W7202 干制生化鑒定試劑盒法-4-微教材

1、農(nóng)產(chǎn)品/食品微生物檢驗(yàn)課程-微教材微課名稱干制生化鑒定試劑盒關(guān)鍵詞微生物；致病菌；生化鑒定試劑盒；干制生化鑒定試劑盒法微課類型講授型微課形式PPT動(dòng)畫式教學(xué)設(shè)計(jì)模式講授法教學(xué)目標(biāo)了解干制生化鑒定試劑盒的組成和種類掌握干制生化鑒定試劑盒的操作步驟及要點(diǎn)教學(xué)內(nèi)容知識(shí)點(diǎn)技能點(diǎn)干制生化鑒定試劑盒的簡(jiǎn)介干制生化鑒定試劑盒的組成干制生化鑒定試劑盒的種類干制生化鑒定試劑盒的操作步驟及要點(diǎn)干制生化鑒定試劑盒的操作步驟知識(shí)講解干制生化鑒定試劑盒一、試劑盒簡(jiǎn)介干制生化試劑盒是一種采用特殊的干制工藝把一般的液體形式生化試劑制備成方便儲(chǔ)存、運(yùn)輸和實(shí)驗(yàn)操作的干制、即用型檢測(cè)產(chǎn)品，用于待測(cè)菌的生化鑒定。1、 試劑盒的組成

2、按照生化反應(yīng)的個(gè)數(shù)，干制生化試劑盒卡盒的多種形式，如4孔盒，10孔盒和16孔盒等等，干制生化鑒定試劑盒有以下四個(gè)部分組成，分別是：（1）盒蓋：防止卡盒在培養(yǎng)過(guò)程中受外界污染。（2）試驗(yàn)孔：內(nèi)有干制試劑，試驗(yàn)時(shí)在試驗(yàn)孔中加入菌液。（3）水槽：試驗(yàn)前加入無(wú)菌水，用于防止菌液在培養(yǎng)過(guò)程中因干燥而失水。（4）結(jié)果記錄板：用于記錄試驗(yàn)結(jié)果。（5）有的致病菌生化試劑盒中還配有三糖鐵試驗(yàn)用培養(yǎng)基和動(dòng)力試驗(yàn)用培養(yǎng)基。2、 試劑盒的優(yōu)點(diǎn)相比其他常規(guī)生化鑒定管和生化套管，干制生化鑒定試劑盒有很多優(yōu)點(diǎn)：如（1）可常溫儲(chǔ)運(yùn)，解決了冷鏈儲(chǔ)存、運(yùn)輸?shù)南拗疲?jié)省成本、減少玻璃制品損耗及存儲(chǔ)空間。 （2）試劑盒生化項(xiàng)目設(shè)置完

3、全符合最新國(guó)標(biāo)要求，一塊試劑盒上完成一株菌的檢測(cè)，省去了尋找、打開(kāi)安瓿瓶的時(shí)間，操作更為省時(shí)、安全，快捷。 （3）卡盒可疊放，無(wú)需配備生化管架，節(jié)省培養(yǎng)空間。 （4） 需要滴加化學(xué)試劑觀察結(jié)果時(shí)，蓋上盒蓋可避免人員吸入刺激性氣體，起保護(hù)作用。 （5） 結(jié)果穩(wěn)定性高，延長(zhǎng)培養(yǎng)至48h結(jié)果不會(huì)發(fā)生變化。 （6）縮短檢測(cè)時(shí)間。24-48小時(shí)即出結(jié)果，改進(jìn)了某些糖培養(yǎng)到72h遲緩發(fā)酵的情況。3、 試劑盒的種類干制生化鑒定試劑盒可用于哪些致病菌的檢驗(yàn)?zāi)?？目前?0種致病菌可使用干制生化鑒定試劑盒進(jìn)行生化鑒定。主要有：沙門氏菌、副溶血性弧菌、單增李斯特氏菌、志賀氏菌、蠟樣芽胞桿菌、阪崎腸桿菌、小腸結(jié)腸炎耶

4、爾森氏菌、大腸埃希氏菌、致瀉氏大腸埃希氏菌、大腸埃希氏菌O157：H7。二、 操作步驟：根據(jù)說(shuō)明書，干制生化鑒定試劑盒的操作程序?yàn)椋海?）打開(kāi)盒蓋，在試劑盒的長(zhǎng)條槽中加入1ml無(wú)菌水，進(jìn)行保濕。（2）用接種環(huán)從平板上挑取單個(gè)純菌落至適量無(wú)菌水中，制成麥?zhǔn)蠞岫鹊木痪鷳乙?。?）將菌液加入試劑盒上圓孔中，每孔（根據(jù)各盒具體說(shuō)明書，有的試劑盒需要添加輔助試劑），蓋上盒蓋。（4）放置培養(yǎng)箱， 按規(guī)定的溫度和時(shí)間培養(yǎng)后，判讀結(jié)果。三、應(yīng)用舉例1、使用沙門氏菌干制生化鑒定試劑盒進(jìn)行沙門氏菌的生化鑒定（1）從鋁箔袋中取出試劑盒，打開(kāi)盒蓋；（2）用接種針從平板上挑取新鮮培養(yǎng)單個(gè)可疑菌落，先劃線接種至三糖鐵和

5、動(dòng)力生化管，再去適量接種至無(wú)菌水中，制成麥?zhǔn)暇鷳乙?；?）接種菌懸液分別至試劑盒的圓孔中； （4）利用石臘油或礦物油覆蓋指定的生化孔；（5）蓋上盒蓋，放入培養(yǎng)盒內(nèi)；（6）將試劑條與三糖鐵生化管一同置于36 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； （7）培養(yǎng)結(jié)束后，將附加試劑加進(jìn)適當(dāng)?shù)男】字?；?）觀察結(jié)果并按照產(chǎn)品說(shuō)明書進(jìn)行判讀；（9）根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)描述進(jìn)行判定。注意：氰化鉀劇毒，實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)做好個(gè)人防護(hù)，避免接觸、入口或吸入。2、使用副溶血性弧菌干制生化鑒定試劑盒進(jìn)行副溶血性弧菌的生化鑒定（1）從鋁箔袋中取出試劑盒，取出時(shí)切勿將托盤倒置,以防止卡盒和生化管掉落；（2）用接種針從平板上挑取新鮮培養(yǎng)單個(gè)可疑菌落接種至適量無(wú)菌水中，制成麥?zhǔn)暇鷳乙?，注意菌懸液濃度不宜過(guò)大，否則可能產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果；（3）用一次性滴管分別滴加一滴糖發(fā)酵添加劑于葡萄糖、蔗糖、乳糖三個(gè)帶有“”試驗(yàn)孔中；（4）在所有的生化項(xiàng)目孔中加入0.2 mL制備的菌懸液；（5）標(biāo)有“ ”的生化項(xiàng)目表示在接種后需滴加礦物油。（6）由于此生化鑒定試劑盒中適配三糖鐵實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象不明顯，一般將這個(gè)實(shí)驗(yàn)單獨(dú)操作。（7）與三糖鐵、動(dòng)力生化管一同置于36 的恒溫恒濕培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，其中ONPG實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)1-3h觀察結(jié)果，如為陰性繼續(xù)培養(yǎng)至24h觀察結(jié)果；（8）培養(yǎng)結(jié)束后，在標(biāo)有“【】”的生化項(xiàng)目表示在觀察結(jié)果時(shí)