W4102-4校準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制-醬油中氨基酸態(tài)氮測(cè)定-微教材

1、食品快速檢測(cè)技術(shù)課程-微教材微課編號(hào)W4102微課名稱(chēng)校準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制-醬油中氨基酸態(tài)氮測(cè)定所屬模塊（章節(jié)）食品成分快速檢測(cè)子模塊調(diào)味品成分快速檢測(cè)關(guān)鍵詞醬油；氨基酸態(tài)氮；比色法；校準(zhǔn)曲線(xiàn)是否通用通用 農(nóng)產(chǎn)品 食品是否重點(diǎn)建設(shè)是 否微課類(lèi)型實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)型微課形式混合拍攝式教學(xué)設(shè)計(jì)模式直觀演示法教學(xué)目標(biāo)1、熟悉比色法快速測(cè)定醬油中氨基酸態(tài)氮的原理；2、會(huì)采用比色法進(jìn)行醬油中氨基酸態(tài)氮測(cè)定的校準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制規(guī)范操作；3、會(huì)用excel進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制。教學(xué)內(nèi)容知識(shí)點(diǎn)技能點(diǎn)1、 比色法測(cè)定醬油中氨基酸態(tài)氮的原理；2、 用excel繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。1、比色法測(cè)定醬油中氨基酸態(tài)氮的校準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制規(guī)范操作。知識(shí)講解1.比

2、色法檢測(cè)醬油中氨基酸態(tài)氮的原理醬油中氨基酸酸態(tài)氮的檢測(cè)方法，國(guó)標(biāo)中規(guī)定的有兩種：第一種是“甲醛值法”，第二種是比色法。本微課采用GB/T 5009.39-2003 醬油衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法中比色法演化而來(lái)的快速檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)醬油中的氨基酸態(tài)氮的含量。其原理是： 在pH=4.8 的乙酸鈉- 乙酸緩沖溶液中，氨基酸態(tài)氮與乙酰丙酮和甲醛反應(yīng)生成黃色的3，5- 二乙酰-2，6- 二甲基-1，4 二氫化吡啶氨基酸衍生物，在波長(zhǎng)406nm 處測(cè)定吸光度，據(jù)此測(cè)定醬油中氨基酸態(tài)氮含量。該方法的檢測(cè)范圍：。 檢出限為。邊學(xué)邊練任務(wù)：醬油中氨基酸態(tài)氮的快速檢測(cè)（比色法）操作步驟：一、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)器材為：加熱器、普析

3、T3FS-GP食品安全現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)儀（可見(jiàn)分光光度計(jì)）；超聲波振蕩器，振蕩器，提取瓶1只，16mm比色管2支及比色管架，可調(diào)取液器100-1000µl1支及配套槍頭若干。實(shí)驗(yàn)試劑為：醬油中氨基酸態(tài)氮測(cè)定試劑，氨氮標(biāo)準(zhǔn)使用溶液（）。二、實(shí)驗(yàn)操作預(yù)設(shè)加熱器溫度100，開(kāi)始升溫。安裝檢測(cè)儀的比色管附件，打開(kāi)檢測(cè)儀電源開(kāi)關(guān)，進(jìn)入【食品安全】，選定【醬油中氨基酸態(tài)氮】，按【開(kāi)始測(cè)量】鍵，調(diào)出測(cè)定醬油中氨基酸態(tài)氮的程序。（本方法選用直徑16mm 比色管）。 將醬油中氨基酸態(tài)氮的測(cè)定試劑母液全部倒入測(cè)定試劑 2 中，再加水，超聲使全部互溶且澄清后配成測(cè)定試劑 2。分別移取氨氮標(biāo)準(zhǔn)使用溶液（）0mL

4、、0.4 mL、0.8mL 于10.0mL 比色管中， 分別加蒸餾水1mL，；各管中氨基酸態(tài)氮含量分別為g、g、g、g、g、g。 各管分別加入2.0mL 醬油中氨基酸態(tài)氮測(cè)定試劑 1，搖勻；分別加入2.0mL ，醬油中氨基酸態(tài)氮測(cè)定試劑 2，搖勻。 將比色管插入加熱器孔中，按【定時(shí)】鍵，定時(shí)15min；定時(shí)器鳴響后，取出冷卻至室溫。冷卻后，在屏幕左上方按【設(shè)置】鍵，選擇【曲線(xiàn)繪制】，將空白管插入比色管架， 按【校零】鍵校零。校零完成后，按【增加】鍵，在屏幕上輸入微克數(shù)后，將對(duì)應(yīng)的比色管插入比色管架，按【測(cè)量】鍵，稍后屏幕顯示吸光值。重復(fù)，全部做完后按【圖形】鍵，觀察曲線(xiàn)及參數(shù)，判斷曲線(xiàn)合格時(shí)，按【采用】鍵，保存曲線(xiàn)。三、注意事項(xiàng) 醬油中氨基酸態(tài)氮的測(cè)定試劑 2 配好后低溫保存，保質(zhì)期為7天。 比色管從加熱爐中取出時(shí)小心，管內(nèi)氣體可能會(huì)沖開(kāi)比色管塞子。四、Excel繪制校準(zhǔn)曲線(xiàn)的方法Excel工資表中操作如下：1. 輸入相應(yīng)數(shù)據(jù)，本實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)是以氨氮含量對(duì)校正吸光度做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，因此，數(shù)據(jù)第一列為“氨氮含量，”，單位是：g；第二列為校正吸光度（即各管溶液用空白管溶液吸光度校零后獲得的吸光度值）。2. 選中相應(yīng)數(shù)據(jù)；3. 在上方工具欄里選插入散點(diǎn)圖，并選中第一個(gè)類(lèi)型的散點(diǎn)圖；4. 選中插入的圖表在工具欄里的圖表布局里選中第三行最后一個(gè)。5. 選中后