細(xì)胞房注意事項(xiàng)和管理

1、細(xì)胞房注意事項(xiàng)和管理一、常規(guī)操作1. 穿著專(zhuān)用實(shí)驗(yàn)服。自己的白大衣或厚外套，可脫在門(mén)外的衣帽架上。2. 穿著專(zhuān)用拖鞋。先在入室間換下自己的鞋子，穿著綠色拖鞋進(jìn)入緩沖間； 再在緩沖間換紅色拖鞋。盡量避免在緩沖間走動(dòng)、停留。3. 細(xì)胞房最多可4個(gè)人同時(shí)使用。盡量避免在內(nèi)長(zhǎng)時(shí)間逗留、交談。4. 離開(kāi)細(xì)胞房前，要保證不使用的儀器及時(shí)關(guān)閉并拔下插頭（離心機(jī)、水 浴鍋、日光燈），超凈臺(tái)開(kāi)啟紫外燈照射2h后關(guān)閉。二、值日生工作職責(zé)1. 每周值日生時(shí)間從周一開(kāi)始，至周日結(jié)束。2. 值日周開(kāi)始時(shí)需做的事情：配制消毒用的 75%勺酒精，制作酒精棉球， 給細(xì)胞房?jī)?nèi)添加足夠的95%C業(yè)乙醇供酒精燈使用。* 75%的酒

2、精可用750ml95%勺酒精加去離子水至950ml配制而成。3. 值日周內(nèi)每天需做的事情：開(kāi)大紫外燈消毒細(xì)胞房 15-30min后才能投 入一天的使用，晚上開(kāi)啟紫外燈滅菌，第二天及時(shí)關(guān)閉；檢查滅菌物品的儲(chǔ)備情 況，以便及時(shí)補(bǔ)充；及時(shí)安排人員清洗回收培養(yǎng)器皿；檢查培養(yǎng)液母液、血清、酒精等公用試劑的儲(chǔ)備情況；至少每天傾倒細(xì)胞房垃圾、換垃圾袋；檢查培養(yǎng)箱 內(nèi)水量是否足夠。4. 值日周結(jié)束前需完成的事情：星期五全方位打掃細(xì)胞房。包括拖地，擦 桌子、柜子、清潔和整理抽屜，擦超凈臺(tái)、冰箱及桌上的儀器，給水浴鍋加水或 換水，洗細(xì)胞房專(zhuān)用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋，紫外消毒細(xì)胞房。更換培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)菌水、檢查硫酸銅溶液是否需

3、要更換（一個(gè)月更換一次）！5. 每2周清潔一次培養(yǎng)箱：先將培養(yǎng)箱中的物品取出暫存于超凈臺(tái)內(nèi)， 對(duì) 于比較敏感的細(xì)胞可以暫存于其他細(xì)胞房的培養(yǎng)箱；將培養(yǎng)箱內(nèi)的不銹鋼板取出，包括4塊橫板和左右2塊立著的架子，用酒精棉球清潔鋼板和培養(yǎng)箱內(nèi)壁； 打開(kāi)培養(yǎng)箱清潔內(nèi)壁時(shí)動(dòng)作要迅速，避免長(zhǎng)時(shí)間敞開(kāi)門(mén)使得大量不潔凈空氣進(jìn) 入，縮短過(guò)濾器的壽命；用紫外燈照射培養(yǎng)箱內(nèi)部 15mi n,手提紫外燈放入培養(yǎng) 箱前要用酒精棉擦拭干凈。2014.6.9培養(yǎng)箱使用注意事項(xiàng)1. 從培養(yǎng)箱取放物品前，用酒精清潔雙手（或手套），盡量縮短開(kāi)門(mén)時(shí)間 和減少開(kāi)門(mén)次數(shù)。*培養(yǎng)箱中的空氣是經(jīng)過(guò)過(guò)濾的潔凈空氣。 長(zhǎng)時(shí)間敞開(kāi)或頻繁開(kāi)關(guān)培養(yǎng)箱，

4、 容易造成污染。2. 培養(yǎng)瓶皿放入培養(yǎng)箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精揮發(fā)后再放入， 以免培養(yǎng)箱內(nèi)滯留過(guò)多乙醇蒸氣。3. 2-3人共用一層培養(yǎng)箱，按預(yù)定位置擺放培養(yǎng)器皿，方便查找，以免長(zhǎng)時(shí)間敞開(kāi)培養(yǎng)箱。普通培養(yǎng)中的細(xì)胞，若非實(shí)驗(yàn)需要，每瓶 /板細(xì)胞每天只需要 觀察生長(zhǎng)狀態(tài)一次，2人以上共用的細(xì)胞，可約好時(shí)間一起觀察。*頻繁將細(xì)胞拿出觀察，容易給培養(yǎng)箱造成污染，同時(shí)也會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng) 條件的恒定。超凈臺(tái)操作規(guī)則1. 超凈臺(tái)使用前用紫外燈照射15分鐘滅菌，使用前、后需用酒精棉球擦 拭工作區(qū)消毒，所有物品放入超凈臺(tái)前均應(yīng)用酒精噴拭表面消毒。2. 點(diǎn)燃酒精燈前需檢查瓶中酒精是否足夠，液面應(yīng)占瓶高1/3

5、-2/3。*消毒用75%勺酒精，酒精燈用95%勺酒精，向噴壺或燈內(nèi)添加酒精時(shí)請(qǐng)留 意。酒精和酒精棉球由值日生負(fù)責(zé)補(bǔ)給，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞房?jī)?nèi)存放量不足時(shí)請(qǐng)及時(shí)通知 值日生。3. 超凈臺(tái)中應(yīng)擺放廢液杯和廢品杯各一只，用于實(shí)驗(yàn)時(shí)暫時(shí)存放廢棄物， 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后廢液杯內(nèi)垃圾要隨即清理帶走，廢液杯沖洗、于入室間晾干備用。4. 可回收的移液管、離心管、培養(yǎng)瓶皿等，放入裝有清水的塑料桶中浸泡， 桶內(nèi)需有足量的清水以沒(méi)過(guò)浸泡物品。*可回收器皿初步涮洗后再放入清水內(nèi)，保證浸泡的瓶、管內(nèi)完全被清水 充滿，避免營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在培養(yǎng)瓶或血清管中過(guò)多殘留而滋生微生物?；厥掌髅笙礈斐绦颍合礉嵕磧?，清水沖十次以上去除洗滌劑殘留；烘干； 泡

6、酸缸48h,盡量瀝干后取出，清水沖洗10次，純水沖洗3次，超純水3次； 烘干/晾干；報(bào)紙/牛皮紙/錫箔紙包裝，高壓濕熱滅菌121C, 20min；放入細(xì)胞 房備用。顯微鏡使用注意事項(xiàng)1. 顯微鏡使用前，用酒精棉從中間至周?chē)潦幂d物臺(tái)。2. 離開(kāi)細(xì)胞房時(shí)或較長(zhǎng)時(shí)間不需使用時(shí)，及時(shí)關(guān)上電源，延長(zhǎng)燈泡壽命。 盡量避免頻繁開(kāi)關(guān)顯微鏡電源。培養(yǎng)液、試劑等相關(guān)操作規(guī)則1. 從冰箱取放物品動(dòng)作要迅速，關(guān)門(mén)時(shí)要檢查門(mén)是否關(guān)好。按類(lèi)別存放試 劑。2. 血清按一定量分裝，分裝好的血清長(zhǎng)時(shí)間保存于 -20 C,使用前取出需 要的量4C預(yù)解凍。按需解凍，避免反復(fù)凍融。*從-20 C取用血清者需在表格上做好登記， 方便在不夠時(shí)及時(shí)領(lǐng)取，以免耽 誤實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。3. 原則上解凍好的血清應(yīng)全部配成含血清的培養(yǎng)基備用，若有剩余，則暫 存于4C并盡快使用。盡量不要使用他人開(kāi)過(guò)的血清，以免交叉污染。細(xì)胞凍存記錄細(xì)胞名稱(chēng)凍存位置凍存方式凍存管編號(hào)細(xì)胞來(lái)源細(xì)胞代數(shù)凍存者凍存日期凍存數(shù)量實(shí)驗(yàn)室冰箱層/盒-80液氮細(xì)胞復(fù)蘇記