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1、植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合原原理理細(xì)胞融合的步驟細(xì)胞融合的步驟誘導(dǎo)方法誘導(dǎo)方法用途用途獲得獲得雜種植株雜種植株細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性去除細(xì)胞壁去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合原生質(zhì)體融合使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合細(xì)胞融合物理(離心、振蕩、物理(離心、振蕩、電刺激)電刺激)化學(xué)(聚乙二醇)化學(xué)(聚乙二醇)物理、化學(xué)方法物理、化學(xué)方法(同左)(同左)滅活的病毒滅活的病毒主要用于制備主要用于制備單克隆抗體單克隆抗體1
2、1、抗體抗體1.1 1.1 概念:概念: 抗體是機(jī)體受抗原刺激抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的、并能與該抗原發(fā)后產(chǎn)生的、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白能的球蛋白 。1.2 1.2 來源:來源: 漿細(xì)胞(漿細(xì)胞(B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞) 抗原抗原 動(dòng)物體動(dòng)物體刺激刺激漿細(xì)胞漿細(xì)胞 抗體抗體抗體不純抗體不純特異性差、純度低;特異性差、純度低;產(chǎn)量低、反應(yīng)不夠靈敏產(chǎn)量低、反應(yīng)不夠靈敏傳統(tǒng)血清抗體的制備傳統(tǒng)血清抗體的制備抗原不純抗原不純 每個(gè)漿細(xì)胞(淋巴細(xì)胞)只能分泌一種抗體,由一每個(gè)漿細(xì)胞(淋巴細(xì)胞)只能分泌一種抗體,由一個(gè)淋巴細(xì)胞增殖產(chǎn)生的細(xì)胞群分泌的抗體化學(xué)
3、成份是單個(gè)淋巴細(xì)胞增殖產(chǎn)生的細(xì)胞群分泌的抗體化學(xué)成份是單一的。一的。如何獲得化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體?如何獲得化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體?體外培養(yǎng)淋巴細(xì)胞能無限增殖嗎體外培養(yǎng)淋巴細(xì)胞能無限增殖嗎? 體外培養(yǎng)單個(gè)淋巴細(xì)胞,提取分泌的抗體體外培養(yǎng)單個(gè)淋巴細(xì)胞,提取分泌的抗體怎樣解決這個(gè)問題?怎樣解決這個(gè)問題?設(shè)計(jì)方案:設(shè)計(jì)方案:一個(gè)一個(gè)B B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖小鼠骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞二、單克隆抗體二、單克隆抗體注射抗原的目的是什么注射抗原的目的是什么誘導(dǎo)其融合的方法有哪些?誘導(dǎo)其融合的方法有哪些?融合后培養(yǎng)液中有幾
4、種細(xì)胞融合后培養(yǎng)液中有幾種細(xì)胞為何要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專為何要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測(cè),多次篩選一抗體檢測(cè),多次篩選大量增殖雜交瘤細(xì)胞獲得單大量增殖雜交瘤細(xì)胞獲得單抗的方法抗的方法比較項(xiàng)目第一次篩選克隆化培養(yǎng)和多次篩選原理在選擇性培養(yǎng)基中添在選擇性培養(yǎng)基中添加某種藥物,特異性加某種藥物,特異性殺死未融合細(xì)胞和融殺死未融合細(xì)胞和融合的同種核細(xì)胞合的同種核細(xì)胞抗原抗原抗體的特抗體的特異性結(jié)合,進(jìn)行異性結(jié)合,進(jìn)行抗體檢測(cè)抗體檢測(cè)目標(biāo)選出雜交瘤細(xì)胞選出雜交瘤細(xì)胞選出既能無限增選出既能無限增殖,又能產(chǎn)生特殖,又能產(chǎn)生特異性抗體的雜交異性抗體的雜交瘤細(xì)胞瘤細(xì)胞【堂堂清【堂堂清】1.單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是_雜交瘤細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)是雜交瘤細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)是_特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備2.單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高的原因是單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高的原因是_每一種每一種B B淋巴細(xì)胞只能分泌一種特異性抗體淋巴細(xì)胞只能分泌一種特異性抗體3.產(chǎn)生抗體的細(xì)胞是產(chǎn)生抗體的細(xì)胞是_ 產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞是產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞是_效應(yīng)效應(yīng)B
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