吸入NO復(fù)合米力農(nóng)治療內(nèi)毒素滴入氣管內(nèi)致兔早期急性肺

1、吸入NO復(fù)合米力農(nóng)治療內(nèi)毒素滴入氣管內(nèi)致兔早期急性肺損傷安徽醫(yī)科大學(xué)附屬省立醫(yī)院麻醉科謝言虎 李娟 章蔚 方才*摘要目的觀察吸入NO復(fù)合米力農(nóng)治療內(nèi)毒素滴入氣管內(nèi)致兔早期急性肺損傷的療效。方法采用內(nèi)毒素滴入兔氣管內(nèi)復(fù)制ALI模型，將30只兔隨機(jī)分為正常組、模型組、NO和米力農(nóng)治療組、NO復(fù)合米力農(nóng)治療組。監(jiān)測(cè)MAP、PAP、PaO2、Qs/Qt，采集血標(biāo)本測(cè)NO、MDA，計(jì)算肺濕/干重比及BALF細(xì)胞總數(shù)、PMN百分比、蛋白含量，觀察肺組織形態(tài)學(xué)變化。結(jié)果 NO和米力農(nóng)治療組PaO2提高，肺動(dòng)脈高壓下降，肺分流率下降，通氣功能改善；BALF中PMN減少，炎癥得到一定抑制，肺損傷程度減輕。NO復(fù)

2、合米力農(nóng)組肺部通氣功能改善較其他兩組更加顯著，BALF中PMN百分比顯著下降，顯微鏡下肺泡擴(kuò)張良好，肺泡間隔薄，只有少量炎性細(xì)胞。結(jié)論 米力農(nóng)能增加內(nèi)源性NO生成，有抗炎作用，具有一定的肺保護(hù)作用；NO復(fù)合米力農(nóng)后，能更好的改善ALI肺部通氣功能，降低肺動(dòng)脈高壓，具有更強(qiáng)的抑制炎癥能力，有著更好的肺保護(hù)作用。關(guān)鍵詞：一氧化氮 米力農(nóng) 急性肺損傷 內(nèi)毒素Inhaled nitric oxide combined with IV infused Milrinone in treatment of rabbits with lipopolysaccharide-induced acute lung

3、injury Xie Yanhu , Li Juan, Zhang Wei, Fang CaiAbstract Objective To observe inhalation of NO combined with iv infusion of Milrinone whether can improve gas exchange of acute lung injury. Methods 30 rabbits were anesthetized with tracheotomy, and then ventilated mechanically. Six animal were selecte

4、d as normal control. The 合肥 230001 安徽醫(yī)科大學(xué)附屬省立醫(yī)院麻醉科 *為通信作者other were induced into ALI by LPS, and randomly allocated into four groups: (1) LPS control group(n=6,receiving ventilation only); (2)NO group(n=6, inhaling NO at 20ppm);(3) NO+Milrinone group(n=6, inhaling NO 20ppm combine with iv infusing M

5、ilrinone at 5g/kg.min after iv 50g/kg); and (4)Milrinone group(n=6,continous iv infusing Milrinone at 5g/kg.min after iv 50g/kg). The mean systemic arterial pressure (mSAP), PaO2 and Qs/Qt were recorded in the time of baseline ,LPS0min ,120min, 150min. Wet-to-dry weight ratio(W/D), total cells, PMN(

6、%) and protein contents in BALF were determined after treatment. Results The rabbits injuryed with LPS in inhaling 20 ppm NO or iv infusing Milrinone could rapidly reduced mPAP and Qs/Qt, increase PaO2,NO without inducing significant change of mSAP. Compared with the LPS control, total cells, PMN(%)

7、, and protein contents in the BALF significantly decrease too. These results suggest that inhaled NO or iv infused Milrinone could attenuate LPS-induced ALI and pulmonary inflammation . In addition, compared with NO or Milrinone group, inhaled No combined with iv infused Milrinone could significantl

8、y reduced mPAP, Qs/Qt, improved pulmonary gas exchange .and the indexes lung injury were lower than those groups. Conclusion Milrinone could increase endogenous NO , attenuate pulmonary inflammation, and have positive effect on preservation of ALI. Inhaled NO combined with iv infused Milrinone could

9、 significantly improve pulmonary gas exchange, and have stronger ability of attenuating pulmonary inflammation.Key words: nitric oxide, Milrinone, acute lung injury, lipopolysaccharide急性肺損傷(Acute lung injury)/急性呼吸窘迫癥是指除心源性外的各種肺內(nèi)外因素所導(dǎo)致的急性、進(jìn)行性缺氧性呼吸衰竭，ALI是導(dǎo)致重癥患者死亡的主要原因之一。近年來(lái)對(duì)ALI的發(fā)病機(jī)制和治療進(jìn)行了大量的基礎(chǔ)和臨床研究，但由

10、于發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，治療效果不佳，死亡率仍高達(dá)50%。一氧化氮（nitric oxide）是具有自由基活性的氣體小分子，吸入NO可降低肺動(dòng)脈壓，改善肺部通氣及氧和，不良反應(yīng)小，但其半衰期短，長(zhǎng)期治療ALI效果不明顯。米力農(nóng)是屬于磷酸二酯酶抑制劑，能降低肺動(dòng)脈壓,改善肺通氣功能。二者復(fù)合應(yīng)用治療早期ALI，以期達(dá)到更好的療效。1 材料與方法1.1 材料 新西蘭家兔（由安徽醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供），30只雌雄不拘，平均體重1.752.5kg，隨機(jī)分為5組。脂多糖（LPS，colli.055B5, Sigma公司），米力農(nóng)（5mg/只）（山東魯南制藥），NO和MDA試劑盒（南京建成），NO由南京特種氣

11、體廠提供，瓶裝氮?dú)饣旌希瑵舛葹?88ppm，NO氣體監(jiān)測(cè)儀(英國(guó)bedfont公司)，呼吸機(jī)（紐邦E200），微量輸液泵（貝朗公司），多功能監(jiān)護(hù)儀（spacelab），血?dú)夥治鰞x（美國(guó)i-state） 1.2 實(shí)驗(yàn)分組 A組 ：正常對(duì)照組；B組：模型對(duì)照組；C組：NO治療組在建模成功后(LPS0min)持續(xù)吸入20ppm NO120min；D組：NO復(fù)合米力農(nóng)治療組在建模成功后持續(xù)吸入20ppm NO120min，同時(shí)予以靜注米力農(nóng)50g·kg-1后以5g·kg-1·min-1持續(xù)輸注；E組：米力農(nóng)治療組在建模成功后予以靜注米力農(nóng)50g·kg-1后以5g

12、·kg-1·min-1持續(xù)輸注。停止治療后繼續(xù)觀察30分鐘。1.3 模型制作 術(shù)前肌注阿托品0.01mg/kg，行耳緣靜脈穿刺開(kāi)放通道靜注3%戊巴比妥鈉30 mg/kg。切開(kāi)氣管、插入氣管導(dǎo)管,深度34cm，連接呼吸機(jī)行機(jī)械通氣， VT 810ml·kg-1，F(xiàn) 25beat·min-1，I:E=1:2，F(xiàn)iO2=30%,間斷追加戊巴比妥鈉和萬(wàn)可松維持麻醉。切開(kāi)皮膚, 顯左股動(dòng)脈,經(jīng)左股動(dòng)脈插入18G套管接壓力換能器監(jiān)測(cè)動(dòng)脈壓,右頸靜脈插入20G套管以便采集血標(biāo)本。沿胸骨左緣第二肋間打開(kāi)縱隔及心包，行肺動(dòng)脈置管，監(jiān)測(cè)肺動(dòng)脈壓力。靜滴生理鹽水7.5ml/k

13、g·h。 待mPAP、mSAP穩(wěn)定30分鐘后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。除正常組氣管內(nèi)滴入NS 2ml外，其他組滴入內(nèi)毒素5mg/kg(NS 2ml), 待血?dú)夥治鲲@示PaO2下降，氧和指數(shù)(PaO2/FiO2)<300,認(rèn)為模型建立。開(kāi)始治療，在氣管導(dǎo)管與呼吸機(jī)接口導(dǎo)入NO氣體及NO監(jiān)測(cè)儀，用微調(diào)流量計(jì)調(diào)節(jié)NO濃度，呼出NO經(jīng)呼吸機(jī)排氣管道排出室外。米力農(nóng)靜脈推注負(fù)荷量后以微量泵靜注維持。對(duì)照組和模型組只吸入相同濃度的氧氣1.4標(biāo)本采集 在建模前、建模后0min、120 min、150 min，記錄兔的平均動(dòng)脈壓、肺動(dòng)脈壓、呼吸頻率等生命體征；抽取動(dòng)靜血做血?dú)夥治?，?jì)算肺內(nèi)分流率（Qs/Qt）

14、；采集靜脈血4 ml，3000r/min離心取上清液，-70冷凍保存待測(cè)丙二醛（MDA）、NO。1.5實(shí)驗(yàn)結(jié)束后 觀察結(jié)束以10%KCl靜脈注射處死動(dòng)物。以10ml生理鹽水灌洗右肺回收支氣管肺泡灌洗液(BALF)約8ml，回收率大于80%，沖洗3次。取5毫升送檢，取20l在顯微鏡下行細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)，其余2500r/min離心后涂片行瑞氏染色，計(jì)算多葉核細(xì)胞（PMN）比例；回收液經(jīng)雙層干紗布過(guò)濾后于43000r/min離心10分鐘,吸取上清液-70保存，采用考馬斯亮蘭法測(cè)定蛋白含量。取左上肺稱(chēng)濕重，置于80烘箱內(nèi)烘干24至恒重,稱(chēng)重并計(jì)算肺組織濕/干重( /)比值。取左下肺4%中性甲醛固定送病理檢

15、查，觀察肺組織形態(tài)學(xué)變化。1. 6血清NO和MDA檢測(cè)按照說(shuō)明書(shū)操作,NO采用硝酸還原法,MDA采用硫代巴比妥酸法.1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 各組數(shù)據(jù)以x±s表示，通過(guò)spss12.0軟件包統(tǒng)計(jì)處理，組間和組內(nèi)比較采用重復(fù)測(cè)量的方差分析；同時(shí)采取多因素方差分析判斷NO復(fù)合米力農(nóng)治療是否存在協(xié)同作用。2 結(jié)果2.1 mSAP、mPAP的變化 在滴入內(nèi)毒素后mSAP逐漸下降，模型組在致傷后血壓顯著下降。各治療組在治療后mSAP較模型組變化不明顯，差異無(wú)顯著意義。mPAP在致傷后顯著升高，經(jīng)治療后下降明顯，差異有顯著意義，停止治療后逐漸回升。NO+米力農(nóng)組mPAP下降則更為顯著，停止治療后回升幅

16、度要小于其他兩治療組。表1 mSAP、mPAP的變化(mmhg)baseline after LPS 0 120 150(min) mSAP mPAP mSAP mPAP mSAP mPAP mSAP mPAP正常組 115.8±6.2 12.8±1.5 114.7±4.7 12.2±1.5 114.1±5.0 12.2±1.9 113.0±8.0 12.2±1.5模型組 115.7±3.8 12.1±1.1 106.5±4.5 22.1±1.4# 88.7±4.0

17、 22.3±2.2 84.3±5.8 21.3±1.6NO 組 112.2±7.2 12.1±1.4 110.2±7.7 21.8±2.5# 99.7±5.5 13.0±1.4# 86.0±6.0 19.8±1.2NO+M組 114.3±7.8 11.8±1.2 105.8±6.3 21.0±2.2# 91.8±4.8 11.3±2.0# 92.0±3.7 17.2±1.5M組 109.7±8.5

18、 12.2±1.9 110.0±4.2 20.5±1.9# 93.3±4.3 14.5±1.1# 88.8±5.7 19.3±1.2 ：組內(nèi)比較，P<0.05,組間比較P>0.05; #:組內(nèi)與致傷前比較P<0.05; #:與致傷后比較,P<0.05; #:與其他治療組比較差異顯著,P<0.052.2 PaO2和Qs/Qt的變化 在致傷后PaO2顯著下降,處于較低水平,經(jīng)治療后明顯升高（P<0.05），NO+米力農(nóng)組則較另兩治療組更為顯著（P<0.05）。停止治療后NO+米力農(nóng)組Pa

19、O2沒(méi)有明顯變化，而另兩治療組則下降明顯（P<0.05），但氧和仍好于致傷后。Qs/Qt在致傷后顯著升高而治療后 迅速下降；NO+米力農(nóng)組下降最明顯，且停止治療后其Qs/Qt雖有所升高仍顯著低于另兩治療組（P<0.05）。表2 PaO2(mmhg)和Qs/Qtbaseline after LPS 0 120 150(min)PaO2 Qs/Qt PaO2 Qs/Qt PaO2 Qs/Qt PaO2 Qs/Qt正常組 152.0±11.5 9.5±0.6 151.5±8.6 9.7±4.0 159.7±10.0 9.8±2.

20、5 157.7±5.4 9.7±0.3模型組 154.3±13.0 9.8±0.3 85.0±7.1 27.8±2.1 75.5±7.0 35.7±2.7 72.3±5.3 37.6±2.6NO 組 159.8±13.1 9.8±0.2 83.5±8.6 27.8±1.7# 134.2±14.0 17.6±1.4# 103.5±6.6 24.5±2.3NO+M組 158.3±16.4 9.8±0.

21、2 87.7±7.1 28.6±1.6# 146.0±13.1 14.8±1.6# 145.7±7.7 17.6±1.6#M 組 160.5±10.2 9.7±0.5 85.5±7.2 28.9±1.7# 132.5±6.0 17.0±1.2# 113.0±8.8 24.8±1.1, #：與致傷前比較，P<0.05；, # #:與致傷后比較, P<0.05；, #:與另兩治療組比較, P<0.052.3 NO和MDA的變化 在致傷后NO水

22、平明顯下降,經(jīng)吸入NO或米力農(nóng)治療后都有上升趨勢(shì), NO+米力農(nóng)組則上升更加顯著,且停止治療后仍能維持在較高水平。MDA在致傷后由于脂質(zhì)過(guò)氧化而過(guò)多產(chǎn)生，經(jīng)治療都顯著下降，停止治療后又有回升趨勢(shì)。表3 NO和MDAbaseline after LPS 0 120 150(min)NO MDA NO MDA NO MDA NO MDA正常組 75.5±3.5 5.71±0.10 77.9±4.4 5.64±0.23 78.6±3.0 5.70±0.26 74.4±5.2 5.64±0.31模型組 77.3±

23、7.0 5.67±0.23 56.8±4.6 7.67±0.18# 52.9±4.7 8.03±0.35 51.3±4.5 8.29±0.31NO 組 74.8±4.9 5.61±0.27 58.3±4.4 7.60±0.22# 159.3±12.3 6.58±0.16# 86.4± 8.7 7.10 ±0.18NO+M組 75.3 ±6.0 5.57±0.30 54.5±2.6 7.69±0.24# 17

24、8.4±8.3 6.11±0.19# 124.7±8.4 6.43±0.17#M 組 79.1±5.2 5.76±0.12 58.0±4.4 7.64±0.19# 141.4±12.1 6.81±0.25# 102.0±5.5 7.23±0.27 , #：與致傷前比較，P<0.05；, # #:與致傷后比較, P<0.05；, #:與另兩治療組比較, P<0.052.4 肺濕/干重比、BALF指標(biāo)的變化肺濕/干重比三治療組均明顯低于模型組（P<0.01

25、），NO+米力農(nóng)組最低。BALF各指標(biāo)中，致傷后細(xì)胞總數(shù)、PMN百分比、蛋白含量均顯著上升，經(jīng)治療后各指標(biāo)都明顯下降，而NO+米力農(nóng)組較另兩治療組更顯著。表4 肺濕/干重、BALF指標(biāo)肺濕/干重比 BALF指標(biāo) 細(xì)胞總數(shù)（108/L） PMN（%） 蛋白含量（g/L）正常組 4.69±0.25 2.36±0.39 0.10±0.03 0.28±0.03 模型組 7.28±0.44 8.21±0.96 66.33±8.48 0.74±0.06NO 組 6.35±0.24 6.29±0.57 25.

26、50±5.68 0.55±0.07NO+M組 5.38±0.27# 6.04±0.47# 8.72 ±2.07# 0.45±0.05# M 組 6.22±0.29 6.77±0.55 31.00±5.10 0.56±0.06:與正常對(duì)照組比較,P<0.05；：與模型組比較，P<0.05；#：與另兩治療組比較，P<0.052.5 肺組織形態(tài)學(xué)變化 模型組：肺泡腔和小氣道內(nèi)有大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),明顯出血水腫。肺泡擴(kuò)張或萎陷，肺泡間隔明顯增厚。NO和米力農(nóng)治療組：肺泡擴(kuò)張度略有改善，炎

27、性細(xì)胞浸潤(rùn)程度要好于模型組，肺泡間隔稍增厚，但肺泡及小氣道仍有水腫、出血。NO+米力農(nóng)治療組：肺泡擴(kuò)張較為均勻，肺泡壁較薄，只有少量的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，肺部出血、水腫、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)與其他兩治療組相比，明顯減輕。正常組(HE, 200) 模型組(HE, 200) NO組(HE, 200) 米力農(nóng)組(HE, 200) NO+米力農(nóng)組(HE, 200)2.6 NO復(fù)合米力農(nóng)的協(xié)同效應(yīng) 本研究采取析因設(shè)計(jì),經(jīng)多因素方差分析, NO+米力農(nóng)治療組治療后,對(duì)PaO2、Qs/Qt、NO、MDA、PMN百分比作用有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05，NO和米力農(nóng)有交互作用，說(shuō)明NO復(fù)合米力農(nóng)治療ALI有著協(xié)同效應(yīng)。3

28、討論3.1 NO與ALILPS作為致病因素，能直接損傷內(nèi)皮細(xì)胞，激活中性粒細(xì)胞，促進(jìn)炎性因子釋放，導(dǎo)致肺動(dòng)脈高壓，誘發(fā)ALI。NO作為內(nèi)源性血管擴(kuò)張因子，也是細(xì)胞間信號(hào)傳導(dǎo)的信使分子，主要由內(nèi)皮細(xì)胞生成。能舒張血管平滑肌，對(duì)抗體內(nèi)縮血管因子作用；作為抑制型非膽堿能非腎上腺素能遞質(zhì)，舒張氣道平滑肌，擴(kuò)張氣管、支氣管，減少肺內(nèi)分流，改善V/Q提高氧和；且能減少PMN的肺內(nèi)扣押，抑制中性粒細(xì)胞的激活，減少PMN趨化蛋白的表達(dá)，選擇性抑制內(nèi)皮細(xì)胞與中性粒細(xì)胞黏附等，保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞；減少炎性因子的釋放，減輕ALI時(shí)肺組織炎性反應(yīng)，保護(hù)肺組織14。單純吸入NO后，PaO2快速上升，肺內(nèi)分流下降；肺動(dòng)脈壓力明

29、顯下降。Cuesta等5發(fā)現(xiàn)胎糞吸入新生羊嚴(yán)重呼吸衰竭吸入NO后PaO2迅速上升，接近正常。臨床研究中，ARDS患者吸入NO后亦證實(shí)有迅速而顯著的氧和改善。我們研究結(jié)果也證實(shí)NO抑制炎癥反應(yīng)，改善肺通氣功能。NO能減輕炎癥反應(yīng),治療后BALF中PMN比例明顯降低,MDA也顯著下降，MDA作為脂質(zhì)過(guò)氧化的產(chǎn)物，能間接反應(yīng)自由基水平，說(shuō)明NO能夠清除自由基，減輕上皮細(xì)胞損傷。NO主要通過(guò)NF-B對(duì)炎癥反應(yīng)進(jìn)行調(diào)節(jié)的，NF-B活化后移位至細(xì)胞核內(nèi)參與調(diào)節(jié)促炎細(xì)胞因子的合成，不同濃度NO可以調(diào)控NF-B的活化過(guò)程7。NO的治療效果不但與吸入時(shí)間有關(guān)，更與機(jī)體所處的炎癥階段，依賴(lài)于組織促炎與抗炎之間的平

30、衡及機(jī)體氧化應(yīng)激的嚴(yán)重程度。所以NO治療ALI應(yīng)盡早進(jìn)行，早糾正缺氧，避免缺氧對(duì)全身臟器的損傷，控制炎癥進(jìn)一步發(fā)展，更有利于NO作用的發(fā)揮，提高治療效果。 NO作用短暫，停藥后肺動(dòng)脈壓有反彈現(xiàn)象，可能與eNOS失活有關(guān)。3.2 米力農(nóng)與ALI近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)磷酸二酯酶（Phosphodiesterase,PDE）抑制劑能抑制中性粒細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞相互黏附，降低肺毛細(xì)血管通透性，減輕肺損傷8。米力農(nóng)為非洋地黃類(lèi)強(qiáng)心藥雙吡啶衍生物，屬于磷酸二酯酶抑制劑，通過(guò)抑制PDE增加了細(xì)胞內(nèi)環(huán)磷酸腺苷（cAMP）水平，從而產(chǎn)生增強(qiáng)心肌收縮力、擴(kuò)張血管降低肺動(dòng)脈壓，還能擴(kuò)張支氣管改善通氣功能。米力農(nóng)應(yīng)用于ALI的研

31、究尚未見(jiàn)報(bào)道。我們結(jié)果表明，米力農(nóng)能顯著降低肺動(dòng)脈壓，減少了肺內(nèi)分流，提高了PaO2，改善了肺通氣狀況，可能部分與擴(kuò)張支氣管作用有關(guān)。同時(shí)，米力農(nóng)增加了內(nèi)源性NO生成，NO水平顯著上升，減少了中性粒細(xì)胞在肺內(nèi)扣押，減輕了肺水腫及蛋白的流失。米力農(nóng)的抗炎作用可能通過(guò)增加中性粒細(xì)胞內(nèi)cAMP水平，減少炎癥因子和氧自由基的產(chǎn)生，減少內(nèi)皮細(xì)胞的損傷9，但是否通過(guò)內(nèi)源性NO生成增多產(chǎn)生抗炎作用及與NO的相互作用確切機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。MDA水平的降低也間接證明米力農(nóng)能清除自由基。Levy等10亦發(fā)現(xiàn)米力農(nóng)具有小劑量的米力農(nóng)具有一定的抗炎作用。米力農(nóng)還可能通過(guò)多種形式減輕ALI，如直接與細(xì)胞間活性氧/活

32、性氮相互作用，減少硝酸鹽的形成；抑制LPS激發(fā)IL-6等炎性因子的生成，促進(jìn)IL-10等抗炎介質(zhì)的產(chǎn)生8。病理結(jié)果也顯示肺泡內(nèi)炎性細(xì)胞顯著減少，肺損傷明顯減輕，說(shuō)明米力農(nóng)具有一定的肺保護(hù)作用。王永劍等研究也證實(shí)了米力農(nóng)對(duì)離體肺的保護(hù)作用11。米力農(nóng)雖是短效藥物，但半衰期要比NO長(zhǎng)的多，性質(zhì)更穩(wěn)定，能有效降低肺動(dòng)脈壓，對(duì)體循環(huán)幾乎無(wú)影響，能增加內(nèi)源性NO的生成，具有一定的抗炎作用。但長(zhǎng)期應(yīng)用可能會(huì)增加死亡率，長(zhǎng)期使用應(yīng)謹(jǐn)慎及有待進(jìn)一步研究12。3.3 NO與米力農(nóng)聯(lián)合應(yīng)用急性肺損傷患者吸入NO的作用與NO的攝入量有關(guān)，吸入NO多分布于通氣較好的肺泡，肺通氣面積減少會(huì)減少NO在肺內(nèi)的分布而限制NO

33、作用的發(fā)揮。Puttensen等13給油酸型ALI狗單純吸入NO發(fā)現(xiàn)對(duì)肺氧和改善不明顯。在本實(shí)驗(yàn)中觀察了NO復(fù)合米力農(nóng)治療ALI的療效。復(fù)合米力農(nóng)后能進(jìn)一步降低肺動(dòng)脈高壓，減輕心臟負(fù)荷，擴(kuò)張支氣管，改善肺通氣功能；同時(shí)增加內(nèi)源性NO的生成，NO水平顯著高于其他兩治療組，MDA水平也明顯降低，間接證實(shí)了清除自由基的能力明顯加強(qiáng)；減少白細(xì)胞在肺內(nèi)聚集，抑制中性粒細(xì)胞的激活，減少炎性因子的釋放，從而減輕內(nèi)皮細(xì)胞損傷，降低毛細(xì)血管通透性，避免肺水腫及肺實(shí)變的形成，能更好的保護(hù)肺臟。我們的結(jié)果也證實(shí)經(jīng)治療后，與其他兩治療組相比，顯著提高PaO2、降低肺內(nèi)分流，更好的改善了肺通氣功能。聯(lián)合應(yīng)用后抗炎能力也

34、進(jìn)一步加強(qiáng)，細(xì)胞總數(shù)特別是PMN百分比顯著下降，接近正常。從病理結(jié)果看，顯微鏡下肺泡和肺間質(zhì)內(nèi)只見(jiàn)少量的炎性細(xì)胞，肺泡間隔無(wú)明顯增厚，解剖結(jié)構(gòu)接近正常，肺泡擴(kuò)張良好，說(shuō)明達(dá)到了很好的保護(hù)效果。Khazin V等14將NO和米力農(nóng)聯(lián)合應(yīng)用于心臟手術(shù)后肺動(dòng)脈高壓患者，發(fā)現(xiàn)能更好的降低肺動(dòng)脈壓。我們結(jié)果也證實(shí)聯(lián)合應(yīng)用后能更加顯著降低ALI兔的肺動(dòng)脈高壓，且對(duì)血流動(dòng)力學(xué)沒(méi)有明顯影響。停止治療后，肺動(dòng)脈壓沒(méi)有明顯反彈，氧和良好，比單獨(dú)應(yīng)用NO或米力農(nóng)治療ALI有著更好的療效且更穩(wěn)定。多因素方差分析結(jié)果表明，NO與米力農(nóng)之間存在交互作用，兩者復(fù)合應(yīng)用后產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)，有著更強(qiáng)的抗炎能力，降低肺動(dòng)脈高壓，改善

35、肺通氣功能，抑制ALI。但兩者的協(xié)同效應(yīng)是否通過(guò)cAMP或內(nèi)源性NO作用，或其他細(xì)胞間信號(hào)傳導(dǎo)產(chǎn)生作用，還有待進(jìn)一步的研究。參考文獻(xiàn)：1 Waldow T,Alexiou K, Witt K,et al. Affenuation of reperfusion-induced systemic inflammation by preconditioning with nitric oxide in an in situ porcine model of normothermic lung ischemia. Chest, 2004,125(6):2253-59. 2 Rene G, Tames

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