應(yīng)用EXCEL繪制ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線及計(jì)算樣本濃度

1、應(yīng)用EXCEL繪制ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線及計(jì)算樣本濃度整體思路：在ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，我們得到的是經(jīng)酶標(biāo)儀讀出的標(biāo)準(zhǔn)品以及樣本 的0D值。其中，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度已知，我們可以利用標(biāo)準(zhǔn)品的0D值及其相對應(yīng)的 濃度，以O(shè)Dfi為橫坐標(biāo)，濃度為縱坐標(biāo)，做一條標(biāo)準(zhǔn)曲線，并用公式表示出來。這樣，我們把樣本的0D值以X值代入，便可求出丫值，即樣本濃度。F面我們就一步步來實(shí)現(xiàn)這個(gè)目標(biāo)：1.首先，將數(shù)據(jù)整理好輸入 Excel，分別為經(jīng)酶標(biāo)儀讀出標(biāo)準(zhǔn)品的0D值及其對應(yīng)的濃度值。丈件 騙矩 Mty）播入© 耦貳肋 TMCT）蛾3& 固口町 釉朋蝕 Add；乂豆具3sal員丨陽弓*丨令瓦-汀超_國壓豊J

2、13I)Z3111119A標(biāo)卷品®值.2飛22 1. SES 1. 204 0. T51 Q 459 0.30? 0.212 0.12桶ft品浪度 1000500250125 52.5 31.25 15.6250oom. cn2. 拖動鼠標(biāo)選取完成的數(shù)據(jù)區(qū)，并點(diǎn)擊圖表向?qū)В趫D表類型中選“ XY散點(diǎn)圖” 并選擇子 圖表類型的 散點(diǎn)圖”第一個(gè)沒有連線的）。如下圖所示。國百'v制懺；7菸7!匕鼻常嚅就二T' d -. rg,I I-II aI l-PHI I FTRI l-F- FT11F I FI I BlHI.一' '_ . IL.-_'.&#

3、39; .I III:玄件磴）赭輯d） ma® 插入d）格式® 工數(shù)據(jù)（SJ閒口 幫腦0）就mFDFQ 二加丄All lii丨7迅T 丨皇無國獰B 空圖春向?qū)?4步f?N 1 -JLX234 z67Zg10n121314151617標(biāo)準(zhǔn)晶（血植-1 Z賽 標(biāo)準(zhǔn)品菠度ui子團(tuán)表奘型迂）:蘇點(diǎn)EL ttl較成討的徴值揀下不戲可查看示例連1取消 1''下_步魚小|完成迪1113. 點(diǎn)擊 下一步”出現(xiàn)如下圖界面。如是輸入是如本例橫向列表的就不用更改,果是縱向列表就改選 列”EBL =電爾i K* d2j標(biāo)準(zhǔn)品00ft |T遠(yuǎn) Ll標(biāo)iS品濃度L JAC5 I-6 1

4、7-.-亠8.9 I-12J nJ iT13 - dij I 丄巳 'IdIT !IS 1WWW.1000ewwoam0Q 0,5常舷魅叩:陽TTqga竺舉曲 J K上二步羈I_苑囲叩I在做ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線，并通過此曲線求樣本濃度時(shí)，因樣本OD值是已知的,因此，我們需要將OD值設(shè)為X。根據(jù)上圖我們可以看到，橫坐標(biāo)X值為0D值,縱坐標(biāo)丫為標(biāo)準(zhǔn)品濃度，這正是我們想要的。4.有時(shí)需要我們手動選擇X值，這時(shí)可以點(diǎn)擊 系列”來更改，如下圖。雲(yún)）克仲叩 «（EJ m二丄 Jl十, ；壬-''»鼻11 I >k h Jli fii Irhv J o j l

5、 hiSS向曷 引步9之2 rVkWkV.誰據(jù)S歲川景赴.I'）名稱軸;棗列禹ja期石imiun n習(xí)Y fSd)7l_i 1価加如 卑構(gòu) IIK ±-1遠(yuǎn) 斥P OP 3 五血 |如果要對橫坐標(biāo)和縱坐標(biāo)進(jìn)行掉換，我們可以就點(diǎn)擊X值和丫值文本框右邊的 小圖標(biāo)，結(jié)果如下圖:Hk"I'Tk I IK ta r nmVnVB nr一ITTnm- zzk I:戲丈件® 編輯® 視圉® 插入格式工具也數(shù)據(jù)窗口 W幫助 A L崔 T J -丨MLiya"£H區(qū)1fed53_21工£I1gA極t品四值 LZ衛(wèi)農(nóng)

6、J二型更丄.2凹QJSL4已盤棕準(zhǔn)品濃度I 1665 500 云6 1血"簸& 31 缶id 6薦 0團(tuán)表向?qū)?4步KN 2 -圖表S報(bào)據(jù)-2 H:£ 出現(xiàn)上圖后，拖動鼠標(biāo)選取正確的數(shù)據(jù)區(qū)域以調(diào)整如下圖。5. 調(diào)好之后，然后點(diǎn)擊 下一步”出現(xiàn)圖表選項(xiàng)界面,回W -匚；.二宀'I:勻丈怦電）IM II） a®® ftA（P f-丄dd 7 色-I' r 6戛胃慮式（Q】ZM C）?（!3R據(jù)辺jS 口 IS 釉勤堪）AJob. Prj»> 2,322A 一 & T"TJOJ£ 3 丁標(biāo)準(zhǔn)&

7、#163;ip 肓"1標(biāo)準(zhǔn)品濃B一 -=. Z178;- -一 - t,1_.1011.12" I I13_.H,5 .U41JEMR向翳 涉»走3 - S覆-蕨I圣掠他 剛舉 圖例I .巒耶志BQ歳磁取VI麹購鷗矽掃尿CO mew 星涌 Ik上一劈團(tuán)2野割、11蕪感里L(fēng)I6. 點(diǎn)擊 下一步”在彈出的窗口再點(diǎn)擊“完成”現(xiàn)在一張帶標(biāo)準(zhǔn)值的完整散點(diǎn)圖 就已經(jīng)完成，如下圖。S3 licrosoft Excel - BnokI.sisAdo'匸m 1 'I迪弊 g f禾體雪立件電）騙鎬© 觀園迫插入（X）榕式a 工員 ®褰©

8、窗口® 裁働 j J U Jl,'-1 -I -7. 到了這一步，散點(diǎn)圖便完成了。我們可能會問，曲線在哪里啊?其實(shí)很簡單，先點(diǎn)擊圖上的標(biāo)準(zhǔn)值點(diǎn)（記住一定要點(diǎn)選上 ），然后單擊右鍵，點(diǎn) 擊添加趨勢線。如下圖:liEEOinft 崔"1 - BdofeL. xLeA® 桔武辺工M爐 Sm牟i «B爐&科a M > _;丄期.蘭 Jl1'-Sy!£SL3hcctHtB13；tn3.Shctd/jy4：yi4,J)Li _n_ 飛 rz f G r 廠廠2_ _ _ ?J標(biāo)®品惋fi2掘£ 1.典5 L

9、歆4 )彈1 Q勾彌 也 湖 伉劭a 01S廠 4 I悸范品娥JS【LM6 MQ 匹0 1理 52 5 3L25 15魏5 工 邑&T31D1200WisocWWW一 Qa 列g(shù) f3£%O/TL g 打CiLcfc_2OSJT越«杲列鞍弍孤1E»5?aj Q=I希MHH?鎖®8.彈出趨勢線類型選擇對話框,有線性，對數(shù)，多項(xiàng)等選項(xiàng)，如下圖。!耳'''；： - - -' -'）文斡疋） 4© ftffl世）入CD ft貳a JJtm 巒E© 冑口怕 W勤iW *也J J d 上 I 丿 A

10、 4 A 刁：. I 創(chuàng)里，17i-匚f亠電Tl亠亡" 飛：了I商1r- =*» -I .A23標(biāo)準(zhǔn)品迎值 _L.79 .10- 111213_41511.17LISn I20 I 一I2ijTfi卄1200lOOOSCOSCO2. 622 1. SE5 1. 204 0. 7SJ0. 3070. 212 0. lES'Wit'參口 武醴）'9. 在選擇之前，我們先對上圖做一下肉眼觀察，如果那些點(diǎn)能連成一條直線，或 接近直線，我們就選擇“線性”，意思就是出來的趨勢線是一條直線，相應(yīng)的該 直線的方程就是y=ax+b的形式。不過，一般的ELISA都不會是

11、所有的標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)呈 完全的線性關(guān)系的，也就是說不是一條完全的直線，這時(shí)我們可以選擇“多項(xiàng)式”， 多項(xiàng)式后面還有“階數(shù)”的選項(xiàng)，也就是說求出來的方程是幾次方，我們一般選“2階”，即出來的方程為y=ax2+bx+c.選擇完畢后，彈出以下窗口E3 Hero soft Ezee 1 Bdok 1. zls10. 趨勢線也就是標(biāo)準(zhǔn)曲線在此便顯示出來了。接下來，我們需要將公式顯示出 來，以根據(jù)樣本的OD值計(jì)算其濃度值。在鼠標(biāo)點(diǎn)選該線（一定要選中，選中后 出現(xiàn)下圖的樣子即線由很多點(diǎn)標(biāo)識出來），單擊鼠標(biāo)右鍵，選擇趨勢線格式ABCDFGaE 2 _3 暫彳崔（Sod值 Z. 822 1. B55 1.304 0.

12、7514 .賒灌圃汰1000500250125a 4蔚 0.3070. 212 0.1525ZS 3k 25 15. 62S05-6 7 -81200SOO600WWW曲I 跡0卩1項(xiàng)貳（慕列1）11我們在彈出的窗口中選擇“選項(xiàng)”選項(xiàng)卡，出現(xiàn)下圖，我們選擇顯示公式, 顯示R方，即相關(guān)系數(shù)，這時(shí)公式與 R方值便都顯示出來了。Cj licroteft ExceliT系列1 M-Bookl.< Is-丄二Bic T 一nnr onnJZiSEZ kaEeUtSM amt 0.459 o,307 0.212 0.152 im EflO> 5M 1«2 fig-S 31.55 15.625 fl丄J 8 丄M51©e站設(shè)9U)參惑(XMJi)O e蔑義©1it 刪MNm<t>W31>匸M *tt 匚紆*位 MK&Q 片|o叵)2科MsSBicrcjsoft Excel