油紅O染色具體操作方法_第1頁(yè)
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1、(6) 投入蘇丹川染液中約30分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間,置于56C溫箱中。(7) 在70%酒精中洗滌5-10秒鐘。(8) 洗于蒸惚水中,然后將切片移于載玻片上。(9)切片移于玻片上,將切片周R1的水分小心擦掉。(io) 甘油明膠封固。結(jié)果:脂肪呈橙紅色或鮮紅色或黑色,膽脂素呈淡紅色,脂肪酸不著色,細(xì)胞核呈藍(lán)色。試劑配制:1. 蘇丹川染液配法:將0.15克蘇丹川溶解于100ml70%酒精或純丙酮和70%酒精混合液中(各50ml),臨用時(shí)過(guò)濾,所得濾液即為飽和濃度。注:浸染時(shí),容器必須蓋好,否則酒精或丙酮揮發(fā),染料沉淀。2. 甘油明膠配制:明膠40g蒸憾水210ml甘油250ml石碳酸結(jié)晶 5ml先將明膠浸

2、入蒸憎水中2小時(shí)或更長(zhǎng)時(shí)間,然后加甘油和石碳酸,加熱15分鐘,搖攪直至混合 液均勻?yàn)橹?。二、蘇丹W (Sudan IV)染色法:蘇丹W又名猩紅,是蘇丹川的衍生物,作為脂肪染劑,經(jīng)各地實(shí)驗(yàn)證明,其結(jié)果優(yōu)于蘇丹IHo其染色步驟與蘇丹川染法完全相同,從略。試劑配制:將1-2克猩紅染劑加純酒精70ml, 10涼氧化鈉20ml,蒸憾水10ml,制成混合液,以微火加熱,置37C溫箱中1小時(shí),取出冷卻后過(guò)濾,12小時(shí)后即可使用。注:此液5天內(nèi)失效,如此看來(lái),浪費(fèi)較大,建議配制70%酉精飽和液,或純丙酮和70%酉精飽 和 液,它們使用方便,且不易失效。結(jié)果:脂肪呈猩紅色,比蘇丹川更為清晰。三、油紅染色法:油紅作為脂肪染色劑,其染色步驟簡(jiǎn)便,染色結(jié)果肯定,并且優(yōu)于蘇丹V。試劑配制:油紅00. 5g異丙醇(含量98%100ml此為油紅飽和液,可長(zhǎng)期保存?zhèn)溆?染色步驟:(1) 凍切片(2) 蒸憾水充分洗滌。(3) 油紅稀釋液染10-15分鐘,避光、密封。油紅稀釋液的配制:(4) 取油紅飽和液6毫升,加蒸飾水4毫升,靜置5-10分鐘后過(guò)濾后使用(5) 60%乙醇鏡下分化至間質(zhì)清晰。水洗。(7) Marry氏蘇木素復(fù)染核。(8) 水洗。(9) 甘油或甘油明膠封片。結(jié)果:脂肪呈鮮紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)色,間質(zhì)無(wú)色。注意事項(xiàng):1. 油紅染色時(shí)應(yīng)避免試劑揮發(fā)過(guò)多

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