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1、本文格式為word版,下載可任意編輯免疫真題大題考試復習重點總結 2021 年 年 10 月 免疫 26、簡述抗原自身因素是如何影響抗原抗體反應的 p22 抗原的理化性狀、抗原表位的種類和數(shù)目均可影響抗原抗體反應的結果。如顆粒性抗原與相應抗體結合后形成凝集現(xiàn)象;可溶性抗原與相應抗體結合后形成沉淀現(xiàn)象;粗糙型細菌在生理鹽水中易消失自凝;血細胞同 igg 類抗體反應可不消失凝集現(xiàn)象;單價抗原(半抗原)與相應抗體結合后不消失沉淀現(xiàn)象。 27、簡述免疫濁度測定的基本原理 p89 抗原、抗體在特別緩沖液中反應而又比例合適(抗體過量)時,形成的小分子可溶性免疫復合物在增濁劑的作用下,快速形成免疫復合物微粒
2、,使反應液消失濁度。在抗體過量且固定的條件下,形成的免疫復合物量隨抗原量增加而增加,反應液的濁度亦隨之增加,即待測抗原量與反應后溶液的濁度呈正相關。用系列已知濃度的抗原標準品進行試驗,制備劑量反應曲線,即可求出標本中抗原含量。 28、簡述凝集反應的影響因素 p97 (1)電解質:顆粒性抗原都帶負電荷,有相互排斥的作用,電解質可降低抗原的電荷,使其易于凝集。一般用 0.85%的氯化鈉溶液稀釋血清與菌液。 (2)ph:一般凝集反應合適的 ph 為 6-8. (3)溫度:除冷凝集素,一般溫度凹凸與血清學反應速度正相關。但超過 60反而會破壞蛋白質結構,故凝集反應通常以室溫或 37中進行為宜 (4)抗
3、體與抗原的比例:凝集反應中多數(shù)狀況下,抗體濃度越高則反應越強(前帶現(xiàn)象:抗體濃度過高,反而不消失明顯凝集) 29、什么叫血清病?簡述其發(fā)生的機制 p249 (1)血清病屬于 iii 型超敏反應的全身性免疫復合物病。是指初次注射大量異種抗毒素血清1-2 周后,可消失發(fā)熱、皮疹,淋巴結腫大,關節(jié)腫痛和一過性蛋白尿等癥狀。 (2)發(fā)生氣制:一次大量注入異種抗毒素血清后,機體產生抗異種血清抗體,由于注入的異種血清尚未完全清除,兩者在抗原量多于抗體量的條件下結合,形成中等大小可溶性 ic,隨血流運行至全身,沉積于腎小球基底膜、關節(jié)滑膜及皮下組織毛細血管壁中,引起一系列癥狀。 (3)血清病具有自限性停止注
4、射抗毒素后癥狀可自行消退。有時應用大劑量青霉素磺胺等藥物也可引起類似血清病樣的反應。 30、簡述對疫苗平安問題的防范措施。 p271 疫苗都是用于健康人群,特殊是兒童的免疫制劑,其質量的優(yōu)劣直接關系到千百萬人的健康和生命平安,因此在制作中應特殊留意質量管理。滅活疫苗菌種為致病性強的微生物,應予徹底滅活;活疫苗的菌種要求遺傳性狀穩(wěn)定,無返祖,無致癌性;血液制品需對獻血員進行嚴格檢查,確保血液不含病原體(如 hiv、hbv、hcv 等);應盡可能削減各種疫苗接種后的副作用,推舉口服接種或盡量削減注射次數(shù)。 31、什么是放射免疫分析和免疫放射分析?試比較二者之間的區(qū)分 p161 (1)放射免疫分析(
5、ria):標記抗原與非標記抗原對特異性抗體的競爭,待測的抗原量與結合的標記抗原-抗體復合物呈反比,與游離的標記抗原呈正比。 (2)免疫放射分析(irma):非競爭性免疫結合反應。過量的標記抗體與待測抗原反應,充分反應后去除游離的標記抗體,抗原-標記抗體復合物的放射強度與待測抗原量呈正比。 (3)比較 32、試述 i 型超敏反應皮膚試驗與 iv 型超敏反應皮膚試驗的原理 p252 (1)i 型超敏反應皮膚試驗: 原理:當變應原通過皮膚挑刺、劃痕、皮內注射等方法進人致敏者皮膚,與吸附在肥大細胞和嗜堿性粒細胞表面的特異性 ige 結合,導致肥大細胞或嗜堿性粒細胞脫顆粒,釋放生物活性介質。在 2030
6、 分鐘內局部皮膚消失紅暈、紅斑、風團及瘙癢感,數(shù)小時后消逝。 應用:查找過敏原,預防藥物或疫苗過敏 (2)v 型超敏反應皮膚試驗 原理:用皮內注射、皮膚班貼等方法使變應原進入已致敏機體,體內致敏 t 細胞再次接觸相同變應原后,釋放多種細胞因子,造成局部以單核細胞和淋巴細胞浸潤為主的炎癥反應。4872 小時內局部消失紅腫、硬結或水皰。 應用:查找過敏原,推斷變應原是否引起機體 v 型超敏反應或機體的細胞免疫功能狀態(tài)。 2021 年 年 10 月 免疫 27、簡述補體結合試驗(cft)的主要成分及檢測原理 p115 (1)主要成分有 5 種。已知抗原(或抗體)、待測抗體(或抗原)、補體系統(tǒng)、綿羊紅
7、細胞、相應抗體 (2)原理 直接補體結合試驗:若反應系統(tǒng)中抗原與抗體特異結合,形成的抗原抗體復合物能將同時加人的補體激活,消耗掉補體。當再加入指示系統(tǒng)時,反應液中已無游離補體,不消失溶血,為補體結合試驗陽性,待檢標本中含有已知抗原(或抗體)相應抗體(或抗原)。反之,為補體結合試驗陰性。 間接補體結合試驗:某些禽類抗血清或某些疾病患者血清中常含有所謂抑制性抗體,當其與相應抗原特異結合后,既不能結合補體,還能阻擋抗原與隨后加入的抗體結合,故不能發(fā)生補體激活反應,反應液中仍有游離補體存在。此時加入指示系統(tǒng)會消失溶血反應,為補體結合試驗陽性。 28、簡述細胞因子的檢測方法及特點。 p213 (1)細胞
8、因子:是由活化免疫細胞和某些基質細胞分泌的,能介導和調整免疫反應、炎癥反應的小分子多肽 (2)生物學測定法:是檢測細胞因子某種特定的生物學活性,而無生物活性的細胞因子前體分子、降解產物、聚合物以及與蛋白質或可溶性受體結合的細胞因子均不能用此法檢出。 (3)免疫學測定法:是用免疫學檢測技術,如酶聯(lián)免疫吸附試驗、放射免疫分析、酶聯(lián)免疫斑點試驗和免疫印跡等,將細胞因子作為蛋白質抗原,用相應的特異性抗體進行測定;此法所測定的是細胞因子的蛋白含量,與其生物活性并不肯定成正比。 (4)分子生物學測定法:是采納分子生物學技術,檢測細胞因子相應的 dna、rna,反映的是細胞因子基因及其表達狀況。 29、簡述
9、 elisa 雙抗體夾心法"一步法'的原理及優(yōu)點 p121 (1)原理:在雙抗體夾心法檢測抗原時,采納針對抗原分子兩個不同抗原打算族的單克隆抗體分別作為固相抗體和原標抗體??蓪⒋郎y樣品與酶標抗體并為一步加入。 (2)優(yōu)點:使用高親和力的單克隆抗體,雙位點一步法不但操作簡潔、時間縮短,而且敏感性和特異性也得到顯著提高。 (3)特點:單克隆抗體分別作為固定抗體和酶標抗體;采納高親和力單抗可提高測定的敏感性和特異性;標本中抗原過量時會消失鉤狀效應。 30、試分析由于檢測試劑因素引起免疫濁度法檢測結果假性上升的緣由 p95 抗體效價低于 1:20 會增加偽濁度 抗血清滅活處理 抗血清
10、含有交叉反應性抗體 peg 濃度過高引起血清中雜蛋白的非特異性共沉 試劑污染(如細菌、塵埃等)和變質 31、患者小紅近來早晨消失"打噴嚏、流鼻涕、流眼淚'等癥狀最初賜予感冒藥治療半個 月無效,反而時不時還伴有晚間咳嗽或氣緊,讓小紅迮覺也睡擔心穩(wěn)了。隨后又按氣管炎 用抗生素進行治療,治療 6 個多月末見好轉。隨后進入另一家醫(yī)院做了一些檢測項目,結 果見下: (1)請依據(jù)以上臨床表現(xiàn)及試驗室檢測結果分析該患者可能患何疾病? ige 明顯上升,懷疑超敏反應 (2)假如要進一步確定該疾病病因,你建議患者做哪些檢測? p243 2021 年 年 10 月 免疫 28、簡述細胞因子的概念
11、及其檢測方法 p213 (1)細胞因子:是由活化免疫細胞和某些基質細胞分泌得而,能介導和調整免疫反應、炎癥反應的小分子多肽。 (2)檢測方法分為三大類: 生物學測定法:是檢測細胞因子某種特定的生物學活性,而無生物活性的細胞因子前體分子、降解產物、聚合物以及與蛋白質或可路性受體結合的細胞因子均不能用此法檢出 免疫學測定法:將細胞因子作為蛋白質抗原,用相應的特異性抗體進行測定。此法所測定的是細胞因子的蛋白含量,與其生物活性并不肯定成正比; 分子生物學測定法是采納分子生物學技術,檢測細胞因子相應的 dna 、rna,反映的是細跑因子基因及其表達狀況。 29、簡述帶現(xiàn)象及其在免疫學檢測中的意義 p21
12、 (1)帶現(xiàn)象:抗原抗體分子比例最合適的范圍,稱為抗原抗體反應的等價帶。在等價帶前后分別為抗體過?;蚩乖^剩,形成的沉淀物少或無,這種現(xiàn)象在免疫測定中稱為帶現(xiàn)象。 (2)意義:消失抗體過量時,稱為前帶。消失抗原過量時,稱為后帶。 30、簡述免疫佐劑的概念及在抗血清制備中應用免疫佐劑的目的 p68 (1)同抗原一起或預先注射到機體內,能增加機體對該抗原的免疫應答或轉變免疫應答類型的非特異性免疫增加性物質,稱為免疫佐劑。 (2)目的:是為了提高抗原的免疫原性,從而增加體液免疫和細胞免疫的水平.獲得高效價抗體。 31、簡述直接熒光顯微技術的原理及評價 p144 (1)熒光顯微技術是通過觀看固定標本上
13、熒光抗體的染色結果,進行抗原的鑒定和定位。 (2)其基本過程是:在標本切片上滴加抗體試劑,使熒光抗體與標本切片中組織或細胞表面的抗原進行結合反應,洗滌除去游離的熒光抗體后,置熒光顯微鏡下觀看熒光現(xiàn)象,在黑暗背景上可見光明的特異熒光。 (3)評價: 熒光顯微鏡所用光源的波長比傳統(tǒng)顯微鏡光源的波長短 1/2,因此熒光顯微鏡的辨別力量超出了傳統(tǒng)顯微鏡的辨別率的極限 熒光顯微鏡技術具有高度靈敏性和專一性。它所用染料的量是極其微小的,只相當于傳統(tǒng)顯微技術中染料消耗量的幾千分之一. 熒光顯微鏡能夠直接顯示細胞內的生物化學成分,并且顯示的彩色效果很光明,極易觀看,極易進行定量分析,而且能以極低濃度的染料檢測
14、出含量極微的物質. 隨著新的熒光染料的創(chuàng)造,可不斷擴大被測物質的范圍. 32、某試驗室購買 elisa 試劑盒進行乙肝三對檢測 (1)乙肝三對包括哪幾個項目? 乙肝表面抗原、乙肝表面抗體、乙肝 e 抗原、乙肝 e 抗體、乙肝核心抗體 (2)每個項目的檢測采納哪種反應類型? 乙肝表面抗原:雙抗體夾心法 乙肝表面抗體:雙抗原夾心法 乙肝 e 抗原:雙抗體夾心法 乙肝 e 抗體:競爭抑制法 乙肝核心抗體:競爭抑制法 2021 年 年 10 月 免疫 27、簡述免疫電泳的原理及用途 【先電泳后集中】p89 (1)定義:將蛋白質區(qū)帶電泳和雙向免疫集中相結合的免疫化學分析技術 (2)原理:先利用區(qū)帶電泳將
15、樣品中不同的抗原蛋白質分子在瓊脂凝膠內分別成若干區(qū)帶,然后與電泳方向平行挖一小槽,加入相應抗血清,與已分別的抗原在瓊脂凝膠內作雙向免疫集中,各種抗原與抗體特異結合,在二者比例合適處形成弧形沉淀線。依據(jù)沉淀弧得而數(shù)量、形態(tài)、位置,對比已知標準抗原、抗體生成的,分析樣品中所含抗原成分及其性質。 28、簡述免疫放射分析的優(yōu)點 p170 免疫放射分析(irma):非競爭性免疫結合反應。過量的標記抗體與待測抗原反應,充分反應后去除游離的標記抗體,抗原-標記抗體復合物的放射強度與待測抗原量呈正比。 (1)敏感度高:抗體分子含酪氨酸多,可以結合多個放射性碘原子;非競爭性免疫結合,抗體過量能與微少抗原充分結合
16、。 (2)特異性高:要求待測物必需具有兩個結合位點,才能形成有效的雙抗體夾心復合物,交叉反應低。 (3)標記物穩(wěn)定,標記簡單 (4)檢測范圍較寬:抗體量大,能結合較多的抗原 (5)穩(wěn)定性好:因標記抗體和固相抗體均屬過量,不易受外界環(huán)境的影響;也不易受試驗操作的影響 29、hat 培育基中英文 h、a 和 t 分別代表什么物質及其作用 p72 【hat 培育基:骨髓瘤細胞是一種缺陷型細胞,在 hat 培育基上無法生長,所以骨髓瘤細胞之間形成的融合細胞也不能在該培育基上存活;脾細胞和脾細胞自身融合的細胞能在 hat培育基上正常生活,但不能增殖,所以經過數(shù)代后,hat 培育基上沒有脾細胞和脾細胞自身
17、融合的細胞;骨髓瘤細胞與脾細胞之間形成的融合細胞能在 hat 培育基上正常生活,并無限增殖?!?hat (hhypoxanthine 次黃嘌呤,aaminopterin 氨基喋呤,tthymidine 胸腺嘧啶核苷) (1)氨基蝶吟(a)為葉酸拮抗物,用以阻斷細胞合成 dna 的主要途徑 (2)次黃嘌呤(h)和胸腺嘧啶核苷(t)供應核苷酸合成的前體,使細胞能通過替代途徑合成dna。 30、時間辨別熒光免疫測定法具有較高的靈敏性和特異性,試分析其標記物-鑭系元素的熒光特點 p156 以鑭系元素鎮(zhèn)(eu)鰲合劑作熒光標記物,利用其長熒光壽命的特點,延長熒光測量時間,待短壽命的自然本底熒光完全衰退后
18、再行測定,所得信號完全為長壽命鑭系螯合物的熒光,從而有效地消退非特異性本底熒光的干擾。 31、試述 i 型超敏反應的發(fā)病機理及其主要的試驗室檢測方法 p243 (1)發(fā)病機理: 致敏階段:變應原進入機體,激活 cd4+th2 細胞和特異 b 細胞,誘導產生特異性 ige 抗體。ige 抗體吸附于肥大細胞和嗜堿性粒細胞表面,使機體處于致敏狀態(tài)。 發(fā)敏階段:已致敏機體再次遇到相同變應原而發(fā)生超敏反應的過程。 (2)試驗室檢測方法i 型超敏反應皮膚試驗: 原理:當變應原通過皮膚挑刺、劃痕、皮內注射等方法進人致敏者皮膚,與吸附在肥大細胞和嗜堿性粒細胞表面的特異性 ige 結合,導致肥大細胞或嗜堿性粒細
19、胞脫顆粒,釋放生物 活性介質。在 2030 分鐘內局部皮膚消失紅暈、紅斑、風團及瘙癢感,數(shù)小時后消逝。 應用:查找過敏原,預防藥物或疫苗過敏 2021 年 年 10 月 免疫 27、簡述捕獲法 elisa 的檢測原理及應用 p122-123 (1)原理:將血清中全部的 igm(特異性或非特異性)捕獲固定在固相上,去除 igg 后,再測定特異性 igm (2)應用:用于檢測特異性的 igm 抗體 28、試分析皮膚試驗消失假陽性的常見緣由 p254 (1)試驗溶液配置不當,過酸或過堿都會對皮膚產生非特異性刺激; (2)被試者皮膚反應性過強,如有皮膚劃痕癥; (3)試驗抗原變質或試驗抗原不純; (4)濃度過大 29、以檢測尿液 hcg 為例,說明間接凝集抑制試驗的檢測原理及結果推斷 p101 (1)間接凝集抑制試驗:是指已知抗原致敏的顆粒載體及相應的抗體為診斷試劑,檢測標本中是否存在與致敏抗原相同的抗原。 (2)不發(fā)生凝集者表明待測樣品中含有相應抗原(或抗體)為陽性;發(fā)生凝集者說明樣品中無相應抗原(或抗體),為陰性。 30、為保證酶免檢測結果的牢靠性,在采集及保存樣本時應留意
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