用高效液相滲透凝膠色譜法法分析動物皮膚和兔關節(jié)液中透明質酸

1、文獻1:ANALYSIS BY HIGH-PERFORMANCE GEL PERMEATION CHROMATOGRAPHYOF HYALURONIC ACID IN ANIMAL SKINS AND RABBIT SYNOVIAL FLUID用高效液相滲透凝膠色譜法法分析動物皮膚和兔關節(jié)液中透明質酸文獻來源:正式出版物Journal of Chromatography A Volume 435, 1988,Pages 335342文獻摘要:作者描述了用兩根色譜柱同時測定生物樣品中透明質酸的濃度和分子量。作者在開頭的介紹中這樣說:我們曾經(jīng)用Shodex OHpak B-806成功把HA跟其他多

2、糖分離,并且測定了它的分子量。但是,要測定HA的濃度需要HA跟其他物質完全分離,因此我們用兩根柱子(Shodex OHpak 和B-806 and B-805合用來達到更高的分離度和覆蓋不同的分子量范圍。色譜條件equipped with two Shodex OHpak columns (Showa Denko, Tokyo,Japan, B-806 and B-805 (50 cm x 8 mm I.D., a guard column of Shodex OHpak800P (50 mm x 6 mm I.D. The eluent was 0.02 M sodium chloride,

3、The flow-rate was 0.5 ml/min.對照品作者自制不同分子量的HA(過特定的柱子或者透析,HA的濃度是作者用咔唑法測糖醛酸的方法測定。標準曲線的制備作者用不同分子量的自制HA做曲線,結果如下: 1:DNA,M=3千1百萬;2 :純化的HA,M=1百萬;3:純化的HA,M=61萬;4:純化的HA,M=33.5萬;5:純化的HA,M=25.7萬;結果表明:在分子量60萬和20萬之間是成線性關系的;作者同時進了Pullulan (GPC葡聚糖標準品,結果發(fā)現(xiàn)用上述曲線測出來的Pullulan分子量跟實際的分子量有差別,說明HA的標準曲線應該用HA標準品校正。結論這個結果證明了可

4、用此方法同時測定生物樣品中HA的分子量和濃度。然而,此色譜技術對于大于1百萬分子量的HA卻不能提供精確的分子量。文獻2 Analysis of Over 15 Million Dalton Polymers by Aqueous SEC Method用水性凝膠滲透色譜法分析超過1500萬分子量的多聚體文獻來源:SHODEX公司網(wǎng)站下載文獻摘要:這篇文章主要是SHODEX公司介紹用Shodex OHpak SB-807 HQ色譜柱來分析高分子量HA(大于100萬,主要介紹了兩個試驗:一.分別用SB-807柱子和SB-806柱子分析了Mw=550萬的HA,結果如下(綠色曲線為806,紅色為807: 結果:用806峰形不對稱(拖尾,作者分析原因為HA超出了806的排阻限度,高分子量的HA在同一時間流出的結果;807峰形對稱,可以準確的表示出樣品的分子量分布,同時,807的大顆粒可以保護潛在的剪切降解。二.用SB-807分