病理技術(shù)論文微波在病理技術(shù)中的應(yīng)用

1、 病理技術(shù)論文：微波在病理技術(shù)中的應(yīng)用摘要目的探討微波在病理特殊染色中的應(yīng)用。方法對(duì)我院200例各類標(biāo)本利用微波染色法進(jìn)行病理染色，分析其結(jié)果。結(jié)果經(jīng)過微波進(jìn)行脫水后組織切片具有組織結(jié)構(gòu)清晰，切片厚薄、染色均勻、背景無氣泡、顏色鮮艷、細(xì)胞變形小、切片完整等特點(diǎn)，對(duì)比度好，無脫片現(xiàn)象，并可明顯縮短整個(gè)制片過程。甲級(jí)片率在50%以上，沒有丙級(jí)切片。結(jié)論本方法節(jié)省時(shí)間、染色效果穩(wěn)定可靠、操作簡(jiǎn)便的特點(diǎn)，適合在病理科，尤其是基層單位開展。關(guān)鍵詞微波；病理；特殊染色隨著臨床對(duì)病理報(bào)告及時(shí)性的要求越來越高，目前有許多病理實(shí)驗(yàn)室在嘗試將病理報(bào)告周期由原來3d縮短到1d。傳統(tǒng)的化學(xué)染色費(fèi)時(shí)、脫片率高，尤其一部

2、分抗原暴露不佳者，染色效果不穩(wěn)定。以上這些都大大影響臨床病理診斷的準(zhǔn)確率。微波輻射技術(shù)在組織病理學(xué)上的應(yīng)用已越來越廣泛，它與常規(guī)方法比較，操作簡(jiǎn)便、省時(shí)快速，為越來越多的病理學(xué)工作者所青睞。我院于2005年6月2008年6月利用微波在病理特殊染色中應(yīng)用，取得了良好效果，現(xiàn)報(bào)道如下。1資料與方法1.1一般資料提取我院各類標(biāo)本200例，涉及的組織部位有皮膚、肌肉、淋巴結(jié)、肺、胃、腸、肝、腎、乳腺、宮頸、子宮內(nèi)膜、子宮肌瘤、輸卵管、卵巢等各類組織，組織塊大小可為2.5cm×1.5cm×0.2cm、2.0cm×1.5cm××1.0cm×0.2

3、cm，鈣化組織取材時(shí)應(yīng)避開。1.2儀器及方法選用微波爐為YWY781B型，輸出功率為80700W，分5檔，實(shí)驗(yàn)采用中高檔。標(biāo)本經(jīng)：（1）固定：固定-脫水混合液（40%甲醛10mL，95%酒精85mL和冰醋酸5mL）中檔微波處理5min后；（2）脫水：放入盛有純丙酮10mL的微波專用容器里中檔微波照射5min×4，每次更換新液；（3）透明：用二甲苯浸泡5min；（4）浸蠟包埋：65石蠟浸泡5min后取出包埋，切片，厚4m。試劑為常規(guī)HE、各類特殊染色所用試劑。切片平放在濕盒中的架子上，滴蘇木素染液覆蓋組織，中高檔微波照射40s，水洗，常規(guī)方法染伊紅，脫水封片。2結(jié)果經(jīng)過微波進(jìn)行脫水后組

4、織切片具有組織結(jié)構(gòu)清晰，切片厚薄、染色均勻、背景無氣泡、顏色鮮艷、細(xì)胞變形小、切片完整等特點(diǎn)，對(duì)比度好，無脫片現(xiàn)象，并可明顯縮短整個(gè)制片過程。甲級(jí)片率在50%以上，沒有丙級(jí)切片。見封三圖7、8。3討論組織標(biāo)本需經(jīng)固定、脫水、透明、浸蠟等程序后才能進(jìn)行石蠟包埋切片，普通情況下需時(shí)1520h。染色過程時(shí)間過長，直接導(dǎo)致脫片率變高。有些患者在手術(shù)過程中需進(jìn)行快速病理診斷，以決定手術(shù)的方式和范圍。冷凍切片是目前最常用的快速切片方法，但冷凍切片機(jī)價(jià)格較高，同時(shí)還需要冷凍包埋劑，切片費(fèi)用也相應(yīng)較高。微波是一種高頻電磁波，頻率為3030000MHz，波長在110000mm之間，可以顯著提高分子的運(yùn)動(dòng)速度，帶

5、動(dòng)極性分子彼此之間作180度的超高速震動(dòng)，分子間的相互碰撞產(chǎn)生均勻一致的摩擦熱，而使組織細(xì)胞的化學(xué)反應(yīng)加速，增加細(xì)胞的滲透性和溶劑分子的穿透力，促進(jìn)了試劑在組織內(nèi)的化學(xué)擴(kuò)散。低強(qiáng)度微波范圍內(nèi)可以很快地影響疏水性相互作用，氫鍵和范德華力促使抗原抗體分子牢固結(jié)合。20世紀(jì)70年代初，國外就有學(xué)者嘗試在組織固定過程中利用微波進(jìn)行組織處理。隨著微波技術(shù)在病理領(lǐng)域的應(yīng)用越來越廣泛，目前已在組織處理、組織化學(xué)染色、免疫組化抗原修復(fù)、電鏡制樣等方面得到應(yīng)用1。微波技術(shù)主要是根據(jù)微波能發(fā)射高頻能量，組織經(jīng)微波輻射后會(huì)加速內(nèi)部分子間的相互碰撞，加快組織固定、脫水等過程，使溶劑分子更快進(jìn)入組織內(nèi)部，提高染色質(zhì)量，

6、達(dá)到快速處理組織的目的，使病理技術(shù)工作的效率大大提高。應(yīng)用微波的熱效應(yīng)和高頻電磁波作用，使某些被封閉的抗原決定簇得以重新暴露，并打開蛋白質(zhì)間交聯(lián)鍵，使標(biāo)記敏感性明顯提高。微波可很好地保護(hù)組織結(jié)構(gòu)和細(xì)胞形態(tài)，克服了常規(guī)染色法中溫度高、時(shí)間長和組織易收縮、脫片等現(xiàn)象。我們?cè)趯?shí)際應(yīng)用中，認(rèn)為微波輻射比較適用于病理組織特殊染色中，在組織特殊染色過程中應(yīng)用微波照射，將大大縮短反應(yīng)時(shí)間，從而加快了組織特殊染色過程。無論是石蠟切片還是樹脂包埋切片的特殊染色，都能在微波作用下加速。微波除了能大大減少染色時(shí)間外，還可減少切片的非特異性沉淀，從而使得染色背景變得干凈。而且效果好，易掌握，對(duì)急性、疑難病例也有較大的

7、定性價(jià)值。另外對(duì)病原體染色時(shí)，用640W的微波照射3060s，還能起到殺死病原體的作用，從而減少對(duì)人的污染2。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，微波特殊染色，從各個(gè)方面都優(yōu)于未經(jīng)微波處理的切片。但在應(yīng)用微波的過程中也要嚴(yán)格控制微波的溫度，因?yàn)闇囟冗^高會(huì)破壞抗體，影響標(biāo)記效果。同時(shí)由于各器官組織材料自身特點(diǎn)不一，電子密度也不完全相同，使用的時(shí)間也不完全相同，筆者認(rèn)為時(shí)間以1520min為宜，不可超過25min。加蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕，盡量避免產(chǎn)生氣泡，切忌加壓，使組織與蓋玻片間能保持一定量的抗體液。綜上所述，本方法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、節(jié)省時(shí)間、染色效果穩(wěn)定可靠、操作簡(jiǎn)便的特點(diǎn)，所需設(shè)備微波爐在病理技術(shù)中應(yīng)用范圍廣，價(jià)格也遠(yuǎn)較冰凍切片機(jī)和超聲波組織處理儀低廉，對(duì)于各種組織不同抗體的免疫組織化學(xué)的臨場(chǎng)應(yīng)用和實(shí)驗(yàn)室研究有實(shí)用價(jià)值，適合在病理科尤其是