臨床微生物室SOP

1、臨床微生物室標(biāo)準(zhǔn)操作程序SOP臨床微生物室標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）目錄檢驗科生物安全防范管理制度、紫外線消毒制度1微生物實驗室安全工作制度、病原微生物保存制度2微生物實驗室安全工作制度、病原微生物保存制度2微生物實驗室消毒隔離措施制度、微生物實驗室標(biāo)本采集運(yùn)輸制度3微生物實驗廢棄物處理制度、尖銳器具安全使用制度3微生物實驗室消毒隔離措施制度、微生物實驗室標(biāo)本采集運(yùn)輸制度3微生物實驗廢棄物處理制度、尖銳器具安全使用制度3工作人員保護(hù)制度、臨床微生物實驗室消毒防護(hù)制度4微生物實驗室質(zhì)量管理制度5微生物實驗室質(zhì)量管理制度6室間質(zhì)量控制管理程序7室內(nèi)質(zhì)量控制管理程序8試劑制配質(zhì)檢操作程序11標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)

2、操作程序14血液及骨除標(biāo)本的采集標(biāo)準(zhǔn)操作程序18呼吸道標(biāo)本留取標(biāo)準(zhǔn)操作程序19尿液標(biāo)本留取標(biāo)準(zhǔn)操作程序20膿及創(chuàng)傷感染標(biāo)本留取標(biāo)準(zhǔn)操作程序21生殖道分泌物標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)操作程序22糞便標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)操作程序23穿刺液標(biāo)本留取標(biāo)準(zhǔn)操作程序24腦脊液、膽汁標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)操作程序25組織標(biāo)本的采集標(biāo)準(zhǔn)操作程序26靜脈導(dǎo)管標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)操作程序27眼耳及乳突分泌物標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)操作程序28樣本接收、核對、接種、培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序29菌株的純化、鑒定、藥敏流程標(biāo)準(zhǔn)操作程序30苛養(yǎng)菌培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序31常見標(biāo)本培養(yǎng)結(jié)果解釋標(biāo)準(zhǔn)操作程序32微生物鑒定及藥物敏感試驗分析系統(tǒng)操作規(guī)程34KB法藥敏試驗標(biāo)準(zhǔn)操作程序42ESB

3、L檢測標(biāo)準(zhǔn)操作程序43B -內(nèi)酰胺酶檢測標(biāo)準(zhǔn)操作程序-44耐甲氧西林葡萄球菌紙片擴(kuò)散法篩選試驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程-45MRSA紙片擴(kuò)散法篩選試驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程-46革蘭染色標(biāo)準(zhǔn)操作程序47抗酸染色標(biāo)準(zhǔn)操作程序48解腺/人型支原體培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序-49沙眼衣原體抗原檢測標(biāo)準(zhǔn)操作程序50康泰真菌鑒定藥敏標(biāo)準(zhǔn)操作程序51觸酶試驗標(biāo)準(zhǔn)操作程序52氧化酶試驗標(biāo)準(zhǔn)操作程序53芽管試驗標(biāo)準(zhǔn)操作程序54臨床微生物實驗室安全標(biāo)準(zhǔn)操作程序55微生物室試劑管理制度56微生物室試劑管理制度57分級報告程序57江曷行新余市人民喔兔松瞼科微生物賣珍金版本號：2.0文件標(biāo)題：松瞼科生物安全后危管理向度文件我忐：突枝文件編號：WSW

4、-SOP-2.0修改R期：2013年1月30 日文件和典：鈕存文件生效日朝：2013年6月30 q編制壽：王庵勇枇次者：賀夏氏申核去：次斐氏發(fā)改等：檢驗科生物安全防范管理制度一、檢驗科在醫(yī)院感染管理工作中應(yīng)履行的職責(zé)：1 .負(fù)責(zé)醫(yī)院感染常規(guī)微生物監(jiān)測。2 .開展醫(yī)院感染病原微生物的培養(yǎng)、分離鑒定、藥敏試驗及特殊病原體的耐藥性監(jiān)測，定期總結(jié)、分析， 向有關(guān)部門反饋，并向全院公布,3 .發(fā)生醫(yī)院感染流行或爆發(fā)時，承擔(dān)相關(guān)檢測工作。4 .負(fù)責(zé)集中所有檢驗后標(biāo)本、培養(yǎng)出的菌株、一次性用品用后的消毒處理。5 .做好檢驗科、輸血科實驗室臺面、地而、空氣消毒，6 .防止病人在檢驗科交叉感染。二、檢驗科在生物

5、安全防范管理工作中應(yīng)達(dá)到以下要求：1 .細(xì)菌室工作人員須穿工作服，戴工作帽，必要時穿隔離衣、戴口罩、手套。2 .使用合格的一次性檢驗用品，用后進(jìn)行無害化處理。3 .格執(zhí)行無菌技術(shù)操作規(guī)程，靜脈采血須一人一針一墊一帶；4 .微量采血應(yīng)做到一人一針一管一片：對病人操作前盡量保持手的清潔。5 .無菌物品如棉簽、棉球、紗布及其容器應(yīng)在有效期內(nèi)使用，開啟后使用時間不得超過24小時。使用 后的廢棄物品，應(yīng)及時進(jìn)行無害化處理，不得隨意丟棄。6 .各種器具（鉗子、消毒罐）應(yīng)及時消毒、清洗：各種廢棄標(biāo)本應(yīng)分類處理（焚燒、入污水池、消毒 或滅菌）。消毒后發(fā)放，7 .檢驗人員結(jié)束操作后應(yīng)及時洗手，有必要時用消毒浸泡

6、。8 .保持室內(nèi)清潔衛(wèi)生。每天對空氣、各種物體表面及地面進(jìn)行常規(guī)消毒。在進(jìn)行各種檢驗時，應(yīng)避免 污染，在進(jìn)行特殊傳染病檢驗后，應(yīng)及時進(jìn)行消毒，遇有場地、工作服或體表污染時，應(yīng)立即處 理，防止擴(kuò)散，并視污染情況向上級報告.9 .菌種、毒種按病原微生物實驗室安全管理條例進(jìn)行管理。10 .在操作有氣溶膠可能的標(biāo)本應(yīng)配置生物安全柜及其它防護(hù)設(shè)置，如紫外線江曷省新余市人員嵌施松瞼科微生物賣徐金板本等：2.0文件標(biāo)題：矣瞼童安全管理制度文件我忐：突枝文件編號：WSW-SOP-2.0修改R期：2013年1月30 日文件計具：鈕存文件生效日期：2013年6月30 q編制者：王屏勇枇承者：爰氏中核去：次爰氏發(fā)改

7、等：實驗室安全管理制度【目的】保障個人安全，防止交叉感染。【適用范圍】臨床微生物實驗室檢驗人員【該S0P變動程序】本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：專 業(yè)主管、科主任?！局饕獌?nèi)容】1 .加強(qiáng)學(xué)習(xí)，嚴(yán)格執(zhí)行安全制度，定期檢查。2 .進(jìn)入實驗室要穿工作服，工作服要放在指定的地點(diǎn)，并經(jīng)常洗滌；生活用品不能帶入實驗 室。3 .實驗室內(nèi)不能高聲談笑，不準(zhǔn)吸煙、飲食，不要用手指觸摸頭、面等部位以免造成污染。 如傳染物污染手部，要立即用1% （g/dl） 84高效消毒劑（或500mg/L含氯消毒劑溶液）浸 泡，再用肥皂水和流水沖洗干凈。4 .如傳染物污染桌面或

8、地面應(yīng)立即用1% （g/dl） 84高效消毒劑溶液（或500mg/L含氯消毒劑 溶液）覆蓋其上，經(jīng)30分鐘方可抹去，如工作服被病原微生物污染，應(yīng)立即脫下，進(jìn)行高 壓滅菌處理。5 .實驗室每天用紫外線進(jìn)行消毒空氣，作好記錄，并定期檢測；接種環(huán)（針）使用后應(yīng)立即 在火焰燈上燒灼滅菌；沾有活菌的玻片、試管等玻璃制品應(yīng)立即放在鋼精鍋內(nèi)統(tǒng)一高壓滅 菌；檢測剩余的標(biāo)本及接觸過微生物的平板、鑒定板（條）等塑料制品均用黃色塑料袋裝 好，置黃色桶內(nèi)，統(tǒng)一滅菌處理。6 .各種電器設(shè)備，要有專人保管，并做好有關(guān)的記錄；易燃物品乙醇應(yīng)妥善保管，遠(yuǎn)離火源 ,若出現(xiàn)著火情況，應(yīng)立即用濕布將其覆蓋。7 .易燃、易爆、劇毒化

9、學(xué)物品要有專人保管，并有使用記錄；分離出甲類或乙類傳染病菌株 ,應(yīng)及時上報院感科，未經(jīng)上級同意不得帶出實驗室，并由專人處理。8 .工作結(jié)束后，用500mg/L含氯消毒劑溶液消毒工作臺面；工作人員雙手應(yīng)用肥皂、流水清 洗三遍以上，關(guān)好窗戶、檢查好電源后，方可離開實驗室。9 .臨床微生物實驗室檢驗人員應(yīng)定期健康體檢及必要的預(yù)防接種，以增強(qiáng)自身抵抗力。江西用新余市人民院院松瞼科救生為實會安杈本等：2.0文件標(biāo)題：微生物矣瞼金慶利的蓍理*度文件我忐：殳拉文件餐等：WSW-SOP-2.0修武日期：2013年1月30日文件和奧：短與文件生政目期：2013年6月30 Q編制者：王屏勇枇承者：/爰氏中校者：十

10、兔比發(fā)敵號：微生物實驗室試劑管理制度1、目的規(guī)范微生物實驗室試劑的管理程序，保證試驗質(zhì)量，2、適用范圍微生物實驗室的所有試劑。3、職責(zé)3.1 檢驗科主任負(fù)責(zé)審批微生物實驗室試劑的申請.3.2 微生物實驗室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)對試劑評估、申購、驗收等管理工作。3.3 檢測人員負(fù)責(zé)試劑試驗相關(guān)SOP的編寫。34檢測人員負(fù)責(zé)試劑的使用、質(zhì)量控制工作。4、程序4.1 試劑4.1.1 試劑的評估、申購、驗收用于檢測標(biāo)本的試劑必須堅持高質(zhì)量、高安全性的標(biāo)準(zhǔn)，由實驗室負(fù)責(zé)人評估、訂購。每批試劑到貨后由實 驗室負(fù)責(zé)人或其指定人員驗收。驗收內(nèi)容包括：試劑的數(shù)量、外觀、有效期及運(yùn)送條件。記錄驗收結(jié)果，并 在試劑外包裝上標(biāo)明

11、接收時間及接收人員簽名，保存質(zhì)量保證書。有損壞或降解的試劑應(yīng)拒收。4.1.2 試劑檔案訂購試劑應(yīng)建立試劑檔案，以監(jiān)控試劑供應(yīng)狀況，保證實驗順利進(jìn)行。試劑檔案內(nèi)容包括：試劑名稱、批號 、數(shù)量、生產(chǎn)商、接收日期、失效日期、儲存條件、試劑說明書、相關(guān)質(zhì)控文件及接收人員簽字等。4.1.3 試劑標(biāo)識所有試劑須有標(biāo)識,并張貼于試劑醒目處C標(biāo)識內(nèi)容包括：試劑名稱、量、濃度、或滴度、儲存條件、配制 日期、失效日期（如果開瓶改變試劑有效期，必須重新登記）。4.1.4 試劑儲存所有試劑應(yīng)按產(chǎn)商要求儲存以防損壞、降解、污染。低溫保存的試劑須放置于冰箱內(nèi)。冰箱應(yīng)每天記錄溫度 以監(jiān)控存放條件是否符合要求。注意安全存放，

12、危害品應(yīng)分開放置，并有明顯標(biāo)識。4.1.5 試劑使用使用前，工作人員應(yīng)確認(rèn)：試劑處于有效期內(nèi)、質(zhì)控合格、標(biāo)識明確、儲存條件正確、存放合理。出現(xiàn)與上 述情況不符時，應(yīng)立即通知實驗室負(fù)責(zé)人，并暫停使用。使用抗血清時應(yīng)注意效價、透明度與色澤，如有渾 濁或沉淀表示已污染，應(yīng)立即停用。取用試劑應(yīng)按有效期先后取用，標(biāo)明開瓶日期、有效期、開瓶人簽名。 當(dāng)試劑存放量接近警戒線時，應(yīng)及時通知負(fù)責(zé)人訂購下一批試劑。4.1.6 試劑質(zhì)量控制參見室內(nèi)質(zhì)量控制管理程序.4.2 培養(yǎng)基421成品培養(yǎng)基4.2.1.1 由實驗室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)評估、訂購。4.2.1.2要求生產(chǎn)商提供培養(yǎng)基質(zhì)控資料，包括培養(yǎng)基名稱、成分、有效期、保

13、存條件及無菌試驗、生長試驗、生化 試驗的合格證明等，質(zhì)控材料至少保留2年。4.2.13驗收時應(yīng)注意培養(yǎng)基是否有標(biāo)識（包括培養(yǎng)基名稱、批號、生產(chǎn)日期、失效日期），包裝是否完整，培養(yǎng)基是 否破損、污染，外觀是否良好（良好培養(yǎng)基應(yīng)該是表面平滑，水分，顏色、厚度適宜，無污染）等.不符合 要求時應(yīng)拒收，421.4驗收后應(yīng)記錄培養(yǎng)基總數(shù)、批號、生產(chǎn)日期、失效日期及接收人員簽名。4.2.2 自制培養(yǎng)基4.2.2.1 應(yīng)嚴(yán)格遵守SOP配制，由勤雜人員高壓火菌。高壓滅菌時須貼指示帶監(jiān)測滅菌效果。4.2.3 培養(yǎng)基保存4.23.1 常規(guī)2-8C保存4.23.2不常用的培養(yǎng)基應(yīng)用塑料袋包好儲存，避免脫水致某些指示劑

14、或抑制劑濃度相對增加，而使病原菌不能生長或 生長不良，4.2.4培養(yǎng)基質(zhì)量控制參見室內(nèi)質(zhì)量控制管理程序.4.3試劑警戒線微生物實驗室應(yīng)設(shè)置試劑警戒線，以防出現(xiàn)試劑短缺而導(dǎo)致試驗無法完成.43.1設(shè)置試劑警戒線應(yīng)當(dāng)考慮到：試劑供貨周期的長短：試劑有效期長短：質(zhì)控試驗需要的時間（要保證新進(jìn)試 劑一旦失控時，實驗室仍有足夠試劑保證試驗的正常進(jìn)行）.4.3.2每月月底清點(diǎn)試劑，清除過期試劑，預(yù)購下月需要使用的試劑。藥敏紙片：常見鈿萄球菌藥敏紙片定為剩x支紙片時預(yù)定下一批：常見腸桿菌科藥敏紙片定剩x紙片時預(yù)定下 一批口鑒定卡：GNI+：定為剩x盒時預(yù)定下一批；GPI：定為剩x盒時預(yù)定下一批：GNS：定為

15、剩x盒時預(yù)定下一批 ;GPS：定為剩x盒時預(yù)定下一批 血培養(yǎng)瓶：定為剩x箱時預(yù)定下一批。培養(yǎng)基：每周準(zhǔn)備好下一周培養(yǎng)基的用量，保證實驗室正常進(jìn)行。常規(guī)微量生化管：定為剩x盒時預(yù)定下一批。江西域鼾余市人民霰施檢瞼科做生物賓珍史版本號：2.0文件粽題：米外觀請案制度文件我志：矣也文件編號：WSW-SOP-2.0修改日期：2013年M 30 q文件計賣：機(jī)與文件生效日期：2013年6月30 q編制者：王席勇枇次壽：爰氏審核者：爰氏發(fā)改等：紫外線消毒制度1 .微生物實驗室每天工作結(jié)束后需對環(huán)境進(jìn)進(jìn)行紫外線消毒40分鐘以上，并做好記錄。2 .紫外線燈管記錄使用時間，使用超過1000小時以上更換紫外線燈管

16、，并記錄時間。3 .紫外線燈管每月用無水酒精擦拭；每半年由院感科對紫外線燈管進(jìn)行紫外線強(qiáng)度（消毒 效果）測試，并標(biāo)明測試。江南粉余市人為偎比松瞼科微生物實徐生K本號：2.0文件林題：微生物實珍全安全工作制度文件狀忐：更拉文件男等：WSW-SOP-2.0修改R朝：2013年M 30 q文件種類：短序文件生效日期：2013年6月30 Q編制者：王孱勇枇總者：爰氏中核壽：/愛氏發(fā)放號：微 生物實 驗室安 全工作 制 度1 每日工作前用紫外線照射實驗室40分鐘以上。2入室前應(yīng)穿工作服，并做好實驗前的各項準(zhǔn)備工作。3.實驗室內(nèi)應(yīng)保持肅靜，不準(zhǔn)吸煙、吃東西及用手觸摸面部。盡量減少室內(nèi)活動，以免引起風(fēng)動，無

17、關(guān) 人員禁入。4,非必要物品禁止帶入實驗室，必要資料和書籍帶入后，應(yīng)遠(yuǎn)離操作臺。5,做好標(biāo)本的登記、編號及試驗記錄。未發(fā)出報告前，請勿丟棄標(biāo)本。6,標(biāo)本處理及各項試驗應(yīng)在操作間進(jìn)行，接種環(huán)用完后應(yīng)立即火焰滅菌，沾菌吸管、玻片等用后應(yīng)浸泡 在消毒液內(nèi)。7.實驗時手部污染，應(yīng)立即用過氧乙酸消毒或浸于3%來蘇兒溶液中5-10分，再用肥皂洗手并沖洗干凈；如誤入口內(nèi)，應(yīng)立即吐出，并用1:1000高鎰酸鉀溶液或3%雙氧水漱 口，根據(jù)實際情況服用有關(guān)藥物。8,實驗過程中，如污染了實驗臺或地面，應(yīng)用3%來蘇兒覆蓋其上半小時，然后清洗；如污染工作服， 應(yīng)立即脫下，高壓滅菌。9,若出現(xiàn)著火情況，應(yīng)沉著處理，切勿慌

18、張，立即關(guān)閉電閘，積極滅火。易燃物品（如酒精、二甲苯、 乙隧和丙酮等）必須遠(yuǎn)離火源，妥善保存。10 .工作結(jié)束時檢查電器、酒精燈等是否關(guān)閉，觀察記錄培養(yǎng)箱、冰箱溫度及工作情況，用浸有消毒液 的抹布將操作臺擦拭干凈，并將試劑、用具等放回原處，清理臺面，未污染的廢棄物扔進(jìn)污物桶，有菌 廢棄物應(yīng)送高壓滅菌后處理。11 .離室前工作人員應(yīng)將雙手用消毒液消毒，并用肥皂和清水洗凈。12 .愛護(hù)儀器設(shè)備，經(jīng)常清潔，注意防塵和防潮。江西高麻余市人民偎院檢瞼科微生物實徐童枚本號：2.0文件標(biāo)題：用原微生物保存制度文件我忐：突拉文件為號：WSW-SOP-2.0修友0朝：2013年1月30即文件和真：理存文件生效日

19、期：2013年6月30 Q編制耆：王屏勇枇發(fā)者：/爰氏中核者：/麥?zhǔn)习l(fā)放等：病原微生物保存制度1 .據(jù)病原微生物安全條例要求實驗室不能保存高致性病原微生物菌（毒）種。2 . 一般藥敏實驗用的標(biāo)準(zhǔn)菌ATCC25922、ATCC25923和ATCC27853,菌種保管應(yīng)有專人負(fù)責(zé)，保存于冰 箱中，確保菌種安全。保管人員變動時，必須嚴(yán)格交接手續(xù)。3 .菌種應(yīng)有嚴(yán)格的登記，包括形態(tài)，分離日期，鑒定日期，簽發(fā)者，主要鑒定性能（包括形態(tài)、染色 、抗原結(jié)構(gòu)、動物致病力等），并注明使用、轉(zhuǎn)移、銷毀情況及原因。4 .各種菌種應(yīng)按規(guī)定時間接種，一般在接種三次后作一次全而的鑒定，注意菌種有無污染及變異，如 發(fā)現(xiàn)變異

20、時，應(yīng)及時更換。菌種保存范圍及向外單位轉(zhuǎn)移，應(yīng)按國家衛(wèi)生部規(guī)定執(zhí)行。實驗結(jié)束后的標(biāo)本、菌株等感染物必須消 毒滅菌處理。并做好記錄。江西周鼾余市人再田院松建科微史岫矣除史版本等：2.0文件套題：微生物賣建會請*陶喜翔先制度文件狀忠：會拉文件編號：WSW-SOP-2.0修武0期：2013年1月30日文件種類：程壽文件生效0期：2013年6月30 a編制者：王展勇枇M者：/麥民審核者：麥民發(fā)敵等：微生物實驗室消毒隔離措施制度1,每天工作前用消毒液消毒工作臺，上班前、下班后開紫外燈（40分鐘）進(jìn)行空氣消毒。2,非必要品禁止帶入實驗室，必要資料和書籍帶入后，應(yīng)遠(yuǎn)離操作臺。3.使用后的載玻片、蓋片、平皿、

21、試管等用lOOOg/L含氯消毒劑浸泡消毒液浸泡，經(jīng)煮沸后清洗或丟棄。4試驗后的血液標(biāo)本用消毒液浸泡后煮沸消毒，所有用于試驗的反應(yīng)板、吸頭等用1000g/L含氯消毒劑浸 泡消毒液浸泡（至少24小時以上）后清洗或丟棄。5.所有微生物培養(yǎng)物（細(xì)菌、支原體、真菌等培養(yǎng)物），不管標(biāo)本陽性或陰性均用1000g/L含氯消毒劑浸 泡消毒液浸泡后，經(jīng)煮沸消毒，才能清洗或丟棄。6,取材、最好采用一次性工具，不能采用一次性工具者，每次取材前均應(yīng)徹底消毒。7,用于浸泡各種器械如刮菌刀、持物鉗、鑲子等的消毒液要定期更換。8 .不慎發(fā)生臨床標(biāo)本或培養(yǎng)物污染工作臺，不要立即用水沖洗，應(yīng)先用紙巾、布等敷料加上消毒液500g/

22、 L含氯消毒劑浸泡消毒30分鐘以上，然后再清洗。如污染工作服，應(yīng)立即脫下，高壓滅菌。9 .實驗時手部污染，應(yīng)立即用肥皂洗手并沖洗干凈，再外用消毒藥水，如誤入口內(nèi)，應(yīng)立即吐出，并用 1:1000高缽酸鉀溶液或3%雙氧水漱口，必要時根據(jù)實際情況服用有關(guān)藥物。江曷用新余市人員晚庵松瞼科微生物實珠安根本等：2.0文件標(biāo)題：微生物實賒支標(biāo)本采累運(yùn)輸制度文件我忠：殳拄文件餐等：WSW-SOP-2.0修/日期：2013年1月30 日文件種類：板存文件生效R期：2013年6月30 q編制壽：王屏勇枇*今：愛民申核專：/爰氏發(fā)放等：微生物實驗室標(biāo)本采集運(yùn)輸制度I.病原微生物的培養(yǎng)必須到微生物實驗室領(lǐng)取無菌器皿、血培養(yǎng)增菌液瓶等留取標(biāo)本。2 .病原微生物的培養(yǎng)標(biāo)本必須在2小時內(nèi)由輸送中心送檢并立即按種。特殊標(biāo)本（如腦脊液、前列腺液 、白帶等）應(yīng)立即送檢并接種。3 .實驗室標(biāo)本姓名、編號或者標(biāo)本采集不符合要求時要退回重留標(biāo)本。江西高酊余市人肉強(qiáng)院檢瞼科微生物賣聯(lián)企收本等：2.0文件斑題：微生物式建廢界物處理制度文件狀忠：關(guān)枝