高氧液聯(lián)合缺血預(yù)處理對家兔心肌缺血再灌注損傷的保護作用

1、高氧液聯(lián)合缺血預(yù)處理對家兔心肌缺血再灌注損傷的保護作用         06-07-01 16:21:00     編輯：studa20          作者：王德明，劉梅梅，李 晉，羅和國，常業(yè)恬【摘要】  目的  研究高氧液聯(lián)合缺血預(yù)處理對家兔心肌缺血再灌注損傷的保護作用。方法  40只家兔隨機分為五組（n8）：假手術(shù)對照組（P組）、缺血再灌注損傷組（

2、IR組）、缺血預(yù)處理組（IP組）、高氧液灌注組（H組）、高氧液灌注聯(lián)合缺血預(yù)處理組（HI組）。除P組外各組動物接受冠狀動脈左前分支60min阻斷和120min再灌注。I組及HI組在長時間缺血前接受反復(fù)三次、每次5min的缺血與5min再灌注預(yù)處理；H組與HI組在缺血前及在再灌注期間持續(xù)輸注高氧液20ml·mg-1·h-1。取缺血區(qū)心肌組織檢測超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量；稱重法測量危險區(qū)心肌梗死比率。結(jié)果  IP組、H組、HI組、IR四組SOD含量均較P組顯著減少，且IR組與IP、H、HI三組差異有顯著性； MDA含量變化與SOD則相反。梗死

3、面積 HI組較IR、IP 、H 組比較差異有顯著性，分別為(18.5±3.5)%、(45.5±4.3)、(25.2±4.2)、(26.4±3.1)%。結(jié)論  高氧液聯(lián)合缺血預(yù)處理可減少心肌梗死面積；保護SOD、抑制MDA生成，對家兔心肌缺血再灌注損傷有保護作用。         【關(guān)鍵詞】  高氧液；缺血預(yù)處理；心肌梗死面積；超氧化物歧化酶；丙二醛        【Abstract】  Objec

4、tive  To investigate the effect of hyperoxia liquid and ischemia preconditioning on myocardial ischemia and reperfusion injury of rabbits.Methods  40 rabbits were randomly divided into five groups(n=8)：pseudo-operation group(group P)，ischemia and reperfusion group(group IR)，ischemia precon

5、ditioning group(group IP)，hyperoxia liquid perfusion group(group H)，hyperoxia liquid perfusion and ischemia preconditioning group(group HI).Animals in each group except group P，received ligation of left anterior branch artery  for 60 minutes and  reperfusion for 120 minutes.Animals in grou

6、p IP and group HI received ischemia preconditioning before long time ligation，animals in group H and HI received hyperoxia liquid 20ml·kg-1·h-1.The content of superoxide dismutase (SOD)，malondialdehyde (MDA) in myocardium of dangerous area were detected，and infarction size were caculated.R

7、esults  MDA content in group IR，IP，H，HI raised significantly and SOD decreased significantly compared with group P.Myocardial infarct size of risk area in group HI (18.5±3.5)%was significantly smaller than that in group IR(45.5±4.3)%、group IP (25.2±4.2)% and group H (26.4±3.

8、1)Conclusion  Hyperoxia liquid perfusion and ischemia preconditioning could reduce infarct size of risk area；protect SOD and reduce the product of MDA.        【Key words】  hyperoxia liquid；ischemia preconditioning；myocardial infarct area；superoxide dismutase (

9、SOD) ；malondialdyde(MDA)        急性心肌缺血性疾病是我國的常見病、多發(fā)病，是威脅人類健康的主要疾病之一。近年的研究表明，細(xì)胞內(nèi)鈣超負(fù)載及自由基是再灌注損傷的主要機制，針對鈣超載拮抗劑與抗氧自由基的治療研究取得了一些療效1，2。但引起心肌損傷的早期原因是缺氧，如果能通過液體途徑給缺血心肌提供氧，可減輕心肌壞死程度，延長心肌生存能力。本研究通過對兔心肌缺血再灌注模型，觀察高氧液聯(lián)合缺血預(yù)處理對心肌缺血再灌注損傷的保護作用，探討適合臨床應(yīng)用的心肌保護措施。     &#

10、160;  1  材料與方法        1.1  材料  實驗動物家兔由中南大學(xué)實驗動物部提供。DH140動物呼吸機（浙江醫(yī)科大學(xué)），GY1高氧醫(yī)用液體治療儀（西安高氧設(shè)備有限公司）。MDA 、SOD檢測實劑盒（南京建成生物有限公司）。        1.2  實驗方法  40只健康家兔，雌雄不拘，體重2.02.5kg，經(jīng)耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉30mg/kg，頸部正中分離氣管切開并插管，用呼吸機行機械通氣，控制呼

11、吸末二氧化碳分壓在3035mmHg水平。開胸后暴露心臟，縫線繞過冠狀動脈左室前支近端心肌深面，以膠管套住。拉緊套管即可阻斷相應(yīng)冠狀動脈，可見心電示波ST段上抬，心肌變青紫。放松套管即可見心肌恢復(fù)成阻斷前顏色，表明心肌再灌注1 ，實驗畢再次結(jié)扎部分動物冠狀動脈左室前支，經(jīng)主動脈根部逆行灌注伊凡氏藍(lán)。取下心臟，剪去左右心房，保留左右心室。        1.3  實驗分組  完成上述操作后穩(wěn)定30min，將實驗動物隨機分為假手術(shù)組（P組）、缺血再灌注組（IR組）、缺血預(yù)處理組（IP組）、高氧液灌注組（H組）、高氧液聯(lián)合

12、缺血預(yù)處理組（HI），每組8只。P組完成所有操作，不進行缺血再灌注，H組及HI組建立靜脈通路輸注高氧液20ml·kg-1·h-1，其它組輸注生理鹽水20ml·kg-1·h-1；IP組及HI組先經(jīng)反復(fù)三次5min缺血和5min再灌注的預(yù)處理，除P組外，其它組再經(jīng)60min缺血和120min的再灌注。整個實驗過程中，維持相同的輸液速度。        1.4  觀測指標(biāo)及檢測方法  將保留的組織標(biāo)本按照下列標(biāo)準(zhǔn)進行分類處理，藍(lán)染部分為血供可恢復(fù)區(qū)，未染部分為缺血區(qū)。將未染色部分冰

13、凍3h后切成2mm薄片，生理鹽水沖洗，用1 TTC浸泡同時37水浴20min，梗死部分不染色，非梗死部分染成磚紅色。按Ismaeil3方法測量并計算出心肌缺血面積（g）、梗死面積（g）及心肌梗死面積與心肌缺血面積之比（）。其它動物左室心肌組織以冷鹽水沖洗后低溫冷凍保存待檢測，SOD、MDA含量按照實劑盒說明書進行檢測。        1.5  統(tǒng)計學(xué)方法  所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用SPSS11.0統(tǒng)計軟件進行ANOVA分析，P0.05為有統(tǒng)計學(xué)差異。         2  結(jié)果        2.1  心肌缺血面積  各組動物心肌缺血