核素藥物99Tc

1、核素藥物99Tc 【摘要】 目的 采用核素藥物99Tc-MDP治療骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型，分析對(duì)骨轉(zhuǎn)換或促進(jìn)成骨作用的價(jià)值。方法 采用鹽酸地塞米松（DX）2mg/kg劑量對(duì)制作骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)兔進(jìn)行肌肉注射，2次/周，注射8周時(shí)，取正常對(duì)照組和骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型組各一組處死，觀察動(dòng)物模型所達(dá)程度。同時(shí)對(duì)骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型組繼續(xù)維持（DX）肌肉注射，但劑量改為1次/周。99Tc-MDP治療組采用與成人相同治療用量2mg/（5mlkg）在實(shí)驗(yàn)兔骨質(zhì)疏松模型的基礎(chǔ)上治療16周。治療16周后，對(duì)正常對(duì)照組、骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型組和99Tc-MDP治療組進(jìn)行腰椎和右側(cè)股骨頭行病理細(xì)胞學(xué)、骨形態(tài)計(jì)量分析、骨密度、

2、生物力學(xué)、X線攝片、CT攝片、核素骨骼掃描以及治療后血清ALP指標(biāo)實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)分析。結(jié)果 8周后正常對(duì)照組和骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型組進(jìn)行比較，骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型組的腰椎和右側(cè)股骨頭行病理細(xì)胞學(xué)表現(xiàn)為明顯骨質(zhì)排列疏松，骨形態(tài)計(jì)量分析、骨密度、生物力學(xué)均下降，血清ALP指標(biāo)明顯升高，骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型成立。治療16周后實(shí)驗(yàn)室結(jié)果顯示，99Tc-MDP治療組與骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型組比較：股骨頭和腰椎的骨密度提高20.17%和26.18%；骨形態(tài)計(jì)量提高108.65%；骨組織ALP降低223.08%；同時(shí)實(shí)驗(yàn)兔的骨組織生物力學(xué)提高了44.24%和87.10%；核素骨骼掃描也顯示示蹤劑攝取增加43.65%。病理組織學(xué)也

3、提示經(jīng)治療成骨細(xì)胞有所活躍。但X線攝片、CT攝片僅肉眼觀察，骨質(zhì)疏松對(duì)照組與99Tc-MDP治療組之間的變化不明顯。結(jié)論 99Tc-MDP治療對(duì)成骨功能或成骨細(xì)胞的轉(zhuǎn)換有一定的關(guān)系，與加速骨形成或促進(jìn)成骨功能相符，筆者將進(jìn)一步進(jìn)行該方面的探討?！娟P(guān)鍵詞】 99Tc-MDP；骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型；成骨作用；治療Research the value of the 99TcMDP for animal model osteogenesis 【Abstract】 Objective In order to reseach the value about the 99TcMDP treated osteop

4、orosis for animal model.Methods Use the cony to made the animal model，the cony were pided intonormal、osteoporosis and therapy group.The osteoporosis and therapy group with intramuscular injected dexamethasone 2mg/kg twice a week.At the 8thweeks，compare normal group and osteoporosis group with the bo

5、ne density，then osteoporosis group was continue intramuscular injected once a week until the test end.The 99TcMDPtherapy group was used99TcMDP2mg/（5mlkg） 16 weeks as theadult dosage.At the16thweek，compared thethree groups with lumbarvertebraand the right femoral caput in pathocytology、bone density、o

6、steo vitodynamics、bone morphometry、x-ray、CT、nuclear bone scan and ALP.Results Theosteoporosis groups lumbarvertebra and the right femoral caput is obviousbone rarefaction and drawdown in bone morphometry、bone density、vitodynamics，and the ALP is obviously rise.The osteoporosis is established.The ther

7、apy group lumbarvertebra and caput femorals bone density is sublimate 20.71 and 26.18; the bone morphometry is 108.65%，ALP is low 233.08%; the bone tissue vitodynamics is sublimate 44.24% and 87.1%; the nuclear bone scan indicatethat the bones tracer uptake is raise 43.65%，pathologicaltest prompt th

8、at the osteoblast is more active than the osteoporosis group.But x-ray and CT is not manifest different.Conclusion 99TcMDPcan accelerate bone formation or enhancement bone formation.【Key words】99TcMDP;animal model of osteoporosis;osteogenesis;treatment 骨質(zhì)疏松癥在中、老年人群中較為普遍，已經(jīng)在治療方面引起人們的重視。如何更好地治療骨質(zhì)疏松癥是臨

9、床探討的一個(gè)方向1，本實(shí)驗(yàn)采用核素藥物锝-99-亞甲基二磷酸鈉（簡(jiǎn)稱(chēng)99Tc-MDP）治療骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)結(jié)果，分析99Tc-MDP對(duì)成骨功能的作用。1 材料與方法1.1 材料1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 新西蘭兔，由上海生旺實(shí)驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖限公司提供；核素藥物99Tc-MDP由成都云克藥業(yè)責(zé)任有限公司提供：其中A瓶為99Tc液5.5g/5ml，B瓶為MDP 5mg；鹽酸地塞米松針劑（簡(jiǎn)稱(chēng)DX）5mg/1ml/支，由上海信誼藥廠購(gòu)置；動(dòng)物實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所為上海市交通大學(xué)第六人民醫(yī)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。1.1.2 分組 購(gòu)健康新西蘭實(shí)驗(yàn)兔40只，平均體重3.00.16kg。將實(shí)驗(yàn)兔分為5組：A、B組為正常對(duì)照組；C

10、、D組為骨質(zhì)疏松對(duì)照組；E組為99Tc-MDP治療組。A、C組實(shí)驗(yàn)兔在證實(shí)骨質(zhì)疏松模型成立時(shí)處死。1.2 方法1.2.1 動(dòng)物模型制作方法 健康新西蘭實(shí)驗(yàn)兔先適應(yīng)性飼養(yǎng)2周，然后進(jìn)行制作骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型。除A、B兩組正常對(duì)照組不注射DX外，采用生理鹽水2ml肌肉注射，C、D、E組均進(jìn)行DX 2mg/kg肌肉注射，2次/周2，3。C組DX注射8周時(shí)，與A組一起處死，觀察動(dòng)物模型所達(dá)程度。D、E兩組繼續(xù)維持DX肌肉注射，但劑量改為1次/周。1.2.2 99Tc-MDP治療方法 將A瓶中99Tc液5ml注入B瓶?jī)?nèi)，搖勻1min后，對(duì)E組進(jìn)行治療，根據(jù)與成人相同治療用量2mg/（5mlkg）治療量用生

11、理鹽水稀釋后行耳靜脈推注，每周1次。治療組實(shí)驗(yàn) ( 核素藥物99Tc-MDP對(duì)成骨作用的動(dòng)物模型研究(2) ) 兔治療時(shí)間定為16周。1.3 檢測(cè)與分析1.3.1 檢測(cè)項(xiàng)目 第三腰椎（L3）和右側(cè)股骨頭行病理細(xì)胞學(xué)分析以及骨形態(tài)計(jì)量分析，第四腰椎（L4）和左側(cè)股骨頭行骨密度和生物力學(xué)試驗(yàn)和X線、CT攝片、核素骨骼掃描（取感興趣區(qū)ROI膝關(guān)節(jié)與脛骨中段的比較）以及治療后血清ALP指標(biāo)（血清經(jīng)56的水浴中處理20min后進(jìn)行檢測(cè)）分析。1.3.2 檢測(cè)步驟 適應(yīng)性飼養(yǎng)2周后進(jìn)行DX注射8周，對(duì)A、C組進(jìn)行X線、CT攝片和核素骨骼掃描后處死，對(duì)腰椎和股骨頭病理切片細(xì)胞學(xué)以及骨形態(tài)計(jì)量分析、骨密度檢測(cè)

12、、生物力學(xué)試驗(yàn)和血清ALP測(cè)定分析。1.3.3 檢測(cè)目標(biāo) DX注射8周時(shí)分析A、C組實(shí)驗(yàn)兔腰椎和股骨頭病理切片細(xì)胞學(xué)以及骨形態(tài)計(jì)量、骨密度檢測(cè)和生物力學(xué)試驗(yàn)、X線、CT攝片和核素骨骼掃描、血清ALP測(cè)定是否存在現(xiàn)明顯的數(shù)據(jù)差異，以證實(shí)骨質(zhì)疏松模型成立。99Tc-MDP治療16周后，除了分析B、D、E組試驗(yàn)之間的差別外，同時(shí)間接提示是否存在成骨趨勢(shì)改變。1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用t檢驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)。2 結(jié)果購(gòu)進(jìn)的所有實(shí)驗(yàn)兔進(jìn)行2周的適應(yīng)性飼養(yǎng)后參考有關(guān)制作兔骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型的資料，給予C、D、E組實(shí)驗(yàn)兔進(jìn)行DX肌肉注射。8周后對(duì)A組和C組行X線、CT攝片、核素ECT骨骼顯像和血清檢查ALP，同時(shí)取雙側(cè)

13、股骨頭和L3、4進(jìn)行骨密度檢測(cè)和生物力學(xué)試驗(yàn)和病理切片、骨形態(tài)計(jì)量測(cè)定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)存在一定的差異。見(jiàn)表1，表2。表1 A、C組實(shí)驗(yàn)兔實(shí)驗(yàn)室結(jié)果注：A組與B組比較，P0.01。病理細(xì)胞學(xué)顯示A組實(shí)驗(yàn)兔骨小梁排列規(guī)則，呈正常骨組織形態(tài)。C組實(shí)驗(yàn)兔骨小梁排列稀疏，存在較明顯的骨小梁斷裂、破壞現(xiàn)象，骨母細(xì)胞不宜在鏡視野中發(fā)現(xiàn)，稀疏和斷裂的骨小梁間存在脂肪組織填充。X線和CT攝片肉眼見(jiàn)C組的骨小梁較A組略有稀疏表現(xiàn)，核素ECT骨骼顯像顯示B組實(shí)驗(yàn)兔的各大關(guān)節(jié)的放射性與A組相比較有所增強(qiáng)，但骨骼顯像較模糊，以椎體顯像更明顯。從以上實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果顯示：經(jīng)采用激素DX注射實(shí)驗(yàn)兔，兔骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型成立。第9周開(kāi)

14、始對(duì)E組進(jìn)行99Tc-MDP治療連續(xù)16周。以B組和D組為正常對(duì)照組和骨質(zhì)疏松對(duì)照組。在飼養(yǎng)過(guò)程中，分別在B組有1只實(shí)驗(yàn)兔于13周時(shí)死亡；D組2只分別在11、14周死亡。死亡的實(shí)驗(yàn)兔均為在購(gòu)入時(shí)就比較瘦小，因拉稀死亡，雖 然D組實(shí)驗(yàn)兔的活動(dòng)較B組、E組略遲鈍，但是實(shí)驗(yàn)兔的一般情況尚較正常。治療16周后進(jìn)行X線攝片、CT攝片、SPECT骨顯像。正常對(duì)照組和骨質(zhì)疏松對(duì)照組的X線攝片、CT攝片結(jié)果與8周時(shí)基本相同。SPECT骨顯像見(jiàn)D組的骨組織放射性分布為減弱現(xiàn)象，以椎體最為明顯，各大關(guān)節(jié)處放射性范圍增大。E組骨骼顯像情況與C組的放射性分布基本相似表2 B、D、E組實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果細(xì)胞學(xué)分析B組與D組

15、存在較明顯的差異，病理切片顯示D組的骨小梁明顯稀疏，有斷裂和缺損區(qū)或凹陷，B組骨小梁排列均勻，骨母細(xì)胞排列規(guī)則，E組的結(jié)構(gòu)基本與C組相似。3 討論骨組織損傷在臨床上是一種較常見(jiàn)的病變，涉及的面也非常大，包括：骨質(zhì)疏松癥、骨性關(guān)節(jié)病、骨折后不愈、骨發(fā)育不良、骨壞死、骨腫瘤等。目前常規(guī)的治療即抑制破骨細(xì)胞的功能，幫助鈣的吸收以及調(diào)節(jié)骨代謝等，在國(guó)外有報(bào)道采用氟制劑的藥物或甲狀旁腺素進(jìn)行治療4、5，可以促進(jìn)成骨功能，幫助某些疾病達(dá)到盡早愈合，國(guó)內(nèi)能促進(jìn)成骨細(xì)胞功能的藥物療效報(bào)道不多。筆者應(yīng)用99Tc-MDP治療動(dòng)物骨質(zhì)疏松模型中發(fā)現(xiàn)，經(jīng)治療的骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型的骨密度和骨細(xì)胞學(xué)改善較明顯6，因此，采用

16、相對(duì)能證實(shí)成骨功能變化的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法，了解99Tc-MDP對(duì)激素誘導(dǎo)的骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型的成骨作用進(jìn)行探討。99Tc-MDP是采用經(jīng)過(guò)衰變的放射性锝-99（99Tc）標(biāo)記雙磷酸鹽（MDP）結(jié)構(gòu)上的化合物，雙磷酸鹽具有在短期內(nèi)非常強(qiáng)的吸附在骨組織表面7，在骨質(zhì)代謝中能夠明顯抑制破骨細(xì)胞的活性8，所以用化學(xué)結(jié)構(gòu)相同而物理性質(zhì)不同的骨骼顯像劑99Tcm-MDP（核素99Tcm具有放射性示蹤作用，而99Tc沒(méi)有m，則沒(méi)有示蹤作用）在12h內(nèi)約有75%與骨組織的蛋白質(zhì)結(jié)合9，就能非常清晰地顯示動(dòng)物的骨組織，同樣99Tc-MDP也有很好的親骨性。另外，有學(xué)者報(bào)道99Tc在人體內(nèi)具有調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能的作用

17、10，因此也有醫(yī)院采用99Tc-MDP進(jìn)行治療免疫系統(tǒng)的疾病：甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)的凸眼、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊椎炎以及銀屑病性關(guān)節(jié)病等的治療，取得了較好的療效?？梢?jiàn)99Tc-MDP將不是單一具有雙磷酸鹽的作用，可能存在尚未知的復(fù)合型功效作用。采用DX肌肉注射實(shí)驗(yàn)兔8周的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，C組與A組比較，C組的骨密度、骨形態(tài)計(jì)量、血清ALP和骨生物力學(xué)均明顯發(fā)生改變，尤其是股骨頭和腰椎骨密度降低23.85%和28.39%；骨形態(tài)計(jì)量降低80.98%；骨組織ALP升高200.50%；證實(shí)實(shí)驗(yàn)兔骨質(zhì)疏松模型成立。通過(guò)對(duì)99Tc-MDP骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型治療16周試驗(yàn)顯示：在骨結(jié)構(gòu)形態(tài)上E組和D組比較：股骨頭和

18、腰椎的骨密度提高20.17%和26.18%；骨形態(tài)計(jì)量提高108.65%；病理組織學(xué)也提示經(jīng)治療成骨細(xì)胞有所活躍。骨ALP降低223.08%；同時(shí)實(shí)驗(yàn)兔的骨組織生物力學(xué)提高了44.24%和87.10%；核素骨骼掃描也顯示示蹤劑攝取增加43.65%。但X線攝片、CT攝片僅肉眼觀察，骨質(zhì)疏松對(duì)照組與99Tc-MDP治療組之間的變化不明顯。根據(jù)上述現(xiàn)象，99Tc-MDP治療對(duì)成骨功能或成骨細(xì)胞的轉(zhuǎn)換有一定的關(guān)系，與加速骨形成或促進(jìn)成骨功能相符，筆者將進(jìn)一步進(jìn)行該方面的探討?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1 潘宏良，何德.老年性骨質(zhì)疏松癥患者骨代謝生化指標(biāo)變化對(duì)其特征的評(píng)估應(yīng)用.中國(guó)臨床康復(fù)，2004，8：3596-3597.2 劉萬(wàn)林.激素性股骨頭缺血壞死發(fā)病機(jī)制及其研究進(jìn)展.中國(guó)矯形外科雜志，2000，7：169-172.3 高克加，李明起，毛誠(chéng)忠，等.99Tc-亞甲基二磷酸鹽治療股骨頭壞死動(dòng)物研究及初步臨床應(yīng)用.中華風(fēng)濕病學(xué)雜志，2004，2：80-84.4 Marie PJ，DE Vernjoul MC，Lomri A.Stimulation of