生物制品生產(chǎn)工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)通用格式和撰寫指南

1、附件 3生物制品生產(chǎn)工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)通用格式和撰寫指南一、治療和預(yù)防用生物制品制造及檢定規(guī)程通用格式二、 按生物制品管理的體外診斷試劑制造及檢定規(guī)程通用格三、生物制品藥品注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)通用格式四、文本格式要求五、撰寫說(shuō)明和注意事項(xiàng)18一、治療和預(yù)防用生物制品制造及檢定規(guī)程通用格式核準(zhǔn)日期：XXXX 年 XX 月 XX 日修訂日期：XXXX 年 XX 月 XX 日藥品通用名稱+制造及檢定規(guī)程通用名漢語(yǔ)拼音通用名英文名稱品種基本信息簡(jiǎn)介，包括：專有名稱、起始材料（適用時(shí)，如血漿、生物組織、變應(yīng)原等，修飾物如PEG、化學(xué)或生物毒性成分（偶聯(lián)）、放射性核素）、表 達(dá)體系（菌/毒種、細(xì)胞基質(zhì)）、主要工藝步驟、佐

2、劑名稱（若有） 。預(yù)防用生物制品格式舉例：本品為X X,爍用X X病毒/細(xì)菌接種X X嚏田胞/培 養(yǎng)基，經(jīng)培養(yǎng)、收獲、濃縮、純化、滅活后，加入XX隹劑制成。含XX等輔料。 如果含防腐劑和抗生素，需注明。治療用生物制品格式舉例：本品為 XX,X系用XX種子（如重組工程菌、病 毒、工程細(xì)胞）/原材料（如血漿、修飾物、合成物）接種XX脂養(yǎng)基/投料XX混 均，經(jīng)培養(yǎng)/提取/偶聯(lián)/合成、收獲、濃縮、純化、滅活/處理后，加入XX制成。 含XX等輔料。如果含防腐劑和抗生素，需注明。1 基本要求明確生產(chǎn)和檢定用設(shè)施、原材料及輔料、水、器具等所遵循的規(guī)范，如國(guó)內(nèi)外 GMP 、藥典等。格式舉例：生產(chǎn)和檢定用設(shè)施、

3、原材料及輔料、水、器具等應(yīng)符合X X要求。2 制造2.1 生產(chǎn)用（工程）細(xì)胞（如適用）2.1.1 名稱及來(lái)源格式舉例：生產(chǎn)用（工程）細(xì)胞為X X細(xì)胞，購(gòu)自X X曲仄X建立。如適用， 需介紹其遺傳特性/構(gòu)建過(guò)程。2.1.2 細(xì)胞庫(kù)的構(gòu)建描述細(xì)胞庫(kù)建立及管理情況， 明確各級(jí)細(xì)胞庫(kù)及生產(chǎn)用細(xì)胞的具體代次 （或細(xì)胞齡）和限傳代次（或限傳細(xì)胞齡）2.1.3 細(xì)胞庫(kù)的檢定逐項(xiàng)或列表明確檢定項(xiàng)目名稱、方法出處、合格標(biāo)準(zhǔn)（如按歐洲藥典等X X X用國(guó)藥典現(xiàn)行版四部通則1101檢查/公司內(nèi)部檢測(cè)方法，應(yīng)X x）x非藥 典收載方法， 應(yīng)在正文對(duì)方法進(jìn)行概要性描述， 并在附錄中對(duì)企業(yè)自建質(zhì)控方法 進(jìn)行具體描述（可參

4、考中國(guó)藥典方法描述） 。2.1.4 細(xì)胞庫(kù)保存應(yīng)明確保存條件。2.2 毒種/菌種（若適用）2.2.1 名稱及來(lái)源格式舉例：生產(chǎn)用毒種/菌種為XX,X購(gòu)自XX的公X建立。若進(jìn)行了改造， 需描述改造原理、具體過(guò)程及傳代過(guò)程等。2.2.2 種子批的建立描述種子庫(kù)建立及管理情況， 明確各級(jí)種子庫(kù)及疫苗的具體代次和限傳代次。2.2.3 種子批檢定逐項(xiàng)或列表明確檢定項(xiàng)目名稱、方法出處、合格標(biāo)準(zhǔn)（如按歐洲藥典等X X X用國(guó)藥典現(xiàn)行版四部通則1101檢查/公司內(nèi)部檢測(cè)方法，應(yīng)X x）x非藥 典收載方法， 應(yīng)在正文對(duì)方法進(jìn)行概要性描述， 并在附錄中對(duì)企業(yè)自建質(zhì)控方法 進(jìn)行具體描述（可參考中國(guó)藥典方法描述） 。

5、2.2.4 毒種/菌種保存應(yīng)明確保存條件。2.3 生產(chǎn)用關(guān)鍵原材料對(duì)生產(chǎn)用毒種/菌種、細(xì)胞之外的其他原材料， 需提供關(guān)鍵原材料的名稱、 來(lái)源（生產(chǎn)商） 、級(jí)別、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)如符合藥典標(biāo)準(zhǔn)，注明藥典版本；如為企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)提供具體標(biāo)準(zhǔn)。2.4 原液按照工藝流程逐項(xiàng)描述工藝操作、 過(guò)程控制、 中間產(chǎn)物檢定、 中間產(chǎn)物保存等步驟， 工藝步驟描述中應(yīng)納入生產(chǎn)規(guī)模、 主要工藝參數(shù)和控制范圍。 生產(chǎn)規(guī)模、工藝參數(shù)和控制范圍應(yīng)為經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的范圍。特別關(guān)注以下幾點(diǎn)：疫苗產(chǎn)品：（ 1）聯(lián)合疫苗，建議將各型原液制造及檢定要求以成品制造及檢定規(guī)程附錄形式撰寫。 多價(jià)疫苗， 應(yīng)明確各型原液的主要工藝參數(shù)， 對(duì)于工

6、藝路線或生產(chǎn)參數(shù)相近的型別可合并描述。（ 2）涉及細(xì)胞培養(yǎng)的疫苗，說(shuō)明細(xì)胞制備及對(duì)照細(xì)胞培養(yǎng)、檢定情況。生產(chǎn)用細(xì)胞制備方面，明確從工作細(xì)胞開(kāi)啟到接種前的細(xì)胞培養(yǎng)傳代過(guò)程、主要工藝參數(shù)及控制范圍，如培養(yǎng)溫度、pH、溶氧、培養(yǎng)時(shí)間、微載體濃度、攪拌速度、 擴(kuò)增次數(shù)、 傳代比例、 傳代周期、 代次、 培養(yǎng)規(guī)模、 細(xì)胞群體倍增水平、細(xì)胞密度、工序暫停時(shí)間、誘導(dǎo)表達(dá)時(shí)間、誘導(dǎo)劑濃度等。關(guān)于對(duì)照細(xì)胞，明確培養(yǎng)容器、培養(yǎng)條件、檢定項(xiàng)目。（ 3）明確培養(yǎng)基/培養(yǎng)液中血清、抗生素及其他添加成分的使用情況，培養(yǎng)基/培養(yǎng)液的主要組分及配制應(yīng)納入規(guī)程附錄。（ 4）明確菌/毒種擴(kuò)增、收獲、有效成分分離及純化等每步工藝的

7、名稱、主要工藝參數(shù)及控制范圍。如病毒接種的 MOI 及培養(yǎng)的主要工藝參數(shù)；層析純化工藝介質(zhì)類型及層析柱相關(guān)主要參數(shù)， 樣品上樣、 平衡、 洗脫等步驟的主要工藝參數(shù)， 收峰條件 / 收集范圍等； 濾器或超濾膜截留值、 使用緩沖液組分等； 滅活或裂解工藝中的總蛋白濃度、滅活劑/裂解劑濃度和滅活/裂解時(shí)間；病毒樣顆粒解聚和重聚的主要工藝參數(shù)； 多糖類疫苗及多糖蛋白結(jié)合疫苗， 其多糖及蛋白載體純化、活化、結(jié)合等工藝步驟的主要工藝參數(shù)等。（ 5）按照中國(guó)藥典要求，建議原液及其他中間產(chǎn)物的檢定，統(tǒng)一列入“6檢定”項(xiàng)的對(duì)應(yīng)欄目，具體描述為按X X頊進(jìn)行（ 6）原液及其他中間產(chǎn)物如需暫存，應(yīng)明確保存條件和期限

8、。重組表達(dá)類產(chǎn)品：（ 1）發(fā)酵/培養(yǎng)工藝應(yīng)明確發(fā)酵/培養(yǎng)模式、規(guī)模、培養(yǎng)基，提供主要工藝參數(shù)（如溫度、 pH 值、 攪拌速度、 通氣、 溶氧等） 、 過(guò)程控制要求 （如細(xì)胞/菌密度、活率、 誘導(dǎo)表達(dá)條件、 微生物污染監(jiān)測(cè)等、 培養(yǎng)物檢定） 、 培養(yǎng)周期、 培養(yǎng)終點(diǎn)、收獲條件等。（ 2） 純化工藝應(yīng)明確分離原理、 純化介質(zhì)的類型、 填料載量、 柱高、 流速、緩沖液、洗脫液、收峰條件等。（ 3）原液及不連續(xù)工序所涉中間體的保存，應(yīng)明確保存條件和期限。化學(xué)偶聯(lián)修飾的制品， 還需提供偶聯(lián)步驟主要工藝參數(shù)， 如蛋白和小分子化合物等偶聯(lián)反應(yīng)底物比例、反應(yīng)溫度、攪拌參數(shù)、時(shí)間等。血液制品、 真核細(xì)胞表達(dá)的重

9、組制品、 動(dòng)植物為媒介表達(dá)的制品以及從動(dòng)植物組織中提取的制品，還應(yīng)明確病毒滅活 /去除關(guān)鍵工藝步驟的工藝參數(shù)?；蛑委?、細(xì)胞治療產(chǎn)品：按照質(zhì)粒、病毒、細(xì)胞分類描述細(xì)胞治療產(chǎn)品的制檢規(guī)程。2.5 半成品（如適用）2.5.1 配制提供確定的制劑批處方、 輔料預(yù)制過(guò)程、 半成品配制方法、 主要工藝參數(shù)及控制范圍，批處方及配制過(guò)程中應(yīng)明確活性成分、輔料、佐劑（如適用）的配制點(diǎn)。應(yīng)明確配制規(guī)模。如涉及佐劑吸附、調(diào)整pH 值等，應(yīng)明確配制過(guò)程的工藝參數(shù)及控制范圍。將生產(chǎn)用輔料的名稱、級(jí)別、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、來(lái)源等以表格形式納入規(guī)程附錄。2.5.2 半成品檢定按X X頊進(jìn)行。2.6 成品2.6.1 分批詳述中間產(chǎn)物

10、、原液、成品間的批次對(duì)應(yīng)關(guān)系；有無(wú)亞批、合批、分批及批次對(duì)應(yīng)情況。2.6.2 分裝/分裝及凍干明確所遵循的規(guī)范。格式舉例：應(yīng)符合中國(guó)藥典 “生物制品 分包裝及貯運(yùn)管理”幺歐洲藥典XX的規(guī)定。應(yīng)明確分裝規(guī)模。應(yīng)明確分裝主要工藝參數(shù)， 如分裝裝量等。如涉及凍干工藝過(guò)程，應(yīng)明確生產(chǎn)規(guī)模、設(shè)備條件、凍干工藝參數(shù)及控制范圍等主要工藝參數(shù)及控制要求。2.6.3 規(guī)格格式舉例：西林瓶裝注射劑型： xxx mg （xxx ml ） /瓶預(yù)充式注射器裝： xxx mg （xxx ml ） /支凍干劑型： xxx mg（ xxx IU ） /瓶2.6.4 包裝明確所遵循的規(guī)范。格式舉例： 應(yīng)符合 中國(guó)藥典 “生物

11、制品分包裝及貯運(yùn)管理 ”/ 歐洲藥典X X網(wǎng)規(guī)定。說(shuō)明本品所用的包裝系統(tǒng)， 包括包裝盒內(nèi)的所有組件。 所選擇包裝系統(tǒng)的來(lái)源和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)以附錄形式提供。3 檢定應(yīng)結(jié)合企業(yè)實(shí)際檢定要求撰寫，包括原液、半成品（如適用） 、成品檢測(cè)項(xiàng)目、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（放行及貨架期，如適用）和分析方法。特別注意以下幾點(diǎn)： （ 1）逐項(xiàng)明確檢定項(xiàng)目名稱、方法出處、合格標(biāo)準(zhǔn)（如按歐洲藥典x X弟國(guó)藥典現(xiàn)行版四部通則1101檢查/公司內(nèi)部檢測(cè)方法，應(yīng)X X）X非藥典收載方法，應(yīng)在正文對(duì)方法進(jìn)行簡(jiǎn)單描述，并在附錄中對(duì)自建質(zhì)控方法進(jìn)行具體描述。 （ 2） 在儲(chǔ)存期易發(fā)生變化的指標(biāo)， 應(yīng)明確放行標(biāo)準(zhǔn)和貨架期標(biāo)準(zhǔn)。4 保存、運(yùn)輸及有效期于

12、XX。影避光保存和運(yùn)輸。自生產(chǎn)之日起，有效期 XX今月。5 生產(chǎn)企業(yè)信息藥品上市許可持有人名稱和地址：原液生產(chǎn)、檢定廠名稱和地址：生產(chǎn)地址應(yīng)具體到廠房/車間、生產(chǎn)線。成品生產(chǎn)、檢定廠名稱和地址：生產(chǎn)地址應(yīng)具體到廠房/車間、生產(chǎn)線。稀釋劑生產(chǎn)、檢定廠名稱和地址：生產(chǎn)地址應(yīng)具體到廠房/車間、生產(chǎn)線。成品包裝、檢定廠名稱和地址。6 附錄一般應(yīng)包括以下內(nèi)容：（ 1）主要儀器設(shè)備：列表提供主要生產(chǎn)設(shè)備的名稱、型號(hào)、生產(chǎn)廠、設(shè)備關(guān)鍵參數(shù)等。（ 2） 生產(chǎn)用關(guān)鍵原材料及輔料： 列表提供名稱、 級(jí)別、 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、 來(lái)源 （生 產(chǎn)商）等。（ 3）稀釋劑、佐劑、修飾產(chǎn)品的小分子部分等，如為自制，納入生產(chǎn)工藝和質(zhì)量

13、標(biāo)準(zhǔn)；如為外購(gòu)，納入生產(chǎn)商和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。（ 4）包裝系統(tǒng)的組件、來(lái)源（生產(chǎn)商）及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。（ 5）培養(yǎng)基的主要組分及配制。（ 6）自建關(guān)鍵質(zhì)控方法操作描述（一般包括檢測(cè)目的、原理、試驗(yàn)材料、主要儀器設(shè)備、操作步驟、結(jié)果計(jì)算、合格標(biāo)準(zhǔn)、典型圖譜（如有）等） 。二、按生物制品管理的體外診斷試劑制造及檢定規(guī)程通用格式核準(zhǔn)日期：XXXX 年 XX 月 XX 日修訂日期：XXXX 年 XX 月 XX 日體外診斷試劑通用名稱 +制造及檢定規(guī)程通用名漢語(yǔ)拼音通用名英文名品種基本信息包括：方法原理、測(cè)定樣本（如血清、血漿等）中的抗原（或抗體、 核酸等） 、 主要組成成份 （如微孔版、 標(biāo)準(zhǔn)品或校準(zhǔn)品和質(zhì)控品或?qū)?/p>

14、照品、內(nèi)標(biāo)、清洗液等）等。1 基本要求生產(chǎn)和檢定用設(shè)施、 原材料及輔料、 水、 器具等所遵循的規(guī)范， 如國(guó)內(nèi)外 GMP 、 藥典等。2 制造2.1 專用原材料放射性核素標(biāo)記產(chǎn)品：固相載體、抗原、抗體、放射性核素等?；诿庖邔W(xué)方法產(chǎn)品：固相載體、顯色系統(tǒng)、抗原、抗體等。對(duì)病原微生物核酸檢測(cè)產(chǎn)品：引物、探針、酶、dNTP 、核酸提取分離/純化系統(tǒng)、顯色系統(tǒng)等。標(biāo)準(zhǔn)品或校準(zhǔn)品、質(zhì)控品（或?qū)φ掌罚?、內(nèi)標(biāo)及企業(yè)參考品等。明確注明上述專用原材料的來(lái)源及其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)于自制的專用原材料，描述制備方法。2.2 制備程序放射性核素標(biāo)記產(chǎn)品：固相載體的包被、放射性核素的標(biāo)記工藝?；诿庖邔W(xué)方法產(chǎn)品：包括固相載體

15、的包被、顯色系統(tǒng)制備工藝。病原微生物核酸檢測(cè)產(chǎn)品： 核酸分離/純化工藝、擴(kuò)增反應(yīng)、 檢測(cè)系統(tǒng)制備工 藝。描述標(biāo)準(zhǔn)品或校準(zhǔn)品、質(zhì)控品（或?qū)φ掌罚?、內(nèi)標(biāo)及企業(yè)參考品等的制備工藝。定量標(biāo)準(zhǔn)品或校準(zhǔn)品、內(nèi)標(biāo)及企業(yè)參考品的標(biāo)定、溯源。2.3 半成品檢定半成品檢定用樣品及合格標(biāo)準(zhǔn)，如采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品或企業(yè)參考品等。2.4 成品2.4.1 分批分批原則。2.4.2 分裝與凍干2.4.3 規(guī)格批準(zhǔn)的規(guī)格。2.4.4 包裝批準(zhǔn)的規(guī)格。3 檢定說(shuō)明成品檢定用樣品及合格標(biāo)準(zhǔn)，如采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品或企業(yè)參考品等。4 保存及有效期5 生產(chǎn)企業(yè)信息藥品上市許可持有人名稱和地址：生產(chǎn)、放行檢定廠名稱和地址：三、生物制品藥品注冊(cè)

16、標(biāo)準(zhǔn)通用格式國(guó)家藥品監(jiān)督管理局藥品注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)號(hào):通用名Pin YinEnglish name概述（與制造及檢定規(guī)程一致）本注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)包括原液檢定（如適用）、半成品檢定（如適用）及成品檢定1原液檢定（如適用）1.1鑒另I1.1.1肽圖采用RP-HPLCt檢測(cè)（附錄XXX,供試品圖譜應(yīng)與參比品一致。2半成品檢定（如適用）3成品檢定4稀釋劑檢定 如有，需納入；如果符合中國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)只說(shuō)明符合 XXX即可 可參考中國(guó)藥典現(xiàn)行版各論中“ 4.稀釋劑”項(xiàng)下的表述。【規(guī)格】格式舉例：西林瓶裝注射劑型：xxx mg （xxx ml） /瓶預(yù)充式注射器裝：xxx mg （xxx ml） /支 凍干劑型：xxx m

17、g (xxx IU ) /瓶【包裝】說(shuō)明本品所用的包裝系統(tǒng)，包括包裝盒內(nèi)的所有組件?！颈４妗⑦\(yùn)輸及有效期】【藥品上市許可持有人】附錄附錄1附錄2附錄3如含有稀釋劑或佐劑， 以附錄形式提供質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)， 并列明來(lái)源 （自制或外購(gòu)生產(chǎn)商）附錄 1 （示例）xxxXj種純度檢測(cè)1. 檢驗(yàn)?zāi)康暮驮肀痉ㄏ挡捎酶咝б合嗌V法測(cè)定xxxxx 的純度。原理是xxx2. 材料和設(shè)備2.1 試劑和材料流動(dòng)相：xxxxx參比品：xxxxxxxx2.2 主要設(shè)備高效液相色譜：3. 操作步驟3.1 操作參數(shù)：流速xxxx ，檢測(cè)波長(zhǎng) xxxx ，洗脫時(shí)間 xxxx ，進(jìn)樣量： xxxxx3.2 系統(tǒng)平衡：使用流動(dòng)相， x

18、xxxxx ，將系統(tǒng)平衡至基線穩(wěn)定。3.3 系統(tǒng)適用性測(cè)試： xxxxxx ，依據(jù)操作參數(shù)運(yùn)行。3.4 系統(tǒng)適用性接受標(biāo)準(zhǔn)： xxxxxxx 。3.5 依據(jù)操作參數(shù)運(yùn)行供試品， xxxxxxxxx 。4. 實(shí)驗(yàn)成立條件（如適用）4.1 通過(guò)系統(tǒng)適用性測(cè)試4.2 目標(biāo)峰滯留時(shí)間 xxxxxx5. 結(jié)果計(jì)算5.1 樣品圖譜使用 xxxxx 法計(jì)算目標(biāo)峰面積及雜質(zhì)峰面積。純度 =xxxxxxxxxxx5.2 xxxxxxxxxxxxxxxxx 。6. 合格標(biāo)準(zhǔn)xxxxxxxx 純度應(yīng)不低于xxxxxxxxxxxxxx 。7. 典型圖譜附錄 2 （示例）XXX翱種宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)殘留量檢測(cè)1. 檢驗(yàn)?zāi)康?/p>

19、和原理采用酶聯(lián)免疫法測(cè)定供試品中的宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)殘留量，以參考品為標(biāo)準(zhǔn)，采用直線回歸法計(jì)算。原理是XXX 。2. 材料和設(shè)備2.1 試劑和材料2.1.1 檢驗(yàn)試劑XXXX 檢測(cè)試劑盒為 XXXXX 來(lái)源XXXX 標(biāo)準(zhǔn)品為 XXXXX 來(lái)源2.1.2 供試品XXXX 品種純化液XXXX 品種2.2 主要設(shè)備酶標(biāo)儀3. 操作步驟3.1 稀釋3.1.1 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋：標(biāo)準(zhǔn)品按XXXXX 濃度稀釋。3.1.2 供試品稀釋：在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)，對(duì)樣品進(jìn)行適當(dāng)稀釋。3.2 取出 XXXXXXX96 孔板。加入供試品、內(nèi)控品，各平行兩孔， XXXX 屋/孔。兩孔加入供試品稀釋液作為空白對(duì)照， XXXX屋/孔。將

20、96孔板在37c 恒溫水浴箱孵育X小時(shí)。3.3 取出96孔板，去除液體，再加入工作濃度洗滌液洗滌板，XXXX履/孔，輕柔震蕩后，甩出里面的液體，拍干。重復(fù)洗滌五次。3.4 用酶標(biāo)記物稀釋液復(fù)溶XXXX 酶標(biāo)記物至XXXXml ，混勻。加入各反應(yīng)孔，XXXX膜/孔，空白孔除外，37c恒溫水浴箱孵育X小時(shí)。每孔加入 XXXX履洗滌液，輕柔震蕩后，去除液體，拍干。重復(fù)洗滌五次。3.5 每孔加入底物液A和底物液B各XXXX川，輕柔震蕩，37c避光孵育X 分鐘。3.6 每孔加入終止液XXXX膜，輕柔震蕩混勻。X分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀于XXX nm波長(zhǎng)下讀數(shù)。4結(jié)果判定實(shí)驗(yàn)結(jié)果須滿足以下有效參數(shù)為成立： XXXX

21、XXXXXXXXXXX 范圍內(nèi)。5. 結(jié)果計(jì)算將樣品的OD值代入直線回歸方程，冉乘以其稀釋倍數(shù)，計(jì)算樣品中的蛋白 質(zhì)殘留。6. 合格標(biāo)準(zhǔn)XXXXXX ：應(yīng)不高于XXXXX 。附錄 3（示例）XXXXX 生物學(xué)活性檢測(cè)1. 檢驗(yàn)?zāi)康暮驮肀痉ㄏ?XXXXX 法測(cè)定 XXXXX 的生物學(xué)活性。原理是XXX2. 材料和設(shè)備2.1 試劑和材料試劑盒 XXXXX ，來(lái)源 XXXXX 。標(biāo)準(zhǔn)品為XXXXX ，來(lái)源XXXXX細(xì)胞株：XXXXX 。培養(yǎng)基：XXXXX緩沖液： XXXXX樣品稀釋液： XXXXX2.2 設(shè)備凈化工作臺(tái)3. 操作步驟3.1 細(xì)胞培養(yǎng)：XXXXX 細(xì)胞XXXXX 培養(yǎng)液于X C, X

22、CO2培養(yǎng)箱中傳代培養(yǎng)。3.2 制備細(xì)胞懸液：取XXXXX 細(xì)胞，棄去培養(yǎng)上清，吸取XXXXX 清洗殘余的培養(yǎng)基， XXXXX 無(wú)菌離心管中離心， XXXXX 棄上清，用 XXXXX 培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度至XXXXX 個(gè)細(xì)胞。3.3 接種細(xì)胞：將上述細(xì)胞懸液混勻后，以 XXXXX 孔加到 96 孔細(xì)胞 培養(yǎng)板中，置于 XXXXX 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)XXXXX h 。3.4 樣品及標(biāo)準(zhǔn)品處理：取XXXXX 標(biāo)準(zhǔn)品，按照使用說(shuō)明書進(jìn)行溶解并稀釋到 XXXXX mg/ml ，混勻。用樣品稀釋液逐級(jí)稀釋待測(cè)樣品和標(biāo)準(zhǔn)品，以XXXXX Ng/m作為上樣起始濃度，XXXXX倍系列稀釋，稀釋XXXXX個(gè) 濃度梯度。

23、3.5 加樣：棄上清，將稀釋好的待測(cè)樣品和標(biāo)準(zhǔn)品加入 96 孔細(xì)胞培養(yǎng) 板中，XXXXX 膜孔。置于XXXXX 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)XXXXX 分鐘。3.6 XXXXX 檢測(cè)（按試劑盒使用說(shuō)明書進(jìn)行）用酶標(biāo)儀進(jìn)行讀數(shù)，以波長(zhǎng) 570 nm為參比波長(zhǎng)，測(cè)定在450 nm處的OD值。4. 結(jié)果判定實(shí)驗(yàn)結(jié)果須滿足以下有效參數(shù)為成立：4.1 四參數(shù)曲線近似“ S”形。4.2 四參數(shù)曲線相關(guān)系數(shù)（R2）值大于XX。4.3 上平臺(tái)點(diǎn)數(shù)不少于 XX 個(gè)，下平臺(tái)點(diǎn)數(shù)不少于 XX 。5. 結(jié)果計(jì)算5.1 采用計(jì)算機(jī)程序或四參數(shù)回歸計(jì)算法進(jìn)行處理，以待測(cè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品的濃度對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)為橫坐標(biāo)，以吸光度值為縱坐標(biāo)，計(jì)算樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的半效稀釋倍數(shù)。代入以下公式計(jì)算樣品的生物學(xué)活性： XXXXX6. 合格標(biāo)準(zhǔn)生物學(xué)活性：應(yīng)為標(biāo)示量的 XXXXX 或結(jié)果應(yīng)為 XXX U 。三、文本格式要求文本格式要求（一）標(biāo)題制造及檢定規(guī)程標(biāo)題使用黑體字體， 四號(hào)， 加粗， 居中， 1.5倍行距； 英文、希臘字母和阿拉伯?dāng)?shù)字使用 Times New Roman,四號(hào)，加粗。藥品注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)“國(guó)家藥品監(jiān)