標(biāo)準(zhǔn)菌株使用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

1、標(biāo)準(zhǔn)菌株使用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1 檢驗(yàn)?zāi)康膶?duì)實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行合理的保存， 并規(guī)范合理的使用流程， 保證菌株的性能 穩(wěn)定可靠。2 范圍微生物實(shí)驗(yàn)室保存的標(biāo)準(zhǔn)菌株。3 職責(zé)微生物組工作人員正確執(zhí)行本操作規(guī)程。4 術(shù)語(yǔ)和定義4.1 標(biāo)準(zhǔn)菌株其特征進(jìn)行了分類和描述，有明確的來(lái)源。 ATCCAmericanTypeCultureCollection ）美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)菌株收藏中心。4.2標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株標(biāo)準(zhǔn)菌株經(jīng)過(guò)一代轉(zhuǎn)接后獲得的同種菌株。4.3工作菌株標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株傳代后得到的同種菌株。4.4標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物標(biāo)準(zhǔn)菌株、標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株、工作菌株的統(tǒng)稱。4.5質(zhì)控菌株室間質(zhì)評(píng)的菌株ATCC最佳，但當(dāng)無(wú)法獲得時(shí)可以使用 ATCC演

2、化的菌株或我國(guó)國(guó)家菌種庫(kù)儲(chǔ)存的標(biāo)準(zhǔn)菌株。特殊情況， 例如定性試驗(yàn)可用已知的菌種作為質(zhì)控菌株。即可。5 保存程序5.1 標(biāo)準(zhǔn)菌株用1ml無(wú)菌的小牛血清或營(yíng)養(yǎng)肉湯溶解。 根據(jù)菌種的生長(zhǎng)特點(diǎn)，接種到新鮮培養(yǎng)基上 選擇適宜的培養(yǎng)條件培養(yǎng) 18-24h。酵母菌要求3天，形成孢子的微生物宜保存孢子。20%勺甘油。挑取5環(huán)-80 C保存。除鏈球菌5.2標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株 成分有蛋白胨、牛肉浸出粉、氯化鈉、甘油、純化木。相當(dāng)于菌落加入到1ml甘油肉湯中混勻。苛養(yǎng)菌可以適當(dāng)增加菌量。和嗜血桿菌以外細(xì)菌均可使用。保存期限1-5 年。成分為脫纖維羊血。挑取5環(huán)菌落加入到1ml甘油肉湯中混勻。苛養(yǎng)菌可以適當(dāng)增加菌量。-80

3、 C保存。主要用于保存鏈球菌、嗜血桿菌及厭氧菌。保存期限1-5 年。5.3工作標(biāo)準(zhǔn)菌株由標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株傳代得到的菌株。 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株對(duì)多向下傳三代。 過(guò)多的傳種會(huì)增加變異的機(jī)會(huì)。標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株根據(jù)菌種特點(diǎn)選擇適宜的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)18-24h即工作標(biāo)準(zhǔn)菌株。儲(chǔ)存在 2-8 C,可放四周。個(gè)別營(yíng)養(yǎng)要求高的為 2周，例如肺炎鏈球菌和嗜血桿菌。使用時(shí)應(yīng)編號(hào)并登記。5.4編號(hào)方法來(lái)源數(shù)字意義購(gòu)買的標(biāo)準(zhǔn)菌株1501ATCC2592215 年第 1 株 ATCC25922儲(chǔ)備標(biāo)準(zhǔn)困1501ATCC25922-3由1501ATCC25922傳代而來(lái)的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)株儲(chǔ)備菌株5.5記錄管理每個(gè)菌的保存管都要有唯

4、一的編號(hào)，簽字筆標(biāo)注，便于查找和管理。5.5.1菌種應(yīng)有嚴(yán)格的登記。每個(gè)編號(hào)都要有詳細(xì)的記錄包括來(lái)源、傳代、保存方法、使用記錄、使用原因、高壓滅菌記錄等。附表標(biāo)準(zhǔn)菌株記錄表標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株記錄表5.5.2菌種保管應(yīng)有專人負(fù)責(zé)，保存于專用冰箱中，雙人雙鎖，確保菌種安全。保管人員變動(dòng)時(shí)，必須嚴(yán)格交接手續(xù)。5.5.3各種菌種應(yīng)按規(guī)定時(shí)間接種，注意菌種有無(wú)污染及變異，如發(fā)現(xiàn)變異時(shí)，應(yīng)及時(shí)更換6使用流程標(biāo)準(zhǔn)菌株購(gòu)買的標(biāo)準(zhǔn)菌株，編號(hào),用完第二天高壓標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備日質(zhì)控每周取出一支標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株傳種合適傳代培養(yǎng)物可以作復(fù)蘇接種合適的培養(yǎng)基，孵育性能驗(yàn)證挑取典型的菌落到合適的穩(wěn)定劑中，編號(hào),80 e保存，準(zhǔn)備nT傳代培養(yǎng)

5、儲(chǔ)備菌株周質(zhì)控月質(zhì)控每周取出一支標(biāo)準(zhǔn)每月取出一支標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株傳種合適儲(chǔ)備菌株傳種合適直接作為工作菌株使用，第二天高壓滅菌管用完第也可以用最后一天的的工作菌株作為傳代培養(yǎng)物繼續(xù)使購(gòu)買的標(biāo)準(zhǔn)菌株（可追溯來(lái)I備菌株傳種，進(jìn)入0代源，衛(wèi)生部室間質(zhì)評(píng)菌株可1代進(jìn)行純度2代作為“儲(chǔ)存標(biāo)準(zhǔn)菌株”用天后代培代培養(yǎng)傳物，個(gè)新的菌株，作為 重新取一直標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)J接種傳代培養(yǎng)一次，并每天傳代平板作為第二天的個(gè)分裝保存，扌檢查和生7質(zhì)側(cè)定室內(nèi)質(zhì)可以再重復(fù)一周，規(guī)則。作同上。但一般來(lái)說(shuō)工作為傳代物菌株不能超過(guò)3代7.1觀察菌落的典型形態(tài)是否符合菌種。有沒(méi)有雜菌生長(zhǎng)。7.2用氧化酶、觸酶、上機(jī)等生化試驗(yàn)，鑒定菌種有沒(méi)有變化。7.3如果有污染或懷疑有問(wèn)題時(shí)，應(yīng)準(zhǔn)備新的首次傳代物或者獲取新的標(biāo)準(zhǔn)菌株。8參考文獻(xiàn)序號(hào)唯一性編號(hào)文獻(xiàn)名稱9.1ISBN978-7-117-19862-2/R全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程第四版 198639.2ISBN978-7-5478-1226-6/R臨床微生物學(xué)診斷與圖解第三版 3959.