白酒中甜蜜素、糖精鈉、安賽蜜和三氯蔗糖四種甜味劑的測定方法 液相色譜-串聯(lián)質譜法標準文本（征求）

1、ICS點擊此處添加中國標準文獻分類號 備案號：DB52貴州省地方標準 DB52XXXXX2021 食品平安地方標準白酒中甜蜜素、糖精鈉、安賽蜜和三氯蔗糖四種甜味劑的測定方法 液相色譜-串聯(lián)質譜法Local food safety standardsMethod for the determination of sodium cyclamate, sacchar in sodium ,acesulfame K and sucralse in Chinese spirits-LC-MS-MS method征求意見稿2021-XX-XX發(fā)布 2021-XX- XX實施貴

2、州省衛(wèi)生和方案生育委員會發(fā) 布前言本標準按照GB/T 1.12021?標準化工作導那么 第1局部：標準的結構和編寫?給出的規(guī)那么起草。 請注意本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承當識別這些專利的責任。本標準附錄A、附錄B為資料性附錄。本標準由貴州省產品質量監(jiān)督檢驗院提出。本標準由貴州省衛(wèi)生和方案生育委員會歸口。本標準主要起草單位：貴州省產品質量監(jiān)督檢驗院、貴州茅臺酒廠集團習酒有限責任公司。本標準主要起草人：孫棣、馮永渝、鐘方達、梁桂娟、胡峰、趙貴斌、龍四紅、胡建鋒、張瓊、陳明學、車馳、談曉君、何洪、張世美。白酒中甜蜜素、糖精鈉、安賽蜜和三氯蔗糖四種甜味劑的測定方法 液相色譜-串聯(lián)

3、質譜法1 范圍本標準規(guī)定了白酒中甜蜜素、糖精鈉、安賽蜜和三氯蔗糖四種甜味劑的液相色譜-串聯(lián)質譜測定方法。本標準適用于白酒中甜蜜素、糖精鈉、安賽蜜和三氯蔗糖殘留量的測定。本標準的方法檢出5mg/kg；安賽蜜檢出限為0.01mg/kg；三氯蔗糖檢出限為0.2mg/kg。2 標準性引用文件以下文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。但凡注日期的引用文件，其隨后所有的修改單不包括勘誤的內容或修訂版均不適用于本標準，然而，鼓勵根據(jù)本標準達成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。但凡不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標準。GB/T 6682 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法GB/T 6682

4、-2021，neq ISO 3696：1987。3 原理白酒用水稀釋定容后過膜，供液相色譜-串聯(lián)質譜法測定，外標法定量。4 試劑和材料除另有說明外，所用試劑均為優(yōu)級純，水為GB/T6682規(guī)定的一級水。4.1 甲醇：色譜純4.2 乙酸銨4.3 乙酸銨溶液：10mmol/L。0.77g乙酸銨4.2加水超聲溶解定容至1000mL。4.4 甜蜜素、糖精鈉、安賽蜜標準物質：純度99.0%，三氯蔗糖標準物質：純度98.5%。4.5 標準儲藏溶液：1.0mg/mL。準確稱取每種標準物質4.410.0mg分別放入10mL容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，混勻。4保存。4.6 g/mL。分別吸取1.0mL各標準

5、儲藏溶液4.5于100mL容量瓶中，用水定容至刻度。4保存。4.7 混合標準工作溶液：準確移取一定體積的混合標準儲藏溶液，根據(jù)需要用水稀釋成5.0ng/mL、10.0 ng/mL、20.0 ng/mL、40.0 ng/mL、60.0 ng/mL、80.0 ng/mL、100.0 ng/mL、200.0 ng/mL、400.0 ng/mL濃度系列標準工作溶液。用前配制。4.8 m濾膜水相。5 儀器5.1 液相色譜-串聯(lián)質譜儀：配有電噴霧ESI離子源。5.2 分析天平：感量0.1mg和0.01g。5.3 超聲波提取器。6 試樣的制備與保存6.1 試樣的制備將所取原始樣品在瓷混樣桶內充分混勻，再將混

6、勻樣品分裝置潔凈容器內密封，作為試樣，標明標記。6.2 試樣保存將試樣于常溫下保存。7 測定步驟7.1 提取m濾膜，供液相色譜-串聯(lián)質譜儀測定。7.2 測定7.2.1 液相色譜條件色譜柱：Agilent TC-C18,5×150mm或相當者；進樣量：10L；流速：800L/min；柱溫：30流動相：A:10mmol/L乙酸銨溶液，B：甲醇。梯度洗脫條件見表1。表1 梯度洗脫條件時間/min流速/L/min流動相A/(%)流動相B/(%)8009010800901080010908001090800901080090107.2.2 質譜條件離子源：電噴霧離子源；掃描方式：負離子掃描；檢

7、測方式：多反響監(jiān)測；電噴霧電壓IS：-4500 V；霧化器壓力GS1：55 Psi；氣簾氣壓力CUR：25 Psi；輔助氣壓力GS2：55 Psi；離子源溫度TEM：600碰撞氣CAD：Medium；定性離子對、定量離子對、碰撞能量CE和去簇電壓DP見表2。表2 四種甜味劑定性離子對、定量離子對、碰撞能量和去簇電壓被測物名稱定性離子對m/z定量離子對m/z碰撞能量/V去簇電壓/V甜蜜素-65-36糖精鈉-41-41-27-46安賽蜜-43-43-20-43三氯蔗糖-81-81-14-147.2.3 液相色譜-串聯(lián)質譜測定在儀器最正確工作條件下，用甜蜜素、糖精鈉、安賽蜜和三氯蔗糖混合標準工作溶液

8、分別進樣，以峰面積為縱坐標，混合標準工作溶液濃度為橫坐標繪制標準曲線，用標準工作曲線對樣品進行定量，應使樣品溶液中四種甜味劑的響應值在儀器測定的線性范圍內。甜蜜素、糖精鈉、安賽蜜和三氯蔗糖標準物質總離子流圖參見附錄A。在上述色譜條件和質譜條件下，甜蜜素、糖精鈉、安賽蜜和三氯蔗糖的參考保存時間見表3。表3 四種甜味劑的參考保存時間被測物名稱保存時間/min甜蜜素糖精鈉安賽蜜三氯蔗糖7.3 空白試驗除不稱取試樣外，均按上述步驟同時完成空白試驗。8 結果計算結果按式1計算： X=c××式中：X 試樣中被測組分殘留量，單位為毫克每千克mg/kg；c 從標準工作曲線得到的被測組分溶液

9、濃度，單位為納克每毫升ng/mL；V 樣品溶液最終定容體積，單位為毫升mL；m 樣品溶液所代表最終試樣的質量，單位為克g。9 方法檢出限和回收率 以信噪比不小于3S/N35mg/kg；安賽蜜檢出限為0.01mg/kg；三氯蔗糖檢出限為0.2mg/kg 。回收率見參見表B.1。_ 附 錄 A(資料性附錄)標準物質總離子流圖甜蜜素、糖精鈉、安賽蜜和三氯蔗糖標準物質總離子流圖，見圖A.1。附 錄 B(資料性附錄)添加回收數(shù)據(jù)表B.1 四種甜味劑甜蜜素、糖精鈉、安賽蜜和三氯蔗糖的添加回收率n=6白酒類型化合物添加濃度/ (mg/kg)回收率范圍/%最大相對標準偏差/%醬香型白酒甜蜜素910糖精鈉105.710安賽蜜19105.692.4三氯蔗糖1010104.7濃香型白酒甜蜜素11106.503.794.382.2糖精鈉10108107.2安賽蜜13.69105.285.9三氯蔗糖1106.7兼香型白酒甜