臨床微生物SOP糞便標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

1、百度文庫(kù)-讓每個(gè)人平等地提升自我11.目的規(guī)范糞便標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，確保檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。2適用范圍糞便培養(yǎng)。3.標(biāo)本標(biāo)本類型 糞便、直腸拭子。標(biāo)本采集3.2.1自然排便采集 自然排便后，挑取其膿血、黏液部分23 g,液體糞便 取絮狀物23ml，盛于滅菌容器內(nèi)，或置于保存液（運(yùn)送培養(yǎng)基）、增菌培養(yǎng)基 中送檢。3.2.2直腸拭子 如不易獲得糞便時(shí)，或排便困難病人及嬰兒，可用直腸拭子采取，即以無(wú)菌棉拭用保存液或生理鹽水濕潤(rùn)后，插入肛門內(nèi)45cm（幼兒23cm）輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)取出，插入卡-布（Cary- Blair）運(yùn)送培養(yǎng)基內(nèi)或無(wú)菌容器內(nèi)送檢。3.2.3糞便標(biāo)本應(yīng)立即送檢，室溫保存不能超過(guò)2小

2、時(shí)，如不能及時(shí)送檢可以放人磷酸鹽甘油（）或轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基，但不能超過(guò)24小時(shí)。培養(yǎng)艱難梭菌的標(biāo)本保存于-20 C以下。培養(yǎng)沙門菌和志賀菌的標(biāo)本應(yīng)放置磷酸鹽甘油溶液中保存。 保存彎曲桿菌和弧菌的標(biāo)本，需加CaCb （100mg/L）試劑。標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)3.3.1糞便標(biāo)本放置時(shí)間超過(guò)2小時(shí)。3.3.2送檢的糞便標(biāo)本混有尿液。3.3.3直腸拭子未置于運(yùn)送培養(yǎng)基中。4.試劑、儀器革蘭染液、氧化酶試劑、麥康凱平板。SS平板、TCBS平板及相關(guān)生化試劑等。 /VITEK鑒定系統(tǒng)；革蘭陰性菌鑒定卡（GNI+）、革蘭陰性細(xì)菌藥敏卡（GNS、 革蘭陽(yáng)性細(xì)菌鑒定卡（GPI）、革蘭陽(yáng)性細(xì)菌藥敏卡（GPS。真菌鑒定卡（YB

3、C） 藥敏紙片、ATB板條等，有效期及儲(chǔ)存條件參見試劑說(shuō)明書。接種針、接種壞、電熱灼燒器、顯微鏡、孵育箱、CO培養(yǎng)箱。診斷血清。5.細(xì)菌鑒定和藥敏質(zhì)控百度文庫(kù)-讓每個(gè)人平等地提升自我2參見質(zhì)量管理程序6.檢驗(yàn)步驟接收標(biāo)本后，立即對(duì)標(biāo)本進(jìn)行編號(hào)、登記。涂片檢查糞便標(biāo)本因各種正常菌群含量甚多，僅以染色性和形態(tài)無(wú)法辨別 是否為病原菌。因此，糞便標(biāo)本一般不作涂片檢查。只有懷疑霍亂弧菌及菌群 失調(diào)所致腹瀉時(shí)，才作直接涂片檢查（觀察動(dòng)力和菌群比例）。培養(yǎng)621沙門一志賀菌培養(yǎng)參見沙門菌屬檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程、志賀菌屬檢 驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。6.2.2致病性大腸埃希菌培養(yǎng)參見致病性大腸埃希菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。623

4、霍亂弧菌培養(yǎng)參見霍亂弧菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。624副溶血弧菌培養(yǎng)參見副溶血弧菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。625小腸結(jié)腸炎耶爾森菌培養(yǎng)參見耶爾森菌屬檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。6.2.6空腸彎曲菌培養(yǎng)參見彎曲菌屬檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。627金黃色葡萄球菌培養(yǎng)參見葡萄球菌屬檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。6.2.8艱難梭菌培養(yǎng)取水樣或黏液樣糞便立即接種于環(huán)絲氨酸頭抱西丁果糖 瓊脂（簡(jiǎn)稱CCFA平板上，并將糞便作102106稀釋后定量接種。35E厭氧環(huán)境 下培養(yǎng)48小時(shí)后，選擇粗糙型黃色茵落，移種于葡萄糖庖肉培養(yǎng)基作毒素測(cè)定； 同時(shí)制涂片，懸滴檢查動(dòng)力、革蘭染色及生化鑒定。6.2.9真菌培養(yǎng)參見真菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。6.2.10氣單胞菌

5、和鄰單胞菌的培養(yǎng)參見氣單胞菌屬檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程和鄰單胞菌檢驗(yàn)操作規(guī)程。6.2.11分枝桿菌培養(yǎng)參見分枝桿菌屬檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。百度文庫(kù)-讓每個(gè)人平等地提升自我3根據(jù)臨床要求分離弧菌分離致病性大腸埃希菌0577.操作流程SSSS XLXLD D或H HE E平3535C培養(yǎng) 181824h24h分離彎曲菌百度文庫(kù)-讓每個(gè)人平等地提升自我48結(jié)果報(bào)告查出腸道致病菌，報(bào)告其菌名和藥敏結(jié)果9注意事項(xiàng)空腸彎曲菌是微需氧菌，初次分離時(shí)需5% - 10% C02和85%0痢疾病人要采集大量膿血標(biāo)本另行培養(yǎng)。糞便標(biāo)本有很多雜菌，但不能由此認(rèn)為糞便標(biāo)本的采集就無(wú)需注意雜菌污染, 為防止污染必須注意標(biāo)本的采集方法

6、。10.臨床意義正常情況下腸道中有多種細(xì)菌寄生，包括大量的厭氧菌、腸球菌、大腸埃希菌、腸桿菌、變形桿菌、糞產(chǎn)堿桿菌等。引起感染性腹瀉的病原微生物有： 細(xì)菌性: 產(chǎn)毒素型腹瀉，包括霍亂弧菌、腸毒素型大腸埃希菌等；侵襲型腹瀉，包括志賀 菌、腸致病型大腸埃希菌和腸侵襲型大腸埃希等；食物中毒，包括沙門菌、金黃 色葡萄球菌、副溶血性弧菌、蠟樣芽胞桿菌和肉毒梭菌等；偽膜性腸炎，包括艱 難梭菌或金黃色葡萄球菌；慢性腹瀉，可能由結(jié)核桿菌引起。真菌性：念珠菌、 毛霉菌等。病毒性：輪狀病毒等。11.危急值報(bào)告培養(yǎng)出霍亂弧菌、傷寒沙門菌、致病性大腸埃希菌0l57等及時(shí)按傳染病報(bào)告，同時(shí)送CDC復(fù)核。參考文獻(xiàn)1中國(guó)合

7、格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì).CNAS - GL23:2008醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力觀察菌落特征及涂片、染色Campy-BACampy-BA 平板 3535C微需氧氣培養(yǎng) 48h48hTCBSTCBS 平板山梨醇麥康凱雙糖鐵或三糖鐵試驗(yàn)觀察菌落形態(tài)及涂片、染色觀察菌落特征及涂片、染色血清血鑒定血清血鑒定儀器或手工細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)儀器或手工細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)儀器或手工細(xì)菌鑒定及藥發(fā)出報(bào)告發(fā)出報(bào)告發(fā)出報(bào)告百度文庫(kù)-讓每個(gè)人平等地提升自我5認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的指南.20082周庭銀編著臨床微生物學(xué)診斷與圖解第二版上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版 社,20073葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜主編全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程第三版南京：東 南大學(xué)出版社，20064Murray PR. Man ual of. Cli nical ed. Washi ngto n; ASM Press, 2007IS