電子探針技術(shù)在金銀花品質(zhì)鑒定中的應(yīng)用

1、電子探針技術(shù)在金銀花品質(zhì)鑒定中的應(yīng)用    關(guān)鍵詞：品質(zhì)鑒定；  金銀花；  元素含量；  電子探針 Application of Electron Probe Method on Quality Identification of Flos LoniceraeAbstract：Objective To develope a new method for distinguishing the geo-authentic and non- authentic species of Flos Lonicerae and iden

2、tification on the quality of medicinal materials. Methods The electron probe was used to analyze the element w Ei ght in the cells of two different species of Flos Lonicerae living in the same environment.ResultsThe content of Ca is the highest while the content of Mg is the lowest in the cell of tw

3、o different species of Flos Lonicerae (r-0.156，P<0.05) and the content of P in the cell is inferior to Ca (r0.868，P<0.01), which reflects the effect of environment. Moreover, the important feature is that the elements except Ca in the cell of Lonicera japonica Thunb. are higher than those of L

4、onicera confusa, which affects its quality and officinal value and forms the grade of medicinal materials.ConclusionThe method of electron probe is effective in appraising and distinguishing the quality of Flos Lonicerae and other medicinal materials because it can be used to distinguish the content

5、 of elements in the cell of different Flos Lonicerae, which is controlled by genetic factor.Key words：Quality identification;  Flos Lonicerae;  Element content;  Electron probe     忍冬科忍冬屬植物忍冬及同屬多種植物的干燥花蕾，俗稱“金銀花”，具有疏風(fēng)散熱、清熱解毒的功效，主要用于急性熱病及各種急性感染性疾病，是 臨床 上常用藥物之一1。金銀花全身是寶，其莖

6、葉也因含有綠原酸和黃酮等主要藥用成分而具有重要 經(jīng)濟(jì) 價(jià)值2，3。 目前 全世界忍冬屬植物約200種，我國有98種，廣布于全國各省區(qū)，并以西南部種類最多，其中可供藥用的品種達(dá)47種14，但傳統(tǒng)上以河南和山東為金銀花的道地產(chǎn)區(qū)。藥材的道地性是藥材對其適生條件長期選擇的結(jié)果，具有強(qiáng)烈的地域性，在特定的生境區(qū)質(zhì)量最好、療效最佳、產(chǎn)量最大，如不同種質(zhì)金銀花藥材中的綠原酸和黃酮類成分含量差異懸殊 5，6，說明種質(zhì)差異對藥用植物有著特殊的潛資源意義。本文以同一生境中的兩種不同種質(zhì)的金銀花葉為材料，運(yùn)用電子探針微區(qū)分析技術(shù)，精確分析元素在金銀花單個(gè)葉肉細(xì)胞內(nèi)的含量，以期獲得某些元素在不同種質(zhì)金銀花葉細(xì)胞內(nèi)的

7、變化 規(guī)律 ，從而為今后藥材品質(zhì)鑒定以及GAP基地建設(shè)提供 參考 。1  材料選取兩株相鄰的忍冬Lonicera japonica Thunb. 和華南忍冬Lonicera confusa作為 研究 對象，分別采集同一葉齡(生長期40天)的健壯葉片用于電子探針分析。其中忍冬原產(chǎn)山東平邑，后引種到廣西弄拉。弄拉位于廣西南寧地區(qū)馬山縣東南部古零鎮(zhèn)境內(nèi)典型的巖溶峰叢山區(qū)。其地理坐標(biāo)為108°19E，23°29N。該區(qū)位于亞熱帶季風(fēng)區(qū)，具有高溫多雨、降雨集中、濕度大等氣候特征。據(jù)多年氣象觀測資料，該區(qū)平均氣溫為19.84 ，年平均降雨量為1 700 mm7。該區(qū)地層巖性為

8、泥盆系東崗嶺組厚層硅泥質(zhì)白云巖，因而該區(qū)土壤具有偏堿富鈣的石灰土特征8。 2  方法取忍冬和華南忍冬同一葉齡的新鮮葉片洗凈搽干，將其剪成1 cm×1 cm左右的小塊，用FAA固定24 h，并經(jīng)70%，85%，95%，100%，100%的酒精系列脫水，固定在載玻片上。然后，經(jīng)氬氣干燥，精密刻蝕噴鍍儀鍍金后，在30kV高壓下用F EI 公司生產(chǎn)的Quanta 200找到單個(gè)葉肉細(xì)胞，利用EDAX9100能譜儀作為電子探針對葉肉細(xì)胞中元素含量進(jìn)行分析。3  結(jié)果3.1  金銀花葉細(xì)胞中主要元素含量特征盡管氣候、土壤和人為活動等外界條件對植物的化學(xué)元素含量有著直

9、接或間接的影響，但植物本身對元素所具有的選擇性吸收能力，是決定其元素含量特征的首要因素9。通過分析發(fā)現(xiàn)：忍冬和華南忍冬葉細(xì)胞中的主要元素含量盡管變化較大，但在很大程度上反映了植物體的化學(xué)成分特征。通過圖12可以看出，這兩種金銀花葉內(nèi)元素含量在重量百分比(WT%)方面有許多相似之處，總是Ca最多Mg最少(相關(guān)系數(shù)0.156，P<0.05)，并且P在葉內(nèi)的含量僅次于Ca(相關(guān)系數(shù)0.868，P<0.01)。這可能與植物在利用Ca時(shí)對Mg的吸收具有拮抗作用，而對P的吸收具有協(xié)同作用有關(guān)10,11。見圖12。通過以上 分析 ，說明金銀花藥材體內(nèi)元素含量高低不是由土壤因子決定，而由其遺傳因素

10、決定，因而不同種質(zhì)金銀花質(zhì)量的差異能夠通過葉內(nèi)元素的差異得到反映。4  小結(jié)4.1  忍冬和華南忍冬葉細(xì)胞內(nèi)元素含量呈現(xiàn)出Ca多Mg少的特征，與它們在被植物吸收過程中的拮抗作用和協(xié)同作用有關(guān)。4.2  忍冬葉細(xì)胞內(nèi)元素含量(除Ca外)均高于華南忍冬葉內(nèi)相應(yīng)元素含量,表現(xiàn)出不同種質(zhì)金銀花品質(zhì)的差異性以及道地金銀花和非道地金銀花在調(diào)控藥材利用土壤元素機(jī)理上的差別。 因而本文通過對比分析不同種質(zhì)金銀花葉內(nèi)元素含量特征，認(rèn)為藥用植物有效成分的形成、積累機(jī)制主要是由其遺傳因素決定，并影響其質(zhì)量，從而本文的 研究 將能為今后金銀花種質(zhì)資源的評價(jià)及鑒定提供一定的 理論 依據(jù)。

11、參考 文獻(xiàn) ：1國家藥典委員會. 中國 藥典，部S.北京：化學(xué) 工業(yè) 出版社，2000：177.2張雁冰，武雪芬.密縣金銀花及其莖、葉中綠原酸含量測定J.河南醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，1999，34(2) :36. 3武雪芬，景小琦，李國茹.金銀花葉藥用成分的提取及抑菌試驗(yàn)J.天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2001，13(3):43.4中國藥材公司.中國中藥資源志要M.北京： 科學(xué) 出版社，1994：1200.5邢俊波，李  萍，張重義.金銀花質(zhì)量與生態(tài)系統(tǒng)的相關(guān)性研究J.中醫(yī)藥學(xué)刊，2003，21(8): 1237.6候?qū)W煌.中國植被地理及優(yōu)勢植物化學(xué)成分M.北京：科學(xué)出版社，1982：316.7蔣忠誠.廣西弄拉白云巖 環(huán)境 元素的巖溶地球化學(xué)遷移J.中國巖溶，1997，16(4):304.8曹建華，袁道先，潘根興.巖溶生態(tài)系統(tǒng)中的土壤J.地球科學(xué)進(jìn)展，2003，18(1):37. 9杜占池，鐘華平.川東紅池壩地區(qū)紅三葉和鴨茅人工草地土壤和植物營養(yǎng)元素含量特征的研究J.植物生態(tài)學(xué)報(bào)，1998，22(4):350.10王慶成，程云環(huán).土壤養(yǎng)分空間異質(zhì)性與植物根系的覓食反應(yīng)J. 應(yīng)用 生態(tài)學(xué)報(bào)，