瘧原蟲形態(tài)武漢市疾病預(yù)防控制中心吳凱

1、瘧原蟲形態(tài)瘧原蟲形態(tài)l戰(zhàn)爭？l自然災(zāi)害？l疫??？l瘧疾影響人類歷史！nothing and no one nothing and no one takes as many lives takes as many lives as malaria.as malaria.一、基本知識(shí)一、基本知識(shí)l瘧疾：是由瘧原蟲經(jīng)按蚊叮咬傳播的傳染病。臨床上以周期性、定時(shí)性發(fā)作的寒戰(zhàn)、高熱、出汗退熱，以及貧血和脾大為特點(diǎn)。是地球上發(fā)生最頻繁的寄生蟲病。被攜帶有瘧原蟲的雌性按蚊叮咬 914 天后，瘧疾的癥狀便開始出現(xiàn)，因瘧原蟲種類不同，出現(xiàn)的天數(shù)及癥狀會(huì)有所不同。l瘧原蟲的發(fā)現(xiàn)： 1880年11月6日法國人char

2、les louis alphonse laveran發(fā)現(xiàn)瘧原蟲，因此獲得1907年nobel prize。 1899年英國人ronald ross 證實(shí)蚊子是瘧疾的傳播媒介，因此獲得1902年nobel prize。l寄生宿主：在脊椎動(dòng)物（人、猴、鼠、雞）和昆蟲體內(nèi)寄生（按蚊）。2個(gè)宿主（人是中間宿主，蚊是終末宿主），4個(gè)期（人體內(nèi)：紅外期、紅內(nèi)期；蚊體內(nèi)： 配子生殖期、孢子增殖期），間日瘧和卵型瘧的紅外期（肝內(nèi)期）有休眠體。l再燃與復(fù)發(fā)：患者經(jīng)過治療后癥狀消失，體內(nèi)尚存少量紅內(nèi)期瘧原蟲，在無新感染且條件適宜時(shí)，殘存瘧原蟲大量增殖，超過發(fā)熱閾值，出現(xiàn)瘧疾發(fā)作稱為復(fù)燃?；颊呓?jīng)過治療后癥狀消失，外

3、周血無瘧原蟲，在無新感染情況下，經(jīng)過一段潛隱期后，由肝中遲發(fā)型孢子引起瘧疾發(fā)作稱為復(fù)發(fā)。l臨床初診為瘧疾病人、疑似瘧疾病人、不明原因發(fā)熱者作為“三熱”病人列為血檢對象。二、人瘧原蟲種類及世界分布二、人瘧原蟲種類及世界分布l惡性瘧原蟲 （plasmodium falciparum，p.f.） l間日瘧原蟲（plasmodium vivax，p.v.）l三日瘧原蟲（plasmodium malariae，p.m.）l卵形瘧原蟲 （plasmodium ovale，p.o.）對外援助對外援助三、武漢市瘧防情況三、武漢市瘧防情況l 輸入性瘧疾。l 發(fā)病率低。l 惡性瘧多。l 危險(xiǎn)性高。l 鏡檢水平參差

4、不齊。20052006200720082009201020112012201305101520253035404550 本 地 輸入性瘧疾病人數(shù)年 份四、生活史四、生活史l某病例于2012年10月15日回國，回國后及時(shí)開展了抗瘧預(yù)防性服藥，2013年1月6日，該病例再次出現(xiàn)瘧疾臨床癥狀，翌日經(jīng)血檢為瘧原蟲陽性。問：該病例可能感染了哪種瘧原蟲？l目前，瘧原蟲抗原快速診斷試劑（rdt）只能檢測出惡性瘧和間日瘧，該病例rdt測試為陰性。問：該病例感染的為哪種瘧原蟲？五、瘧原蟲形態(tài)五、瘧原蟲形態(tài)l鏡檢鏡檢、瘧原蟲抗原快速診斷試劑（rdt）、分子生物學(xué)。l鑒別三要素：核、胞漿和色素。l經(jīng)吉氏、瑞氏或劉氏

5、染色一般：核核呈鮮紅色或紫紅色，胞漿胞漿呈蘭色，色素色素呈黃褐色或深褐色。l染色質(zhì)量對鏡檢影響大。間日瘧（間日瘧（p.v.）薄血膜形態(tài)）薄血膜形態(tài)l環(huán)狀體（早期/小滋養(yǎng)體）：胞質(zhì)環(huán)狀、藍(lán)色。細(xì)胞核一個(gè)，紅色。l滋養(yǎng)體：胞核增大，胞質(zhì)增多。偽足、瘧色素（棕黃色）、薛氏小點(diǎn)（淡黃色）、被寄生rbc脹大。l裂殖體：核分裂、胞質(zhì)也分裂，形成裂殖子。瘧色素成堆。被寄生rbc脹大明顯。l配子體：圓形或橢圓形，瘧色素分散，核增大，一個(gè)。胞質(zhì)占滿脹大rbc。大（）配子體胞漿深蘭色，核偏于一邊，核周可見明顯不染色帶；?。ǎ┡渥芋w胞漿淺蘭色，核較疏松，常位于中央。惡性瘧（惡性瘧（p.f.）薄血膜形態(tài)）薄血膜形態(tài)l

6、環(huán)狀體：rbc大小正常，顏色較深；核一個(gè)或二個(gè)；環(huán)小，纖細(xì)，約為紅細(xì)胞直徑1/51/6，時(shí)常位于紅細(xì)胞的邊緣。常見多個(gè)同寄生一紅細(xì)胞現(xiàn)象。l滋養(yǎng)體：rbc大小正常，顏色較深，可出現(xiàn)較粗、大小不一、分布不勻、數(shù)目較少，紅色茂氏小點(diǎn)；核一個(gè)；環(huán)較小，圓形，堅(jiān)實(shí)，體積小；出現(xiàn)較細(xì)的黑褐色顆粒色素，常集成塊。原蟲此時(shí)開始集中在內(nèi)臟原蟲此時(shí)開始集中在內(nèi)臟毛細(xì)血管毛細(xì)血管。l裂殖體：rbc大小正常，顏色較深，可見茂氏小點(diǎn)；裂殖子836個(gè)，平均1824個(gè)，排列不規(guī)則或呈二重排列；色素黑褐色，集中于中央或一側(cè)。l配殖體：新月型（）或臘腸型（）；核一個(gè)，位于細(xì)胞中央；黑褐色色素分布于核周圍。間日瘧與惡性瘧原蟲薄

7、血膜形態(tài)比較間日瘧與惡性瘧原蟲薄血膜形態(tài)比較被寄生被寄生rbcl間日瘧：常脹大，多形，色淺，薛氏點(diǎn)鮮紅色，細(xì)小，數(shù)多。l惡性瘧：大小正常，色稍紫；茂氏點(diǎn)紫紅色，粗大，數(shù)少。環(huán)狀體（小滋養(yǎng)體）環(huán)狀體（小滋養(yǎng)體）l間日瘧：胞漿肥厚，環(huán)較大，核1個(gè),占rbc直徑1/3，常見1個(gè)原蟲。 l惡性瘧：環(huán)纖細(xì)，核1個(gè)或2個(gè)，占rbc直徑1/5至1/6，常見2個(gè)或多個(gè)原蟲。大滋養(yǎng)體大滋養(yǎng)體l間日瘧：蟲體不規(guī)則，較大；阿米巴樣空泡明顯；瘧色素細(xì)小，黃褐色。l惡性瘧：外周血難查見。蟲體小，圓形；空泡小；早期瘧色素細(xì)小，金黃色，晚期結(jié)成塊狀，黑褐色。裂殖體裂殖體l間日瘧：被寄生rbc大于正常紅細(xì)胞；裂殖子1224個(gè)

8、，通常16個(gè)，排列不規(guī)則；瘧色素常集于一側(cè)，黃褐色。l惡性瘧：外周血難查見。被寄生rbc小于正常紅細(xì)胞；裂殖子較小，826個(gè)，排列不規(guī)則；瘧色素成團(tuán)快狀，黑褐色。配殖體配殖體l間日瘧：圓形核1個(gè)，充滿脹大rbc。瘧色分散。l惡性瘧：臘腸形或新月形，核1個(gè)。瘧色素分散 。三日瘧原蟲薄血膜形態(tài)三日瘧原蟲薄血膜形態(tài)l被寄生rbc正?；蚩s小，有細(xì)小的齊氏點(diǎn)，淡紅色。l小滋養(yǎng)體蟲體中等，核1個(gè)，胞漿較粗厚，偶見細(xì)小褐色色素顆粒。l大滋養(yǎng)體蟲體較小，核1個(gè)，胞漿帶狀，空泡不顯著，色素顆粒深褐色，粗大，沿邊緣分布。l裂殖體寄生的rbc縮小，裂殖子612個(gè)，常為8個(gè)，常圍繞聚集在中央深褐色色素顆粒排列成菊花、

9、梅花狀。l配殖體寄生的rbc縮小，配殖體呈圓形，核1個(gè)，色素顆粒深褐色，類似間日瘧配殖體形態(tài)。卵形瘧原蟲薄血膜形態(tài)卵形瘧原蟲薄血膜形態(tài)l被寄生rbc正常或脹大，卵圓形或邊緣呈傘矢狀，細(xì)胞褪色，薛氏點(diǎn)粗大較多。l小滋養(yǎng)體蟲體中等，核1個(gè)，胞漿粗厚，無色素。l大滋養(yǎng)體蟲體較小，核1個(gè)，胞漿圓形，空泡不顯著，色素顆粒棕黃色，較粗大。l裂殖體寄生的rbc縮小，裂殖子612個(gè)，常為8個(gè)，排列不規(guī)則，裂殖子較大，色素顆粒棕黃色，聚集中央或細(xì)胞一側(cè)。l配殖體寄生的rbc縮小，常有鋸齒狀邊緣，配殖體呈圓形，核1個(gè)，色素顆粒棕黃色，與間日瘧相似。諾氏瘧原蟲諾氏瘧原蟲l人感染諾氏瘧原蟲主要在東南亞地區(qū)被報(bào)道。l灰

10、色區(qū)域顯示諾氏瘧原蟲主要傳播媒介白踝按蚊的地理分布。l數(shù)字代表人感染諾氏瘧原蟲的病人數(shù)，包括本地病例和在該地區(qū)有居住旅行史的病例。 l諾氏瘧原蟲是主要長尾猴和短尾猴中傳染的猴瘧原蟲，現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)也可以通過按蚊造成猴與人、人與人和人與猴之間的傳染。l諾氏瘧原蟲發(fā)育周期為24h，被感染病人血內(nèi)容易出現(xiàn)高原蟲血癥及臨床癥狀加重而出現(xiàn)危險(xiǎn)。諾氏瘧原蟲高原蟲血癥諾氏瘧原蟲形態(tài)與惡性瘧、三日瘧原蟲相似諾氏瘧原蟲形態(tài)與惡性瘧、三日瘧原蟲相似l經(jīng)吉姆薩染色后諾氏瘧原蟲形態(tài)：被感染的紅細(xì)胞不脹大，細(xì)胞褪色，瘧色素明顯。l紅細(xì)胞瘧原蟲感染率較高，一般各期可見 ，小滋養(yǎng)體與惡性瘧原蟲環(huán)狀體相似，有雙核、3核，1個(gè)紅細(xì)胞

11、有3個(gè)、4個(gè)瘧原蟲同時(shí)感染的情況，在被感染紅細(xì)胞邊緣也可見瘧原蟲寄生。l多數(shù)晚期滋養(yǎng)體呈阿米巴樣，有些晚期滋養(yǎng)體小于紅細(xì)胞體積的2/3，胞漿致密不變形。也有多數(shù)晚期滋養(yǎng)體有形成帶狀的趨勢，接近三日瘧原蟲的“帶狀” 晚期滋養(yǎng)體。l瘧原蟲的成熟裂殖體中央通常聚集著816個(gè)裂殖子，裂殖體不完全占滿整個(gè)紅細(xì)胞。l晚期滋養(yǎng)體和裂殖體中有濃密的褐色瘧色素。l瘧原蟲配子體充滿了紅細(xì)胞的絕大部分或者完全充滿，形態(tài)同間日瘧原蟲，但略小。l引用自：朱淮民 ，李軍，鄭徽。諾氏瘧原蟲的人體自然感染j，中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志，2006, 24（6）：70-71.諾氏瘧原蟲諾氏瘧原蟲l(a, b) 小滋養(yǎng)體l(c)

12、成熟滋養(yǎng)體l(d) 帶狀滋養(yǎng)體l(e, f, g) 裂殖體l(h) 裂殖子l(i) 配殖體厚血膜形態(tài)厚血膜形態(tài)l厚血膜的鏡檢受到很多因素的影響，如：厚血膜層次多、背景深、透光差，蟲體收縮，瘧原蟲的形態(tài)結(jié)構(gòu)遠(yuǎn)不如薄血膜上清晰典型；厚血膜中紅細(xì)胞重疊和橫豎交替，使瘧原蟲體態(tài)各不相同，并且還會(huì)出現(xiàn)折皺疊加的現(xiàn)象；血片制作、染色過程中亦會(huì)使原蟲皺縮變形和腐蝕破損，厚血膜中原蟲的形態(tài)與薄血膜相比，差異很大，識(shí)別較難；染色過程中血紅蛋白溶解，紅細(xì)胞消失而不能像薄血膜那樣可以借助紅細(xì)胞特有的改變和瘧原蟲在紅細(xì)胞內(nèi)的特點(diǎn)進(jìn)行識(shí)別；厚血膜上還常混雜一些與原蟲較易混淆的染液殘?jiān)?、血小板和血?xì)胞碎片，更增加了鑒別的

13、困難。l在厚血膜中，各期瘧原蟲的體積都略為縮小，其中只有大、小滋養(yǎng)體的形態(tài)有較大改變，而裂殖體和配子體的形態(tài)則無明顯變化。l小滋養(yǎng)體：胞漿呈環(huán)狀或向核的一側(cè)或兩側(cè)收縮，使環(huán)的中間斷裂，或圍繞核。間日瘧原蟲的環(huán)較大，常呈分號(hào)“；”和感嘆號(hào)“！”狀；而惡性瘧原蟲的環(huán)纖細(xì)，常呈冒號(hào)“：”、飛鳥“.”、v狀和斷環(huán)狀。惡性瘧環(huán)狀體在發(fā)育不同階段，其個(gè)體大小有很大變化。注意粗環(huán)與間日瘧環(huán)狀體的區(qū)別。l大滋養(yǎng)體：間日瘧大滋養(yǎng)體體呈阿米巴樣運(yùn)動(dòng)，胞漿常斷裂幾塊或縮成圓形，核和瘧色素均被包在胞漿之中，著色深，只隱約可見紅色的核和黃綠色的瘧色素。胞漿可皺縮斷裂成幾個(gè)塊狀，大小不一，似互不連接。核位于胞漿之中或外邊

14、。瘧色素分布不均勻。有些僅見胞漿和瘧色素而核看不清楚。惡性瘧原蟲大滋養(yǎng)體，與薄血膜形態(tài)相似，常呈圓形，體小結(jié)實(shí)，瘧色素細(xì)小，金黃色，結(jié)成塊狀后，呈黑褐色。 厚血膜惡性瘧環(huán)狀體特點(diǎn)：“滿天星”，“！”狀等。厚血膜惡性瘧配殖體與薄血膜形態(tài)差別不大。厚血膜間日瘧滋養(yǎng)體，胞漿連續(xù)或斷開，有或沒有紅細(xì)胞影子。厚血膜間日瘧裂殖體與薄血膜形態(tài)差別不大。惡性瘧原蟲環(huán)狀體、大滋養(yǎng)體裂殖體、配殖體厚、薄血膜涂片的優(yōu)缺點(diǎn)厚、薄血膜涂片的優(yōu)缺點(diǎn)l薄血膜：瘧原蟲形態(tài)典型，易辨認(rèn)，較易鑒別種類，原蟲分散難于發(fā)現(xiàn)，檢查效率低，費(fèi)時(shí)間。l厚血膜：血量多，面積小，瘧原蟲檢出率高，瘧原蟲容易發(fā)現(xiàn)，省時(shí)間，但瘧原蟲形態(tài)改變 ，紅細(xì)

15、胞輪廓消失，不易辨認(rèn)，鑒別原蟲困難 ?；旎旌虾闲托透懈腥救炯先旧Ч幒蟑懺x形態(tài)服藥后瘧原蟲形態(tài)l抗瘧藥物可以使瘧原蟲的形態(tài)發(fā)生各種變化。同一類型的藥物對瘧原蟲的形態(tài)引起的變化大致相同。l一般說，藥物作用對大、小滋養(yǎng)體和裂殖體前期的形態(tài)變化較大，配子體的形態(tài)變化較小，最明顯的變化有外觀破碎、色素早期凝集和裂殖體縮小等，如核疏松，核著色深，胞漿稀少或破碎，色素凝結(jié)，成粗大顆粒，裂殖體核常裂成碎塊，大小不一等。瘧原蟲與其它物體的鑒別瘧原蟲與其它物體的鑒別 l厚血膜可因染液的酸堿度影響，或只看到小滋養(yǎng)體的核、或只看到瘧色素、或者只見胞漿斷裂的殘塊。這樣，它與涂片和染色過程所沾污的雜質(zhì)包括來自空

16、氣的灰塵、真菌、孢子，來自取血時(shí)沾污的污垢、細(xì)菌，染料殘?jiān)准?xì)胞裂后散出之顆粒，碎片，網(wǎng)狀紅細(xì)胞的殘骸中等，皆易混淆，血小板等誤為瘧原蟲。l疑似瘧色素：血膜上的染料殘?jiān)盎覊m，有時(shí)可誤為瘧色素，此時(shí)可依據(jù)其顆粒大小，色澤及分布范圍加以區(qū)別。轉(zhuǎn)動(dòng)微螺旋時(shí)，可見它浮于紅細(xì)胞之上，與原蟲不在一平面上。l疑似瘧原蟲核：細(xì)菌尤其是球菌或白細(xì)胞破裂后散出的顆粒，皆為紅色小點(diǎn)，與瘧原蟲的核相似，最易混淆。但球菌形體較大，邊線光滑，常見許多個(gè)聚集一處，分布廣。中性和酸性白細(xì)胞的顆粒，著色較淡，邊緣整齊，附近常有白細(xì)胞的碎屑。l疑似瘧原蟲胞漿：網(wǎng)狀紅細(xì)胞殘骸和白細(xì)胞殘骸通常為蘭色，與瘧原蟲的胞漿相似，有時(shí)因與

17、上述紅點(diǎn)巧合一起，而容易誤為瘧原蟲。鑒別時(shí)如形同大滋養(yǎng)體，可依據(jù)瘧色素的特點(diǎn)加以區(qū)別；如形同小滋養(yǎng)體，可依據(jù)蟲體大小、折光是否均勻以及核與胞漿是否在一個(gè)平面上加以區(qū)別。六、血液細(xì)胞六、血液細(xì)胞 l嗜中性粒細(xì)胞：是白細(xì)胞中數(shù)量最多的，約占全部白細(xì)胞的53左右，呈圓形，胞質(zhì)淡紅色，內(nèi)含有多量的紫紅色微粒（不易看清）。胞核隨細(xì)胞成熟的程度而不同，幼稚型的呈桿狀或馬蹄形，成熟的呈分葉狀，三葉的較多見，老齡的有89葉或更多。l嗜酸性粒細(xì)胞：細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含深紅色大型顆粒，顆粒內(nèi)含有過氧化物酶和酸性磷酸酶。其細(xì)胞核的形狀與嗜中性白細(xì)胞相似，通常有23葉，約占白細(xì)胞總數(shù)的4。l嗜堿性粒細(xì)胞：數(shù)量很少，約占0.6，