蛋白酶磷酸酶抑制劑

1、來源：原創(chuàng)，轉(zhuǎn)載請注明發(fā)布時間：2009-10-20查看次數(shù)：21在與蛋白相關(guān)的檢測中，首先最關(guān)鍵的一步便是蛋白質(zhì)的提取。蛋白質(zhì)的提取過程中,PMSF Leupeptin 亮肽素，Aprotini我們要經(jīng)常加和蛋白酶抑制劑以防止蛋白質(zhì)的降解。另外在磷酸化蛋白的研究過程中，磷酸酶 抑制劑也是必不可少的，本文總結(jié)了常用的蛋白酶抑制劑n抑肽酶，Pep stat in 胃蛋白酶抑制劑，EDTA-Na2等以及磷酸酶抑制劑 NaF氟化鈉，Na3VO4原磯酸鈉，BETA-glycerophosphate甘油磷酸鈉，Na2P2O4焦磷酸鈉等。對這些蛋白酶抑制劑的 溶解配制，貯存液與工作液濃度，保存都做了詳細的

2、說明。蛋白酶抑制劑P MSF特性：絲氨酸蛋白酶抑制劑，如 胰凝乳蛋白酶，胰蛋白酶和凝血酶， 也抑制半胱 氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶（可逆的地面處理）。溶解性：溶于異丙醇，乙醇，甲醇和丙二醇果10mg/ml。在水溶液中不穩(wěn)定。在100%異丙醇，+25 C時穩(wěn)定至少9個月分子量: 使用：貯存濃度：200mM工作濃度：1mMLeupeptin 亮肽素 特性：抑制絲氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶，木瓜蛋白酶，纖溶酶，和組織 蛋白酶B 溶解性：高度溶于水（1mg/ml）。4C 一周穩(wěn)定,分成小份冷凍在-20 C至少6個分子量：C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4:C20H38N6O4 x 1/2 H

3、2SO4 x H2O:使用：貯存濃度：1mg/ml，工作濃度ug/ml （1mM）Ap roti nin 抑肽酶特性：絲氨酸蛋白酶抑制劑，抑制纖維蛋白溶酶,激肽釋放酶，胰蛋白酶，糜蛋白酶的高活性。不抑制凝血酶或因子 X。溶解性：易溶于水（10mg/ml ）或緩沖液（例如,tris ,）。pH 約 7-8 的溶液在4C可保存1周，分裝保存在-20 C可至少保存6個月。避免反復(fù)凍融,pH的堿性環(huán)境可使其滅活。分子量：6,512 使用：貯存濃度:1mg/ml,工作濃度：-ug/ml - uM）Pep stat in胃蛋白酶抑制劑特性：抑制天冬氨酸（酸）蛋白酶如胃蛋白酶，腎素，組織蛋白酶D,凝乳酶,許

4、多微生物酸性蛋白酶 溶解性：溶于甲醇約1mg/ml；可溶于乙醇，過夜溶解可達到 1 mg/ml ；在6當 量乙酸中溶解度為300ug/ml。4C穩(wěn)定一周，分裝儲存于-20 C時可保存1個月分子量:使用：貯存濃度：1mg/ml，使用濃度：卩g/ml（1卩M）EDTA-Na2特性：金屬蛋白酶抑制劑 溶解性：溶于水至，在PH8-9的條件下，4 C穩(wěn)定至少6個月分子量: 使用：工作濃度：-mg/ml - mM）,不需現(xiàn)用現(xiàn)配，在溶液pH值調(diào)至8-9時再加入。磷酸酶抑制劑NaF氟化鈉溶解性：溶于水 分子量: 使用： 貯存液：5M 工作濃度：10-20mMNa3VO4原磯酸鈉分子量: 溶解性：溶于水，我們購買過來的是原磯酸鈉.原磯酸鈉需要經(jīng)過處理以后才能 成為激活的磯酸鈉，激活的磯酸鈉才具有抑制去磷酸化的作用.原磯酸鈉變成激 活的磯酸鈉的過程是：lOOmM原磯酸鈉激活儲存液配制(1) .取克的原磯酸鈉溶解于10ml的雙蒸水中,加酸調(diào)節(jié)PH至10(顏色變黃)(2) .煮至無色(3) .室溫冷卻(4) .重調(diào)PH至10重復(fù)(1 )(2)(3)(4 )直至溶液保持無色，并且PH穩(wěn)定于10,分裝100ul/管,每10ml裂解液加一管.(終濃度為1mM),-20度保存.使用： 貯存液：100mM工作濃度：1mMBETA-glycero phos phate 甘油磷酸鈉 溶解