《基礎(chǔ)分子生物學(xué)》復(fù)習(xí)題及參考答案解讀

1、基礎(chǔ)分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題及參考答案一、 填空題1. 核酸分子中糖環(huán)與堿基之間為B 型的 糖苷 鍵，核苷與核苷之間通過磷酸二酯鍵連接成多聚體。2.DNA變性后，紫外吸收增加，粘度下降，浮力密度 升高，生物活性喪失。3.DNA雙螺旋直徑為2nm,每隔3.4nm上升一圈，相當(dāng)于10個堿基對。4.Z-DNA為左手螺旋。5.hn-RNA是真核生物mRNA的前體。6. 用San ger的鏈末端終止法測定 DNA 級結(jié)構(gòu)時，鏈終止劑是雙脫氧核苷三磷酸。7. 維系DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的力主要有氫鍵 和堿基堆積力。8. 在堿性條件下，核糖 核酸比 脫氧核糖核酸更容易降解，其原因是因為核糖核酸的每個核苷酸上-0H 的

2、緣故。9. DNA復(fù)制時，連續(xù)合成的鏈稱為前導(dǎo) 鏈；不連續(xù)合成的鏈稱為 _隨叢鏈。10. DNA合成的原料是四種脫氧核糖核苷三磷酸；復(fù)制中所需要的引物是 RNA 。11. DNA合成時，先由引物酶合成RNA 引物 ，再由 DNA 聚合酶川在其3'端合成DNA鏈，然后由 DNA 聚合酶I切除引物并填補空隙，最后由DNA連接酶連接成完整的鏈。12. 細(xì)菌的DNA連接酶以NAD為能量來源，動物細(xì)胞和T4噬菌體的DNA連接酶以ATP為能源。13. 大腸桿菌RNA聚合酶的全酶由a 2 B B組成，其核心酶的組成為 a 2 B B '。14. RNA轉(zhuǎn)錄過程中識別轉(zhuǎn)錄啟動子的是b 因子，協(xié)

3、助識別轉(zhuǎn)錄終止部位的是 p 因子。15. 真核細(xì)胞mRNA合成后的成熟過程包括戴帽 、 加尾 、剪接、 甲基化修飾 。16. 遺傳信息由 RNA傳遞到 DNA的過程稱為逆轉(zhuǎn)錄，由逆轉(zhuǎn)錄酶催化。17. 反密碼子第1位堿基和密碼子第二堿基的配對允許有一定的擺動，稱為變偶性。18. 在原核細(xì)胞翻譯起始時，小亞基16SrRNA的3'端與mRNA5端的 SD序列之間互補配對，確定讀碼框架,fMet-tRNAf占據(jù)核糖體的 P 位點位置。19. 細(xì)胞內(nèi)多肽鏈合成的方向是從N端到_C端，而閱讀mRNA勺方向是從 5 端至U 3 ' 端。20. 在形成氨酰-tRNA時，由氨基酸的羧 基與tRN

4、A3'末端的_羥基形成酯鍵。為保證蛋白質(zhì)合成的正確性，氨酰tRNA合成酶除了對特定氨 基酸有很強的專一性之外，還能將“錯誤”氨基酸從氨?；?tRNA復(fù)合物上水解下來。21.轉(zhuǎn)肽酶催化生成的化學(xué)鍵是肽鍵，該酶還具有酯酶活性。22.肽鏈延伸包括：進(jìn)位、成肽、和移位。23.翻譯延長階段的進(jìn)位，是指氨酰-tRNA進(jìn)入 A位。翻譯延長階段的轉(zhuǎn)位是指 mRNA與核糖體做相對運動。24. 體內(nèi)大多數(shù)蛋白質(zhì)形成正確的構(gòu)象需要分子伴侶的幫助,某些蛋白質(zhì)的折疊還需要二硫鍵互換酶和脯氨酰肽酰異構(gòu)酶的催化。25. 正調(diào)控和負(fù)調(diào)控是基因表達(dá)的兩種最基本的調(diào)節(jié)形式，其中原核細(xì)胞常用負(fù)調(diào)控模式，而真核細(xì)胞常用正調(diào)控

5、 模式。26. 在原核細(xì)胞中，由同一調(diào)控區(qū)控制的一群功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因組成一個基因表達(dá)調(diào)控單位，稱為啟動子，其調(diào)控區(qū)包括啟動 基因和操縱 基因。27. 有些基因的表達(dá)較少受環(huán)境的影響，在一個生物體的幾乎所有細(xì)胞中持續(xù)表達(dá)，因此被稱為管家基因；另有一些基因表達(dá)極易受環(huán)境的影響，在特定環(huán)境信號刺激下，相應(yīng)的基因被激活，基因表達(dá)產(chǎn)物增加，這種基 因是可 誘導(dǎo)的基因，相反，如果基因?qū)Νh(huán)境信號應(yīng)答時被抑制，這種基因是可阻遏的基因。28. 在基因重組技術(shù)中，切割DNA用 限制性核酸內(nèi)切酶，連接DNA用DNA連接酶 。29. 除噬菌體外，質(zhì)粒 和 病毒也是分子克隆的常用載體。30. 用動物病毒DNA改造的基

6、因載體有腺病毒載體和反轉(zhuǎn)錄病載體。用于植物基因工程的常用載體是Ti質(zhì)粒 。31. 將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌稱轉(zhuǎn)化 ，將噬菌體DNA轉(zhuǎn)入細(xì)菌稱轉(zhuǎn)導(dǎo) 。32. Southern印跡法、Northern印跡法和 Western印跡法是分別用于研究DNA 、 RNA 和 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移和鑒定的幾種常規(guī)技術(shù)。第3頁 共19頁選擇題1.有關(guān)核酸的雜交 （ A,C,D ）A. DNA變性的方法常用加熱和堿變性B. 相同來源的核酸才能通過變性而雜交C. 不同來源的核酸復(fù)性時，若全部或部分堿基互補就可以雜交D. 雜交可以發(fā)生在 DNA與 DNA之間，RNA與 DNA RNA與 RNA之間E. 把待測DNA標(biāo)記成探針進(jìn)行雜

7、交2. DNA的復(fù)性速度與以下哪些有關(guān)（ E）A. 溫度 B.分子內(nèi)的重復(fù)序列C.pH D. 變性DNA的起始濃度 E.以上全部3. 某DNA分子中腺嘌呤的含量為 15%則胞嘧啶的含量應(yīng)為（D）A15% B 30% C 40%D 35% E 70%4.DNA變性是指（D）A分子中磷酸二酯鍵斷裂B多核苷酸鏈解聚CDNA分子由超螺旋t雙螺旋D互補堿基之間氫鍵斷裂E . DNA分子中堿基丟失5.寡聚 dT- 纖維素柱層析用于(D)A.從總DNA中分離純化質(zhì)粒DNAB.從總核蛋白中分離 DNPC. 除去雜蛋白 D. 從總RNA中純化mRNA6. 關(guān)于雙螺旋結(jié)構(gòu)學(xué)說的敘述哪一項是錯誤的 （C）A. 由兩

8、條反向平行的脫氧多核苷酸鏈組成B. 堿基在螺旋兩側(cè)，磷酸與脫氧核糖在外圍C. 兩條鏈間的堿基配對非常嚴(yán)格，A與T間形成三個氫鍵，G與C間形成兩個氫鍵D. 堿基對平面垂直于中心軸，堿基對之間的作用力為范德華力E. 螺旋每轉(zhuǎn)一圈包含10個堿基對7. 下列關(guān)于雙鏈DNA堿基含量關(guān)系，哪一個是錯誤的（B）A A=T， G=C B A+T=G+CC A+G=C+TD A+C=G+T8. 下列是幾種 DNA分子的堿基組成比例。哪一種的Tm值最高（A）AA+T=15%B G+C=25%C G+C=40% D A+T=80%9. DNA復(fù)制時，下列哪一種酶是不需要的（E）A. DNA旨導(dǎo)的DNA聚合酶B .

9、DNA連接酶 C .拓樸異構(gòu)酶D .解鏈酶E.限制性內(nèi)切酶10. DNA復(fù)制中的引物是（C）A. 由DNA為模板合成的DNA片段B 由RNA為模板合成的RNA片段C. 由DNA為模板合成的RNA片段D 由RNA為模板合成的RNA片段E.引物仍存在于復(fù)制完成的DNA鏈中11. DNA復(fù)制時，子鏈的合成是(C)A. 一條鏈5'宀3 '，另一條鏈35' B 兩條鏈均為3'宀5'C. 兩條鏈均為 5't 3 ' D .兩條鏈均為連續(xù)合成E.兩條鏈均為不連續(xù)合成12. 在E.coli細(xì)胞中DNA聚合酶I的作用主要是 (C)A. DNAM制B. E.

10、coliDNA 合成的起始C. 切除RNA引物D. 岡崎片段的連接13. 需要 DNA 連接酶參與的過程有 (A)A. DNA 復(fù)制B. DNA 體外重組 C. DNA 損傷的切除修復(fù) D. RNA逆轉(zhuǎn)錄14. DNA 損傷的光修復(fù)作用是一種高度專一的修復(fù)方式， 它只作用于紫外線引起 的 (A)A.嘧啶二聚體B.嘌呤二聚體C.嘧啶-嘌呤二聚體D.為兩個單獨的嘧啶堿基15. 真核細(xì)胞RNA聚合酶H催化合成的是(B)A. 18SRNA B . mRNA C . tRNA D . 5SRNA E . rRNA16. 轉(zhuǎn)錄指下列哪一過程 (B)以DNA為模板合成DNA存在于細(xì)胞核內(nèi)的 mRNA前體 存

11、在于細(xì)胞核內(nèi)的sn RNA前體A.以RNA為模板合成 DNA B. 以DNA為模板合成RNAC.以RNA為模板合成蛋白質(zhì)D.17. h nRNA 是(B)A.存在于細(xì)胞核內(nèi)的tRNA前體 B.C.存在于細(xì)胞核內(nèi)的rRNA前體D.18. 基因有兩條鏈，與mRNA序列相同(T代替U)的鏈叫做(A)A. 有義鏈 B. 反義鏈 C. 重鏈 D. cDNA 鏈19. 下列關(guān)于逆轉(zhuǎn)錄酶的敘述哪一個是錯誤的 (D)A.它以RNA為模板指導(dǎo)DNA的合成B. 它也可以DNA為模板指導(dǎo)DNA的合成C.它具有RNase H活性 D.逆轉(zhuǎn)錄酶的作用不需要引物20. 多肽鏈的氨基酸序列取決于 (D)A. tRNA B.

12、 18S rRNA C. 28S rRNA 合成酶21. 密碼GGC勺對應(yīng)反密碼子是(A)A. GCC B. CCG C. CCC D. CGC22. 關(guān)于密碼子，錯誤的敘述是 (C)A.每一密碼子代表一種氨基酸B.C. 一種氨基酸只有一種密碼子D.E. 密碼子有種族特異性D. mRNA E. 氨基酰 -mRNAE. GGC某些密碼子不代表氨基酸甲硫氨酸只有一種密碼子23. 一個N端為丙氨酸的20肽，其開放的閱讀框架至少應(yīng)該由多少個核苷酸殘 基組成？ (C)A 60 個B. 63 個 C. 66 個 D. 57 個 E. 69 個24. 氨基酰-tRNA中，tRNA與氨基酸的結(jié)合鍵是(E)A.

13、鹽鍵 B.磷酸二酯鍵C. 肽鍵 D. 糖苷鍵 E. 酯鍵25. 原核生物和真核生物翻譯起始不同之處 (B)A. 真核生物的 Shine-Dalgarno 序列使mRNA核糖體結(jié)合B. 真核生物帽子結(jié)合蛋白是翻譯起始因子之一C. IF 比 eIF 種類多D. 原核生物和真核生物使用不同起始密碼E. 原核生物有TATAAT乍為翻譯起始序列，真核生物則是TATA26. 關(guān)于核蛋白體轉(zhuǎn)肽酶，錯誤的敘述是 (C)A.轉(zhuǎn)肽不需要 GTP B.轉(zhuǎn)肽不需要 ATP C .活性中心在小亞基D. 活性中心在大亞基E .活性中心與rRNA有關(guān)27. 一個氨基酸參入多肽鏈，需要 (B)A.兩個 ATP分子B .一個A

14、TP分子，兩個 GTP分子C. 一個 ATP分子，一個 GTP分子D .兩個ATP分子，一個 GTP分子E. 兩個GTP分子28. 信號肽段的乍用是 (C)A.指導(dǎo)DNA合成的啟動B.指導(dǎo)多肽鏈糖基化C.引導(dǎo)多肽進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng) D .指導(dǎo)RNA合成的啟動E.指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成的啟動29. 多肽鏈合成后，其 Ser可(B)A.乙酰化 B .糖基化C .磷酸化 D .甲基化 E.硫酸化30. 蛋白質(zhì)合成后加工不包括 (D)A.蛋白質(zhì)的磷酸化B .信號肽的切除C .蛋白質(zhì)的糖基化D. 酶的構(gòu)像變化E .蛋白質(zhì)的乙酰化31. 以下哪一種抑制劑只能抑制真核生物的蛋白質(zhì)合成 (C)A.氯霉素 B. 紅霉素 C .

15、放線菌酮D.嘌呤霉素E .四環(huán)素32. 一個操縱子通常含有(B)A. 一個啟動序列和一個編碼基因C. 數(shù)個啟動序列和一個編碼基因E 兩個啟動序列和數(shù)個編碼基因B. 一個啟動序列和數(shù)個編碼基因D. 數(shù)個啟動序列和數(shù)個編碼基因33. 有關(guān)操縱子學(xué)說的論述，正確的是(B)A. 操縱子調(diào)控系統(tǒng)是真核生物基因調(diào)控的主要方式B. 操縱子調(diào)控系統(tǒng)是原核生物基因調(diào)控的主要方式C. 操縱子調(diào)控系統(tǒng)由調(diào)節(jié)基因、操縱基因、啟動子和結(jié)構(gòu)基因組成D. 誘導(dǎo)物與阻遏蛋白結(jié)合啟動轉(zhuǎn)錄E. 誘導(dǎo)物與啟動子結(jié)合而啟動轉(zhuǎn)錄34轉(zhuǎn)錄因子是（ C）A.調(diào)節(jié)DNA結(jié)合活性的小分子代謝效應(yīng)物B.調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄延伸速度的蛋白質(zhì)C. 調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄起始

16、速度的蛋白質(zhì)D.調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物分解速度的蛋白質(zhì)E. 促進(jìn)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物加工的蛋白質(zhì)35阻遏蛋白（阻抑蛋白）識別操縱子中的（C）A. 啟動基因 B. 結(jié)構(gòu)基因 C. 操縱基因 D. 內(nèi)含子 E. 調(diào)節(jié)基因36. 在下列哪種情況下，乳糖操縱子的轉(zhuǎn)錄活性最高（A）A. 高乳糖，低葡萄糖B. 高乳糖，高葡萄糖C. 低乳糖，低葡萄糖D. 低乳糖，高葡萄糖 E. 不一定37. 順式作用元件是指（ E）A.基因的5 /側(cè)翼序列 B.基因的3/側(cè)翼序列 C.基因的5/和3/側(cè)翼 序列D. 基因的5/和3 /側(cè)翼序列以外的序列E. 具有轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)功能的特異 DNA序列38. 反式作用因子是指（ E）A. 具有激活功能的調(diào)

17、節(jié)蛋白 B. 具有抑制功能的調(diào)節(jié)蛋白C. 對自身基因具有激活功能的調(diào)節(jié)蛋白D. 對另一基因具有激活功能的調(diào)節(jié)蛋白E. 對另一基因有調(diào)節(jié)功能的蛋白質(zhì)因子39. 下列關(guān)于限制性內(nèi)切酶的敘述哪一項是錯誤的（C）A. 它能識別DNA特定的堿基順序，并在特定的位點切斷DNAB. 切割點附近的堿基順序一般呈回文結(jié)構(gòu)C. 它能專一性降解經(jīng)甲基化修飾的 DNAD. 是重組DNA的重要工具酶E. 主要從細(xì)菌中獲得40. 基因工程中，不常用到的酶是（ C）A. 限制性核酸內(nèi)切酶 B.DNA 聚合酶 C.DNA 解鏈酶 D.DNA 連接酶E. 反轉(zhuǎn)錄酶41 下列哪項不能作為表達(dá)載體導(dǎo)入真核細(xì)胞的方法？（D）A. 磷

18、酸鈣轉(zhuǎn)染 B. 電穿孔 C. 脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染 D. 氯化鈣轉(zhuǎn)染 E. 顯 微注射42. 重組體的篩選方法有（ A）A. 抗藥標(biāo)志篩選 B. 標(biāo)記補救 C. 分子雜交 D. 免疫化學(xué) E. 酶聯(lián)免 疫檢測43. CDNA 是指（D）A. 在體內(nèi)合成的與病毒 DNA或 RNA互補的DNAB. 在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與DNA互補的DNAC. 在體外經(jīng)轉(zhuǎn)錄合成的與 DNA互補的RNAD. 在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與RNA互補的DNAE. 在體內(nèi)經(jīng)轉(zhuǎn)錄合成的與 DNA互補的RNA44 .建cDNA文庫時，首先需分離細(xì)胞的(C)A. 染色體 DNA B. 線粒體 DNA C. 總 mRNA D.tRNA E.rRN

19、A三、判斷題(V)1.生物體內(nèi)，天然存在的 DNA分子多為負(fù)超螺旋。(V)2.RNA分子可以發(fā)生熱變性，并有增色效應(yīng)。(X )3.水分子可以插入天然 DNA分子雙螺旋空隙中。(X )4.從結(jié)構(gòu)基因中的 DNA序列可以推出相應(yīng)的蛋白質(zhì)序列。(V)5.提高鹽濃度可使 DNA分子的熔點(Tm)升高。(V) 6.RNA的局部螺旋區(qū)中，兩條鏈之間的方向也是反向平行的。(X )7.在E.coli細(xì)胞和真核細(xì)胞中都是由 DNA聚合酶I切除 RNA引物。( X ) 8.逆轉(zhuǎn)錄酶催化 RNA 指導(dǎo)的 DNA 合成不需要 RNA 引物。(X )9.RNA病毒不含DNA基因組，根據(jù)中心法則它必須先進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，才能復(fù)

20、 制和增殖。(X )10.原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的 RNA聚合酶都能夠直接識別啟動子。(X )11.大腸桿菌染色體 DNA由兩條鏈組成，其中一條鏈充當(dāng)模板鏈，另外一條鏈充當(dāng)編碼鏈。(X )12 由于遺傳密碼的通用性，用原核生物表達(dá)真核基因不存在技術(shù)障礙。 表達(dá)出的蛋白質(zhì)通常是有功能的。(X )13.氨酰-tRNA合成酶可以通過合成反應(yīng)的逆反應(yīng)切除誤載的氨基酸。(X )14.所有氨酰-tRNA合成酶的作用都是把氨基酸連接在tRNA末端核糖的3/ 羥基上羥丁基丄。(X )15.在核糖體上形成肽鏈所需的能量，由水解GTP來提供。(X )16.生物合成蛋白質(zhì)時，A位的氨基酸轉(zhuǎn)移到 P位，使P位的肽鏈延長，

21、A位 空載的 -tRNA 隨后便脫落。(X)17. 蛋白質(zhì)能夠折疊成何種三維結(jié)構(gòu)，主要是由分子伴侶決定的。(V)18.高等真核生物的大部分 DNA是不為蛋白質(zhì)編碼的。( V) 19. 大多數(shù)管家基因編碼低豐度的 mRNA.(X)20. 乳糖可以誘導(dǎo)乳糖操縱子的表達(dá)， 所以乳糖對乳糖操縱子的調(diào)控屬于正 調(diào)控系統(tǒng)。( V)21. 某些蛋白質(zhì)既可以作為阻遏蛋白又可以作為激活蛋白參與基因表達(dá)的調(diào)控。(V)2 2.準(zhǔn)備用原核生物表達(dá)真核基因時，最好通過cDNA獲取目的基因。(V)2 3.用原核生物表達(dá)真核生物的糖蛋白，其表達(dá)產(chǎn)物不會有正常的生物學(xué)功能。(X )24.Ti質(zhì)粒可以隨土壤農(nóng)桿菌進(jìn)入植物細(xì)胞。

22、(X )25.用入噬菌體作克隆載體時，外源DNA片斷越小，克隆的成功率越高。( V)26. 基因克隆選擇的宿主細(xì)胞必須無限制性核酸內(nèi)切酶。(X)27. 采用藍(lán)白斑選擇法時，藍(lán)色菌落或噬菌斑是含有重組載體的克隆。(V)2 8.若1個氨基酸有3個遺傳密碼，則這 3個遺傳密碼的前兩個核苷酸通 常是相同的。四、名詞解釋(每題 2 分，共 20 分)1. 增色效應(yīng) (hyperchromic effect) ；核酸從雙鏈變?yōu)閱捂湹臒o規(guī)則卷曲狀態(tài)時，在260nm處的吸光度增加，稱“增色效應(yīng)”。2. 分子雜交( molecular hybridization )；不同的DNA片段之間，DNA片段與RNA片段

23、之間，如果彼此間的核苷酸排列順 序互補也可以復(fù)性，形成新的雙螺旋結(jié)構(gòu)。這種按照互補堿基配對而使不完全互補 的兩條多核苷酸相互結(jié)合的過程稱為分子雜交。3. 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)( PCR)；聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR是擴增樣品中的 DNA量和富集眾多 DNA分子中的一個特 定的DNA序列的一種技術(shù)。在該反應(yīng)中，使用與目的DNA序列互補的寡核苷酸作為引物，進(jìn)行多輪的 DNA合成。其中包括 DNA變性，弓I物退火和在 Tap DNA聚合酶催 化下的DNA合成。4. DNA 的變性與復(fù)性(denaturation and renaturation of DNA );DNA的變性是指DNA雙螺旋區(qū)的氫鍵斷裂，變成

24、單鏈并不涉及共價鍵的斷裂。 DNA的復(fù)性是指變性 DNA在適當(dāng)條件下，又可使兩條彼此分開的鏈重新締合成為雙 螺旋結(jié)構(gòu)。5. Tm ；通常把加熱變性 DNA使增色效應(yīng)達(dá)到最大增量一半時的的溫度稱為該DNA的熔點或熔解溫度，用 Tm表示。6. 內(nèi)含子與外顯子內(nèi)含子是指結(jié)構(gòu)基因中存在于外顯子之間的非編碼序列，也是基因中不表達(dá)的序 列，屬插入序列。外顯子是指基因中編碼蛋白質(zhì)的序列。7. 半保留復(fù)制；DNA復(fù)制的一種方式。每條鏈都可用作合成互補鏈的模板，合成出兩分子的雙 鏈DNA每個分子都是由一條親代鏈和一條新合成的鏈組成。8. 岡崎片段；相對比較短的 DNA鏈（大約1000核苷酸殘基），是在 DNA的

25、滯后鏈的不連續(xù)合 成期間生成的片段，這是 Reiji Okazaki 在DNA合成實驗中添加放射性的脫氧核苷 酸前體觀察到的。9. 復(fù)制體；一種多蛋白復(fù)合體，包含DNA聚合酶，引發(fā)酶，解旋酶，單鏈結(jié)合蛋白和其它輔助因子。復(fù)制體位于每個復(fù)制叉處，進(jìn)行染色體DNA復(fù)制的聚合反應(yīng)。10. 編碼鏈；雙鏈DNA中，不能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄的那一條DNA鏈，其核苷酸序列與轉(zhuǎn)錄生成的RNA的序列一致（在 RNA中是以U取代了 DNA中的T）。11. 內(nèi)含子； 在轉(zhuǎn)錄后的加工中，從最初的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物除去的內(nèi)部的核苷酸序列。術(shù)語內(nèi)含子也指 DNA中編碼相應(yīng)RNA的區(qū)域。12. 外顯子（ exon）既存在于最初的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中，也存

26、在于成熟的RNA分子中的核苷酸序列。術(shù)語外顯子也指DNA中編碼相應(yīng)RNA的區(qū)域。13. 遺傳密碼；DNA編碼鏈或mRNAh的核苷酸，以3個為一組（三聯(lián)體）決定 1個氨基酸的種 類，稱為三聯(lián)體密碼。 mRNA勺三聯(lián)體密碼是連續(xù)排列的，因此， mRNA勺核苷酸序列 可以決定蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)。14. 擺動假說；mRNA上的密碼子與tRNA上的反密碼子相互辯認(rèn)，大多數(shù)情況是遵從堿基配對 規(guī)律的。但也可出現(xiàn)不嚴(yán)格的配對，這種現(xiàn)象就是遺傳密碼的擺動性，tRNA分子上有相當(dāng)多的稀有堿基，例如次黃嘌呤（in osi ne,l ）常出現(xiàn)于三聯(lián)體反密碼子的 5'端第一位，它和 mRN/密碼子第3位的A、C

27、、U都可以配對。15.SD 序列；位于mRNA分子AUG起始密碼子上游約 813個核苷酸處，由46個核苷酸組 成的富含嘌呤的序列，以 -AG-GA-為核心。SD序列同16S rRNA近3'-末端的序列互 補，在核糖體與mRNA勺結(jié)合過程中起重要作用。16. 信號肽；是未成熟的分泌性蛋白質(zhì)中可被細(xì)胞轉(zhuǎn)運系統(tǒng)識別的特征性氨基酸序列。有堿 性N-末端區(qū)、疏水核心區(qū)及加工區(qū)三個區(qū)段。蛋白質(zhì)被轉(zhuǎn)運到細(xì)胞的一定部位后， 信號肽即被切除。17. 多聚核糖體是由1個mRNA分子與一定數(shù)目的單個核糖體結(jié)合而成的串珠狀排列。每個核糖體可以獨立完成一條肽鏈的合成， 所以多個核糖體上可以同時進(jìn)行多條肽鏈的合成

28、， 可以加速蛋白質(zhì)的合成速度，提高模板mRNA勺利用率。18. 操縱子；原核生物的幾個功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因往往排列在一起，轉(zhuǎn)錄生成一個mRNA然 后分別翻譯成幾種不同的蛋白質(zhì)。這些蛋白可能是催化某一代謝過程的酶，或共同 完成某種功能。這些結(jié)構(gòu)基因與其上游的啟動子，操縱基因共同構(gòu)成轉(zhuǎn)錄單位，稱 操縱子。19. 啟動子；是RNA聚合酶結(jié)合位點周圍的一組轉(zhuǎn)錄控制組件，包括至少一個轉(zhuǎn)錄起始點。 在真核基因中增強子和啟動子常交錯覆蓋或連續(xù)。有時，將結(jié)構(gòu)密切聯(lián)系而無法區(qū) 分的啟動子、增強子樣結(jié)構(gòu)統(tǒng)稱啟動子。20. 增強子；是一種能夠提高轉(zhuǎn)錄效率的順式調(diào)控元件，最早是在SV40 病毒中發(fā)現(xiàn)的長約200bp的一

29、段DNA可使旁側(cè)的基因轉(zhuǎn)錄提高 100倍，其后在多種真核生物，甚至在 原核生物中都發(fā)現(xiàn)了增強子。增強子通常占100200bp長度，也和啟動子一樣由若干組件構(gòu)成，基本核心組件常為 812bp，可以單拷貝或多拷貝串連形式存在。21. 衰減子；在原核生物的 Trp 操縱子結(jié)構(gòu)中，第一個結(jié)構(gòu)基因與啟動子P 之間有一個區(qū)域含 Trp 密碼子，稱衰減子。當(dāng)環(huán)境中 Trp 濃度很高時，它可通過編碼并翻譯，使正 在轉(zhuǎn)錄的mRNA形成終止信號，從而終止Trp操縱子的表達(dá)。這種轉(zhuǎn)錄衰減實質(zhì)上是 轉(zhuǎn)錄與一個前導(dǎo)肽翻譯過程的偶聯(lián)，它是原核生物特有的一種基因調(diào)控機制。22. 反式作用因子；大多數(shù)真核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子由某一基

30、因表達(dá)后，通過與特異的順式作用元件相互 作用（DNA蛋白質(zhì)相互作用），或通過與基它調(diào)節(jié)因子的相互作用（蛋白質(zhì) -蛋白質(zhì) 相互作用） ，反式激活另一基因的轉(zhuǎn)錄，故稱反式作用蛋白或反式作用因子。23. 順式調(diào)控元件：指可影響自身基因表達(dá)活性的真核DNA序列。根據(jù)順式作用元件在基因中的位置、轉(zhuǎn)錄激活作用的性質(zhì)及發(fā)揮作用的方式，分為啟動子、增強子及沉默子等。24. 降解物基因活化蛋白；也就是cAMP受體蛋白（cAMP receptor protein,CRP ）,它與cAMP的復(fù)合物可 以促進(jìn)某些原核操縱子（如乳糖操縱子）的轉(zhuǎn)錄。25. 克隆技術(shù)；“克隆”作為名詞指相同的分子或細(xì)胞構(gòu)成的群體，或一個共

31、同的祖先通過無 性繁殖所得到的群體，作為動詞指獲取“克隆”的過程?？寺〖夹g(shù)特指獲取“克隆” 的過程，包括分子克隆，細(xì)胞克隆等技術(shù)。26. 限制性核酸內(nèi)切酶；就是識別DNA的特異序列，并在識別位點或其周圍切割雙鏈DNA的 一類核酸內(nèi)切酶。限制性核酸內(nèi)切酶存在于細(xì)菌體內(nèi)，與相伴存在的甲基化酶共同構(gòu)成細(xì)菌的 限制、修飾體系，限制外源 DNA保護自身DNA對保持細(xì)菌遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定具有重 要意義。限制性核酸內(nèi)切酶分為三類，其中的H類酶能特異性在一定的核苷酸序列 處切割雙鏈DNA因而在基因工程中得到廣泛的應(yīng)用?；蚪MDNA文庫；第 13 頁 共 19 頁利用限制性核酸內(nèi)切酶將染色體DNA切割成一定大小的片

32、段，將這些片段分子與適當(dāng)?shù)目寺≥d體拼接成重組DNA分子，繼而轉(zhuǎn)入受體菌，使每個細(xì)菌內(nèi)都攜帶一種重組DNA分子。不同細(xì)菌中的重組DNA分子可能包含不同的染色體 DNA片段，這樣，只要得到的轉(zhuǎn)化細(xì)菌所攜帶的重組DNA分子種類足夠多，則全部轉(zhuǎn)化細(xì)菌所攜帶的各種染色體片段就代表了染色體的整個基因組。存在于轉(zhuǎn)化細(xì)菌內(nèi)，由克隆載 體所攜帶的所有基因組 DNA片段的集合稱基因組 DNA文庫。基因組DNA文庫涵蓋了 基因組的全部基因信息。27. cDNA 文庫以mRNA為模板，經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶催化，在體外反轉(zhuǎn)錄成cDNA與適當(dāng)?shù)妮d體(常用噬菌體或質(zhì)粒載體)連接后轉(zhuǎn)化受體菌，則每個細(xì)菌含有一段cDNA并能繁殖擴增，這

33、樣包含著細(xì)胞全部 mRNA言息的cDNA克隆集合稱為該組織細(xì)胞的cDNA文庫?；蚪M含有的基因在特定的組織細(xì)胞中只有一部分表達(dá)，而且處在不同環(huán)境條件、 不同分化時期的細(xì)胞其基因表達(dá)的種類和強度也不盡相同，所以cDNA文庫具有組織細(xì)胞特異性。cDNA文庫顯然比基因組 DNA文庫小得多，能夠比較容易從中篩選克隆 得到細(xì)胞特異表達(dá)的基因。另外，對真核細(xì)胞來說，從基因組DNA文庫獲得的基因與從cDNA文庫獲得的不同，基因組DNA文庫所含的是帶有內(nèi)含子和外顯子的基因組 基因，而從cDNA文庫中獲得的是已經(jīng)過剪接，去除了內(nèi)含子的cDNA 一般來說，從cDNA文庫獲得的基因，因不含內(nèi)含子而片段較小，更適合于

34、用作基因工程的目的基因。由于原核生物不存在將 hnRNA加工成mRNA勺酶系統(tǒng)，若用原核生物表達(dá)真核 基因，則目的基因一定要通過 cDNA獲取。五、分析計算題1.簡述B-DNA的結(jié)構(gòu)特征。( 1)兩條反向平行的多核苷酸鏈圍繞同一中心軸相互纏繞形成右手螺旋；(2) 嘌呤和嘧啶堿位于雙螺旋的內(nèi)側(cè)，磷酸和核糖在外側(cè)， 彼此通過3', 5 ' 磷酸二酯鍵相連接，形成 DNA分子的骨架。堿基平面和縱軸垂直，糖環(huán)的平面則和 縱軸平行；(3) 雙螺旋的平均直徑為 2nm,兩個相鄰的堿基對之間相距的高度，堿基堆積 距離為0.34nm,兩個核苷酸之間的夾角為 36度；( 4)兩條核苷酸鏈依靠彼此

35、堿基之間形成的氫鍵相聯(lián)系而結(jié)合在一起；( 5)堿基在一條鏈上的排列順序不受任何限制。2何謂Tn?影響Tm大小的因素有哪些？在實驗中如何計算Tm值？DNA的變性從開始解鏈到完全解鏈，是在一個相當(dāng)窄的溫度范圍內(nèi)完成的，在 這一范圍內(nèi)，紫外線吸收值的增加量達(dá)到最大增加量的50%寸的溫度為DNA的解鏈溫度(溶解溫度，melting temperature,Tm )。Tm值大小主要與GC含量有關(guān)，GC 含量越高，Tm值越大；另外核酸分子越大，Tm值也越大，溶液pH值大于11.3，核酸完全變性，小于 5.0則核酸容易脫嘌呤。降低溶液的離子強度會使Tm值下降，尿 素等變性劑也會使 Tm值下降。在實驗中，Tm

36、值計算公式：Tm=69.3+0.41（G+C%）,小 于 20bp 的寡核苷酸：Tm=4（ G+C +2（ A+T 。3. 如果人體有1014個細(xì)胞，每個體細(xì)胞的 DNA含量為6.4 >109個堿基對。試計 算人體DNA的總長度是多少？是太陽-地球之間距離（2.2 >09公里）的多少倍？已 知雙鏈DNA每1000個核苷酸重1> 10-18g，求人體的DNA的總質(zhì)量。每個體細(xì)胞的 DNA 的總長度為：6.4 >09».34nm = 2.176 10>nm= 2.176m,3.人體內(nèi)所有體細(xì)胞的 DNA的總長度為：2.176m >0 = 2.176 1

37、> km這個長度與太陽-地球之間距離（2.2 >09公里）相比為：2.176 >011/2.2 »9 = 99倍， 每個核苷酸重 1X10-18g/1000=10-21g,所以，總 DNA 6.4 X023X10-21=6.4 >02=640g4. 什么是DNA變性？ DNA變性后理化性有何變化？DNA雙鏈轉(zhuǎn)化成單鏈的過程成變性。引起DNA變性的因素很多，如高溫、超聲波、強酸、強堿、有機溶劑和某些化學(xué)試劑（如尿素，酰胺）等都能引起變性。DNA變性后的理化性質(zhì)變化主要有：（1）天然DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)解鏈變成單鏈的無規(guī)則線團，生物學(xué)活性喪失；（2）天然的線型

38、DNA分子直徑與長度之比可達(dá) 1 : 10,其水溶液具有很大的黏度。變性后，發(fā)生了螺旋-線團轉(zhuǎn)變，黏度顯著降低；（3）在氯化銫溶液中進(jìn)行密度梯度離心，變性后的DNA浮力密大大增加；（4）沉降系數(shù)S增加；（5） DNA變性后，堿基的有序堆積被破壞，堿基被暴露出來，因此，紫外 吸收值明顯增加，產(chǎn)生所謂增色效應(yīng)。（6） DNA分子具旋光性，旋光方向為右旋。由于DNA分子的高度不對稱性，因此旋光性很強，其a=150。當(dāng)DNA分子變性時，比旋光值就大大下降。5. 什么是核酸雜交？有何應(yīng)用價值？熱變性后的DNA片段在進(jìn)行復(fù)性時，不同來源的變性核酸（DNA或 RNA只要有一定數(shù)量的堿基互補（不必全部堿基互補

39、），就可形成雜化的雙鏈結(jié)構(gòu)。此種使不 完全互補的單鏈在復(fù)性的條件下結(jié)合成雙鏈的技術(shù)稱為核酸雜交。用被標(biāo)記的已知 堿基序列的單鏈核酸小分子作為探針，可確定待檢測的 DNA RNA分子中是否有與探針同源的堿基序列。用此原理，制作探針，再通過雜交，可用于細(xì)菌，病毒，腫瘤 和分子病的診斷（基因診斷）。也可用于基因定位，目的基因篩選，基因表達(dá)狀況 的分析等研究工作。15146. 若使 N標(biāo)記的大腸桿菌在N培養(yǎng)基中生長三代，提取DNA，并用平衡沉降法測定DNA密度，其14N-DNA分子與14N - 15N雜合DNA分子之比應(yīng)為多少？15N標(biāo)記的大腸桿菌利用培養(yǎng)基中的 14N合成DNA第一代DNA雙鏈都是1

40、4N 15N 雜合DNA分子。第二代分別是以第一代中的 14N和15N鏈作為母鏈合成新的 DNA所 以14N DNA分子與14N- 15N雜合DNA分子之比為1 : 1。第三代中的14N和15N母鏈的 分子之比是3: 1,所以14N- DNA分子與14N 15N雜合DNA分子之比應(yīng)為3： 1。7. 真核生物DNA聚合酶有哪幾種？它們的主要功能是什么？真核生物的DNA聚合酶有、3、丫、3、&五種，均具有5 3聚合酶活性， DNA聚合酶丫、3和£有3 5外卜切酶活性，DNA聚合酶a和B無外切酶活性。DNA 聚合酶a用于合成引物，DNA聚合酶S用于合成細(xì)胞核 DNA DNA聚合酶B

41、和&主 要起修復(fù)作用，DNA聚合酶丫用于線粒體DNA的合成。8. 真核細(xì)胞中有幾種 RNA聚合酶？它們的主要功能是什么？真核生物的 RNA 聚合酶，按照對 a -鵝膏蕈堿的敏感性不同進(jìn)行分類： RNA 聚 合酶I基本不受a -鵝膏蕈堿的抑制，在大于10-3mol/L時才有輕微的抑制。RNA聚合酶H對a-鵝膏蕈堿最為敏感，在 10-8mol/L以下就會被抑制。RNA聚合酶川對a -5-4-鵝膏蕈堿的敏感性介于聚合酶I和聚合酶n之間，在10 mol/L到10 mol/L才會有抑制現(xiàn)象。RNA聚合酶I存在于核仁中，其功能是合成 5.8S rRNA、18 S rRNA和 28 S rRNA。R

42、NA聚合酶n存在于核質(zhì)中，其功能是合成 mRNA、snRNA。RNA聚 合酶川也存在于核質(zhì)中，其功能是合成 tRNA和5 S rRNA及轉(zhuǎn)錄Alu序列。9. 真核生物三類啟動子各有何結(jié)構(gòu)特點？真核生物三類啟動子分別由 RNA 聚合酶 I、 II、 III 進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。類別 I 啟動子包 括核心啟動子和上游控制元件兩部分，需要 UBF1 和 SL1 因子參與作用。類別 II 啟 動子包括四類控制元件：基本啟動子、起始子、上游元件和應(yīng)答元件。識別這些元 件的反式作用因子由通用轉(zhuǎn)錄因子、 上游轉(zhuǎn)錄因子和可誘導(dǎo)的因子。 類別 III 啟動子 有兩類：上游啟動子和基因內(nèi)啟動子，分別由裝配因子和起始因子促進(jìn)

43、轉(zhuǎn)錄起始復(fù) 合物的形成和轉(zhuǎn)錄。10 論述遺傳密碼的特點。(1) 遺傳密碼為三聯(lián)體：模板從mRNA5端的起始密碼子開始，到3 '端的終止密碼稱為開放讀碼框架。 在框架內(nèi)每 3 個堿基組成 1 個密碼子， 決定 1 個氨基酸。(2) 遺傳密碼的種類：遺傳密碼共 64個，其中 61個密碼子分別代表各種氨基酸。 3個為肽鏈合成的終止信號。位于5 '端的AUG除了代表甲硫蛋氨酸外，還是肽鏈合成的起始信號。(3)遺傳密碼的連續(xù)性：對mRNA分子上密碼子的閱讀方法叫讀碼。 正確讀碼是每 3 個相鄰堿基一組，不間斷地連續(xù)讀下去，直到出現(xiàn)終止密碼為止。 mRNAh堿基的插入和缺失，可導(dǎo)致框移突變

44、。(4 )遺傳密碼的簡并性：有 61個密碼子代表20種氨基酸，每個密碼子只代表一種氨基酸，而多數(shù)氨基酸都有24個密碼子，這種由幾個密碼子編碼同一氨基酸的現(xiàn)象稱為簡并性。從密碼表上可看出 密碼子的第 3位堿基通常是簡并的。 (5)遺傳密碼的擺動性：指密碼子與反密碼子 配對不遵從堿基配對規(guī)律，此不嚴(yán)格的配對關(guān)系稱為擺動性。如丙氨酰-tRNA反密碼子的第1位堿基I可以與密碼子第 3位的A、C或U配對。遺傳密碼的擺動性使一 種tRNA可以識別幾種代表同一種氨基酸的密碼子。(6)遺傳密碼的通用性：從細(xì)菌到人的遺傳密碼都市通用的，但近年發(fā)現(xiàn)哺乳類動物線粒體的蛋白質(zhì)合成體系中有 個別例外。如 UAG不代表終

45、止密碼子，而代表色氨酸；CUA不代表亮氨酸，而代表蘇氨酸。(7)遺傳密碼的防錯系統(tǒng)：由于遺傳密碼的簡并性，有 4個密碼的氨基酸， 其第三位的堿基被替換，仍編碼同一種氨基酸，從遺傳密碼表可以看出，只要遺傳 密碼的第二位是 U,則第一位和第三位不論怎么變化，其編碼的氨基酸總是疏水性 的，如第二位是C,則其編碼的氨基酸是非極性的或極性不帶電荷的，若第二位為A或G,則編碼的氨基酸 R基是親水性的，第一位是 A或C,第二位是A或G則編碼 第 15 頁 共 19 頁的氨基酸R基是堿性的，若前兩位是AG則編碼的氨基酸 R基是酸性的。這些規(guī)律使 某些核苷酸的替換可以不引起肽鏈中氨基酸的變化，或被替換的氨基酸理

46、化性質(zhì)相 似。這便是密碼的防錯系統(tǒng)。11. 如果mRNAb的閱讀框已被確定，它將只編碼一種多肽的氨基酸順序。從一蛋白質(zhì)的已知氨基酸順序，是否能確定唯一的一種mRNA勺核苷酸序列？為什么？由于1個密碼子只能編碼一種氨基酸，在mRNA勺開放閱讀框確定后，用遺傳密碼可以推出其相應(yīng)蛋白質(zhì)的氨基酸序列。由于mRN堤由DNA轉(zhuǎn)錄而來的，如果基因(DNA編碼區(qū)的序列已知，也可由此推出相應(yīng)表達(dá)產(chǎn)物的氨基酸序列。但是，由于 除甲硫氨酸和色氨酸外的 18 種氨基酸均有一種以上的密碼子， 由蛋白質(zhì)的氨基酸序 列推斷相應(yīng)mRNA勺核苷酸序列時，我們會面臨多種選擇。比如，由7個氨基酸的序列推測其可能的 mRNA編碼區(qū)序

47、列，若其中有5個氨基酸有2個密碼，則能夠與其相 對應(yīng)的核苷酸序列會有 25種，即有 32種。12. 如果E.Coli染色體DNA的 75%可用來編碼蛋白質(zhì)，假定蛋白質(zhì)的平均相對分子質(zhì)量為60000,以三個堿基編碼一個氨基酸計算，(1)若該染色體 DNA大約能編碼2000種蛋白質(zhì)，求該染色體 DNA的長度？ ( 2)該染色體DNA的相對分子質(zhì)量 大約是多少？(氨基酸殘基的平均相對分子質(zhì)量是120,核苷酸對的平均相對分子質(zhì)量是 640 )。( 1)因為蛋白質(zhì)的平均相對分子質(zhì)量為60000,氨基酸殘基的平均相對分子質(zhì)量為 120,則蛋白質(zhì)的平均氨基酸殘基的個數(shù)為 60000/120=500 個,編碼

48、 2000種蛋 白至少需要2000 X 500X 3個密碼子，而 DNA堿基的75%用來編碼這2000個蛋白， 則該染色體 DNA勺長度為：2000 X 500 X 3/75%=4000000bp。若該 DNA為B-DNA 每 個bp使螺旋軸延伸 0.34nm,則其長度應(yīng)為： 0.34 X 4000000=1360000nm； (2)該染 色體 DNA勺相對分子質(zhì)量大約是640X 4000000= 2560000000=2.56 X 109 Da。13. 原核生物與真核生物翻譯起始階段有何異同？相同之處： ( 1 )都需生成翻譯起始復(fù)合物；( 2)都需多種起始因子參加；( 3)翻譯起始的第一步

49、都需核糖體的大、小亞基先分開；(4)都需要mRN/和氨酰-tRNA結(jié)合到核糖體的小亞基上；(5) mRNAfc小亞基上就位都需一定的結(jié)構(gòu)成分協(xié)助。(6)小亞基結(jié)合 mRNA和起始者tRNA后，才能與大亞基結(jié)合。(7)都需要消耗能量。不同之處： (1)真核生物核糖體是 80S(40S+60S)； eIF 種類多( 10多種)；起 始氨酰-tRNA是met- tRNA (不需甲?；?，mRNA沒有SD序列；mRNA在小亞基上就 位需5'端帽子結(jié)構(gòu)和帽結(jié)合蛋白以及 elF2 ; mRNAB于met-tRNA結(jié)合到小亞基上。(2)原核生物核糖體是 70S( 30S+50S); IF種類少(3種

50、)；起始氨酰-tRNA是fmet- tRNA (需甲?；?；需SD序列與16S-tRNA配對結(jié)合，rps-1辯認(rèn)識別序列；小亞基 與起始氨酰-tRNA結(jié)合后，才與 mRNA吉合。14. 簡述信號肽假說的基本內(nèi)容。 蛋白質(zhì)合成后的靶向輸送原理,有幾種不同的學(xué)說,信號肽假說是目前被普遍接受的學(xué)說之一。分泌性蛋白質(zhì)的初級產(chǎn)物N-端多有信號肽結(jié)構(gòu)，信號肽一旦合成(蛋白質(zhì)合成未終止)，即被胞漿的信號肽識別蛋白(SRP結(jié)合，SRP與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的內(nèi)側(cè)面的受體即對接蛋白（DP結(jié)合，組成一個輸送系統(tǒng)，促使膜通道開放，信 號肽帶動合成中的蛋白質(zhì)沿通道穿過膜，信號肽在沿通道折回時被膜上的信號肽酶 切除，蛋白質(zhì)在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)

51、和高爾基體經(jīng)進(jìn)一步修飾（如糖基化）后，即可被分選到細(xì) 胞的不同部位。15. 肽鏈合成后的加工修飾有哪些途徑？蛋白質(zhì)合成后的加工修飾內(nèi)容有： 信號肽，切除蛋白質(zhì)前體中的特定肽段。 基化、甲基化等。（3）二硫鍵的形成。16.簡述操縱子的基本結(jié)構(gòu)。操縱子的調(diào)控區(qū)有一個操縱序列， 有幾個結(jié)構(gòu)基因，還有操縱子受阻遏而處于關(guān)閉狀態(tài)。若 結(jié)合，可增大操縱子的轉(zhuǎn)錄活性。（1）肽鏈的剪切：如切除 N端的Met，切除（2）氨基酸側(cè)鏈的修飾，如：磷酸化、糖（4 ）與輔基的結(jié)合。一個啟動序列及一個 CAP位點，調(diào)控區(qū)下游CAP位點個調(diào)節(jié)基因編碼阻遏蛋白，阻遏蛋白與操縱序列結(jié)合，使 cAMP與CAP結(jié)合，形成的復(fù)合物與

52、 阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié)和CAP的正性調(diào)節(jié)共同調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)，操縱子機制在原核基因表達(dá)調(diào)控中具有較善遍的意義，因其多是 幾個功能相關(guān)基因串聯(lián)于同一操縱子上，故在同一啟動序列控制下，可轉(zhuǎn)錄出能為 多種蛋白質(zhì)編碼的 mRNA，即多順反子 mRNA。17. 舉例說明基因表達(dá)的誘導(dǎo)與阻遏，正調(diào)控與負(fù)調(diào)控。在特定的環(huán)境信號刺激下，相應(yīng)的基因被激活，基因表達(dá)產(chǎn)物增加，則這種基因是可誘導(dǎo)的。可誘導(dǎo)基因在特定的環(huán)境中表達(dá)增強的過程稱為誘導(dǎo)。例如有DNA 損傷時，修復(fù)酶基因就會在細(xì)菌內(nèi)被誘導(dǎo)激活，使修復(fù)酶的活性增加。相反，如果 基因?qū)Νh(huán)境信號應(yīng)答時被抑制則這種基因是可阻遏的，可阻遏基因表達(dá)產(chǎn)物水平降 低的過程稱

53、為阻遏，例如，當(dāng)培養(yǎng)液中色氨酸供應(yīng)充分時，在細(xì)菌內(nèi)編碼色氨酸合 成相關(guān)酶的基因表達(dá)會被抑制。如果某種基因在沒有調(diào)節(jié)蛋白存在時是表達(dá)的，加 入某種調(diào)節(jié)蛋白后基因表達(dá)活性便被關(guān)閉，這樣的控制為負(fù)調(diào)控。例如，乳糖操縱 子。相反，若某種基因在沒有調(diào)節(jié)蛋白存在時是關(guān)閉的，加入某種調(diào)節(jié)蛋白后基因 活性就被開啟，這種控制稱為正調(diào)控。例如代謝物阻遏。18. 概述原核生物基因表達(dá)調(diào)控的特點。原核基因表達(dá)調(diào)控與真核存在很多共同之處，但因原核生物沒有細(xì)胞核和亞細(xì) 胞結(jié)構(gòu)，其基因組結(jié)構(gòu)要比真核生物簡單，基因表達(dá)的調(diào)控因此而比較簡單。雖然 原核基因的表達(dá)也受轉(zhuǎn)錄起始、轉(zhuǎn)錄終止、翻譯調(diào)控及RNA、蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性等多級調(diào)控

54、，但其表達(dá)開、關(guān)的關(guān)鍵機制主要發(fā)生在轉(zhuǎn)錄起始。其特點包括以下3方面:（1） b因子決定RNA聚合酶的識別特異性：原核生物只有一種RNA聚合酶，核心酶催化轉(zhuǎn)錄的延長，二亞基識別特異啟動序列，即不同的二因子協(xié)助啟動不同基因的轉(zhuǎn)錄。（2）操縱子模型的普遍性：除個別基因外，原核生物絕大數(shù)基因按功能 相關(guān)性成簇地連續(xù)排列在染色體上，共同組成一個轉(zhuǎn)錄單位即操縱子，如乳糖操縱 子等。一個操縱子含一個啟動序列及數(shù)個編碼基因。在同一個啟動序列控制下，轉(zhuǎn) 錄出多順反子 mRNA。（ 3）阻遏蛋白與阻遏機制的普遍性：在很多原核操縱子系統(tǒng)， 特異的阻遏蛋白是控制啟動序列活性的重要因素。當(dāng)阻遏蛋白與操縱基因結(jié)合或解 離

55、時，結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄被阻遏或去阻遏。19. 概述真核生物基因組的特點。（1）基因組結(jié)構(gòu)龐大：哺乳動物基因組DNA由約3 109bp的核苷酸組成。大約有3萬個左右的基因，90%以上的DNA不為蛋白質(zhì)編碼。真核細(xì)胞DNA與組蛋白結(jié)合形成復(fù)雜的染色質(zhì)結(jié)構(gòu)，基因表達(dá)調(diào)控機制更加復(fù)雜。（2）單順反子：真核基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子，即一個編碼基因轉(zhuǎn)錄生成一個mRNA分子，經(jīng)翻譯生成一條多肽鏈。許多蛋白質(zhì)由幾條不同的多肽鏈組成，因此存在多個基因的協(xié)調(diào)表達(dá)。（3）重復(fù)序列：重復(fù)序列在真核DNA中普遍存在，重復(fù)序列長短不一，短的在10個核苷酸以下，長的達(dá)數(shù)百，乃至上千個核苷酸。據(jù)重復(fù)頻率不同分為高度重復(fù)序 列、中度

56、重復(fù)序列及單拷貝序列。（4 ）基因的不連續(xù)性：結(jié)構(gòu)基因的兩側(cè)有不被轉(zhuǎn)錄的非編碼序列，往往是基因表達(dá)的調(diào)控區(qū)。在編碼基因內(nèi)部有一些不為蛋白質(zhì)編 碼的間隔序列，稱內(nèi)含子，而編碼序列稱外顯子，因此真核基因是不連續(xù)的。20. 概述真核生物基因表達(dá)調(diào)控的特點。同原核生物一樣，真核基因表達(dá)調(diào)控的最基本環(huán)節(jié)也是轉(zhuǎn)錄起始，而且某些機 制是相同的，但也存在明顯差別：（1）RNA聚合酶：真核有 3種RNA聚合酶，分別負(fù)責(zé)3種RNA轉(zhuǎn)錄。（2）活性染色質(zhì)結(jié)構(gòu)變化：當(dāng)基因被激活時， 可觀察到染色體相應(yīng)區(qū)域發(fā)生結(jié)構(gòu)和性質(zhì)變化。包括對核酸酶敏感，DNA拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)變化，DNA堿基修飾變化和組蛋白變化。（3）正調(diào)節(jié)占主導(dǎo)地位： 真核RNA聚合酶對啟動子的親和力極小或