分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn) 心得體會(huì)

1、關(guān)于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的體會(huì)梁慧媛（生技01級(jí)） 不知不覺(jué)間，一年的時(shí)間就這樣流逝了，與分子生物實(shí)驗(yàn)相伴，對(duì)我而言，的確不同尋常。并不僅僅是學(xué)習(xí)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)和方法的寶貴經(jīng)歷，它意味著更多。 首先是實(shí)驗(yàn)條件、實(shí)驗(yàn)過(guò)程、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的完備性，從這里可以初步感受到生物學(xué)研究的科學(xué)性與嚴(yán)肅性，自己可以得到寶貴的機(jī)會(huì)，親身體會(huì)生物學(xué)研究的苦辣酸甜。 一直一直喜歡，得到正確實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)刻的暢快感，那是無(wú)法言明的欣慰感，一次身心徹底地放松，可以將所有一整天來(lái)積累的疲勞拋之身后，即使僅僅是小小的成功，也會(huì)讓我們興奮不已。在整理資料，將一年來(lái)保存的記錄一遍一遍的翻看，重溫其中的特別滋味，我，輕輕地笑了。我，喜歡這里，喜

2、歡生物學(xué)。 失誤是常有的，經(jīng)歷過(guò)吃驚、后悔、無(wú)奈，檢討分析，最后重新開(kāi)始。一波三折的記憶清晰的印在腦海中，這種深深的挫折感，再試一次的勇氣，我會(huì)一生記取的。一年間，隨著對(duì)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)知識(shí)和技能的進(jìn)一步學(xué)習(xí)，我更堅(jiān)定了自己學(xué)習(xí)生物學(xué)的志向，感謝分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的"試煉"。 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)心得體會(huì)劉東強(qiáng)（生科01級(jí)） 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室本科生第一次接觸到了真正培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)?zāi)芰Φ膶?shí)驗(yàn)課，它不同于我們?cè)诖蠖_(kāi)的植物、動(dòng)物、微生物等實(shí)驗(yàn)課。在這些課上，主要以制備樣品并觀察樣品的形態(tài)、結(jié)構(gòu)特征為主，這是由于我們當(dāng)時(shí)正值大二，專(zhuān)業(yè)知識(shí)還遠(yuǎn)不夠。 隨著以后理論課學(xué)習(xí)的深入，我們開(kāi)始了分子生

3、物學(xué)實(shí)驗(yàn)的學(xué)習(xí)，這無(wú)疑對(duì)于深刻鞏固我們理論課上學(xué)到的知識(shí)是有幫助的，也進(jìn)一步加深了對(duì)原有知識(shí)的理解，如啟動(dòng)子的概念、類(lèi)型、PCR的原理等。另外，在實(shí)驗(yàn)課中，我們掌握并學(xué)會(huì)如何運(yùn)用分子生物學(xué)研究中的一些基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)，如質(zhì)粒的提取、總RNA的制備、PCR技術(shù)等。 我們的實(shí)驗(yàn)動(dòng)手能力通過(guò)親身接觸實(shí)驗(yàn)過(guò)程并親自設(shè)計(jì)一些實(shí)驗(yàn)得到了提高，使我們不再象剛開(kāi)始做分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候照搬實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)上的實(shí)驗(yàn)步驟，而是通過(guò)我們自己的思考，根據(jù)現(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)條件，對(duì)原有的步驟作必要的改進(jìn)。 此外，通過(guò)這門(mén)實(shí)驗(yàn)課的學(xué)習(xí)，我們形成了嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度，如有時(shí)得出的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與理論不符，我們漸漸養(yǎng)成了仔細(xì)分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的習(xí)慣，查找在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

4、或操作過(guò)程中出現(xiàn)的問(wèn)題，同時(shí)對(duì)理論知識(shí)認(rèn)識(shí)得更清楚。 總之，我認(rèn)為，分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課，是稱(chēng)得上實(shí)用、精彩、有意思的好實(shí)驗(yàn)，對(duì)于今后我的研究或工作很有價(jià)值。 劉佳凝（生技01級(jí)） 一學(xué)期的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)對(duì)我來(lái)說(shuō)很重要，同時(shí)通過(guò)一學(xué)期的實(shí)踐讓我給分子生物學(xué)有了較深入地體會(huì)：1、很感謝由我系生化組老師們編寫(xiě)的這本實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)。里面的實(shí)驗(yàn)原理與操作步驟都清晰易懂，有助于我們?cè)趯W(xué)習(xí)操作。 2、實(shí)驗(yàn)老師的耐心指導(dǎo)對(duì)我們幫助很大。他們要求嚴(yán)格，待人和藹可親，實(shí)驗(yàn)要求嚴(yán)且對(duì)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的知識(shí)的深刻掌握與理解給我們留下了很深刻的印象。在老師們的帶領(lǐng)下我們都很認(rèn)真完成了每一次的實(shí)驗(yàn)與之后的總結(jié)與報(bào)告。 3、由于

5、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)是我們上大學(xué)后接觸的第一個(gè)大型實(shí)驗(yàn)課，所以這對(duì)我們來(lái)說(shuō)是一個(gè)磨練的過(guò)程。從不熟練當(dāng)熟練，從不耐煩到耐心認(rèn)真，每個(gè)人在一學(xué)期后都有一種"脫胎換骨"的感覺(jué)。同時(shí)這個(gè)實(shí)驗(yàn)幫助我們從分認(rèn)識(shí)到生物學(xué)的不可知性、變化多樣性及創(chuàng)新空間的廣博性。在學(xué)期后的設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)中，每組同學(xué)都努力開(kāi)動(dòng)腦筋，搜集資料，查閱文獻(xiàn)，提出了很多好的實(shí)驗(yàn)方案。這種設(shè)計(jì)與創(chuàng)新調(diào)動(dòng)了同學(xué)的同學(xué)們的積極性，使得大家在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中都更加認(rèn)真、仔細(xì)、一絲不茍，并在獲得到好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果后體會(huì)到了前所未有的成就感。所以我們都很感謝分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的老師及設(shè)計(jì)這門(mén)課的老師們。這個(gè)實(shí)驗(yàn)讓我們受益非淺。 實(shí)驗(yàn)心得體會(huì)

6、張?chǎng)稳铮ㄉ?1級(jí)） 通過(guò)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課的學(xué)習(xí)，我們首先了解了分子生物學(xué)常用的載體，即質(zhì)粒載體的制備及宿主細(xì)胞的感受態(tài)的制備。這些都讓我們?cè)趯W(xué)過(guò)書(shū)本狀的知識(shí)以后有了一個(gè)親手操作，更深一步所學(xué)的知識(shí)的機(jī)會(huì)。 生物學(xué)以及分子生物學(xué)本身就是一門(mén)實(shí)驗(yàn)性的學(xué)科，如果只有單純的理論課上的講解而沒(méi)有與之相配套的實(shí)驗(yàn)操作，跟的無(wú)法使我們深刻體會(huì)到我們所學(xué)的那些如轉(zhuǎn)導(dǎo)轉(zhuǎn)化之類(lèi)究竟是怎樣操縱的。 至于PCR基因擴(kuò)增、RT-PCR、蛋白質(zhì)印跡這些實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)的學(xué)習(xí)對(duì)我們以后生物化學(xué)大實(shí)驗(yàn)、生化技術(shù)原理、基因工程、蛋白質(zhì)工程的學(xué)習(xí)都奠定了一個(gè)很堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)，幫助我們對(duì)這一系列等分子生物學(xué)技術(shù)有了很好的了解和掌握的。

7、相配套的理論課的學(xué)習(xí)與實(shí)驗(yàn)操作上是非常必要，我覺(jué)得分子實(shí)驗(yàn)課的時(shí)間安排就相當(dāng)合理，在我們學(xué)理論課的同時(shí)就進(jìn)行實(shí)驗(yàn)課的操作，這樣相輔相承的學(xué)習(xí)，才能促進(jìn)我們的進(jìn)一步提高。 實(shí)驗(yàn)心得劉娟（生科01級(jí)）一、實(shí)驗(yàn)操作：同樣的樣品，同樣的步驟，不同的人可以作出不同的結(jié)果。 當(dāng)然分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)本身的結(jié)果就有一定的偶然性，因?yàn)樗僮鞯牟牧鲜菢O其微小的，肉眼無(wú)法看見(jiàn)的，所以用理論來(lái)預(yù)見(jiàn)可行的實(shí)驗(yàn)，結(jié)果往往有些出乎意料。而每個(gè)人操作上的細(xì)微差別對(duì)RNA、DNA而言就是一場(chǎng)地震。 有人說(shuō)做生物實(shí)驗(yàn)和學(xué)數(shù)學(xué)不一樣，數(shù)學(xué)只要用靈活的思維，嚴(yán)禁的邏輯就行，而生物實(shí)驗(yàn)要求的往往不止這些，不只要心靈還要手巧肯干，

8、而分子實(shí)驗(yàn)又比其他實(shí)驗(yàn)要求嚴(yán)格，每一步都須三思而后行，而且必須有極大的耐心去重復(fù)一些枯燥的步驟。 二、關(guān)于設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)：想總比做起來(lái)容易，當(dāng)初覺(jué)得mRNA差異顯示原理簡(jiǎn)單，操作應(yīng)該不成問(wèn)題。結(jié)果第一天的實(shí)驗(yàn)便給了個(gè)下馬威，不僅結(jié)果等于沒(méi)有，而且對(duì)接下來(lái)的步驟更是一無(wú)所知，無(wú)從下手。而最終自己的實(shí)驗(yàn)結(jié)果只不過(guò)是mRNA差異顯示地預(yù)實(shí)驗(yàn)，由于該方法的假陽(yáng)性率極高，正常的科研實(shí)驗(yàn)是需要反復(fù)重復(fù)實(shí)驗(yàn)，并將最后的結(jié)果測(cè)序分析，并進(jìn)一步分析是否為新基因，當(dāng)然我們不可能接著做，只完成了該實(shí)驗(yàn)的一小步，也已經(jīng)學(xué)到了很多書(shū)上沒(méi)有的東西。 三、還存在的問(wèn)題：自己在做的過(guò)程中，有時(shí)會(huì)有"照方抓藥"的

9、情況出現(xiàn)，并不完全明白自己所做的步驟有什么作用便做了，事前事后缺乏思考。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，儀器、試劑的收集，總只有幾個(gè)人在做，其他人只是張口就問(wèn)在哪，說(shuō)明擺放無(wú)秩序，做實(shí)驗(yàn)時(shí)依賴(lài)心理太強(qiáng)，（看完其他國(guó)外的幾個(gè)實(shí)驗(yàn)室照片后，覺(jué)得我們實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)不錯(cuò)了。） 每一步驟最好都有記錄，特別是樣品多時(shí)，要有據(jù)可查。一門(mén)好實(shí)驗(yàn)課中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 2003級(jí)研究生 陸璐 我是生物科學(xué)專(zhuān)業(yè)99級(jí)的學(xué)生，在大三的時(shí)候選修了分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)這門(mén)課。在半年的學(xué)習(xí)和實(shí)踐中，我學(xué)會(huì)了很多基礎(chǔ)的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法，掌握了一定的實(shí)驗(yàn)技能，這些都為現(xiàn)階段的實(shí)驗(yàn)工作提供了很大的幫助，這使我避免了剛剛進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作時(shí)要一切從頭學(xué)起

10、的忙亂，節(jié)省了大量時(shí)間。 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課上所講授的質(zhì)粒提取、藍(lán)白斑篩選、RNA提取及鑒定、基因組DNA提取、western blot、瓊脂糖凝膠電泳、PCR技術(shù)等都是我現(xiàn)在常用的技術(shù)。在實(shí)驗(yàn)課的訓(xùn)練中，我也逐步養(yǎng)成了良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程讓我受益很多，老師們認(rèn)真負(fù)責(zé)的態(tài)度也必然讓更多的師弟師妹們從中獲益。       我是北京師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)專(zhuān)業(yè)2002級(jí)的碩士研究生，在研一第一學(xué)期參加了分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程。這門(mén)課程將分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作的理論與實(shí)踐相結(jié)合，不僅使我在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技能方面

11、得到系統(tǒng)的訓(xùn)練，而且讓我對(duì)具體實(shí)驗(yàn)操作的原理有了清晰地認(rèn)識(shí)。尤為難得的是，作為一門(mén)實(shí)驗(yàn)課，它還鍛煉了我運(yùn)用已學(xué)到的理論知識(shí)和已掌握的實(shí)驗(yàn)技能綜合解決科學(xué)問(wèn)題的能力。這些都為我之后研究生階段的工作做了必要的準(zhǔn)備，打下了良好的基礎(chǔ)。 這門(mén)課程開(kāi)設(shè)的實(shí)驗(yàn)以綜合性為主，涵蓋面廣，幾乎包括一般分子生物學(xué)研究會(huì)涉及的所有內(nèi)容：最基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)，如瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA；基因克隆所要用到的技術(shù)，如質(zhì)粒提取、DNA重組及重組子篩選、細(xì)菌感受態(tài)的制備及轉(zhuǎn)化、外源基因的誘導(dǎo)表達(dá)等；還有一些其他的常用技術(shù)，如動(dòng)、植物基因組DNA的提取、植物總RNA的提取、PCR擴(kuò)增、蛋白質(zhì)印跡、Southern雜交等。 我研究生階

12、段的一部分工作是要將外源基因通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法轉(zhuǎn)入植物中，并鑒定轉(zhuǎn)化是否成功。首先要用到質(zhì)粒提取、DNA重組等技術(shù)來(lái)構(gòu)建插入有外源基因的表達(dá)載體。轉(zhuǎn)化植物成功后，就需要提取植物基因組DNA及總RNA，利用PCR擴(kuò)增、Southern雜交、RT-PCR、蛋白質(zhì)印跡等技術(shù)，對(duì)外源基因進(jìn)行不同水平的鑒定。 正是因?yàn)榉肿由飳W(xué)實(shí)驗(yàn)課對(duì)基本原理的詳細(xì)講解、對(duì)實(shí)驗(yàn)技能的系統(tǒng)訓(xùn)練，使我在工作中比較容易上手，工作進(jìn)度也有了保證。另外，通過(guò)在這門(mén)課上系統(tǒng)地、全面的學(xué)習(xí)，也使我在工作需要學(xué)習(xí)新的實(shí)驗(yàn)技術(shù)時(shí)，觸類(lèi)旁通，比較容易理解消化。 分子生物學(xué)課程對(duì)我的科研工作的幫助胡麗婭進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室做課題已經(jīng)一年多

13、了，在日常的科研工作中，分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課中學(xué)到的知識(shí)和技術(shù)給了我很大的幫助，例如"外源基因在大腸桿菌中的誘導(dǎo)表達(dá)"和"SDSPAGE檢測(cè)蛋白"等等。 我的課題主要是研究鈣調(diào)磷酸酶的折疊機(jī)制，而整個(gè)研究的基礎(chǔ)就是要拿到純的、具有完整的生物活性的酶。這是整個(gè)工作的第一步，也是非常關(guān)鍵的一步。剛開(kāi)始參與科研工作時(shí)，我遇到了蛋白表達(dá)為包含體的問(wèn)題，因?yàn)槟貌坏降鞍?，?shí)驗(yàn)無(wú)法進(jìn)行下去。于是我運(yùn)用在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課中學(xué)到的知識(shí)，對(duì)表達(dá)條件進(jìn)行了摸索，最終解決了表達(dá)的問(wèn)題。順利的進(jìn)行了后續(xù)的實(shí)驗(yàn)工作。      

14、0;隨著課題的深入，我需要構(gòu)建一個(gè)點(diǎn)突變體來(lái)觀察這一位點(diǎn)對(duì)于鈣調(diào)磷酸酶的結(jié)構(gòu)和折疊的作用。由于有在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課中打下的基礎(chǔ)，我利用Primer premier設(shè)計(jì)了點(diǎn)突變的引物，運(yùn)用PCR技術(shù)對(duì)鈣調(diào)磷酸酶進(jìn)行點(diǎn)突變：質(zhì)粒DNA的提取和酶切、E.coli感受態(tài)細(xì)胞的制備，轉(zhuǎn)化。每一步實(shí)驗(yàn)都能夠得到理想的結(jié)果。我想正是以前學(xué)到的知識(shí)和經(jīng)驗(yàn)使我能夠順利的完成設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)。      通過(guò)一年多來(lái)的實(shí)驗(yàn)工作，我更加深切的體會(huì)到堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)和良好的實(shí)驗(yàn)技能對(duì)于科研工作的重要性。在我本科的課程中，分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課是一門(mén)尤其重要的課程，在這門(mén)課

15、程的學(xué)習(xí)過(guò)程中，我和我的同學(xué)們都打下了很好的基礎(chǔ)。整個(gè)課程的安排十分合理，給我們?cè)S多親自動(dòng)手實(shí)踐的機(jī)會(huì)；在遇到問(wèn)題時(shí)，老師鼓勵(lì)我們積極思考，和我們一起討論，幫助我們解決問(wèn)題。每一個(gè)小實(shí)驗(yàn)的成功，對(duì)于我們這些"初生之犢"來(lái)說(shuō)，都是一種莫大的鼓勵(lì)，鼓勵(lì)我們?cè)诳茖W(xué)研究中前進(jìn)。 與此同時(shí)，我們?cè)谶@門(mén)實(shí)驗(yàn)課的學(xué)習(xí)中還培養(yǎng)了良好的合作意識(shí)和團(tuán)隊(duì)精神。同學(xué)們齊心協(xié)力，一起動(dòng)腦筋解決實(shí)驗(yàn)中的問(wèn)題。在今天的科研工作中，這些品質(zhì)讓我們能夠更好的融入到課題組這一個(gè)大家庭中，大家互相幫助，誰(shuí)遇到了問(wèn)題，大家一起討論，出謀劃策。同時(shí)，在討論的過(guò)程中，大家也能學(xué)到更多的知識(shí)。 生命科學(xué)學(xué)院

16、2002碩 細(xì)胞生物學(xué)專(zhuān)業(yè)王利敏 作為一名細(xì)胞所的二年級(jí)研究生，一年級(jí)所選修的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程對(duì)我的幫助是不可忽視的。在這個(gè)課程上，讓我初次接觸到了許多進(jìn)行生物研究時(shí)必須具備的實(shí)驗(yàn)技術(shù)以及一些基本技能，象電泳，蛋白質(zhì)印跡，PCR等等，這些實(shí)驗(yàn)在幾乎每個(gè)人以后的工作中都會(huì)用到，我也不例外。而且這些實(shí)驗(yàn)又不同于本科時(shí)，它不但是更復(fù)雜，還給了更多我們自己動(dòng)手的空間和時(shí)間，一來(lái)能鍛煉大家的思考能力，比如我們自己設(shè)計(jì)引物來(lái)合成目的基因；還能鍛煉我們自己安排時(shí)間和一個(gè)實(shí)驗(yàn)進(jìn)度的能力，分子實(shí)驗(yàn)一般周期比較長(zhǎng)，學(xué)習(xí)如何合理地安排時(shí)間使之更有效的確對(duì)于今后自己實(shí)驗(yàn)地安排大有裨益。總之，分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程的確是

17、一門(mén)對(duì)今后實(shí)驗(yàn)很有幫助地課程。 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程學(xué)習(xí)隨感陳暉時(shí)光荏苒，不知不覺(jué)中研究生生活已過(guò)去一年，進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室也有快一年的時(shí)間了。大學(xué)時(shí)專(zhuān)業(yè)課的學(xué)習(xí)為我的科研工作打下的堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)，而實(shí)驗(yàn)課程尤其是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的學(xué)習(xí)更讓我獲益匪淺。  分子生物學(xué)課程的學(xué)習(xí)讓我們初步建立了分子的概念，但核酸到底是什么樣子的，什么是PCR，什么是質(zhì)粒，什么是轉(zhuǎn)化，這些概念對(duì)于我們始終很抽象。是分子生物學(xué)試驗(yàn)讓我們真正接觸了分子生物學(xué)，將那些抽象的概念變得具體，而不再是紙上談兵。在分子生物學(xué)試驗(yàn)中我們學(xué)習(xí)到了分子生物學(xué)最基本的實(shí)驗(yàn)技能，如感受態(tài)細(xì)胞的制備及轉(zhuǎn)化，質(zhì)粒DNA的提取及酶切

18、，植物總RNA的提取等等。這些技能的學(xué)習(xí)讓我在科研工作中很快能進(jìn)入角色。在開(kāi)始進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室時(shí)，常會(huì)有種手足無(wú)措的感覺(jué)。但當(dāng)看到那些熟悉的儀器，如微量移液器，培養(yǎng)箱，PCR儀等時(shí)，真有他鄉(xiāng)遇故知的感覺(jué)。而不需別人指導(dǎo)，運(yùn)用實(shí)驗(yàn)課上學(xué)到的知識(shí)成功地完成實(shí)驗(yàn)，那種滿足感更是無(wú)法形容。至今還記得獨(dú)立提出要用的質(zhì)粒時(shí)的情形，師兄在夸獎(jiǎng)之余將更多的工作放心地交給我，讓我們實(shí)驗(yàn)的進(jìn)展順利很多。不過(guò)最重要的是在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)的過(guò)程中，我們建立了整體大實(shí)驗(yàn)的概念，這是在以往的實(shí)驗(yàn)訓(xùn)練中沒(méi)有的。以往的實(shí)驗(yàn)如無(wú)機(jī)化學(xué)，有機(jī)化學(xué)等等，所涉及的通常只是某個(gè)數(shù)據(jù)的測(cè)定或某種物質(zhì)的提取，實(shí)驗(yàn)持續(xù)的時(shí)間通常也就兩三個(gè)小時(shí);

19、而分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，每次會(huì)持續(xù)一天時(shí)間。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)得與科研比較相似，毫不夸張的講 ，每個(gè)實(shí)驗(yàn)都可以直接用于科研。在這里我們學(xué)到了實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的概念，不是單純的實(shí)驗(yàn)技術(shù)的堆砌，而是根據(jù)自己的目的，有機(jī)的將各種方法組合起來(lái)。所有這些都是我們進(jìn)入科研工作所必須的素質(zhì)。而老師的講解不會(huì)局限于某種技術(shù)，而是更偏重開(kāi)拓思路，引導(dǎo)我們思考，從而達(dá)到舉一反三的目的。如在講解植物總RNA的提取時(shí)，采用的是白化的玉米葉子，所含糖類(lèi)脂類(lèi)比較少，此時(shí)老師會(huì)提出問(wèn)題如果糖類(lèi)多時(shí)又該如何改進(jìn)提取的方法;書(shū)上所講的只是其中一種提取方法，是否還有其他的方法可以提純RNA。老師并不會(huì)直接給出這些問(wèn)題的答案，而是要我們?cè)谡n后自己查閱資料

20、。這一方面鍛煉了我們查閱文獻(xiàn)的能力，另一方面這些資料的積累成為科研工作時(shí)寶貴的一手材料，可以直接應(yīng)用于科研。"授人以魚(yú)不如授人以漁"，老師們精心的講解常會(huì)給我們豁然開(kāi)朗的感覺(jué)，學(xué)習(xí)到的不是單純的技術(shù)而是一種思路。感謝分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，感謝給予我們悉心教導(dǎo)的老師，是他們的工作使我們真正接觸到了分子實(shí)驗(yàn)，并為將來(lái)進(jìn)入科研工作打下了良好的基礎(chǔ)。 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)小結(jié)2001級(jí)生物科學(xué)專(zhuān)業(yè) 張皓彬做完半年的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，感到它是一門(mén)非常好的課，在我們學(xué)習(xí)生物學(xué)的過(guò)程中占據(jù)著很大的分量。 首先，分子生物學(xué)是一門(mén)技術(shù)性很強(qiáng)的實(shí)驗(yàn)，在實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中，某些小的失誤可能會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生很大

21、的影響。所以對(duì)實(shí)驗(yàn)中的操作是比較嚴(yán)格的，特別象無(wú)菌操作過(guò)程。在實(shí)驗(yàn)中從儀器上來(lái)說(shuō)我們接觸了大量的儀器，而且也學(xué)到了一些基本的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，這對(duì)我們將來(lái)從事相關(guān)工作有著非常大的幫助。 其次，分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中所含的知識(shí)和技術(shù)與理論知識(shí)結(jié)合的比較好，先學(xué)習(xí)了理論知識(shí)再去做實(shí)驗(yàn)，這樣結(jié)合很好，而且我感覺(jué)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)是我們所做的實(shí)驗(yàn)中一門(mén)設(shè)計(jì)到比較"高深"知識(shí)或新問(wèn)題的實(shí)驗(yàn)，能激發(fā)出我們對(duì)學(xué)習(xí)分子生物學(xué)理論與實(shí)踐的興趣。 最后，我認(rèn)為最重要的是它給了我們學(xué)生一次自己設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的機(jī)會(huì)。這是我們所做的實(shí)驗(yàn)中唯一能給我們自己設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)機(jī)會(huì)的課。第一，整個(gè)過(guò)程中，我們?cè)谧鐾昵懊嬉恍┗緦?shí)驗(yàn)后，再去

22、設(shè)計(jì)一個(gè)用自己所學(xué)到的知識(shí)技術(shù)的實(shí)驗(yàn)，有了一個(gè)整體的了解，也是對(duì)一整套技術(shù)的回顧與應(yīng)用。從設(shè)計(jì)中所要用到的試劑、儀器，到實(shí)驗(yàn)中試劑的具體用量，儀器使用的具體參數(shù)，以及引物的設(shè)計(jì)和整個(gè)實(shí)驗(yàn)的時(shí)間安排等等都要有明確的概念，可以說(shuō)是給了我一次科學(xué)探究的機(jī)會(huì)。第二，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)后我們自己去操作檢驗(yàn)它的可行性，檢驗(yàn)自己設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)?zāi)懿荒軌虺晒?，更重要的是整個(gè)過(guò)程對(duì)我們以后從事相關(guān)工作有著非常重要的幫助，所以這是非常有意義的。 總的來(lái)說(shuō)，分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)是一門(mén)非常好的實(shí)驗(yàn)課程。 設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)和具體操作的感想生物科學(xué)2001級(jí)谷波2003.12.22設(shè)計(jì)階段：我們組原本的想法有點(diǎn)不切實(shí)際。我們打算在瑞士的一個(gè)

23、酶庫(kù)網(wǎng)站上找到一種酶，再?gòu)膅enenbank中找到這種酶的全序列，再自行設(shè)計(jì)引物。我們甚至下載了引物設(shè)計(jì)軟件。然而我們輸入某種酶某段功能片段的名稱(chēng)卻從genebank中得到了成百上千序列，我們放棄了。只是從多篇文獻(xiàn)中找到一種酶的某段基因把它的引物和表達(dá)載體進(jìn)行改造和改換，以符合老師提供的限制性?xún)?nèi)切酶。而PCR的溫度與循環(huán)次數(shù)，及其余的各種步驟，僅僅是把是實(shí)驗(yàn)書(shū)上的串聯(lián)在一起，并沒(méi)有考慮任何改動(dòng)，更別提摸索實(shí)驗(yàn)條件的部分了。當(dāng)我們的老師講評(píng)時(shí)，我才了解到，我們的設(shè)計(jì)是多么的不充分，成功率有多低。 操作階段：通過(guò)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，我最大的收獲是有了串起已經(jīng)做過(guò)的實(shí)驗(yàn)的思路，也明白了做重組的各個(gè)步驟的原理。

24、所以，當(dāng)我拿到老師給的設(shè)計(jì)方案時(shí)，我的思路很清晰。然而具體的操作又暴漏出許多問(wèn)題。首先是操作時(shí)不能做到提前思考，大家往往只會(huì)照方抓藥，不能事先想清楚為何要這樣做。這使我們常常忽略細(xì)節(jié)的地方，造成時(shí)間的浪費(fèi)甚至結(jié)果不理想。比如我們把第二次回收時(shí)的重要數(shù)據(jù)遺失。特別是寫(xiě)報(bào)告時(shí)，更會(huì)感覺(jué)到中間結(jié)果記錄的不詳細(xì)，以至分析原因時(shí)沒(méi)有具體的可依賴(lài)的結(jié)果做支持。還有就是中間各個(gè)步驟的現(xiàn)象，如果我們能從最基本的實(shí)驗(yàn)時(shí)就觀察現(xiàn)象，之后再做重復(fù)或類(lèi)似的實(shí)驗(yàn)時(shí)，就能及時(shí)判斷實(shí)驗(yàn)每一步的正確與否，便于及時(shí)糾正錯(cuò)誤。最后是我們實(shí)驗(yàn)時(shí)心態(tài)不夠正確，實(shí)驗(yàn)就是要?dú)v經(jīng)失敗和重復(fù)，不能面對(duì)不良結(jié)果時(shí)就急噪起來(lái)，不能心平氣和的繼續(xù)

25、下去，甚至失去探索的動(dòng)力。每當(dāng)我們進(jìn)度落后時(shí)，大家常常焦急的追趕其它組，往往造成不該出現(xiàn)的錯(cuò)誤或遺漏。 實(shí)際操作不同于理論學(xué)習(xí)，它要求我們事事親臨，面面俱到，并且積累經(jīng)驗(yàn)，這樣才能從細(xì)微處窺探整個(gè)實(shí)驗(yàn)的成敗。這正應(yīng)了老師所說(shuō)："我們需要心靈，手巧，兼肯干的學(xué)生"心靈有賴(lài)于勤思考，手巧還需要多實(shí)踐總結(jié)，肯干則要求我們持之以恒，腳踏實(shí)地我們會(huì)朝這個(gè)方向努力的。 生命科學(xué)學(xué)院2002碩 神經(jīng)生物學(xué)專(zhuān)業(yè)馬駿我是神經(jīng)生物學(xué)專(zhuān)業(yè)研二的學(xué)生。我在研一時(shí)選修了分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課，在一個(gè)學(xué)期的學(xué)習(xí)中所獲甚多。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)我們主要做的大實(shí)驗(yàn)包括感受態(tài)的制備、質(zhì)粒的提取及鑒定、蛋白在大

26、腸桿菌中的表達(dá)。我們?cè)诒究坪脱幸坏臅r(shí)候?qū)W習(xí)了分子生物學(xué)的理論知識(shí)，但通過(guò)大實(shí)驗(yàn)親身實(shí)踐后才更深刻的理解了這些理論知識(shí)，并且在遇到問(wèn)題解決問(wèn)題的過(guò)程中，了解了這些知識(shí)用于實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)注意的細(xì)節(jié)。通過(guò)系統(tǒng)科學(xué)的實(shí)驗(yàn)，我還了解了實(shí)驗(yàn)規(guī)劃和實(shí)驗(yàn)安排的重性。分子生物學(xué)大實(shí)驗(yàn)鍛煉了我的實(shí)驗(yàn)操作技能，培養(yǎng)了我耐心細(xì)致的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣，這都有益于我現(xiàn)在所進(jìn)行的課題研究，避免了走彎路，提高了實(shí)驗(yàn)效率。所以我認(rèn)為在進(jìn)行正式的課題研究之前進(jìn)行分子生物學(xué)大實(shí)驗(yàn)的學(xué)習(xí)是很必要的。師弟師妹們請(qǐng)認(rèn)真學(xué)習(xí)：） 實(shí)驗(yàn)心得      我是北京師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院生物化學(xué)

27、與分子生物學(xué)專(zhuān)業(yè)2002級(jí)的碩士研究生，在研一第一學(xué)期參加了分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程。這門(mén)課程將分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作的理論與實(shí)踐相結(jié)合，不僅使我在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技能方面得到系統(tǒng)的訓(xùn)練，而且讓我對(duì)具體實(shí)驗(yàn)操作的原理有了清晰地認(rèn)識(shí)。尤為難得的是，作為一門(mén)實(shí)驗(yàn)課，它還鍛煉了我運(yùn)用已學(xué)到的理論知識(shí)和已掌握的實(shí)驗(yàn)技能綜合解決科學(xué)問(wèn)題的能力。這些都為我之后研究生階段的工作做了必要的準(zhǔn)備，打下了良好的基礎(chǔ)。 這門(mén)課程開(kāi)設(shè)的實(shí)驗(yàn)以綜合性為主，涵蓋面廣，幾乎包括一般分子生物學(xué)研究會(huì)涉及的所有內(nèi)容：最基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)，如瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA；基因克隆所要用到的技術(shù)，如質(zhì)粒提取、DNA重組及重組子篩選、細(xì)菌感受態(tài)的制備及轉(zhuǎn)

28、化、外源基因的誘導(dǎo)表達(dá)等；還有一些其他的常用技術(shù)，如動(dòng)、植物基因組DNA的提取、植物總RNA的提取、PCR擴(kuò)增、蛋白質(zhì)印跡、Southern雜交等。 我研究生階段的一部分工作是要將外源基因通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法轉(zhuǎn)入植物中，并鑒定轉(zhuǎn)化是否成功。首先要用到質(zhì)粒提取、DNA重組等技術(shù)來(lái)構(gòu)建插入有外源基因的表達(dá)載體。轉(zhuǎn)化植物成功后，就需要提取植物基因組DNA及總RNA，利用PCR擴(kuò)增、Southern雜交、RT-PCR、蛋白質(zhì)印跡等技術(shù)，對(duì)外源基因進(jìn)行不同水平的鑒定。 正是因?yàn)榉肿由飳W(xué)實(shí)驗(yàn)課對(duì)基本原理的詳細(xì)講解、對(duì)實(shí)驗(yàn)技能的系統(tǒng)訓(xùn)練，使我在工作中比較容易上手，工作進(jìn)度也有了保證。另外，通過(guò)在這門(mén)課上系

29、統(tǒng)地、全面的學(xué)習(xí)，也使我在工作需要學(xué)習(xí)新的實(shí)驗(yàn)技術(shù)時(shí)，觸類(lèi)旁通，比較容易理解消化。 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程如何應(yīng)用于科研之我見(jiàn)生命科學(xué)學(xué)院 生物化學(xué)與分子生物學(xué)專(zhuān)業(yè) 2003研 李彥杰 作為一名生物化學(xué)與分子生物學(xué)專(zhuān)業(yè)一年級(jí)的研究生，在生命科學(xué)領(lǐng)域5年的求知探索中，我深切體會(huì)到這期間學(xué)習(xí)的各門(mén)課程，包括生物化學(xué)、分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、遺傳學(xué)、生理學(xué)，尤其是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程，對(duì)培養(yǎng)我今后獨(dú)立進(jìn)行科研，及提高科研能力、拓寬科研思路是不可或缺的。由于它所包含的內(nèi)容與科研連接最直接，最緊密，不僅教給我們實(shí)驗(yàn)的技術(shù)方法，還教給我們?cè)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的思路及科研中必不可少的合作精神，可以說(shuō)是生物科研最重要

30、的基礎(chǔ)課之一。 生物學(xué)方面的科研離不開(kāi)我們?cè)诜肿由飳W(xué)實(shí)驗(yàn)課程中學(xué)到的技術(shù)和方法，而為了達(dá)到同一個(gè)實(shí)驗(yàn)?zāi)康目捎玫募夹g(shù)與方法常常不止一種，如何選擇最合適的方法以取得最佳實(shí)驗(yàn)結(jié)果其實(shí)就是靈活應(yīng)用分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)所學(xué)于科研的過(guò)程。以下是結(jié)合我的課題的一點(diǎn)粗淺體會(huì)。我的科研課題是小鼠腦紅蛋白及突變體的設(shè)計(jì)、融合表達(dá)、蛋白純化及結(jié)構(gòu)、性質(zhì)測(cè)定，基本的流程是從小鼠腦組織中提取總RNA，設(shè)計(jì)帶有合適酶切位點(diǎn)的引物，利用RT-PCR技術(shù)獲得雙鏈cDNA，再將雙鏈cDNA雙酶切的產(chǎn)物與同樣經(jīng)雙酶切的GST融合表達(dá)載體pGEX-4T-3相連，轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21感受態(tài)細(xì)胞，在2YT培養(yǎng)基中表達(dá)，過(guò)GST親和層析柱初

31、純蛋白，凝血酶酶切獲腦紅蛋白和谷胱苷肽硫轉(zhuǎn)酶，再經(jīng)Sephadex-G75分子篩層析柱分離，得到電泳純的腦紅蛋白，冷干保存。 從第一步提取總RNA到轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞，這些步驟全都是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課上學(xué)習(xí)過(guò)的基本實(shí)驗(yàn)方法，比如核酸電泳、蛋白電泳、PCR、構(gòu)建載體、感受態(tài)制備、轉(zhuǎn)化等，由于這些技術(shù)已經(jīng)在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課上系統(tǒng)學(xué)習(xí)并親身操作，因此在科研中使用這些技術(shù)時(shí)就能駕輕就熟。 但又不能完全照搬課本，有時(shí)需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中出現(xiàn)的具體問(wèn)題對(duì)方法進(jìn)行改良，添加適合的步驟或刪減不需要的步驟。例如分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中檢驗(yàn)總RNA提取效果采用的是甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳法，甲醛的作用是使RNA酶變性，阻止其降解R

32、NA，電泳結(jié)果能否出現(xiàn)18S和28S的條帶能說(shuō)明RNA 的主要成分rRNA是否完整，而我的課題中提總RNA的目的是需要其中的mRNA作為模板進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄PCR，因此電泳檢測(cè)只有相對(duì)意義，所以只用一般的電泳采用稍高的電壓即可。設(shè)計(jì)RT-PCR引物過(guò)程中，嚴(yán)格按照分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程所學(xué)的PCR原理部分進(jìn)行設(shè)計(jì)，設(shè)計(jì)出的引物滿足引物長(zhǎng)度1530bp、G+C含量4050、堿基隨機(jī)分布和引物3'端與模板嚴(yán)格配對(duì)這幾個(gè)基本要求。但實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明用oligodT做第一輪引物能擴(kuò)增成功，而用特異性引物則擴(kuò)增失敗，分析原因可能是RNA二級(jí)結(jié)構(gòu)嚴(yán)重，因此需要消除RNA二級(jí)結(jié)構(gòu)，使特異性引物能與模板緊密結(jié)合，采用擴(kuò)增前將模板在65保溫10分鐘的方法成功解決了這一問(wèn)題。目前我的課題已經(jīng)進(jìn)行到蛋白純化步驟，分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課上所學(xué)幫助我順利完成實(shí)驗(yàn)的上游即分子生物學(xué)階段的初步工作。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課的收獲及其在實(shí)際科研中的應(yīng)用生命科學(xué)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)專(zhuān)業(yè)03級(jí)碩研 白 巍"對(duì)一名生物化學(xué)與分子生物學(xué)專(zhuān)業(yè)的研究