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1、植物細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)的失敗分析及改進(jìn)方案植物細(xì)胞有絲分裂觀察實(shí)驗(yàn)是高中生物學(xué)的重點(diǎn)和難點(diǎn)實(shí)驗(yàn)之 一其中涉及的原理技術(shù)對(duì)其后的學(xué)習(xí)具有重要意義。 然而根據(jù)目前教 科書中觀察植物細(xì)胞有絲分裂的方法來做實(shí)驗(yàn)由于材料的選擇和處 理中諸多不確定因素, 往往出現(xiàn)效果不理想或者實(shí)驗(yàn)時(shí)間需要協(xié)調(diào)等 問題,師生對(duì)此實(shí)驗(yàn)感受到比較棘手, 不少師生對(duì)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)只重視 結(jié)果不重視結(jié)果分析, 只滿足于實(shí)驗(yàn)的成功而不愿意對(duì)失敗原因進(jìn)行 闡述. .一、實(shí)驗(yàn)存在的問題1 1、取材不易,培養(yǎng)較難 鏡查時(shí)找不到分裂相細(xì)胞與材料的選擇和培養(yǎng)有關(guān)。 長(zhǎng)出的根數(shù)量少或不長(zhǎng)根, 蔥和健壯的洋蔥一起培養(yǎng), 洋蔥在相同的條件下培養(yǎng), 關(guān),長(zhǎng)
2、霉而沒有腐爛的洋蔥培養(yǎng)出的根尖少, 把洋蔥鱗片的基部切除,因只有變態(tài)葉缺少變態(tài)莖,所以不會(huì)長(zhǎng)根。 因此,在選擇洋蔥時(shí),應(yīng)選新鮮營(yíng)養(yǎng)豐富、 不長(zhǎng)霉、不腐爛的健壯品, 取材確為不易; 培養(yǎng)時(shí)瓶?jī)?nèi)裝滿清水,讓洋蔥的底部接觸到瓶?jī)?nèi)的水 面,并把這個(gè)裝置放在溫暖的地方,注意經(jīng)常換水,使洋蔥的底部總 是接觸到水,以防止根的腐爛, 這樣培養(yǎng)對(duì)于一線的教師來說確實(shí)是 一件較為繁瑣的事。2 2、取材時(shí)間的選定較難 有絲分裂活動(dòng)的高峰時(shí)間不一定恰好是實(shí)驗(yàn)時(shí)間。 為了能找到有 絲分裂各期的典型細(xì)胞, 在多數(shù)教材中, 實(shí)驗(yàn)材料的選取多在有絲分裂活動(dòng)的高峰期進(jìn)行, 并把剪下的根尖立即投入鹽酸、 酒精中固定解 離(解離液
3、是質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 15%15%的鹽酸和體積分?jǐn)?shù)為 95%95%的酒精溶液按 1 1:1 1 的比例混合而成),但是選用不同的材料時(shí),有絲分裂活動(dòng)的高 峰期不同。例如:大蒜在 13-13.513-13.5 時(shí),洋蔥在 1111 時(shí)左右和 15-1615-16 時(shí), 小麥在 11-1311-13 時(shí);并且可能因品種、室溫等條件不同,在各地的具體 時(shí)間有所差別。由于多數(shù)材料有絲分裂活動(dòng)的高峰期并不在實(shí)驗(yàn)課時(shí) 間,這就使實(shí)驗(yàn)過程中找到正處于有絲分裂時(shí)期的細(xì)胞的可能性大大 降低,甚至根本找不到有絲分裂時(shí)期的細(xì)胞。3 3、取材部位把握不好腐爛的洋蔥 培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)了會(huì)發(fā)臭, 若把部分腐爛的洋 則會(huì)使健壯洋蔥長(zhǎng)霉腐
4、爛; 同一批購(gòu)買的 有的長(zhǎng)根有的不長(zhǎng)根, 這與洋蔥的休眠有 易腐爛散發(fā)出的氣味濃,準(zhǔn)確切取根尖生長(zhǎng)點(diǎn)部位, 是實(shí)驗(yàn)成功的前提, 一些學(xué)生制成的 臨時(shí)裝片中往往看不到或看到很少的分裂相細(xì)胞, 就是因?yàn)榍腥〔课?錯(cuò)誤導(dǎo)致的, 即沒有選準(zhǔn)根尖的生長(zhǎng)點(diǎn)部分, 有些學(xué)生以為根尖越長(zhǎng) 越好,盡撿長(zhǎng)的, 鏡檢時(shí)分不清哪端是根尖且因查找的范圍廣,很難 找到分裂相細(xì)胞,有些學(xué)生剪取正常的 2-3m2-3mm m根尖,但染色時(shí)因染色 劑顏色較深,很難從染液中揮取,造成染色時(shí)間過長(zhǎng)。4 4、 材料處理時(shí)間把握不好 根尖解離時(shí),時(shí)間要嚴(yán)格控制,解離時(shí)間不足,壓片時(shí)細(xì)胞不易分散,細(xì)胞重疊看不清,效果不好;解離時(shí)間過長(zhǎng),
5、細(xì)胞分離過度, 無法取出根尖進(jìn)行染色制片。 染色時(shí)間要嚴(yán)格控制, 染色不足無法分 辨,染色過度也無法分辨。5 5、 顯微鏡操作不當(dāng)顯微鏡操作要按一定的程序進(jìn)行, 特別是對(duì)光程序、 高倍鏡觀察 程序,有的學(xué)生不按程序操作,結(jié)果既耽誤了進(jìn)間,又觀察不到相應(yīng) 的結(jié)果,而且易損壞顯微鏡,常有學(xué)生壓碎蓋玻片,載玻片,弄臟鏡 頭,找不到組織,細(xì)胞等,觀察到的只是一些載玻片上臟物,目鏡或 物鏡上不能移動(dòng)的臟物,一團(tuán)漆黑或一片空白。二、實(shí)驗(yàn)方法步驟的改進(jìn)方案一1 1、材料選取:查閱資料以吊蘭根尖為材料,對(duì)比目前常用的洋 蔥、大蒜,小麥,根尖等其他材料,發(fā)現(xiàn)它具有材料易得,取材時(shí)間 要求不嚴(yán),實(shí)驗(yàn)操作較易,實(shí)驗(yàn)
6、效果較好等優(yōu)點(diǎn),更易觀察到細(xì)脃有 絲分裂各時(shí)期的分裂相。吊蘭(chlorphytumcomosumjackchlorphytumcomosumjack )是百合科多年生草本植物,各 地極常見的室內(nèi)栽培觀葉花卉, 本實(shí)驗(yàn)用的是它的匍匐莖 (也稱走莖) 上長(zhǎng)出的具有氣生根的新植株。 該材料較易獲得, 因?yàn)榈跆m主要通過 無性繁殖方式繁殖(栽培一年即有大量氣生根) 。2 2、材料的處理( 1 1)取材時(shí)間和取材長(zhǎng)度, 吊蘭根尖一般上午 8-108-10 間處于分裂 高峰,此時(shí)取材可看到極多的分裂相,甚至高倍鏡下都可在一個(gè)視野 中看到各種分裂相。但白天其他時(shí)間取材也都可以容易地看到各時(shí)期 的分裂相, 所
7、以以簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)操作和提高學(xué)生參與方面考慮, 筆者認(rèn)為 幾乎不必實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行固定, 可以在實(shí)驗(yàn)時(shí)讓學(xué)生直接取材。 取材長(zhǎng)度 也沒有太多限制, 短到只要?dú)馍庥邪咨霈F(xiàn)即可長(zhǎng)至長(zhǎng)到幾厘米 的“老根”根尖都可以看到分裂相。( 2 2)解離和漂洗時(shí)間吊蘭根尖細(xì)胞柔嫩,較容易解離,用20%20%鹽酸只需 5-105-10 分鐘即可,漂洗也十分方便,用鑷子夾住氣生根,在 清水中來回涮幾下(約半分鐘,以加快除去鹽酸)再浸泡 1-21-2 分即可 進(jìn)行對(duì)根尖染色。( 3 3)染色和壓片處理:染色可直接在載皮片上進(jìn)行,先用刀片 將根尖白色的分生區(qū)(約 2mm2mm 切下,用鑷子壓扁滴上 1 1 滴 0.02%0.
8、02%龍 膽此染液, 染色 1-21-2 分鐘。染色過程中最好要用鑷子尖斜著在根尖上 壓幾下(約 1010 秒),使之進(jìn)一步分散開,從而染色更加均勻。染色結(jié) 束時(shí),用吸水紙從一側(cè)小心地將染液吸干 , , 滴加一滴清水在根尖上, 蓋上蓋玻片,加幾層吸水紙?jiān)谏厦妫媚粗复怪庇昧簬紫?,使?xì)胞 分散開,移開吸水紙即可觀察。( 4 4)用醫(yī)用龍膽紫藥水與蒸餾水按 1 1:5 5 稀釋后染色。醫(yī)用龍膽 紫藥水一般醫(yī)院里都有, 容易買到并且價(jià)格比較低廉, 而且稀釋后對(duì) 染色體染色的效果也不錯(cuò)。( 5 5)顯微鏡觀察方法基本同其他材料。我認(rèn)為在做實(shí)驗(yàn)之前教 師可安排學(xué)生觀察洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂的固定裝片,
9、使學(xué)生有一個(gè) 深刻的感性認(rèn)識(shí)。 實(shí)驗(yàn)時(shí)可指導(dǎo)學(xué)生先用低倍鏡找到近正方形或近圓 形的分裂細(xì)胞。 因?yàn)榉稚鷧^(qū)細(xì)胞的特點(diǎn)是正方形排列緊密,有的細(xì)胞處于分裂狀態(tài)。 再用高倍鏡找出處于細(xì)胞分裂中期的細(xì)胞,因?yàn)橹衅谌旧w的形態(tài)固定, 數(shù)目清晰,染色體的著點(diǎn)很整齊地排列在赤道板, 是觀察染色體的最佳時(shí)期,然后再找出前期、后期、末期的細(xì)胞。三. 實(shí)驗(yàn)方法步驟的改進(jìn)方案二一. 取材1 1、材料選?。憾嗄陙韺?duì)洋蔥與大蒜的根尖進(jìn)行對(duì)比,發(fā)現(xiàn)大蒜根尖比洋蔥根尖的效果更好,優(yōu)點(diǎn)是大蒜根尖取材更方便,容易培養(yǎng), 生長(zhǎng)快成本低,細(xì)胞分裂活躍,分裂相多,而且大蒜根尖纖細(xì),解離 和染色快,染色體清晰。2 2、培養(yǎng)方法:選個(gè)大、
10、飽滿的大蒜頭,分囊后用鐵絲或竹簽將蒜 瓣穿成一排,擱于盛有清水的容器IHR1IIIHR1II上培養(yǎng),使每囊蒜瓣的底部都浸沒廠 X X 4 4于水中,在室溫 20C20C 上下陽(yáng)光充足 I I 1 1的晴天養(yǎng) 3 34 4 天,期間換 1-21-2 次水,卩州 1 1 屈 h h :; flKlflKl 根尖就可長(zhǎng)到 2 22.5cm2.5cm,即可剪取 備用如圖 1 1。(注:一個(gè)蒜頭至少有圖18 8 囊,平均每囊能長(zhǎng) 2020 多根根尖,一個(gè)蒜頭能長(zhǎng) 160160 多根根尖,可供 3 3 個(gè)班用,相比洋蔥來說成本低得 多)3 3、根尖剪取時(shí)間:根尖細(xì)胞分裂旺盛時(shí)取材,因?yàn)榇藭r(shí)分裂相 多,實(shí)驗(yàn)
11、效果好,根據(jù)筆者多年的經(jīng)驗(yàn),取材時(shí)間一般在晴天的中午 1 1: 0000 前后,根尖質(zhì)量較好。一、根尖的固定由于教材的編制和教學(xué)進(jìn)度的限制,一般不能直接取到正處于分 裂旺盛時(shí)期的新鮮根尖,這就需要把根尖固定并保存起來備用。 其方 法是將剪取的根尖置于固定液(1 1 份冰醋酸和 3 3 份 95%95%酉精的混合液) 中固定,使根尖的生長(zhǎng)點(diǎn)細(xì)胞變成乳白色,根尖下沉(因?yàn)樾迈r的根 尖是浮在固定液液面上的),一般需 12122424 小時(shí),然后用 70%70%酒精漂 洗,再置于 70%70%勺酒精中保存,隨用隨取。二、解離和漂洗把根尖放入 15%15%勺鹽酸中解離, 由于大蒜根尖纖細(xì), 解離時(shí)間只
12、需 8 81010 分鐘,就能使生長(zhǎng)點(diǎn)細(xì)胞基本酥散。把已解離的根尖取出放 入盛有清水的大燒杯中,用玻璃棒或鑷子輕輕攪動(dòng)漂洗 3 3 分鐘,期間A 換一次清水,再將漂洗后的清水倒出,即可進(jìn)入下一步染色。三、染色1 1、把漂洗后酥軟的根尖用鑷子從清水中取出置于載玻片中央, 并用吸水紙將根尖吸干,目的使染液保持一定的濃度。2 2、用刀片在載玻片上切取乳白色米粒樣的生長(zhǎng)點(diǎn)細(xì)胞,并將生 長(zhǎng)點(diǎn)有規(guī)律地縱剖,取其 1/31/3 1/51/5 生長(zhǎng)點(diǎn)細(xì)胞為染色材料。3 3、 滴兩滴 2%2%醋酸的龍膽紫染液 或醋酸洋紅染液進(jìn)行染色,染色時(shí)間:浮2 2。%昔酸龍膽紫染液染色 2 2 分鐘左右,H H醋酸洋紅染色
13、 5 5 分鐘或用肉眼觀察染 色材料變紅即可。四、壓片染色后蓋上蓋玻片,在蓋玻片上 墊 3 3 5 5 層吸水紙,用拇指重壓,但不 能研轉(zhuǎn),使生長(zhǎng)點(diǎn)細(xì)胞均勻地壓成一薄薄的霧狀細(xì)胞層, 到高倍鏡檢觀察,效果極好。2%2%醋酸 龍膽紫染液染色結(jié)果見照 2 2,用醋酸 洋紅染液染色的結(jié)果見照 3 3。按照上述經(jīng)過改進(jìn)的實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)進(jìn) 行操作能使 95%95%以上的學(xué)生觀察到植 物細(xì)胞有絲分裂各期染色體變化的情 況,起到實(shí)驗(yàn)教學(xué)良好的效果。四. 實(shí)驗(yàn)方法步驟的改進(jìn)方案三 1 1、材料的選取應(yīng)該靈活,不是必須用洋蔥 洋蔥是較為典型的用于觀察植物細(xì)胞有絲分裂的材料,效果也較為理 想。但由于受季節(jié)及學(xué)生人數(shù)等條
14、件的限制, 培養(yǎng)的洋蔥根尖往往不 能滿足學(xué)生實(shí)驗(yàn)的需要,影響了實(shí)驗(yàn)的正常進(jìn)行。針對(duì)上述情況,筆 者近年來試著用大蒜、小麥、蠶豆、蒜苗、車前草等代替洋蔥作為實(shí) 驗(yàn)材料,發(fā)現(xiàn)蠶豆、小麥、大蒜等均達(dá)到較為理想的效果。這些不同 的材料來源方便,培養(yǎng)期短,易生根,根尖數(shù)目多,且可在不同的季 節(jié)選用不同的材料。因此, 可以用這些材料代替洋蔥完成實(shí)驗(yàn),達(dá)到 實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹? 2、洋蔥根尖的培養(yǎng)應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況采用不同的方法洋蔥的生根與周圍環(huán)境的溫度關(guān)系密切。在室溫202025C25C 范圍內(nèi)洋 蔥鱗莖易生根,且數(shù)目多、生長(zhǎng)速度快 ; ; 在較低或較高溫度條件下, 則生根少、 生長(zhǎng)較慢且易老化, 尤其是經(jīng)冷藏或輻射
15、處理而處于休眠 期的洋蔥鱗莖更不易生根 ( ( 在然后從低倍昭2八、 、3pdo Z1IF照3市場(chǎng)上買到的洋蔥則多是經(jīng)過冷藏或輻 射處理過的 ) ) 。對(duì)于這樣的材料,培養(yǎng)前先用刀片切去處于休眠狀態(tài) 的陳根,讓它們?cè)?202025C25C 溫度下放幾周時(shí)間,待根部周圍長(zhǎng)出許 多白色突起后再培養(yǎng),就可以提高生根率。在室溫 20202525C C 條件下, 于實(shí)驗(yàn)前 5 57d7d 選取底部鱗莖盤面積較大的洋蔥, 用刀片切去底部陳 根或切去一薄層,放在盛滿水的燒杯或廣口瓶上, 使其底部接觸水面, 置于溫暖向陽(yáng)處, 注意每天換水, 以免因氧氣不足等而造成根尖生長(zhǎng) 緩慢或腐爛。3 3、根尖的取材時(shí)機(jī)會(huì)
16、影響到實(shí)驗(yàn)的效果 教科書上沒有要求取材時(shí)機(jī), 但是實(shí)踐證明, 用作觀察細(xì)胞分裂的植 物根尖的取材時(shí)間非常重要。各種不同植物的根尖細(xì)胞在一天 2424 小 時(shí)內(nèi)進(jìn)行分裂的時(shí)刻不同, 分裂的高峰期也不盡相同。 所以根尖的取 材時(shí)間應(yīng)根據(jù)不同植物種類培養(yǎng)的溫度條件選取最佳的時(shí)機(jī)。 洋蔥的 根尖細(xì)胞在常溫 2020 C C 左右時(shí),1010 時(shí)至 1616 時(shí)根尖細(xì)胞分裂較旺盛,尤 以 1111 時(shí)左右為最佳,在其他時(shí)間剪取根尖,則不易觀察到不同分裂 期的細(xì)胞。因此,當(dāng)根長(zhǎng)到 2 23c3cm m時(shí)在 1111 時(shí)左右可以取材,取材長(zhǎng) 度以 5mn5mn 左右為宜 4 4、根尖的固定與解離,用 15%
17、15%的鹽酸代替 10%10%的鹽酸 固定的目的是迅速殺死細(xì)胞并能使細(xì)胞核及細(xì)胞器在形態(tài)結(jié)構(gòu)上盡 可能保持生活時(shí)的完整和真實(shí)狀態(tài)。 解離的目的是使細(xì)胞的胞間層物 質(zhì)溶解,在壓片時(shí)細(xì)胞易于分散。 傳統(tǒng)的做法是固定與離析同時(shí)進(jìn)行, 即把取的材料放在由等量的濃鹽酸和 95%95%的酒精所配制的固定離析液 中進(jìn)行固定與解離。 實(shí)踐證明這樣做不如把固定與解離分開進(jìn)行效果好。即把取下的材料先放在固定液中,固定時(shí)間為3 35h5h。固定劑可 選用常用的 FFAFFA 固定劑即福爾馬林- -醋酸- -酒精固定劑,固定好的材料 可放在 70%70%的酒精溶液中保存。根尖的解離要掌握正確的解離時(shí)間。若解離時(shí)間太短
18、, 細(xì)胞不易完全分散開, 解離時(shí)間太長(zhǎng)根尖完全酥軟, 無法進(jìn)行觀察。 解離液以 15%15%的鹽酸溶液為好, 用 15%15%的鹽酸代替 10%10% 的鹽酸可縮短解離時(shí)間。 把固定好的根尖取出用清水沖洗干凈后放入 盛有 15%15%鹽酸離析液的培養(yǎng)皿中,解離時(shí)間 5min5min 左右,只要根尖色 澤變白略帶透明即可,此時(shí)根尖壓片效果較好。5 5、根尖的染液中加少量 10%10%醋酸更好 染色是制作根尖臨時(shí)裝片的另一個(gè)關(guān)鍵步驟,其目的是使細(xì)胞的細(xì)胞 質(zhì)和細(xì)胞核及核中的染色體分別染上深淺不一的顏色, 以便清晰地觀 察細(xì)胞分裂各個(gè)時(shí)期的特征。洋蔥根尖的染色劑常用的是龍膽紫和醋 酸洋紅。醋酸洋紅因
19、價(jià)格較貴, 配制復(fù)雜且染色效果又不如龍膽紫好, 故目前多用龍膽紫作染色劑。而僅用 1%1%的龍膽紫溶液對(duì)根尖進(jìn)行染 色,細(xì)胞核內(nèi)都被染成深紫色,染色體不突出,在顯微鏡下難以清晰 地觀察到有絲分裂各個(gè)時(shí)期核內(nèi)染色體行為的變化。 根據(jù)筆者多次比 較體會(huì),發(fā)現(xiàn)在 1%1%龍膽紫溶液中滴加少量 10%10%醋酸至溶液呈鮮亮的紫 色,這樣配制的染色劑,醋酸起到一定的分色作用,可加強(qiáng)細(xì)胞核和 染色體的選擇性著色, 以避免核內(nèi)都染成一片深紫色, 從而達(dá)到良好 的觀察效果且用這種方法配制的染色劑可長(zhǎng)久保存, 溶液不易產(chǎn)生沉 淀。用清水洗凈解離根尖, 用鑷子將洋蔥根尖放在載玻片上。 為了使其染 色均勻,可用鑷子
20、將圓柱狀的根尖輕輕壓扁, 加 2 2 滴染色液進(jìn)行染色, 染色時(shí)間 3 35min5min。染色時(shí)若用酒精加熱,效果更好。但注意加熱時(shí) 不可使染色液蒸發(fā), 只需使載玻片在酒精燈火焰上來回移動(dòng)幾次即可。染色完畢,蓋上蓋玻片,再蓋以 2 2 層吸水紙,用拇指輕壓一下 ( ( 也可 用鉛筆的橡皮頭在蓋玻片上輕輕敲幾下 ) ) ,即可使根尖細(xì)胞均勻地?cái)U(kuò) 散成云霧狀, 四周多余的水分可用吸水紙吸掉, 這樣就可在顯微鏡下 進(jìn)行觀察了。 至此,一個(gè)較為理想的用于觀察植物細(xì)胞有絲分裂的臨 時(shí)裝片即告制成。6 6、學(xué)生實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的調(diào)整 中學(xué)生物課一般為每節(jié)課 4545 分鐘,而完整地完成這個(gè)實(shí)驗(yàn),大概需 2 2
21、節(jié)課。 2 2 節(jié)課連排在中學(xué)中一般不可能,那么教師就必須對(duì)實(shí)驗(yàn)內(nèi) 容作些調(diào)整。裝片制作過程中,解離 T T 漂洗 T T 染色 T T 制片是一個(gè)完整 的實(shí)驗(yàn)程序。為了節(jié)省時(shí)間, 使學(xué)生有充足的時(shí)間觀察洋蔥根尖細(xì)胞 有絲分裂各個(gè)時(shí)期, 教師可在上課前將解離和漂洗這兩步驟做好。 這 樣,可節(jié)省 20202525 分鐘(minmin)。五 實(shí)驗(yàn)方法步驟的改進(jìn)方案四 ( 一) 材料的選擇和根尖的培養(yǎng)1 1) . . 材料的選擇 . . 根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,洋蔥根尖是典型并較為理想的觀察植物細(xì)胞有絲分裂的材料, 但在近些年的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn), 我們地區(qū)市面出售的洋蔥有兩個(gè)旺季, 一是秋季出售的本地產(chǎn) 的洋蔥 .
22、 .二是夏季出售的從外地運(yùn)入我市的洋蔥 . . 本地產(chǎn)的洋 蔥在深秋時(shí)收獲, 隨即進(jìn)入休眠期, 春季做有絲分裂實(shí)驗(yàn)時(shí)生 根比較容易,并且發(fā)根多,生長(zhǎng)迅速,是有絲分裂實(shí)驗(yàn)的好材 料. . 我校多在九月份做此實(shí)驗(yàn), 此時(shí)本地產(chǎn)洋蔥未上市, 從外 地運(yùn)入我市的洋蔥, 大多數(shù)經(jīng)過激光或冷藏處理, 不發(fā)根或很少發(fā)根. . 即使未經(jīng)上述處理,夏季收獲的洋蔥有自然休眠的特 性,休眠期一般為三個(gè)月左右,在此期間不發(fā)根或極少發(fā)根 總之,無論哪種情況, 我們學(xué)校用洋蔥做有絲分裂的實(shí)驗(yàn)材料 都不適宜 . . 在教學(xué)實(shí)踐中我借鑒他人的實(shí)驗(yàn)成果,用大蒜的根 尖做實(shí)驗(yàn)材料 . . 首先在我們地區(qū)市面出售的大蒜多為山東產(chǎn)大
23、 蒜,一年四季都有出售,夏季收獲的大蒜,休眠期約為 2020 7575天,在我校做有絲分裂實(shí)驗(yàn)時(shí),已越過休眠期,容易發(fā)根;其 次山東產(chǎn)大蒜瓣多, 而且每一瓣都可發(fā)根十幾條, 原料用量少, 而收獲根尖比較多,可謂物美價(jià)廉;再者,大蒜根尖比洋蔥根尖細(xì),便于解離 . . 實(shí)踐證明,在我們地區(qū)大蒜根尖是有絲分裂實(shí)驗(yàn)不可多得的好材料2 2). . 培養(yǎng)根尖 . .實(shí)驗(yàn)過程要求培養(yǎng)洋蔥根尖時(shí)要用廣口瓶裝滿清水, 讓洋蔥底部接觸到瓶?jī)?nèi)的水面, 并且使洋蔥的底部總 是接觸到水 . . 這需要教師細(xì)心觀察并及時(shí)添加清水 . . 我們?cè)谂?養(yǎng)大蒜根尖時(shí)采取了改進(jìn)措施, 具體方法是: 找一塊不太厚的 泡沫塑料板,
24、在上面挖一些大小能放進(jìn)蒜瓣的小孔 (孔要比蒜 瓣略小些),取一定數(shù)量的大蒜瓣,剝?nèi)ネ膺吥べ|(zhì)枯衣,將蒜 瓣放入小孔后輕輕擠壓蒜瓣, 使蒜瓣基部微微凸起的根原體剛 好從小孔內(nèi)露出為宜,然后將泡沫塑料板放在盛有清水的臉盆內(nèi)或水槽內(nèi), 由于浮力的作用, 泡沫塑料板浮在水面上, 而大蒜基部根原體又能始終接觸到水面, 每 天換水一次, 3434 天就長(zhǎng)出合適長(zhǎng)度的根供實(shí)驗(yàn)用 . . 用這種方法培養(yǎng) 大蒜根尖,操作方便,簡(jiǎn)單易行,教師省時(shí)省力 ( 二) 實(shí)驗(yàn)儀器的替代 小坩堝代替培養(yǎng)皿 . . 實(shí)驗(yàn)過程中,根尖的解離染色所用的儀器都是培養(yǎng)皿. . 我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)使用培養(yǎng)皿存在以下幾點(diǎn)不足: 表面積過大,解
25、離和染色時(shí)都要加入較多的藥液才能沒及要處理的材 料,存在著藥品浪費(fèi)現(xiàn)象; ( 2 2)培養(yǎng)皿相對(duì)較淺,解離液 染色液都 容易灑在實(shí)驗(yàn)臺(tái)和地板上,污跡很難擦干凈; (3 3)玻璃材質(zhì)的培養(yǎng)皿 粘上龍膽紫液后較難洗刷 . . 實(shí)踐中,我們發(fā)現(xiàn)染色廢液倒入瓷質(zhì)水池 子后容易清洗 . .于是我們用化學(xué)實(shí)驗(yàn)用的瓷質(zhì)小坩堝替代培養(yǎng)皿 . . 由 于小坩堝比較小,深淺度適宜,既節(jié)省藥品,又便于操作,還有效地 防止了染色液灑出等問題, 同時(shí)解決了實(shí)驗(yàn)后儀器洗刷不干凈的難題, 是有絲分裂實(shí)驗(yàn)中非常合適的替代儀器2.22.2指形管替代培養(yǎng)皿 . . 在漂洗過程中要求 將解離后酥軟的根尖放 入盛有清水的培養(yǎng)皿中漂洗
26、約 1010 分鐘 . . 實(shí)踐下來,我們發(fā)現(xiàn)有一些 弊端:(1 1)部分學(xué)生沒有充分理解漂洗的生理作用,對(duì)漂洗這一步驟不夠重視. . 表現(xiàn)為縮短漂洗時(shí)間或在培養(yǎng)皿中加水較少等現(xiàn)象 實(shí)驗(yàn)課受時(shí)間限制,漂洗時(shí)間過長(zhǎng),擠占了尋找有絲分裂相的時(shí)間, 是造成實(shí)驗(yàn)課時(shí)間延長(zhǎng)的原因之一 . . (3 3)在 1010 分鐘的漂洗過程中 學(xué)生無事可做,客觀上形成了實(shí)驗(yàn)課堂秩序混亂的現(xiàn)象 . . 針對(duì)上述情 況我們采取了以下措施:我們首先向?qū)W生講清楚漂洗的目的和意義 漂洗的目的是將含有鹽酸的解離液徹底洗干凈; 漂洗的意義是防止含 有鹽酸的解離液破壞染色體和細(xì)胞核的結(jié)構(gòu); 防止在染色時(shí)解離液中 的鹽酸與染色液中
27、的龍膽紫發(fā)生化學(xué)反應(yīng), 影響染色體的著色, 導(dǎo)致 實(shí)驗(yàn)效果不理想 . .在保證制片質(zhì)量的前提下, 為了縮短實(shí)驗(yàn)操作時(shí)間, 給學(xué)生留下充足的時(shí)間觀察裝片 尋找有絲分裂相,我借鑒他人成功 的經(jīng)驗(yàn),改靜態(tài)的 浸泡為動(dòng)態(tài)的沖洗 . . 具體的操作如下:用指形管替代培養(yǎng)皿,用自來 水沖洗 2323 分鐘,使根尖在指形管內(nèi)不斷 翻騰 ,流水沖洗可使解 離后材料上附著的解離液迅速地溶解在水中,既達(dá)到了漂洗的目的, 又縮短了時(shí)間,同時(shí)還起到了約束課堂秩序的作用 操作方法的改進(jìn) 剪取根尖的改進(jìn) . .實(shí)驗(yàn)操作過程中先后 4 4 次用鑷子夾取根尖, 根尖被1 1)培養(yǎng)皿2 2)解離后酥軟,用鑷子反復(fù)夾取,很容易夾
28、碎 夾爛根尖生長(zhǎng)點(diǎn),造成 染色后找不到根尖, 使操作歸于失敗 . . 為此,實(shí)驗(yàn)中我們將 剪取洋蔥 根尖 23mm23mm 改成剪取大蒜根尖 1cm+0.11cm+0.1 ;以便操作中用鑷子夾取根 尖生長(zhǎng)點(diǎn)上方, 很好地保留住根尖生長(zhǎng)點(diǎn),在操作的最后一步制片時(shí) 剪去多余的根,經(jīng)過多年的實(shí)踐檢驗(yàn),效果頗佳 優(yōu)化實(shí)驗(yàn)過程優(yōu)化實(shí)驗(yàn)過程 4.14.1 根尖的解離 . . 解離根尖的目的是利用解離液中 的鹽酸將組織細(xì)胞間的中膠層溶解, 使組織細(xì)胞分離開, 便于制成單 層細(xì)胞的裝片,利于有絲分裂相的觀察 . . 我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),北方地 區(qū)溫度偏低,延長(zhǎng)解離時(shí)間( 810810 分鐘)根尖才能變得酥軟,符合 實(shí)驗(yàn)要求,為了節(jié)省時(shí)間, 提高實(shí)驗(yàn)課的效率,我們將根尖放入盛有 解離液的小坩堝中, 并用鑷子夾住坩堝放入盛有 6060度溫水的大燒杯 中進(jìn)行熱水浴 1212 分鐘,根尖很
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