實驗十食品中淀粉的測定

1、實驗十 食品中淀粉的測定第一法 酶水解法一、目的與要求：1、明確與掌握各類食品中淀粉含量的原理及測定方法。2、掌握用酶水解法和酸水解法測定淀粉的方法。二、原理樣品經(jīng)除去脂肪及可溶性糖類后，其中淀粉用淀粉酶水解成雙糖，再用鹽酸 將雙糖水解成單糖，最后按還原糖測定，并折算成淀粉。三，試劑：1 、0.5 淀粉酶溶液：稱取淀粉酶 0.5 克，加 100 毫升水溶解，數(shù)滴甲 苯或三氯甲烷，防止長霉，貯于冰箱中。2、碘溶液：稱取 3.6 克碘化鉀溶于 20 毫升水中，加入 1.3 克碘，溶解 后加水稀釋至 100 毫升。3、乙醚4、85乙醇5、6N鹽酸：量取50毫升鹽酸加水稀釋至100毫升。6、甲基紅指示

2、液： 0.1 乙醇溶液。7、20氫氧化鈉溶液。8堿性酒石酸銅甲液：稱取34.639克硫酸銅(CuSd 5H0)。加適量水溶解， 加 0.5 毫升硫酸，再加水稀釋至 500毫升，用精制石棉過濾。9、堿性酒石酸銅乙液：稱取 173克酒石酸鉀鈉與 50克氫氧化鈉，加適 量水溶解，并稀釋至 500 毫升，用精制石棉過濾，貯存于橡膠塞玻璃瓶內(nèi)。10、0.1000N高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液。11 、硫酸鐵溶液：稱取 50 克硫酸鐵，加入 200 毫升水溶解后，人 100 毫升硫酸，冷后加水稀釋至 1000 毫升。四、操作方法：1 、樣品處理：稱取 2-5 克樣品，置于放有折疊濾紙的漏斗內(nèi)，先用 50 毫升乙醚分

3、5次洗除脂肪，再用約 100 毫升 85乙醇洗去可溶性糖類，將殘留物移入 250毫 升燒杯內(nèi)，并用 50 毫升水洗濾紙及漏斗，洗液并入燒杯內(nèi)，將燒杯置沸水浴上 加熱15分鐘，使淀粉糊化，放冷至60C以下，加20毫升淀粉酶溶液，在55-60E 保溫 1 小時，并時時攪拌。然后取 1 滴此液加 1滴溶液，應(yīng)不顯現(xiàn)藍色，若顯藍 色，再加熱糊化并加 20 毫升淀粉酶溶液，繼續(xù)保溫，直至加碘不顯藍色為止。 加熱至沸，冷后移入 250毫升容量瓶中，并加水至刻度，混勻，過濾，棄去初濾 液。取 50 毫升濾液，置于 250毫升錐形瓶中，并加水至刻度，沸水浴中回流 1 小時，冷后加 2 滴甲基紅指示液，用 20

4、氫氧化鈉溶液中和至中性，溶液轉(zhuǎn)入 100毫升容量瓶中，洗滌錐形瓶，洗液并人 100毫升容量瓶中，加水至刻度，混 勻備用。B、測定：吸取 50 毫升處理后的樣品溶液，于 400毫升燒杯內(nèi)，加入 25毫升堿性 酒石酸銅甲液及 25 毫升乙液，于燒杯上蓋一表面皿，加熱，控制，在 4 分鐘內(nèi) 沸騰，再準(zhǔn)確煮沸 2 分鐘，趁熱用鋪好石棉的古氏坩堝或 c4 垂融坩堝抽濾，并 用60 r熱水洗滌燒杯及沉淀，至洗液不呈堿性為止。將古氏坩堝或垂融坩堝放 回原 400 毫升燒杯中，加 25毫升硫酸鐵溶液及 25毫升水，用玻棒攪拌使氧化亞 銅完全溶解，以 0.1000N 高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至微紅色為終點。同時量取

5、 50 毫升水及與樣品處理時相同量的淀粉酶溶液，按同一方法 做試劑空白實驗。(A1-A2) X 0.9計算：X1=X10050V1m1X X X1000250100X :樣品中淀粉的含量，;A :測定用樣品中還原糖的含量，mgA:試劑空白中還原糖的含量，mg0.9 ：還原糖（以葡萄糖計）換算成淀粉的換算系數(shù)；m :稱取樣品質(zhì)量，g；V：測定用樣品處理液的體積，毫升（ml）第二法 酸水解法一、原理：樣品經(jīng)除去脂肪及可溶性糖類后，其中淀粉用酸水解成具有還原性的 單糖，然后按還原糖測定，并折算成淀粉。二、試劑：1 、乙醚；2、85乙醇溶液；3、6N鹽酸溶液；4、40氫氧化鈉溶液；5、10氫氧化鈉溶液

6、；6、甲基紅指示液： 0.2 乙醇溶液7、精密PH試紙8、20乙酸鉛溶液9、10硫酸鈉溶液10、乙醚11 、堿性酒石酸銅甲液。 （ 配制見前 ）12、 堿性酒石酸銅乙液；（ 配制見前 ）13、 硫酸鐵；（ 配制見前 ）14、0.1000N 高錳酸鉀標(biāo)液三、儀器：1 、水浴鍋2、高速組織搗碎機： 1 200r min3、皂化裝置并附 250 毫升錐形瓶。四、操作方法：1、 樣品處理A、糧食，豆類、糕點、餅干等較干燥的樣品，稱取 2.0-5.0克磨碎過40目 篩的樣品，置于放有慢速濾紙的漏斗中，用 30 毫升乙醚分三次洗去樣品中的脂 肪，棄去乙醚。再用 150 毫升 85乙醇溶液分?jǐn)?shù)次洗滌殘渣，除

7、去可溶性糖類 物質(zhì)。并濾干乙醇溶液， 以 100 毫升水洗滌漏斗中殘渣并轉(zhuǎn)移至 250毫升錐形瓶 中，加入30毫升6N鹽酸，接好冷凝管，置沸水浴中回流 2小時。回流完畢后， 立即置流水中冷卻。待樣品水解液冷卻后，加入 2 滴甲基紅指示液，先以 40 氫氧化鈉溶液調(diào)至黃色，再以 6N鹽酸校正至水解液剛變紅色為宜。若水解液顏 色較深，可用精密PH試紙測試，使樣品水解液的PH約為7。然后加20毫升20% 乙酸鉛溶液，搖勻，放置 10 分鐘。再加 20 毫升 10硫酸鈉溶液，以除去過多 的鉛。搖勻后將全部溶液及殘渣轉(zhuǎn)入 500毫升容量瓶中， 用水洗滌錐形瓶， 洗液 合并于容量瓶中，加水稀釋至刻度。過濾

8、，棄去初濾液 20毫升，濾液供測定用。B 、蔬菜、水果、各種糧豆含水熟食制品：按 1：1 加水在組織搗碎 機中搗成勻漿（蔬菜、水果需先洗凈、晾干、取可食部分）稱取5-10克勻漿（液體 樣品可直接量取 ），于 250毫升錐形瓶中，加 30毫升乙醚振搖提取 （除去樣品中 脂肪） ，用濾紙過濾除去乙醚，再用 30毫升乙醚淋洗兩次，棄去乙醚。再用 150 毫升 85%乙醇溶液分?jǐn)?shù)次洗滌殘渣，除去可溶性糖類物質(zhì)。并濾干乙醇溶液， 以100毫升水洗滌漏斗中殘渣并轉(zhuǎn)移至 250毫升錐形瓶中，加入30毫升6N鹽酸， 接好冷凝管，置沸水浴中回流 2小時?；亓魍戤吅螅⒓粗昧魉欣鋮s。待樣品 水解液冷卻后，加入

9、2 滴甲基紅指示液，先以 40%氫氧化鈉溶液調(diào)至黃色，再 以6N鹽酸校正至水解液剛變紅色為宜。 若水解液顏色較深，可用精密PH試紙測 試，使樣品水解液的PH約為7。然后加20毫升20%乙酸鉛溶液，搖勻，放置 10 分鐘。 再加 20 毫升 10%硫酸鈉溶液， 以除去過多的鉛。 搖勻后將全部溶液及 殘渣轉(zhuǎn)入 500毫升容量瓶中， 用水洗滌錐形瓶， 洗液合并于容量瓶中， 加水稀釋 至刻度。過濾，棄去初濾液 20 毫升，濾液供測定用。2、測定：吸取 50毫升處理后的樣品溶液，于 400毫升燒杯內(nèi)，加 25毫升堿性酒 石酸銅甲液及 25毫升乙液。于燒杯上蓋一表面皿加熱，控制在 4 分鐘沸騰再準(zhǔn) 確煮沸2分鐘，趁熱用鋪好石棉的古氏坩堝或 G4垂融坩堝抽濾，并用60E熱水 洗滌燒杯及沉淀， 至洗液不呈堿性為止。 將古氏坩堝或垂融坩堝放回原 400毫升 燒杯中， 加 25毫升硫酸鐵溶液及 25毫升水， 用玻棒攪拌使氧化銅完全溶解， 以 0.1000N 高錳酸鉀標(biāo)液滴定至微紅色為終點。同時吸取 50 毫升水，加與測樣品時相同量的堿性酒石酸銅甲乙液、硫 酸鐵溶液及水，按同一方法做試劑空白試驗。(A