.只有具備嚴(yán)格的、適當(dāng)?shù)钠桨才e措才能進(jìn)行玻片培養(yǎng).病毒：單層細(xì)胞應(yīng)孵育一定時(shí)間,以滿足相應(yīng)病毒的生琵要求；應(yīng)詳細(xì)記錄細(xì)胞類型、傳代數(shù)、細(xì)胞來源、培養(yǎng)

24、基及生長狀況；應(yīng)檢測并記錄培養(yǎng)基和稀釋劑的無菌試驗(yàn)和pH;應(yīng)監(jiān)測細(xì)胞病變效應(yīng),以優(yōu)化培養(yǎng)的最正確時(shí)fB3o宜比擬未經(jīng)接種或接種無菌物質(zhì)的單層細(xì)胞與接種臨床標(biāo)本的培養(yǎng)物.應(yīng)建立程序,對(duì)定量血清試驗(yàn)的紅細(xì)胞懸液進(jìn)行檢測并標(biāo)準(zhǔn)化.工作表和/或記錄應(yīng)顯示試劑或參比血清的滴度如果可能,以及檢測結(jié)果的實(shí)際滴度.所有血清學(xué)試驗(yàn)檢測抗原或抗體,應(yīng)設(shè)立陽性和陰性對(duì)照.寄生蟲：實(shí)驗(yàn)室應(yīng)與臨床醫(yī)師協(xié)商制定寄生蟲常規(guī)檢驗(yàn)操作規(guī)程并遵循,其中包括常規(guī)寄生蟲學(xué)試驗(yàn)糞便標(biāo)本的采集時(shí)間、次數(shù)、標(biāo)本量.糞便顯微鏡檢查蟲卵和寄生蟲,應(yīng)包括濃縮過程和固定染色試驗(yàn)；新鮮稀便顯微鏡檢查應(yīng)包括直接濕片檢查,以觀察寄生蟲的動(dòng)力.血液寄生蟲

25、瘧原蟲或其他血源性寄生蟲顯微鏡檢查應(yīng)制備厚血涂片和薄血涂片,陽性結(jié)果應(yīng)執(zhí)行危急值報(bào)告程序.血涂片檢驗(yàn)瘧原蟲陽性時(shí),應(yīng)同時(shí)報(bào)告鑒定結(jié)果.分子微生物學(xué)：每次患者標(biāo)本核酸提取、準(zhǔn)備過程手工或自動(dòng)化,應(yīng)平行設(shè)立陰陽性質(zhì)控.應(yīng)規(guī)定并記錄所有孵育反響溫度.如果孵育溫度超出規(guī)定范圍,應(yīng)在發(fā)報(bào)告前采取糾正舉措.試驗(yàn)操作和結(jié)果報(bào)告應(yīng)遵循制造商的建議,而不用其他試劑、探針取代.應(yīng)制定程序驗(yàn)證所有環(huán)節(jié),包括染色、試劑、培養(yǎng)基、抗血清和分析軟件等符合預(yù)期性能.應(yīng)規(guī)定特殊病原體的識(shí)別、隔離、報(bào)告,以及特殊處理程序.除一般內(nèi)容外,程序還應(yīng)包括適宜的培養(yǎng)環(huán)境和足夠的培養(yǎng)時(shí)間；非選擇性培養(yǎng)基平板直徑大于9cm宜只接種一份標(biāo)本

26、.應(yīng)能夠盡快完成白喉?xiàng)U菌、氣性壞疽菌群、炭疽桿菌、肉毒梭菌和破傷風(fēng)桿菌檢測；痰標(biāo)本應(yīng)進(jìn)行常規(guī)涂片、革蘭染色,以確定標(biāo)本的可接受性或培養(yǎng)范圍.田、檢驗(yàn)程序的質(zhì)量保證實(shí)驗(yàn)室的內(nèi)部質(zhì)量限制體系應(yīng)以文件形式明確規(guī)定,包括整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作過程,如實(shí)驗(yàn)分析前、中、后報(bào)告,以及病人識(shí)別及準(zhǔn)備；標(biāo)本采集、標(biāo)識(shí)、保存、運(yùn)送、處理、檢測后貯藏；報(bào)揭發(fā)送時(shí)間.這些內(nèi)容應(yīng)符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn).如：應(yīng)對(duì)檢測儀器進(jìn)行維護(hù)、功能評(píng)估及溫度監(jiān)測；在報(bào)告患者結(jié)果之前,應(yīng)確認(rèn)質(zhì)控在可接受范圍；缺乏審核者的報(bào)告結(jié)果,應(yīng)由適當(dāng)人員在24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行評(píng)估；應(yīng)有舉措發(fā)現(xiàn)并更正重大的文字錯(cuò)誤、實(shí)驗(yàn)錯(cuò)誤以及可能影響患者處理的不尋常的檢測結(jié)果.標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)

27、程內(nèi)容應(yīng)包括：實(shí)驗(yàn)原理、臨床意義、標(biāo)本類型、檢測試劑、定標(biāo)試劑、質(zhì)控、操作步驟、計(jì)算方法、生物參考區(qū)間及檢測結(jié)果的解釋,并注明分析前后注意事項(xiàng).操作者應(yīng)能方便取閱,實(shí)際操作應(yīng)與之相符.應(yīng)有文檔資料證實(shí),工作人員了解其操作活動(dòng)涉及的所有文件.質(zhì)量治理體系文件應(yīng)至少每年一次由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人或其指定人員評(píng)估.新的制度、操作規(guī)程或原有文件的重要變更實(shí)施前,應(yīng)由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人或其指定人員評(píng)估并批準(zhǔn).應(yīng)有舉措保證所有工作人員顯微鏡檢查結(jié)果判斷及報(bào)告的一致性.試劑：所有試劑應(yīng)標(biāo)注：名稱和質(zhì)量、濃度或滴度；存放條件；配制時(shí)間；失效期.以上內(nèi)容亦應(yīng)記錄.假設(shè)試劑啟封,改變了有效期和儲(chǔ)存條件,應(yīng)記錄新的有效期.試劑的

28、儲(chǔ)存條件應(yīng)遵循生產(chǎn)商的建議,并在標(biāo)明的有效期內(nèi)使用.新批號(hào)或貨次的試劑使用前,應(yīng)通過直接分析參考物質(zhì)、新舊批號(hào)平行實(shí)驗(yàn)或常規(guī)質(zhì)控等方法進(jìn)行性能驗(yàn)證,并記錄.定性試驗(yàn)試劑應(yīng)至少檢測一個(gè)陽性和一個(gè)陰性樣本.直接抗原檢測試劑,假設(shè)含內(nèi)質(zhì)控,每一新批號(hào)或相同批號(hào)不同貨次應(yīng)檢測陽性和陰性外質(zhì)控并記錄.假設(shè)不含內(nèi)質(zhì)控,實(shí)驗(yàn)應(yīng)每天檢測陽性和陰性質(zhì)控并記錄.培養(yǎng)基：外觀應(yīng)良好平滑、水分適宜、無污染、適當(dāng)?shù)念伾秃穸?試管培養(yǎng)基濕度適宜,應(yīng)有明確標(biāo)簽,根據(jù)標(biāo)簽應(yīng)能獲得生產(chǎn)日期批號(hào)、保質(zhì)期、配方適用時(shí)、質(zhì)量限制、貯存條件等信息.購置的有質(zhì)量保證標(biāo)準(zhǔn)的培養(yǎng)基,實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保存制造商所遵循的質(zhì)量保證標(biāo)準(zhǔn),以及每批號(hào)產(chǎn)品完

29、成無菌試驗(yàn)、生長試驗(yàn)、生化反響及質(zhì)量限制性能的合格證實(shí)等文件；無質(zhì)量保證標(biāo)準(zhǔn)的培養(yǎng)基,每批號(hào)和/或每次購置的產(chǎn)品應(yīng)檢測相應(yīng)的性能,包括生長試驗(yàn)或與舊批號(hào)平行試驗(yàn)、生長抑制試驗(yàn)適用時(shí)、生化反響適用時(shí)等.每個(gè)批號(hào)和/或每次購置時(shí),應(yīng)檢查并記錄產(chǎn)品的破損、污染,及外觀、冷凍或加熱現(xiàn)象.自制培養(yǎng)基,每批號(hào)產(chǎn)品應(yīng)檢測相應(yīng)的性能,包括無菌試驗(yàn)、生長試驗(yàn)或與舊批號(hào)平行試驗(yàn)、生長抑制試驗(yàn)適用時(shí)、生化反響適用時(shí)等.細(xì)菌：所有染色劑革蘭染色、特殊染色、熒光染色的新批號(hào),以及使用中的染色劑,應(yīng)至少每周用陽性和陰性適用時(shí)的質(zhì)控菌株檢測染色程序；使用的每種染色方法,應(yīng)有操作程序如：每種試劑彳用時(shí)間等,并遵循.新批號(hào)及每一貨次的試劑、紙片,如口引味試劑,桿菌肽,奧普托辛,X、V、XV因子紙片等應(yīng)有陰陽性質(zhì)控.凝固酶、過氧化氫酶、氧化酶、|3內(nèi)酰胺酶,除新批號(hào)及每一貨次外,使用每天應(yīng)做陰性和陽性質(zhì)控,但商業(yè)頭抱菌素試劑的8內(nèi)酰胺酶試驗(yàn)可遵循制造商的奄議.應(yīng)驗(yàn)證商業(yè)鑒定系統(tǒng)包括自動(dòng)、半自動(dòng)、手32結(jié)果的可靠性.診斷性抗血清試驗(yàn)應(yīng)設(shè)陰陽性,尤其是陰性對(duì)照.有多種組成局部的試劑盒,應(yīng)使用同-于tL號(hào)的成分,除非生產(chǎn)商有特別說明.應(yīng)每天監(jiān)測并記錄CO孵育箱內(nèi)的C02濃度.抗菌藥物敏感性試驗(yàn)：常規(guī)采用的藥